阿霉素白蛋白磁纳米粒在正常肝脏的靶向性

目的：观察阿霉素白蛋白磁纳米粒在正常肝脏中的磁靶向性。并观察阿霉素白蛋白磁纳米粒在全身各脏器的分布特征。方法：大鼠正中开腹,胃十二指肠动脉插管固定。实验组,左肝外叶加磁场,肝动脉注射阿霉素白蛋白的磁纳米粒（相当于阿霉素0．5mg/kg),磁场应用30min移去磁场后,动物立即处死,对照组：左肝外叶外不加磁场,肝动脉注射同等剂量的纳米粒后30min处死。动物处死后,立即取靶区肝、非靶区肝、心、肾、脾、肺、小肠和胃作γ计数。肝组织作组织学切片。结果：左肝外叶应用磁场30min后,磁共肝组织的放射活性较非磁共肝组织的放射活性明显增加（P＜0．0001）,磁区肝组织与非磁区肝组织的放射活性比值为2．6。而对照组磁区肝组织与非磁区肝组织的放射活性之间无统计学差异。肝外脏器的放射活性明显降低。除实验组肺的放射活性较对照组明显下降外,其它脏器两组之间没有统计学差异,另外,实验组,心、肾、脾、肺和小肠与靶区肝组织和的放射活性比值较对照组明显降低,胃与靶区肝组织的放射活性比值两组之间无统计学差异。注入纳米粒的70％－80％分布于肝脏,其它脏器含量极少。病理切片显示磁共小动脉中见大量纳米粒存在,对照组及非磁共肝中纳米粒很少见。结论：阿霉素白蛋白磁纳米粒在正常肝脏组织中有明显的磁靶向性,阿霉素白蛋白磁纳米粒主要分布于肝脏,其它脏器含量较少。实验组心、肾、脾、肺和小肠与靶区组织的放射活性比值明显降低,说明磁的存在使这些脏器的相对药物暴露明显减少。     

外加磁场对半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒在大鼠体内分布影响的研究

目的观察半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒(ADR-GHMN)在正常肝脏中的靶向性,并观察ADR-GHMN在全身各脏器的分布特征及外加磁场对其分布的影响.方法大鼠正中开腹,肝动脉插管并固定,肝动脉注射125I-ADR-GHMN(相当于阿霉素0.5 mg/kg),左外叶加磁场,磁场应用30 min,移去磁场后,动物立即处死;对照组:肝动脉注射ADR-GHMN,左外叶不加磁场,30min后,移去磁场后,动物立即处死,立即取靶区肝、非靶区肝、肾、心、肺、小肠、脾及周围血作γ计数.肝组织作病理切片.结果注入的纳米粒75～85%分布于肝脏,其它脏器极少.病理切片显示磁区小动脉见大量纳米粒存在,对照组及非磁区肝中纳米粒很少见.结论ADR-GHMN在正常肝组织中有明显的磁靶向性;在磁场作用下,ADR-GHMN主要分布于肝脏,其它脏器含量很少;试验组肾、心、肺、小肠、脾及外周血于对照组的放射活性比较明显降低,表明磁性物质的存在使这些脏器的相对药物暴露明显减少.     

荧光分光光度法检测半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒在大鼠体内分布的研究

目的观察由半乳糖化白蛋白磁性纳米粒运载的阿霉素经舌静脉给药后在大鼠体内的的分布状况.方法全部大鼠随机分为四组,经舌静脉,按分组分别注射相应药物,剂量均为阿霉素2.5 mg/kg体重.取全血、心、肺、肝、脾、肾.全血制成血浆,器官组织制成匀浆,盐酸乙醇法提取阿霉素,用荧光光度计测量.结果静脉注射同等剂量、不同剂型的阿霉素药物后,阿霉素在器官中的蓄积程度从高到低:肝:D靶肝＞D非靶肝、C＞B＞A;心脏、肾、血浆:A＞B＞D、C;脾:B＞A、C、D;肺:B＞A＞C、D.磁性阿霉素白蛋白纳米粒注入体内后,在心、肺、肝、脾、肾中的药物浓度在15～30min达峰值,而半乳糖化后,阿霉素的药物峰值提前到5 min或之前.外加磁场和未加磁场的半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒组的药物靶向指数和药物选择指数是均高于磁性白蛋白纳米粒.结论磁性阿霉素白蛋白纳米粒经半乳糖化后,可显著增强阿霉素对肝脏的靶向性,并显著降低心、肺、脾、肾、血浆肝外器官的组织阿霉素浓度.利用外加磁场,可提高阿霉素在肝脏特定部位蓄积的能力.因此,静脉注射半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒是可行的.     

