几种CMV相关物检测对诊断肾移植患者CMV感染的评价

目的 比较血中pp65抗原、DNA和IgM抗体检测对肾移植患者巨细胞病毒（CMV）活动性感染的诊断价值,为临床上对CMV感染的诊断和治疗提供参考.方法 收集83位肾移植患者的血标本（共302份）,分离血浆和多型核白细胞,血浆用于CMV-DNA（定性PCR）和IgM抗体（ELISA）检测,白细胞用于pp65抗原血症检测（荧光免疫法）.结果 CMV-DNA阳性率为36.1%,CMV IgM抗体阳性率20.2%,CMV pp65抗原阳性率为38.5%.pp65抗原阳性细胞数与病人的临床症状密切相关.结论 pp65抗原阳性细胞数能反应CMV的数量,可监测早期活动性CMV感染及疗效观察,检测方法特异,灵敏,操作简单,适合临床实验室应用.     

婴儿肝炎综合征患儿外周血白细胞巨细胞病毒早、晚期抗原检测及其临床意义

对15例婴儿肝炎综合征患儿外周血淋巴细胞、单核细胞、粒细胞分别进行了巨细胞病毒（CMV）早期抗原（EA）、晚期抗原（LA）检测。结果9例白细胞EA阳性，5例LA阳性，各类白细胞感染无明显选择性。5例CMV抗原阳性者恢复期复查，仅2例阳性。与抗CMVIgM、尿CMV分离、抗CMVIgG双份血清检测等方法对比，9例阳性中8例被此3项检查证实为CMV感染，6例阴性中此3项检查亦阴性，其阳性率明显高于其它检查，示其可作为CMV急性感染的较好诊断方法。     

PP65抗原检测在脑性瘫痪患儿巨细胞病毒感染诊断中的价值

人巨细胞病毒（CMV）感染是引起人类先天性中枢神经系统畸形的主要病原之一。CMV感染常常引起胎儿或新生儿脑性瘫痪（cerebral palsy，CP）或认知障碍，是造成出生缺陷和小儿残疾的重要原因。在感染早期进行特异性的抗病毒治疗能够有效地改善预后，提高治愈率，减少并发症及降低死亡率。因此，早期准确诊断活动性CMV感染，是早期抗病毒治疗的关键。PP65抗原是巨细胞病毒早期产生的一种结构蛋白，是巨细胞病毒活动性感染的标志。本研究通过流式细胞技术对CP患儿进行血PP65抗原测定，并同时测定尿定量CMV DNA及血CMV IgM作为对照，以探讨PP65抗原检测在CMV感染诊断中的意义。     

免疫胶体金法检测MPB64抗原在结核病实验室诊断中的价值

目的通过与传统的结核病实验室诊断方法（直接涂片抗酸染色、改良罗氏培养、PCR）的比较,评价免疫胶体金法检测结核杆菌MPB64抗原在结核病快速诊断中的应用价值。方法收集158例确诊为结核病患者的临床标本,分别用直接涂片抗酸染色、改良罗氏培养基培养、PCR、免疫胶体金法检测米氏7H9培养产物中的MPB64抗原检测结核分支杆菌,并对结果进行比较分析。结果涂片阳性率为10.76%,改良罗氏培养阳性率为20.89%,PCR检测阳性率为56.33%,免疫胶体金法检测阳性率为41.14%。结论免疫胶体金法检测米氏7H9液体培养产物中的MPB64抗原可以作为一种较为敏感、快速简便的检测结核分支杆菌感染的方法,有助于结核病临床快速诊断。     

