基于组织分布学特征评价补骨脂炮制工艺研究

目的:应用组织分布学特征,评价补骨脂的炮制工艺。方法:以大鼠血中移行成分补骨脂素与异补骨脂素的总含量为指标,HPLC梯度洗脱,测定不同炮制品药效成分在大鼠各组织脏器中的含量,分析其变化趋势。结果:与生品组相比,药汁法(五味子为辅料),促进药效成分入肝(207%)、肾(150%)显著;盐炙法与微波炙法,促进药效成分吸收入肾(分别为137%、176%),雷公法也能促进药效成分在肝(180%)、肾(196%)中的吸收,且在肺(200%)中含量相对较高。结论:利用组织分布学特征的方法来评价补骨脂不同的炮制工艺,为验证补骨脂"酒制升提""入盐走肾""醋注肝经""相资为制"等中医理论提供了依据。     

补骨脂不同溶剂提取物对前列腺增生小鼠干预作用比较

目的:比较补骨脂水提取物以及50%、75%、95%乙醇提取物对小鼠前列腺增生的干预作用,确定其发挥抗前列腺增生作用的最佳提取溶剂并对其抑制前列腺增生作用的活性成分进行初步探讨。方法:测定灌服补骨脂不同溶剂提取物及癃闭舒胶囊后的前列腺增生小鼠的前列腺系数,制备并观察小鼠的前列腺病理切片,同时对不同溶剂提取物中补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂甲素、补骨脂乙素及补骨脂酚的含量进行测定,探究与其疗效的关系。结果:与模型对照组比较,各乙醇提取物组小鼠的前列腺系数均显著降低(P0.01),而水提取物组与模型对照组比较差异无统计学意义(P 0.05)。组织切片显示,除水提取物组外,其他各组小鼠的前列腺增生症状均明显减轻;其中75%乙醇提取物组和95%乙醇提取物组较50%乙醇提取物组的细胞层明显变薄、腺上皮褶皱明显减少(P0.05)。含量测定结果显示,补骨脂提取物中上述5种成分含量较高的为75%乙醇提取物和95%乙醇提取物,两者相近;其次是50%乙醇提取物组,而水提取物组中各种成分的含量均较低。结论:补骨脂高浓度乙醇提取物能更好地发挥抗前列腺增生的作用,同时推测其对小鼠前列腺增生的抑制作用可能与补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂甲素、补骨脂乙素及补骨脂酚这5种或其中的某些成分有关。     

补骨脂乳膏剂的制备及其质量控制

目的：制备补骨脂乳膏并建立其质量标准。方法：加热回流法提取补骨脂中主要成分补骨脂素和异补骨脂素,浓缩至浸膏。取处方对应量的主药、乳化剂水相和油相制得乳膏剂,采用高效液相法测定乳膏中补骨脂素和异补骨脂素的含量,并考察制剂稳定性。结果：补骨脂素检测浓度在0.0145～0.3620μg范围内线性关系良好（r=0.9999）,平均回收率为98.20%（RSD=1.79%,n=6）;异补骨脂素检测浓度在0.0188～0.470μg范围内线性关系良好（r=0.9999）,平均回收率为98.87%,RSD=1.58%,且制备的补骨脂乳膏均匀细腻,易于涂布,质量稳定。结论：补骨脂乳膏的处方及制备工艺合理,质量可控,值得推广,质量控制方法简便﹑准确﹑重现性好,适用于该制剂的质量控制。     

补骨脂炮制前后补骨脂素和异补骨脂素的变化

目的比较补骨脂炮制前后补骨脂素和异补骨脂素的变化。方法采用雷公法、盐炙法对19个不同来源的补骨脂药材进行了炮制。通过HPLC梯度洗脱测定补骨脂炮制前后的补骨脂素和异补骨脂素的量。结果盐炙法有利于提高脂溶性化合物的总量,而雷公法提高了补骨脂素和异补骨脂素的量。结论雷公法和盐炙法使补骨脂中成分的量发生改变。     

补骨脂果皮和种子中化学成分的分布规律研究

[目的]阐明豆科植物补骨脂果皮、种子中化学成分的分布规律。[方法]采用超高效液相色谱法测定四批生补骨脂果皮、种子中香豆素、黄酮、单萜等化合物,计算各化学成分在补骨脂果实中的相对含量。[结果]补骨脂苷、异补骨脂苷主要分布在补骨脂种子中,其相对含量≥ 89.63%;补骨脂甲素、新补骨脂异黄酮、Corylifol A、Corylifol C、补骨脂查尔酮、补骨脂酚等黄酮和单萜酚类成分主要分布在果皮中,其相对含量≥ 80.86%,其中Corylifol C仅分布于果皮中;补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂定、4″,5″-去氢异补骨脂定等香豆素类成分在种子和果皮中均有分布,其相对含量相当。[结论]补骨脂苷和异补骨脂苷主要存在于补骨脂种子中,黄酮和单萜类化合物主要存在于果皮中,补骨脂素、异补骨脂素等脂溶性香豆素在果皮和种子中均有分布。     