磁性化疗纳米粒治疗大鼠移植性肝癌

目的：通过对移植性肝癌模型大鼠肝动脉注射磁性阿霉素白蛋白纳米粒,并在肝肿瘤区加磁场,观察磁性阿霉素白蛋白纳米粒对移植性肝癌的治疗效果。方法：建立大鼠移植性肝癌模型,将肿瘤模型大鼠分为4组。肝动脉注射生理盐水6只;肝动脉注射游离阿霉素0．5mg/kg6只;肝动脉注射磁性阿霉素白蛋白纳米粒（相当于0．5mg/kg阿霉素）6只;肝动脉注射磁性阿霉素白蛋白纳米粒（相当于0．5mg/kg阿霉素）,肝肿瘤区加磁场6只,各组动物肝动脉注药后,生存超过1周者,记录生存天数,生存期满60d者则处死,取肿瘤组织作病理切片观察,各组动物进行生存率分析。结果：生理盐水治疗组：生存期平均为23．5d;游离阿霉素治疗组,生存期为22．5d;纳米粒不加磁场治疗组,生存期平均为36．2d;纳米粒加磁场治疗组有3只动物到60d仍存活,最短存活期为48d。对各组动物进行生存率分析,并作Logrank检验发现,生理盐水治疗组与游离阿霉素治疗组生存期无统计学差异。磁性阿霉素蛋白纳米粒治疗,肿瘤区不加磁场组动物较生理盐水治疗组和游离阿霉素组肿瘤组织无明显变化,生存60d大鼠肿瘤组织病理切片发现肿瘤已完全由纤维和无结构的组织所代替。结论：肝动脉注射游离阿霉素对移植性肝肿瘤大鼠生存无明显改善,肝动脉注射磁性阿霉素白蛋白纳米粒,肿瘤区不加磁场,可以延长动物生存期（P＜0．05）,肝动脉注射磁性阿霉素白蛋白纳米粒,肿瘤区加磁场治疗组较瘤区不加磁场治疗组生存期明显延长（P＜0．05）。     

半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒在正常大鼠体内的分布特征

目的观察半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒(ADR-GHMN)在正常肝脏中的靶向性,并观察ADR-GHMN在全身各脏器的分布特征.方法使用放射示踪技术,用125I标记纳米粒.肝动脉注射,分别于注药后5、15、30、60、120min处死,立即取肝、肾、心、肺、小肠、脾、及周围血作γ计数.结果半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒在注射后5 min后最高,为15054.4 CPM/g,各时相前者的肝摄取率均为同时刻后者的2,3倍.两药在肝、肾、心、肺、小肠、脾、及周围血的分布有高度显著性(P＜0.05).结论半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒在正常肝组织中有明显的主动靶向性,半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒主要分布肝脏,其它的脏器含量少.     

给药途径对磁性白蛋白纳米靶向分布的影响

该实验用125I标记磁性白蛋白纳米粒,经荷肝癌鼠的肝动脉、门静脉及颈静脉三种不同途径给药,旨在比较外置定位磁场与否,各组的肝癌区(磁靶区)、正常肝和肺组织的克组织放射性量以及肝癌区血管栓塞程度,以探求一种较佳的给药途径和方法。结果显示外置磁场能使磁性白蛋白纳米粒在靶区定位聚集,并减少其在非靶区的分布;外置磁场下经肝动脉给药组的肝癌组织区克组织放射量最高(P＜O.01),而其正常肝和肺组织的克组织放射量最低(P＜0.01),其肝癌区血管栓塞程度也明显高于经门静脉及经颈静脉组。表明外置定位磁场下经动脉途径注入磁性白蛋白纳米粒的磁靶向化疗栓塞效果最好。     