巨细胞病毒嗜肝细胞性和肝细胞感染模型的建立

目的确定巨细胞病毒（CMV）体外能否直接攻击肝细胞,并建立肝细胞感染模型。方法①人肝细胞系感染：用人CMV（HCMV）AD169毒株感染正常人肝细胞系（L-02）和人胚肺成纤维细胞（HELF）与L-02共培养细胞,HC-MV感染的HELF细胞为阳性对照;②原代鼠肝细胞（PML）感染：用重组鼠CMV（MCMV）感染PML细胞。光镜观察细胞病变（CPE）,电镜观察病毒颗粒,间接免疫荧光（IFA）法检测HCMV抗原;原位杂交法检测MCMVIE基因。PML性质经观察其特征性超微结构和检测培养上清白蛋白水平予以鉴定。结果在PML细胞纯度〉95%（培养第8天）时感染病毒,3d后〉80%细胞出现典型CPE;电镜下胞核和胞质内见大量病毒颗粒;病毒IE基因检测呈阳性。HELF细胞可被HCMV感染;而L-02细胞无论是单独,还是与HELF共培养,其病毒标志物均呈阴性,细胞结构保持正常。结论原代鼠肝细胞体外可受到MCMV直接感染,为CMV肝炎的体外研究提供成功的肝细胞感染模型;而正常人肝细胞系不能感染HCMV,推测其表面HCMV受体发生改变或丢失。     

聚合酶链反应测定巨细胞病毒在移植术后的临床价值

目的用聚合酶链反应（PCR）诊断移植受着术后巨细胞病毒（CMV）的感染状况，建立一种新的快速诊断巨细胞病毒感染的方法并初步用于移植爱着。方法应用酶链免疫吸附法（ELISA）及PCR法分别测定230例移植术患者血清中巨细胞抗体（CMV-Ab）及巨细胞抗原（CMV-Ag）。结果ELISA法测得IgG和IgM阳性率分别为99.35％和15．42％，而PCR测得抗原阳性率为9．45％，两组在统计学上无显著性差异（P〉0．05）。结论移植术后存在不同程度的CMV感染，临床上应用PCR技术检测对早期诊断移植术后受者CMV感染具有重要意义。     

快速诊断呼吸道合胞病毒感染——间接免疫荧光法测定脱落细胞

本文报告用免疫荧光抗体技术(IFAT)直接检测气管分泌物中脱落细胞病毒抗原,并与常规病毒分离和血清学检查进行比较,确定IFAT可否作为呼吸道合胞病毒(RSV)感染的快速诊断方法。     

巨细胞病毒DNA检测在筛查巨细胞病毒感染中的应用

目的 探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法检测婴儿尿液人巨细胞病毒(CMV)DNA在儿科CMV感染诊断中的价值.方法 对565例临床疑诊CMV感染患儿分别应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)、酶联免疫法(ELISA)检测尿液CMV-DNA及血清CMV-IgM抗体.结果 FQ-PCR检测尿CMV-DNA的阳性率为42 83%,ELISA检测婴儿血清CMV-IgM抗体阳性率为20 18%.两种方法对CMV感染诊断符合率为76 46%,前者诊断阳性率显著高于后者(χ2=33 59,P<0 01).结论 FQ-PCR检测尿液CMV-DNA是早期诊断婴儿CMV感染的敏感有效的方法.     

晨尿脱落细胞端粒酶活性检测在膀胱癌中的诊断价值

目的：探讨检测晨尿脱落细胞端粒酶活性在膀胱肿瘤诊断中的作用，寻找一种敏感特异的非介入性方法诊断膀胱癌。方法：采用荧光定量聚合酶链反应试验（FQ-PCR）和细胞学方法，对39例膀胱移行细胞癌患者（肿瘤组）、20例膀胱良性疾病患者（对照组）晨尿脱落细胞进行了端粒酶活性检测，肿瘤组均行手术治疗，肿瘤标本作病理组织学检查，对两种方法检测的阳性率以及病理检查结果进行了分析比较。结果：FQ-PCR法检测肿瘤组患者晨尿脱落细胞端粒酶活性的阳性率为74．4％（29／39），显著高于尿细胞学检查的阳性率30．8％（12／39）；G1、G2、G3级膀胱移行细胞癌患者自排晨尿脱落细胞端粒酶活性阳性率分别为66．7％、77．3％和75％，无显著性差异。而对照组中仅1例表达有端粒酶活性，与肿瘤组比较有显著性差异（P〈0．005）。结论：FQ-PCR法检测晨尿脱落细胞端粒酶活性操作简便，特异、敏感，可以作为膀胱移行细胞癌早期诊断的无创性检查方法。     

