TNFα诱导血管内皮细胞HO-1基因表达的受体及细胞内信号机制

目的探讨肿瘤坏死因子(TNFα)对脑微血管内皮细胞(BMVEC)HO-1基因表达的信号转导机制。方法采用TNF受体1敲除的脑血管内皮细胞[BVEC/TNF-RI(-/-)]为研究对象,用RT-PCR法测定TNFα刺激细胞24h后HO-1基因mRNA的表达,用westernblot法检测TNFα对JNK、ERK激酶和转录因子AP-1活性的影响,并用JNK或ERK抑制剂干预上述诱导实验。结果TNFα刺激BVEC/TNF-RI(-/-)HO-1表达增高(P<0.05),此外,TNFα刺激BVEC/TNF-RI(-/-)可引起JNK和ERK激酶表达和转录因子AP-1的活性增强(P<0.05),可是JNK的抑制剂SP600125能减弱TNF诱导的HO-1的表达(P<0.05),而ERK的抑制剂不能。结论TNFR2和JNK激酶对于TNFα诱导的HO-1的表达有重要作用。     

严重烧伤后血浆sTNFR浓度的变化

肿瘤坏死因子(TNF)在全身炎症反应综合征(SIRS)的发生发展过程起重要作用[1],它是通过与靶细胞膜受体(TNFR)结合来发挥生物学功能的,而TNFRs胞外部分裂解后成为可溶性肿瘤坏死因子受体(sTNFR),分为sTNFR I和sTNFR I.sTNFR能与TNFR竞争结合TNF,影响TNF发挥功能.     

肿瘤坏死因子受体研究近况

肿瘤坏死因子α(TNFα)是单核巨噬细胞系统产生的一种重要的细胞调节因子,具有多种生物学功能,与干扰素等一些细胞因子一样,发挥作用需要细胞表面高亲和性受体的介导。近几年国外为了探讨TNFα的作用机理,对TNF_α受体(TNFR)作了深入的研究,并取得进展,本文综述TNFR的研究近况。1 TNFR的存在形式和分布 1985年Baglioni等首先用~(125)I标记重组人TNF_α,以受体结合分析法证实细胞膜上存在TNFR,随后许多研究者测定了各种肿瘤细胞和正常细胞的TNFR,实验表明上皮细胞系肿瘤细胞(子宫颈癌、结     

磁场对荷瘤小鼠TNF及TNFR水平的影响

目的　观察磁场对荷瘤鼠瘤组织内肿瘤坏死因子 (TNF)及肿瘤坏死因子受体 (TNFR)的影响。方法　采用磁场照射荷瘤小鼠瘤区。结果　磁疗组小鼠体内TNF活性明显增强 ,TNFR表达量增多 ,与非磁疗组相比 ,差异有高度显著性 (P <0 .0 1)。结论　磁场具有增强荷瘤小鼠TNF活性并促进TNFR表达的作用。     

肿瘤坏死因子受体1的信号传导与肿瘤的关系

肿瘤坏死因子(TNF)是一种有着极其广泛生物学活性的细胞因子,它有2种特异性受体,其大部分生物学效应是通过TNF受体1(TNFR1)介导的。TNFR1涉及促凋亡及抗凋亡2种截然不同的信号传导途径,TNFR1活化后细胞究竟是生存还是死亡则取决于双方信号水平的强弱对比及作用时机的不同。本文就TNFR1的信号传导途径及在肿瘤组织/细胞中的表达与功能方面作一综述。     

TNF的分离纯化和TNFR实验研究

应用本室建立的方法制备、分离纯化肿瘤坏死因子(TNF),应用生物素标记技术,使TNF生物素化为肿瘤坏死因子生物素(TNFB)。应用TNFB建立肿瘤坏死因子受体(TNFB)的ABC法检测技术,检测几种培养细胞涂片,显示染色位于细胞膜上,非生物素化TNF能竞争阻断TNFB的结合,使染色下降,检测表明鼠成纤维母细胞L_(929)细胞、子宫颈癌细胞株(Hela细胞)、肝癌细胞株SMMC_(7721)细胞和白血病细胞株     