不同给药途径对磁性白蛋白纳米粒靶向分布的影响

目的　该实验旨在比较外置定位磁场与否 ,各组的肝癌区 (磁靶区 )、正常肝和肺组织的克组织放射量以及肝癌区血管栓塞程度 ,以探求一种较佳的给药途径和方法。方法　用12 5I标记磁性白蛋白纳米粒 ,经药肝癌鼠的肝动脉、门静脉及颈静脉三种不同途径给药。结果　外置磁场使磁性白蛋白纳米粒在靶区定位聚集 ,减少其在非靶区的分布 ;外置磁场下经肝动脉给药组的肝癌组织区克组织放射量最高 (P <0 .0 1) ,而正常肝和肺组织的克组织放射量最低 (P <0 .0 1) ,肝癌区血管栓塞程度也明显高于经门静脉及经颈静脉组。结论　外置定位磁场下 ,经动脉途径注入磁性白蛋白纳米粒的磁靶向化疗栓塞效果最好。     

磁导靶向给药在荷瘤小鼠体内分布特性的实验研究

目的考察经磁导靶向给药载阿霉素金磁复合微粒在荷瘤小鼠体内分布特性。方法建立小鼠肝细胞癌动物模型,将30只小鼠分为三组,每组10只,空白对照组经尾缘静脉注射生理盐水,单纯磁阿霉素组和磁阿霉素加磁场组分别注射载阿霉素金磁复合微粒溶液,其中,磁阿霉素加磁场组外加5000Gs磁场固定1h,然后处死全部小鼠,心脏取血并收集心、肝、肾、肿瘤组织,应用高相液相色谱法测定各组织中阿霉素浓度,评价其在小鼠体内靶向分布特性。结果肿瘤靶区应用外磁场固定后,肿瘤组织中药物浓度远高于非磁区其他组织中药物浓度（P〈0．05）,其他组织的药物浓度（除心脏外）与空白对照组相当（P〉0．05）。而在没有外磁场的环境下,药物在全身各组织中呈弥散性分布,且肝脏和肿瘤组织中药物浓度较高。结论磁导靶向给药具有良好的靶向定位作用,有望成为一种新的化疗药物剂型用于肿瘤的靶向治疗。     

O-羧甲基乳糖酰化壳聚糖-聚乳酸阿霉素纳米粒在大鼠体内的靶向性研究

目的探讨O-羧甲基乳糖酰化壳聚糖-聚乳酸阿霉素纳米粒在大鼠体内的靶向性。方法全部大鼠随机分为4组，每组30只，A组：游离阿霉素组；B组：O-羧甲基壳聚糖聚乳酸阿霉素组；C组：壳聚糖-聚乳酸阿霉素纳米粒组；D组：O-羧甲基乳糖酰化壳聚糖-聚乳酸阿霉素纳米粒组；经舌静脉，按分组分别注射；取全血、心、肺、肝、脾、肾。全血制成血浆，器官组织制成匀浆，盐酸乙醇法提取阿霉素，用荧光光度计测量。结果静脉注射同等剂量、不同剂型的阿霉素药物后，半乳糖化修饰后纳米粒的肝靶向性明显增强，肝外器官的浓度明显降低。结论O-羧甲基乳糖酰化壳聚糖-聚乳酸阿霉素纳米粒对正常大鼠肝脏具有明显的靶向性。     

交变磁场介导下半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒对兔VX2肝癌的影响研究

目的探讨半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒对兔VX2肝癌的磁介导热疗作用。方法将成模后的荷瘤白兔随机分成6组：A组，对照组，即生理盐水组；B组，游离阿霉素组；C组，半乳糖磁性阿霉素纳米粒组；D组，Fe3O4纳米粒组；E组，阿霉素磁性纳米粒组；F组，半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒组化白蛋白。各组经肝动脉插管灌注药物（按2mg／kg阿霉素计算），除C组外，其它各组置交变磁场中作用30min，期间监测癌中心区、癌边缘区、正常肝组织和直肠的温度变化；观察治疗后14d的肝癌体积、肝癌的生长率、肝癌及正常肝组织的病理改变。结果D、E、F组癌中心区和边缘区温度显著高于正常肝组织和直肠（P〈0．001）；A、B、C组各部位的温度无明显升高。治疗后14d，F组肿瘤体积明显缩小，肿瘤生长率为-15％；肝癌细胞可见大面积坏死，平均在70％以上，癌灶及癌边缘可见栓塞的铁磁微粒，而右肝未见铁磁微粒的沉积；其它各组体积增大3、5～13倍，肿瘤生长率显著增加（127％～568％），肝癌细胞中至轻度坏死（0％～70％）。结论交变磁场下，A、B、C组癌组织升温达到42℃以上；半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒对肝癌组织有独特的靶向作用，表现出明显的热化疗协同增效的治疗效果。     