补骨脂不同提取工艺的比较研究

[目的] 比较补骨脂的不同提取工艺。[方法] 以补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂甲素、补骨脂乙素、补骨脂酚的转移率为指标, 对补骨脂3种提取工艺(冷浸法、超临界CO₂萃取法、回流法)进行比较研究。[结果] 在3种提取工艺中, 超临界CO₂萃取法萃取时间短, 但指标成分转移率较低;回流法时间短, 但能耗大;冷浸法提取效率高, 能耗低。[结论] 根据大生产的实际需要, 选择冷浸法为补骨脂提取方法。     

田口(Taguchi)实验设计法优选中药材补骨脂的提取工艺

目的：采用田口实验设计法研究补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的最佳提取工艺。方法：采用60%乙醇回流提取,以乙醇用量、提取时间、提取次数作为考察因素,采用L9（34）正交表安排实验,补骨脂素和异补骨脂素总量的信噪比（S/N）作为考察指标筛选补骨脂的提取工艺。结果：最佳提取条件为乙醇用量为5倍,提取时间为1.5h,提取3次。结论：该工艺稳定、可行。     

HPLC法对不同产地补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的含量测定

目的：建立补骨脂中主要成分含量的HPLC（高效液相色谱）测定方法。方法：色谱柱填料为：Kromasil C18（4．6×150mm），流动相为甲醇-水（50：50），检测波长为330nm，流速为1．0mL／min。结果：补骨脂素在4．8—20．16μg／mL（r=0．9996）范围内、异补骨脂素在4．55—19．11μg／mL（r=0．9999）范围内线性关系良好；补骨脂素与异补骨脂素平均回收率分别为103．59％（RSD=1．75）、99．28％（RSD=1．30）。结论：该方法准确、稳定、简单，可以作为补骨脂药材的质量控制方法。     

淫羊藿不同炮制法对配方中补骨脂有效成分煎出的影响

为了解淫羊藿不同炮制法对与其配伍的补骨脂化学成分煎出的影响,用未经炮制的淫羊藿和经羊油炒炙的淫羊藿分别与含补骨脂中药方剂同煎,结果经羊油炒炙后的淫羊藿可提高异补骨脂素的煎出量,提示,淫羊藿经羊油炙后不但影响其自身的药材成分的药理作用发近,而且对与其配伍的补骨脂可产生增溶作用,促进补骨脂素向异补骨脂素的转化。淫羊藿用羊油炒炙后,与补骨脂配伍入汤药,可影响补骨脂化学成分的煎出和转化,结果提示中药炮制研究尚应重视对方药配伍的影响。     

碱提酸沉法提取补骨脂中补骨脂乙素的工艺研究

目的：通过碱提酸沉的方法对补骨脂乙素的提取进行工艺优化。方法：以补骨脂乙素的含量为指标，通过单因素试验和正交试验考察料液比、碱液浓度、碱提时间、酸沉pH、酸沉时间以及超声时间对补骨脂乙素提取工艺的影响。结果：碱提酸沉法提取补骨脂乙素的最佳工艺为：料液比为1∶10、碱液浓度为4%、碱提时间为2 h、酸沉pH为6、酸沉时间为0.5 h、超声时间为20 min。结论：本研究优化的最佳工艺条件具有良好的复重性，且稳定可靠、经济环保，适合大量提取补骨脂中的补骨脂乙素。     

HPLC法测定固本咳喘胶囊和补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的含量

[目的]采用高效液相色谱法测定固本咳喘胶囊和补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的含量.[方法]用C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇:水(52:48)为流动相,检测波长246 nm.[结果]固本咳喘胶囊中补骨脂素平均回收率为96.35％(RSD=0.71％),异补骨脂素平均回收率为102.8％(RSD=1.30％).[结论]该方法简便、快速、准确,适用于固本咳喘胶囊和补骨脂的质量控制.     

