LC-MS法测定大鼠血浆中甘草次酸及其药动学研究

[目的] 建立液相色谱-质谱联用(LC-MS)的方法测定大鼠口服三拗汤后甘草次酸的药代动力学。[方法] 采用Agilent Zorbax SB-C18(4.6 mm×150 mm,5 μm)色谱柱, 流动相为乙腈-水(含10 mmol/L甲酸铵), 90%乙腈等度洗脱, 流速0.3 mL/min, 柱温25 ℃, 进样量20 μL。采用电喷雾离子源, SIM负离子检测模式, 甘草次酸和熊果酸(内标)定量离子分别为m/z 469.4和m/z 455.4。大鼠单剂量灌胃给予三拗汤浓缩液后, 经液-液萃取法对大鼠血浆样品进行预处理, 利用LC-MS法测定大鼠体内甘草次酸的血药浓度, 并采用DAS(ver.1.0)软件计算药代动力学参数。[结果] 甘草次酸的线性范围为5~10 000 μg/L, 最低定量限为5 μg/L, 内源性物质不干扰甘草次酸及内标的测定, 方法精密度、准确度、回收率和稳定性均符合生物样品的测定要求。[结论] 本方法具有专属性强、准确度高、灵敏度好的特点, 可用于甘草次酸的药代动力学研究。     

LC-MS/MS法测定大鼠血浆中芍药内酯苷的浓度及其在毒代动力学研究中的应用

目的 建立测定大鼠血浆中芍药内酯苷的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法.方法 血浆样品经乙酸乙酯-异丙醇(95:5,V/V)提取后,以Poroshell 120 EC-C18柱(50 mm×2.1 mm,2.7μm)为分析柱,乙腈-水为流动相梯度洗脱,采用ESI源在多反应监测(MRM)方式下进行正离子检测.用于定量分析的离子反应为m/z 498.5→m/z 197.1(芍药内酯苷)和m/z 251.3→m/z 108.2(拉科酰胺,内标).结果 芍药内酯苷血浆浓度测定方法的线性范围为20~2000 ng/ml,日内、日间精密度RSD%均<15%,准确度(RE)在±8.06%之间.结论 该法适用于芍药内酯苷在大鼠体内的毒代动力学研究.     

LC-MS/MS法测定乌苯美司及甲氨蝶呤在临床药物相互作用中的应用

目的建立灵敏、高效、专属性强的高效液相色谱质谱联用法用于测定生物样品中乌苯美司和甲氨蝶呤的浓度。方法两种LC-MS/MS法均采用乙腈沉淀蛋白法处理生物样品,应用Hypersil ODS-C18色谱柱分离,通过电喷雾电离源串联质谱,以多反应监测方式进行负离子检测,测定生物样品中乌苯美司和甲氨蝶呤的浓度。其中,m/z 309.10→m/z 120.30,m/z 455.20→m/z 308.20和m/z 370.40→m/z 288.10分别作为乌苯美司、甲氨蝶呤和西洛他唑(内标)定量分析时监测的离子对,色谱分离的流动相为乙腈-0.1%甲酸水(60∶40,=v/v),流速为0.4 mL/min。结果苯美司、甲氨蝶呤在2.00~2000.00 ng/mL的范围内线性关系良好(r2=0.9976)。结论所建的LC-MS/MS法快速、灵敏、专属性强,适用于乌苯美司和甲氨蝶呤临床药代动力学研究。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中青霉素V的浓度

目的 建立液相色谱一串联质谱法(1iquid chromatography-mass spectrometry/mass spectrometry,LC-MS/MS)测定人血浆中青霉素V的浓度,并用于人体药代动力学研究.方法 以甲醇和乙腈沉淀蛋白处理样品,采用C18色谱柱,流动相为5 mmol/L.醋酸胺+0.5%甲酸水溶液一乙腈(55:45,v/v),以氯硝西泮为内标,电喷雾离子源,选择正离子多离子反应监测模式,检测离子分别为m/z 351.10→m/z 160.10(青霉素V)和m/z 316.00→m/z270.00(内标).并测定了19名健康志愿者口服单剂量青霉素V钾片0.472 g后血药浓度.结果 青霉素V在0.05～20.00 mg/L浓度范围内线性关系良好,相对回收率大于96.7%,提取回收率大于94.9%,日内相对标准差(relative standard deviation,RSD)小于2.3%,日间RSD小于10.4%.结论 本法准确可靠专属性强,可作为人血浆中青霉素V的测定方法 .     