Liver targeting and the delayed drug release of the nanoparticles of adriamycin polybutylcyanoacrylate in mice

Background Liver targeting drug delivery systems can improve the curative effects and relieve the cytotoxicity of the chemotherapy drugs in the treatment of liver diseases. Nanoparticles carrying therapeutic drugs are currently under hot investigation with great clinical significance. This study was aimed to investigate the different tissue distribution of the adriamycin polybutylcyanoacrylate nanoparticle (ADM-PBCA-NP) in the mice body after an injection via lateral tail vein, and to study the liver targeting effects of ADM-PBCA-NP in different diameters on normal mice liver. Methods One hundred and eighty Kunming mice were randomly divided into 6 groups with 30 mice in each group (5 treatment groups of ADM-PBCA-NP in the different diameter ranges, non-conjugated free adriamycin injection was employed as the control group). A single dose of either conjugated or free adriamycin equaled 2 mg/kg of body weight was delivered via the tail vein. Five mice in each trail were sacrificed at 5, 15, 30 minutes, 1, 5 and 12 hours postinjection, respectively. The adriamycin concentrations in the respectively collected liver, kidney, spleen, heart, lung and plasma were demonstrated using a high performance liquid chromatography with fluorescence detector. Results Compared with the control group, adriamycin was hardly detected in the heart muscle of the treatment groups (P&lt;0.05). The nanoparticle-conjugated adriamycin was cleaned up quickly from the kidney tissue. The adriamycin concentrations of the mice liver and spleen in the experimental groups were significantly higher than that in the control group, except for the group with the nanoparticles diameters of (22.3±6.2) nm (P&lt;0.05). The ADM-PBCA-NP in (101.0±20.3) nm diameter had the highest liver distribution, and the second highest adriamycin distribution in liver was the group of (143.0±23.5) nm diameter (P&lt;0.05). Moreover, adriamycin was released slowly in the liver during the detection period in the experimental groups. ADM-PBCA-NP in (22.3±6.2) nm diameter was not distributed in the tissue of the liver, kidney, heart, spleen, and lung. Conclusions ADM-PBCA-NP in 100－150 nm diameter range has the best liver targeting with a characteristic of slow medicine release. It also decreases the medicine distribution in the heart, kidney and lung. In the treatment of liver cancer, the polybutylcyanoacrylate nanoparticles system has a good liver targeting ability, which increases the anticancer activity and markedly decreases the toxicity of adriamycin.     

磁性药物纳米粒在体内的靶向分布及其对肝癌的疗效研究

目的　了解磁性药物纳米粒在体内的靶向分布及其对肝癌的疗效研究。方法　将磁性药物纳米粒经肝动脉注入患有植入性肝癌的小鼠体内。结果　经过外部磁场的诱导 ,磁性药物纳米粒在肝脏肿瘤部位积聚 ,在正常肝组织和肺组织中显著减少 ,在肾脏、心脏、脾脏、小肠及胃中持续维持低水平。纳米粒能够选择性分布在肿瘤组织中。结论　利用磁性纳米粒以提高肝癌的治疗效果 ,减少药物对重要器官的副作用是很有发展潜力的     

磁性Fe3O4纳米颗粒对大鼠脏器组织中Caveolin-1和Clathrin Heavy Chain蛋白表达的影响

目的：探讨磁性Fe₃O₄纳米颗粒对大鼠主要脏器组织中Caveolin-1及Clathrin Heavy Chain蛋白表达的影响,阐明其作用机制。方法：将24只Wistar大鼠按体质量随机分成对照组和低、中、高剂量磁性Fe₃O₄纳米颗粒组,尾静脉注射不同剂量磁性Fe₃O₄纳米颗粒24h后取脏器组织,Western blotting法检测大鼠主要脏器组织中Caveolin-1及Clathrin Heavy Chain蛋白的表达水平,荧光实时定量PCR法检测大鼠主要脏器组织中Caveolin-1及Clathrin Heavy Chain mRNA的表达水平。结果：与对照组比较,中和高剂量组大鼠肝脏和脾脏组织中Clathrin Heavy Chain蛋白和mRNA表达水平明显升高（P<0.05）。高剂量组大鼠肾脏组织中Clathrin Heavy Chain mRNA的表达水平与其他3组比较明显升高（P<0.05）。Caveolin-1蛋白表达水平在各剂量组之间比较差异无统计学意义（P>0.05）;与对照组比较,低、中和高剂量组大鼠肝脏、肺脏和脾脏组织中Caveolin-1 mRNA表达水平明显升高（P<0.05）;各组肾脏组织中Caveolin-1mRNA表达水平差异无统计学意义（P>0.05）。结论：磁性Fe₃O₄纳米颗粒能够诱导大鼠肝脏、肺脏、脾脏中Clathrin Heavy Chain蛋白表达增强,通过Clathrin Heavy Chain蛋白的内吞作用是磁性Fe₃O₄纳米颗粒进入大鼠肝脏、肺脏和脾脏细胞的途径之一。     