RT-PCR,pp65抗原及组织病理学测定肾移植术后巨细胞病毒感染的比较研究

目的比较巨细胞病毒（CMV）定量PCR检测,CMV-pp65抗原检测及组织病理学在肾移植术后CMV感染中的诊断价值。方法回顾性分析28例肾移植患者临床资料,并结合文献进行讨论。结果共有11例患者发生无临床症状的巨细胞病毒感染,经静脉注射更昔洛韦,11例全部治愈。结论 CMV定量PCR,CMV-pp65抗原检测及组织病理学均能作为肾移植术后CMV感染早期诊断的有效手段,三者比较,CMV定量PCR更敏感,CMV-pp65抗原检测更特异,组织病理学则具有创伤性,因此三者共同应用对CMV感染早期诊断更有意义。     

间接免疫荧光技术对毛细支气管炎合胞病毒病原快速诊断的研究

应用间接免疫荧光技术对50例毛细支气管炎患儿鼻咽分泌物脱落细胞进行合胞病毒抗原检查,与病毒分离和/或补体结合试验比较,敏感性为74.2％,特异性为68.4％。间接免疫荧光技术敏感、特异、快速、简便,能够为RSV感染的早期快速诊断提供依据,具有临床应用价值。     

酶免疫组化法对肾综合征出血热早期诊断的方法学研究

目的：用酶免疫组化法对肾综合征出血热进行早期诊断。方法：将肾综合征出血热病毒(HFRSV)接种于Vero—E6细胞，培养后制高效价病毒抗原片。应用酶免疫组化技术进行检测。结果：酶免疫组化技术对肾综合征出血热能早期、快速、特异性地诊断。结论：实验证明该法具有早期诊断、快速简便、特异敏感等特点，其检测结果可长期保存等优点，尤其适用于基层医疗单位推广应用。     

聚合酶链反应在临床巨细胞病毒感染检测中的应用和研究

本文用聚合酶链反应(PCR)技术检测76份患儿尿标本中巨细胞病毒(CMV)DNA,其中32份尿标本做了病毒分离,另44例同时做血清CMV IgM抗体检测。结果PCR和病毒分离阳性符合率为100％,与CMV IgM抗体检出率无显著差异(P>0.05)。证明PCR方法具有特异性高、敏感性好、操作简便、检测周期短等优点,适用于临床进行CMV感染的快速诊断。     

青海省2006年流感局部爆发流行中的病原体检测

目的：分析上呼吸道疾病局部爆发流行中流感病毒感染的检测方法及意义。方法：采用试剂盒现场快速检测（ELISA法）标本中的流感病毒抗原。标本运输至实验室,接种到狗肾传代细胞（MD-CK）进行病毒分离,血凝及血凝抑制试验鉴定毒株型别。结果：快速检测阳性率12%,病毒分离阳性率73.7%。结论：病毒分离在流感病毒的检测中具有敏感性好的优点,但快速抗原检测在现场诊断中也值得采用。     

血PP65抗原检测在诊断巨细胞病毒感染上的应用

目的探讨血PP65抗原、尿CMV-DNA和血IgM抗体检测对婴儿巨细胞病毒(CMV)活动性感染的诊断价值.方法通过免疫荧光技术对142例CMV病毒性感染患儿进行血PP65抗原检测,同时用实时荧光定量PCR方法测定尿CMV-DNA,并用ELISA法检测血清CMV-IgM,比较三种方法的检测结果;对25例PP65阳性患儿进行短期随访,分析PP65的临床应用价值.结果142例CMV感染患儿中,PP65抗原阳性率89.4%(127/142),阳性细胞范围7-145/2×105个多形核白细胞.PP65与尿CMV-DNA两种方法检测的结果差异无统计学意义(χ2=0.125,P>0.05),但PP65与血CMV-IgM检测结果差异有统计学意义(χ2=53.16,P<0.01).PP65抗原和尿PCR的阳性符合率98.4%(127/129),阴性符合率86.7%(13/15),与IgM抗体阳性符合率是51.2%(65/127),阴性符合率19.5%(15/77).PP65相对于PCR的敏感性为98.4%(127/129),特异性为97.6%(124/127);PP65抗原水平与CMV感染的病情程度有明显相关性,高水平PP65感染患儿多发全身性感染,低水平PP65抗原血症多为单脏器感染(χ2=49.03,P<0.005).在感染恢复期,PP65转为阴性或明显下降.结论 PP65抗原检测是诊断活动性CMV感染的快速、敏感、特异的有效方法,量化结果有助于监测病情,评价感染状态.     