高效液相色谱-质谱-质谱联用法测定Beagle狗血浆中石杉碱甲

目的:建立狗血浆中石杉碱甲的液质联用测定法.方法:血浆样品经液液萃取,用高效液相色谱-质谱-质谱联用法检测.色谱柱为Nucleocil ODS柱,50×2.0 mm I.D.,5 μm,流动相为乙腈-甲醇-水-甲酸(20∶40∶40∶0.1,v/v).采用多反应监测,用于定量的离子为m/z 243→210(石杉碱甲)和m/z 257→226(内标N-甲基石杉碱甲).结果:线性范围为0.1～12 ng/ml,最低定量浓度为0.1 ng/ml,可以检测到Beagle狗静注和口服100 μg石杉碱甲后12 h的血药浓度.结论:该方法灵敏度高,简便快速,可用于药代动力学研究.     

LC-MS法测定人血浆中赖诺普利及其在药代动力学中的应用

目的：建立人血浆中赖诺普利的LC-MS测定法。方法：血浆样品以10mmol／L的盐酸溶液酸化后经固相萃取小柱提取，采用选择性离子检测方法测定其血药浓度。色谱柱为Lichrospher ODS柱，流动相为甲醇-40mmol／L醋酸铵水溶液（含0.1％甲酸）（45：55），内标为依那普利拉，检测仪器为Agilent 1100四极杆质谱检测器，离子源为ESI源，检测离子为m／z：406．2（赖诺普利）、m／z：349．2（内标），裂解电压为150V。结果：在1～300ng／mL范围内赖诺普利与内标峰面积比值与浓度线性关系良好，最低定量限为1ng／mL。本方法回收率为73．46％～80．79％，批内和批间的精密度均小于15％。结论：该方法经考察符合生物样品的分析要求，可以应用于临床血药浓度的测定和药代动力学研究。     

UPLC/MS/MS法同时测定人血浆中人参皂苷Re和Rg1含量及对参附冻干粉针剂的药代动力学评价

目的 在人血浆中建立一种快速灵敏的同时测定人参皂苷Re和Rg1含量的超高效液相色谱串联质谱(UPLC/MS/MS)检测方法.方法 采用Acquity UPLCTM BEH C18分析柱(1.7 μm, 2.1×100 mm),三重四级杆质谱检测器,在多反应检测模式(MRM)下分别选择质荷比(m/z) 969.6 →789.3、 m/z 823.5→643.2 和m/z 803.5 →387.1对Re、Rg1和内标地高辛进行检测.18名健康志愿者提供的324份血浆样品用该方法进行检测,并进行参附冻干粉针剂的药代动力学研究.结果 每个样品仅需要50 μL的血浆,洗脱时间仅需4 min.Re和Rg1的最低检测限均为0.025 ng/mL.在0.1～200 ng/mL内线性关系良好(r2>0.999).人参皂苷Re及Rg1在人血浆中的药动学参数均符合三室开放模型.结论 本法具有灵敏、快速的特点,适用于人参皂苷Re、Rg1血药浓度的同时测定以及静脉滴注参附冻干粉针剂药代动力学的研究.     

LC-MS法测定大鼠血浆中EXH-1626的浓度

目的:建立测定大鼠血浆中EXH-1626浓度的液相色谱-质谱(LC-MS)方法?方法:大鼠血浆样品中加入内标卡马西平,经蛋白沉淀剂(甲醇∶5%硫酸锌溶液 = 70∶30,V/V)沉淀血浆蛋白后取上清液5 μl进行LC-MS测定?色谱条件:色谱柱为汉邦ODS C18柱(5 μm,150 mm × 4.6 mm),流动相为乙腈∶10 mmol/L醋酸铵水溶液(用乙酸调pH至3)70∶30,流速为0.6 ml/min,柱温30℃;质谱条件:采用电喷雾离子化(ESI)方式,以选择性离子监测(SIM)方式检测,EXH-1626和内标选择检测离子的质荷比(m/z)分别为453.3([M+H]+)和274.3([M+H]+)?结果:大鼠血浆中EXH-1626在5~10 000 ng/ml内线性关系良好(r = 0.999 7),最低定量限(LOQ)为5 ng/ml,由低到高(10?100?1 000和10 000 ng/ml)4个浓度的日内和日间精密度RSD均< 10%,绝对回收率均> 70%,相对回收率90%~110%?结论:该方法快速?准确,灵敏度高,操作简便,适用于EXH-1626血药浓度测定及其非临床药代动力学研究?     