阿霉素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒粒径对肝靶向性的影响

目的:观察不同粒径的阿霉素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒(adriamycinpolybutylcyanoacrylatenanoparticles,ADM-PBCA-NP)及阿霉素(adriamycin,ADM)经小鼠尾静脉给药后在小鼠体内的生物分布差异,研究不同粒径的ADM-PBCA-NP对正常肝脏的靶向性,旨在筛选出肝靶向性最好的ADM-PBCA-NP。方法:昆明种小鼠180只,随机分为游离ADM组、(22.3±6.2)nmADM-PBCA-NP组、(48.6±9.2)nmADM-PBCA-NP组、(101.9±20.3)nmADM-PBCA-NP组、(143.5±23.5)nmADM-PBCA-NP组和(194.2±28.4)nmADM-PBCA-NP组。每组30只,经小鼠尾静脉按2mg/kg的剂量分别注射上述ADM-PBCA-NP或游离ADM。每组于给药后5,15,30min,1,5,12h各处死5只小鼠,分别提取肝、肾、脾、心、肺、血浆样品,以高效液相色谱法测定ADM的浓度。结果:12h以内除(22.3±6.2)nm组外,其他纳米粒组小鼠肝脏中的ADM浓度显著高于游离ADM组(P<0.05),而在心肌组织中未测到或ADM浓度显著低于游离ADM组(P<0.05),肾脏组织中高浓度ADM维持时间不长;(101.9±20.3)nm组小鼠肝脏中的ADM浓度显著高于其他各组(P<0.05);其次为(143.5±23.5)nm组。(22.3±6.2)nm组的ADM浓度在肝、肾、心、脾、肺组织中均未测到。各纳米组小鼠肝脏中ADM浓度在各时间段缓慢释放。结论:(1)一定粒径范围的ADM-PBCA-NP具有良好的肝靶向性,并具有缓慢释药的特点,降低了心脏等脏器的药物分布,是治疗肝癌较理想的给药系统。(2)100~150nm粒径的ADM-PBCA-NP肝靶向性最强,这为临床应用阿霉素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米药物治疗肝癌提供了实验依据。     

Cy5标记寡脱氧核苷酸MT01经大鼠牙龈黏膜局部注射后在重要脏器组织中的分布

目的：观察不同时间点Cy5标记寡脱氧核苷酸（ODN）MT01在大鼠体内重要脏器组织中的分布,初步探讨其分布的规律性。方法：选取60只Wistar大鼠随机分为实验组和对照组,每组30只;实验组大鼠牙龈黏膜局部注射Cy5标记的MT01,对照组大鼠牙龈黏膜局部注射未经标记的MT01;于注射后15 min、1 h、4 h、8 h、16 h、1 d、2 d、3 d、4 d和5 d分别取大鼠肺、肝、脾、肾、心和脑组织;激光共聚焦显微镜下观测大鼠重要脏器组织中MT01的荧光分布,以荧光阳性细胞率表示各脏器组织内MT01进入各组织细胞量。结果：对照组大鼠重要脏器组织中未观察到荧光阳性细胞;实验组大鼠除心、脑组织外,肺、肝、脾和肾组织细胞中均可观察到荧光阳性细胞;肾组织中荧光阳性细胞呈片状分布,荧光主要集中于肾小管上皮细胞的胞质中;肝、脾和肾组织的荧光阳性细胞率呈规律性变化,峰值分别出现在注射后4、3和4 d时,肺组织的荧光阳性细胞率未见明显规律性。结论：MT01经大鼠牙龈局部注射后可进入肺、肝、脾和肾组织,主要集中在肾脏组织中,且分布具有一定规律性。