参莲胶囊对肿瘤坏死因子基因表达调控作用研究

目的探讨“参莲胶囊”对肿瘤坏死因子(TNF)基因的调控作用。方法采用双抗体夹心ELISA法及受体吸收试验,观察参莲胶囊对肿瘤患者TNF活性的影响。结果肿瘤患者体内TNF活性明显降低,而血清中可溶性TNF受体(STNFR)的表达量增高。服用参莲胶囊后TNF活性增强,而TNFR含量减少,自身服药前后比较,差异有高度显著性(P<0.01)。结论参莲胶囊具有促进TNF表达及抗肿瘤作用。     

重组绿色荧光蛋白-肿瘤坏死因子融合蛋白的表达及应用

目的　为肿瘤坏死因子 α (TNF α)及其受体 (TNFR)的科学研究提供实验工具。方法　用基因克隆技术构建了人TNF α (rhTNF α)及绿色荧光蛋白 (GFP)与人TNF α的融合蛋白 (GFP TNF)的原核表达质粒pET2 8a/rhTNF及 pET2 8a/GFP TNF ,分别转化大肠杆菌BL2 1;用IPTG诱导重组蛋白的表达 ,超声裂菌 ,包涵体中的rhTNF α和GFP TNF用镍金属螯合层析柱进行纯化 ;用MTT法检测rhTNF α和GFP TNF的生物活性。结果重组表达的rhTNF α及GFP TNF均具有明显的细胞毒效应 ,GFP TNF还具有GFP的绿色荧光特性。结论　rhTNF α和GFP TNF具有生物活性 ,可用于TNF α和TNFR的实验研究。     

肿瘤坏死因子受体基因转移增强TNF杀伤肿瘤细胞作用的研究

目的 :探讨肿瘤坏死因子受体 (TNFR)基因转移对肿瘤细胞表面 TNFR表达量的影响 ,进而观察其对TNF杀伤肿瘤细胞作用的影响。　方法 :建立 TNFR的逆转录病毒表达载体 ,通过转染包装细胞 PA 317产生完整病毒颗粒 ;人前列腺癌细胞株 PC- 3m和小鼠 Renca肾腺癌细胞株经病毒感染后 ,检测其细胞表面 TNFR数量及TNF在体内外对其杀伤作用的变化。　结果 :TNFR基因转移前后 PC- 3m细胞表面与 TNF结合的位点数量分别为 2 912个 /细胞和 8872个 /细胞 (P<0 .0 5 ) ,Renca细胞表面与 TNF结合的位点数分别为 783个 /细胞和 36 78个 /细胞 (P<0 .0 5 )。 TNFR基因转染后 ,TNF在裸鼠体内对 PC- 3m和 Renca的肿瘤抑制率分别增强 1.8和 2 .1倍。　结论 :以逆转录病毒为载体的基因转移方法 ,可以提高肿瘤细胞表面 TNFR的表达量 ,从而增强 TNF对肿瘤细胞的体外杀伤作用和体内抑制作用     

TNFα和TNFR1在子宫腺肌病组织中的表达及意义

目的 检测肿瘤坏死因子α(TNFα)和肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)在子宫腺肌病(腺肌病)组织中的表达,探讨其发病机制.方法 采用免疫组化SABC法检测40例腺肌病患者在位及异位子宫内膜组织TNFα和TNFR1的表达,并与20例正常子宫内膜进行比较.结果 TNFα在腺肌病组在位、异位及对照组内膜中的表达差异均无显著性(P＞0.05);而TNFR1除在腺肌病组异位内膜显著低于对照组外(P＜0.05),余组问差异均无显著性(P＞0.05).腺肌病组在位内膜增生期与分泌期TNFα的表达差异无显著性(P＞0.05),而TNFR1的表达分泌期显著高于增生期(P＜0.05);腺肌病组异位内膜增生期与分泌期TNFα、TNFR1的表达差异均无显著性(P＞0.05);而在对照组两者的表达均分泌期明显高于增生期(P＜0.05).TNFα在腺肌病组在位内膜增生期的表达显著高于对照组同期(P＜0.05);TNFR1在分泌期的表达为腺肌病组异位内膜＜腺肌病在位内膜＜对照组,两两比较差异均具有显著性(P＜0.05).结论 TNFα、TNFR1参与正常子宫内膜的周期性调节.在位内膜分泌期及异位组织中TNFR1的低表达可能与腺肌病的发生发展有关.     