肾移植病人巨细胞病毒感染的研究

目的：了解不同免疫状态对活动性巨细胞病毒（CMV）感染发病率的影响。研究肾移植病人术后预防性应用抗CMV药物阿昔洛韦的作用。方法：用链霉亲和素－生物素（LSAB）法检测28例肾移植术后病人、27例发热病人和25例正常人的活动性CMV感染及CMV病的发病情况。同时检测肾移植术后1组（≤6个月组）及肾移植术后2组（＞6个月组）活动性CMV感染发病率及肾功（血肌酐）。结果：肾移植术后组、发热组、政党组活动性CMV感染发病率分别为21．4％、3．7％、0％;, 移植术后组与正常组活动性CMV感染发病率有统计学差异（P＜0．01）。发热组与正常组的发病无统计学差异（P＞0．05）。肾移植术后1组及2组活动性CMV感染发病率分别为29．4％,9．1％,二者无统计学差异（P＞0．05）。活动性CMV感染与CMV感病5万个白细胞中平均抗原阳性细胞数分别为13．5和55。结论：人群活动性CMV感染发病率与免疫状态相关。术后3个月内小剂量口服阿昔洛韦对活动性CMV感染有一定预防作用。LSAB法可快速、早期诊断活动性CMV感染与CMV病,且抗原阳性细胞量与感染严重程度有关。     

实时荧光PCR法、胶体金快速检测法及病毒分离培养法在甲型流感病毒检测中的临床应用分析

目的：探讨实时荧光PCR法、胶体金快速检测法及病毒分离培养法检测甲型流感病毒的临床应用。方法采用实时荧光PCR法、胶体金快速检测法及病毒分离培养法同时检测210份临床流感样标本是否有甲流感病毒阳性反应,统计分析其方法灵敏度、特异性。结果实时荧光PCR法检测其阳性率最高,病毒分离培养法阳性率最低,三者阳性率有显著差异（P 〈0.05）。结论三种检测方法对甲型流感病毒检测均显效,胶体金快速检测法可用于流感病毒早期筛选,实时荧光PCR法用于确诊,病毒分离培养法用于实验室分析与疫苗的研究。     

间接荧光法测定特异性IgM在呼吸道合胞病毒感染早期快速诊断中的应用

呼吸道合胞病毒(RSV)为婴幼儿严重下呼吸道感染的重要病原。常规的病原诊断方法是取病人鼻、咽拭子或鼻咽部吸出物作病毒分离和/或取病人双份血清作抗体测定。由于RSV易灭活,分离阳性率低,分离鉴定所需时间长,与双份血清抗体测定一样,仅能提供回顾性诊断。国外目前所用RSV早期快速诊断的方法是用直接或间接免疫荧光法检测咽部脱落细胞     

LAMP 荧光染色法检测人乳头瘤病毒的临床应用

人乳头瘤病毒（HumanPapillomaVirus，H1）V）是引起尖锐湿疣的主要病原体，目前还不能进行体外细胞培养，且其抗原接触免疫系统的机会少，难以用检测抗体的方法诊断。PCR（聚合酶链式反应）检测病毒DNA序列具有特异和敏感等特点，但需要特殊的仪器设备，且对检测人员有较高的技术要求，难以用于基层。本研究采用环介导等温扩增技术（LAMP）结合荧光染色检测HPV，对尖锐湿疣的预防、早期快速诊断和治疗具有特别重要的临床意义。     

女性生殖道沙眼衣原体感染的检验方法对比

目的 研究不同方法对女性生殖道宫颈拭子样本沙眼衣原体的检测价值。方法采集450例19—49岁无感染症状女性宫颈分泌物，分别进行培养、直接荧光抗体检测抗原及核酸扩增三种方法检测，且分别确定阳性标准。结果450例受检查者，培养、DFA、PCR敏感性分别为44．0％、27．8％、28．9％，PCR法检测的阳性率明显好于DFA法与培养法（P〈0．05）。结论核酸扩增技术检测CT的检出率远远高出DFA法和细胞分离培养法的检出率，但应用单一实验诊断CT感染仍具有很大的局限性。