液相色谱-串联质谱测定大鼠血浆中紫云英苷的浓度及其药代动力学研究

目的建立液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定大鼠血浆中紫云英苷的浓度,并研究其灌胃给药后在大鼠体内的药代动力学特征。方法以槲皮素为内标,采用HPLC-MS/MS方法,色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18,流动相为甲醇-10 mmol/L醋酸铵水溶液-甲酸(80∶20∶0.15,v/v/v),采用多反应监测(MRM)模式,监测离子分别为:m/z 449.1→m/z287.1(紫云英苷),m/z301.1→m/z151.1(槲皮素);DAS2.0药动学软件计算药动学参数。结果紫云英苷在1.00～1000 ng/ml浓度范围内线性关系良好(r2=0.9929);定量下限为1.00 ng/ml;低、中、高浓度的提取回收率均大于93%。大鼠灌胃给药后在0.5±0.1 h达到231.1±67.3 ng/ml的峰值浓度,血浆半衰期为3.9±1.3 h,AUC0-∞为782.6±152.8(ng.h/ml)。结论本方法灵敏度高、选择性强、分析时间短,适用于血浆中紫云英苷的浓度测定及其药代动力学研究。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中普罗布考浓度

目的建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)技术测定人血浆中普罗布考浓度的方法。方法血浆经乙酸乙酯∶二氯甲烷(1∶1,V/V)提取后,采用HPLC-MS/MS测定。以ultimate CN(50mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,乙腈∶水∶氨水=97∶3∶0.05(甲酸调pH=7.20)为流动相进行分离。质谱采用负离子模式检测,以大黄素甲醚为内标,检测离子515.5→236.1(普罗布考)和283.0→239.9(内标)。结果普罗布考在2.5～6000ng/mL范围内线性关系良好,最低定量限为2.5ng/mL,方法回收率在93.02%～104.12%之间,日内、日间精密度分别小于4.67%及5.72%。结论本研究所建立的方法准确、灵敏,可用于普罗布考血药浓度测定及药代动力学研究。     

LC／MS／MS测定犬血浆中氯米帕明浓度及体内药动学

目的：建立液相色谱-串联质谱法测定犬血浆中氯米帕明（Clomipramine）。方法：色谱柱为ZorbaxExtend—C18柱（150mm×4．6mm,5μm,美国Agilent公司）;C18保护柱（4．0mm×3．0mm,5μm,迪马公司）;流动相为乙腈-10mmol／L醋酸铵-甲酸（60：40：0．1,V／V／V）;流速为0．5ml／min;进样量为20μl;柱温为20℃;采用三重四极杆串联质谱仪,ESI电离源,以选择反应监测方式进行检测。用于定量分析的离子反应分别为m／z315．2,86．1（氯米帕明）和m／z285．1～86．2（内标异丙嗪）。500μl血浆样品经正己烷液提取后蒸干,流动相复溶,进行分析。结果：测定血浆中氯米帕明的线性范围为1～500ng／ml,定量下限为1ng／ml;日内、日间精密度RSD均小于15％,准确度在85％。115％范围内．符合《中国药典》2010年版二部的规定．结论：本方法可用干氯米帕明的女体内药代动力学研究。     