肿瘤坏死因子受体实验研究

应用本室制备的肿瘤坏死因子生物素（ＴＮＦＢ），藉ＡＢＣ法对几种肿瘤细胞坏死因子受体（ＴＮＦＲ）进行定位分析，结果与文献报道的放射受体结合分析法一致，３株胃癌细胞ＴＮＦＲ存在情况与ＴＮＦ对这３株胃癌细胞的抑制率相吻合。应用荧光分光光度法测定胃癌细胞内游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ），ＴＮＦ可引起胃癌细胞ＦＧＣ－８５的［Ｃａ２＋］ｉ急性升高，提示ＴＮＦ对［Ｃａ２＋］ｉ有明显影响。     

He—Ne激光照射对SP2／0骨髓瘤小鼠TNF及TNFR水平的影响

目的：观察激光照射对瘤鼠瘤组织内肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）及肿瘤坏死因子受体（ＴＮＦＲ）的影响。方法：采用麦联免疫吸附试验及受体吸附试验分析测定瘤组织内ＴＮＦ及ＴＮＦＲ和可溶性ＴＮＦＲ（ＳＴＮＦＲ）的含量。结果：激光照射组小鼠瘤组织内ＴＮＦ活性明显增强,ＴＮＦＲ表达量增多,瘤细胞增殖率降低,与对照组相比有高度显著性差异（Ｐ〈０．０１）。结论：氦氖激光具有增强带瘤小鼠机体ＴＮＦ活性并促进ＴＮＦＲ表达的作     

类风湿性关节炎患者应用益赛普治疗前后血清TNF的变化及其意义

目的:检测类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)患者在应用益赛普治疗前后血清TNF的变化,并初步探讨其临床意义。方法:应用ELISA法检测45例RA患者接受益赛普治疗前后血清TNF的变化,并与35例正常健康人做比较。结果:RA患者接受益赛普治疗前血清TNF浓度明显高于正常人(P<0.05),治疗后TNF的表达水平明显下降,与治疗前相比有显著性差异(P<0.05)。结论:益赛普可明显下调RA患者体内TNF水平,缓解患者的临床症状,具有良好的临床疗效。     

肿瘤坏死因子-α对少突胶质前体细胞的影响及其机制的研究

目的：探讨肿瘤坏死因子‐α（T N F‐α）对少突胶质前体细胞（O PC ）的作用及机制,为脑室周围白质软化（PV L ）的治疗提供策略。方法将分离纯化的OPC分为空白对照组、TNF‐α组、肿瘤坏死因子受体1（TNFR1）抗体组,将50 ng／mL TNF‐α作用于TNF‐α组、TNFR1抗体组,免疫荧光化学检测OPC的分化情况,四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测3组细胞的相对活力, RT‐PCR检测细胞TNFR1的mRNA水平的表达情况。结果与空白对照组和TNFR1抗体组相比,TNF‐α组OPC的细胞活力明显下降（P＜0．05）,并且不能沿着少突胶质谱系细胞进行分化,即分化为原少突胶质细胞。TNF‐α组TNFR1的mRNA表达明显的上调,空白对照组和TNFR1抗体组的mRNA表达无明显的变化。结论 TNF‐α主要通过 TNFR1引起OPC的凋亡,抑制O PC分化。     

肿瘤坏死因子基因和蛋白及受体在子宫内膜组织的表达

目的探讨子宫内膜癌组织肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）基因和蛋白及受体的表达及意义。②方法分别采用非同位素原位杂交方法、免疫组化方法对４８例子宫内膜癌组织ＴＮＦｍＲＮＡ,ＴＮＦ蛋白及ＴＮＦ受体（ＴＮＦＲ）的表达进行检测。③结果子宫内膜癌组织中１６例ＴＮＦｍＲＮＡ呈阳性表达,均为间质的单个核细胞和平滑肌细胞,腺癌细胞无阳性表达,对照组未见阳性表达。１５例病人ＴＮＦ蛋白呈阳性表达,２５例ＴＮＦＲ呈阳性表达,对照组子宫内膜腺体也有ＴＮＦＲ阳性表达,两组比较差异无显著性（χ２＝２．４５,Ｐ＞０．０５）。ＴＮＦｍＲＮＡ与ＴＮＦ蛋白表达存在不一致性,ＴＮＦ与ＴＮＦＲ表达与组织学分化及肌层浸润深度差异均无显著性（χ２＝２．１７,０．８１,Ｐ＞０．０５）;ＴＮＦＲ蛋白表达明显高于ＴＮＦ,两者比较差异有极显著性（χ２＝４．２９,Ｐ＜０．０５）;ＴＮＦＲ在正常内膜表达与子宫内膜癌表达差异无显著性（χ２＝２．４５,Ｐ＞０．０５）。④结论子宫内膜癌间质细胞能够表达ＴＮＦｍＲＮＡ,并产生ＴＮＦ蛋白。     