HPLC测定人尿液三苯双脒次级代谢物对苯二甲酸浓度

目的建立测定人尿液三苯双脒次级代谢物对苯二甲酸（TPA）浓度的高效液相色谱法（HPLC）。方法以阿魏酸为内标（internal standard, IS）,志愿者尿样稀释后经Ultimate XB0C18柱（4.6mm×200mm,5μm）、流动相甲醇－1%醋酸（35∶65,V/V）分离,在检测波长为240nm、流速为0.8mL/min、柱温为30℃条件下采用HPLC分析。结果在1～400μg/mL内,TPA与IS的峰面积比值与浓度线性关系良好（r=0.9954）,定量下限为1μg/mL,低、中、高浓度的相对回收率分别为（106.0±4.4）%、（107.4±4.2）%和（108.5±2.4）%,批内和批间相对标准偏差（RSD）小于8%。结论方法符合生物样品分析要求,可用于三苯双脒次级代谢物TPA尿液浓度的测定。     

Development of a UHPLC-MS/MS method for the quantification of ilaprazole enantiomers in rat plasma and its pharmacokinetic application

In Korea and China, ilaprazole is a widely used proton pump inhibitor in the treatment of gastric ulcers. In this study, a specific and sensitive LC-MS/MS method has been developed and validated for the quantification of ilaprazole enantiomers in the rat plasma, using R-lansoprazole as the internal standard. The enantioseparation was achieved on a CHIRALPAK AS-RH column (4.6 mm × 150 mm, i.d. 5 μm), with a mobile phase composed of 10 mM ammonium acetate aqueous solution and acetonitrile (60:40, V/V), at a flow-rate of 0.5 mL/min. The method was validated over the concentration range of 0.5–300 ng/mL for both, R- and S -ilaprazole. The lower limit of quantification was 0.5 ng/mL for both enantiomers. The relative standard deviation (RSD) of intra- and inter-day precision of R-ilaprazole and S-ilaprazole was less than 10.9%, and the relative error accuracy (RE) ranged from −0.5%–2.0%. Finally, the method was successfully evaluated in rats in a stereoselective pharmacokinetic study of the ilaprazole racemate.     

HPLC-MS/MS同时检测大鼠血浆中阿托伐他汀和伏立康唑的浓度

目的建立并应用同时测定大鼠血浆中阿托伐他汀和伏立康唑浓度的液相质谱联用方法（HPLC-MS/MS）,研究阿托伐他 汀单独给药及与伏立康唑联合给药后,大鼠体内阿托伐他汀的药动学变化以及伏立康唑的浓度变化。方法采用醋酸钠酸化, 甲基叔丁基醚液-液萃取法处理血浆样品,经Thermo Hypersil Gold C1（8 2.1×100 mm, 1.9 μm）色谱柱分离,流动相为乙腈-0.1%甲 酸水溶液,梯度洗脱,分析时间6 min;质谱检测采用加热电喷雾离子源（H-ESI）正离子扫描方式,选择反应监测（SRM）模式检 测,选用m/z559.2→440.2（阿托伐他汀）、m/z350.2→281（伏立康唑）、m/z370.2→252（内标兰索拉唑）作为定量分析的离子。结 果阿托伐他汀在0.01~100 ng/mL（r=0.9957）,伏立康唑在0.025~100 ng/mL（r=0.9966）范围内线性关系良好,阿托伐他汀和伏 立康唑的日间和日内精密度均小于13%,提取回收率66.50%~82.67%,血浆样品稳定性符合测定要求。单独给药和联合给药后 大鼠血浆中阿托伐他汀的AUC0-24 h分别为（438.78±139.61）和（927.43±204.12)）h·μg·L-1,CLz/F分别为（23.89±8.14）和（10.43± 2.58）L·h-1·kg-1,Cmax分别为（149.62±131.10）和（159.37±36.83）μg·L-1,t1/2分别为（5.08±1.63）和（5.58±2.11）h,Tmax分别为（0.37± 0.14）和（3.60±1.52）h,其中AUC0-24 h和CLz/F,Tmax具有显著性差异（P<0.05）。同时可测定合并给药组中伏立康唑的血药浓度。 结论本方法简单快速,灵敏度高,可用于同时检测大鼠血浆中阿托伐他汀和伏立康唑的浓度。伏立康唑和阿托伐他汀联用,使 阿托伐他汀的部分药代动力学参数发生了改变。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆和尿液中二甲啡烷的浓度

目的 建立高效液相色谱串联质谱法 (HPLC-MS/MS) 测定人血浆及尿液中二甲啡烷的浓度。 方法 以重蒸乙醚为萃取剂,采用Ultimate C₁₈ (50 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,流动相为甲醇-水-甲酸=75∶25∶0.05,流速为0.2 mL/min。采用正离子模式,ESI 离子源,MRM 模式检测,以利多卡因为内标定量,二甲啡烷和内标的检测离子对质荷比分别为 (m/z) 256.4→155.3和 (m/z) 235.4→86.1。 结果 二甲啡烷血药浓度在0.025~5.0 ng/mL范围内线性关系良好（ r=0.995 7),最低定量限为0.025 ng/mL;尿药浓度在0.1~20.0 ng/mL范围内线性关系良好（ r=0.998 3）,最低定量限为0.1 ng/mL。血浆方法回收率为103.38%～106.88%;尿液方法回收率为90.05%～101.40%。血药浓度日内、日间精密度相对标准偏差 (RSD)分别小于5.92%及5.70%,尿药浓度日内、日间精密度RSD分别小于10.35%及8.80%。 结论 本研究建立的方法准确、灵敏、可靠,可用于二甲啡烷的血药浓度和尿药浓度的测定及其药代动力学研究。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中乌苯美司浓度

目的建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定人血浆中乌苯美司浓度。方法采用API3000型HPLC-MS/MS液质联用系统,Ultimate C18分析柱(50mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水-甲酸(70∶30∶0.05,V/V/V),流速为0.2mL/min,格拉司琼作为内标。样品经过固相萃取后浓缩进样,多反应离子检测模式,正离子扫描,离子源为ESI源。结果检测乌苯美司的线性范围为0.4～4000ng/mL,最低定量限为0.4ng/mL。批内精密度和批间精密度均小于6%。结论本法具有快速简便、灵敏准确的特点,可满足乌苯美司临床药物浓度测定的需要。     

液相色谱-串联质谱测定大鼠血浆中紫云英苷的浓度及其药代动力学研究

目的建立液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定大鼠血浆中紫云英苷的浓度,并研究其灌胃给药后在大鼠体内的药代
动力学特征。方法以槲皮素为内标,采用HPLC-MS/MS方法,色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18,流动相为甲醇-10 mmol/L
醋酸铵水溶液-甲酸（80∶20∶0.15, v/v/v）,采用多反应监测（MRM）模式,监测离子分别为：m/z 449.1→m/z 287.1（紫云英苷）,m/z
301.1→m/z 151.1（槲皮素）;DAS2.0药动学软件计算药动学参数。结果紫云英苷在1.00~1000 ng/ml浓度范围内线性关系良好
（r2=0.9929）;定量下限为1.00 ng/ml;低、中、高浓度的提取回收率均大于93%。大鼠灌胃给药后在0.5±0.1 h达到231.1±67.3 ng/ml的
峰值浓度,血浆半衰期为3.9±1.3 h,AUC0-∞为782.6±152.8 (ng·h/ml)。结论本方法灵敏度高、选择性强、分析时间短,适用于血
浆中紫云英苷的浓度测定及其药代动力学研究。
     

液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯的含量(英文)

目的建立了测定大鼠血浆中脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯(DAS)的液相色谱-串联质谱法。方法血浆样品经液-液萃取后,以甲醇-水(70∶30,V/V)为流动相,通过Restek PinnacleⅡC18柱分离,格列吡嗪为内标,选择负离子扫描方式,以多反应监测(MRM)方式进行检测。用于定量分析的离子反应分别为m/z 531→m/z 431(DAS)和m/z 444→m/z319(格列吡嗪,内标)。结果DAS血浆浓度测定方法的线性范围为5～2500 ng/ml,定量下限为5 ng/ml。日内、日间精密度(RSD)均小于9.51%,准确度(RE)在-0.18%~1.93%。样品提取回收率为79.73%~85.99%,每个样品的测试时间为3 min。应用此法测试了大鼠口服或静注穿琥宁(DAS的单钾盐)后DAS的血药浓度,计算出其绝对生物利用度为3.69%。结论本方法灵敏度高、专属性强,适合于DAS的临床前药动学研究。