36例多系统器官功能衰竭患者血清TNF的动态观察

目的观察３６例多系统器官功能衰竭患者血清ＴＮＦ的变化，并探讨其有关因素。方法，采用ＥＬＩＳＡ法，与正常人对照。结果多系统器官功能衰竭组血清ＴＮＦ含量较正常对照组明显增高，并随病情恶化而升高、病情好转而降低。结论测定血清ＴＮＦ对疾病的预后有提示意义。     

肿瘤坏死因子受体(TNFR)基因转移增强TNF对肿瘤细胞的杀伤作用

目的：探讨ＴＮＦＲ基因转移对肿瘤细胞表面ＴＮＦＲ表达量的影响，观察其对ＴＮＦ杀伤膀胱肿瘤细胞作用的影响。方法：建立ＴＮＦＲ的逆转录病毒表达载体，通过转染包装细胞ＰＡ３１７产生完整病毒颗粒；膀胱癌ＢＩＵ８７细胞经病毒感染后，检测细胞表面ＴＮＦＲ数量及ＴＮＦ对其杀伤作用的变化。结果：ＴＮＦＲ基因转移前膀胱癌ＢＩＵ８７细胞表面与ＴＮＦ结合的位点数量平均为９１２个／细胞，经病毒感染后，细胞表面与ＴＮＦ结合的位点数量平均为２８７２个／细胞（Ｐ＜０．０５）；ＴＮＦ对经病毒感染的ＢＩＵ８７细胞的杀伤作用较未经病毒感染者有明显增强（Ｐ＜０．０５）。结论：以逆转录病毒为载体的基因转移方法可以提高肿瘤细胞表面ＴＮＦＲ的表达量，从而增强ＴＮＦ对肿瘤细胞的杀伤作用。     

同种异体血管移植后TNF在血管和心肌组织中的表达

目的探讨同种异体血管移植后肿瘤坏死因子(TNF)在移植的血管和心肌组织中的表达。方法用成年雄性新西兰大白兔做血管供者,日本大白兔做血管受者,进行颈动脉血管移植。通过新鲜植入、抗生素处理及液氮冷冻等方法对移植的血管进行处理,HE染色观察移植血管和心肌组织的形态学改变;免疫组织化学方法检测移植血管和受者心肌组织TNF表达的变化。结果TNF表达率在液氮冷冻组低于新鲜移植组和抗生素处理组,与自体原位移植组相似。新鲜移植组TNF表达率最高,各组间比较差异有显著性(P<0.05)。血管移植后,受者心肌组织的TNF的表达与移植血管的相似:新鲜移植组和抗生素处理组的TNF表达率较高,液氮冷冻组的TNF表达率较低(P<0.05)。结论同种异体血管移植能激发移植血管和心肌组织产生TNF,液氮冷冻处理可降低移植血管和受者心肌组织的TNF的产生。     

肿瘤坏死因子细胞毒活性检测方法比较

比较MTT比色分析法、中性红摄取法、结晶紫染色湿测法、结晶紫染色干测法和~3H-TdR摄入法五种方法检测L929细胞毒活性的敏感性和稳定性。结果表明五种方法检测的TNF活性有明显差异,以结晶紫染色干测法具有较敏感、稳定、简便之优点.并用此方法检测TNF对三种不同肿瘤细胞的细胞毒活性结果,不同的肿瘤细胞对TNF的敏感性有明显差异,提示可用结晶紫染色干测法检测TNF对不同肿瘤细胞的细胞毒性效应的敏感性。以供临床治疗参考。