正交试验法优选沙苑子炮制工艺

目的：优选沙苑子的最佳炮制工艺。方法：以UV法测定沙苑子中总黄酮含量为指标,采用L9（3^4）正交试验设计法对沙苑子的炮制工艺进行优选。结果：优选出最佳炮制工艺为：盐浓度4%,烘制温度140℃,烘制时间4h。结论：该炮制工艺合理、简单、可行、效率高,可为大规模生产提供参考依据。     

应用均匀设计-高通量筛选技术评价丹参有效单体成分抗氧化及海马神经细胞保护作用的最佳配伍

目的：通过均匀设计-高通量筛选（uniform design—high throughput screening,UD—HTS）技术,对丹参多种有效单体成分进行多因素多水平配伍组合样品抗氧化及海马神经细胞保护作用的筛选。方法：具有生物活性的丹参多种有效单体（脂溶性7种和水溶性7种）。按照均匀设计方案,得到各单体之间不同浓度配比的组合样品,通过抗2,2-二苯基-1-苦肼基自由基（2,2-Di（4-tert-octylphenyl）-1-picrylhydrazyl,DPPH）氧化法和细胞学实验检测各组合样品药物活性。结果：通过初筛和复筛,得到A13、PA两个抗氧化及海马神经细胞保护作用最佳配伍组合样品。结论：均匀设计．高通量筛选技术可快速筛选出药效较好的组合样品,适合多因素多水平配比的大规模药物筛选。     

HPLC法分析川芎-香附配伍前后指标成分的变化

目的：研究药对川芎-香附配伍对单味药材中指标成分的影响。方法：以川芎嗪、阿魏酸、藁本内酯和α-香附酮为指标成分,采用HPLC法分析川芎、香附及川芎-香附配伍前后变化。色谱条件：色谱柱为Inertsil ODS-3（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相为：甲醇-0.05%磷酸水溶液（梯度洗脱,0～20 min：45%～48%甲醇;20～25 min：48%～70%甲醇;25～50 min：70%～75%甲醇;50～55 min：75%～100%甲醇;55～60 min：100%～45%甲醇）,检测波长为270 nm。结果：药对中指标成分川芎嗪、阿魏酸、藁本内酯含量与单味药材相比均有所增大。结论：川芎-香附配伍前后特征峰面积均发生明显变化。     

侧柏叶炮制方法研究

目的：研究侧柏叶炮制前后槲皮素含量的变化,建立侧柏叶合理的炮制方法。方法：通过HPLC法对侧柏叶中槲皮素的含量进行测定,色谱柱为Agilent Eclipse XPB-C18（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相为甲醇：0.2%磷酸溶液（55∶45）;流速1.0 mL·min^-1;检测波长360 nm;柱温30℃;并对侧柏叶的生品、烘制品及不同炮制品中槲皮素进行测定和比较。结果：槲皮素在0.03~0.52μg成良好的线性关系,回收率为97.5%~100.8%,RSD1.22%,槲皮素在烘制品中的含量较传统炮制品高。结论：所建立的HPLC法简便可靠、精密度高。烘制法具有和传统炮制法相接近的结果,提示其作为侧柏叶的炮制法存在一定的可行性。     

逍遥蒌贝胶囊的质量标准研究

目的建立逍遥蒌贝胶囊的质量控制方法。方法采用薄层色谱法（TLC）对处方中白术、当归、浙贝母和柴胡进行定性鉴别;采用高效液相色谱法（HPLC）测定处方中芍药苷的含量,色谱柱：Diamonsil C18色谱柱（4.6 mm×200 mm,5μm）;流动相：甲醇-0.1%磷酸水溶液（30∶70,v/v）;流速：1.00 mL.min-1;检测波长：232 nm;进样量10μL。结果薄层鉴别的色谱斑点清晰,特征斑点对应性强,阴性对照无干扰;芍药苷进样量在65～1 300 ng范围内与峰面积具有良好的线性关系,r=0.999 9,平均回收率为99.43%（n=6）,RSD为1.97%。结论所建立的方法简便、准确、重现性好,可作为逍遥蒌贝胶囊的质量控制标准。     

维药香青兰中挥发油成分的GC-MS分析

目的：用气相色谱-质谱联用（GC-MS）法对香青兰的挥发油成分进行分析。方法：按《中国药典》要求用水蒸气蒸馏法得到香青兰的挥发油，用GC-MS法分离并分析其化学成分，采用气相色谱峰面积归一化法定量。结朵：鉴定出51种成分，其中柠檬醛（顺式及反式）含量较高，占总挥发性成分的相对含量为31．43％，其次为棕榈酸（16．48％）及香叶醇乙酸酯（9．02％），提示其可以作为制备柠檬香系香料的重要原料。结论：本方法稳定可靠，重现性好，适用于香青兰挥发油的化学成分分析。     

钯作为基体改进剂在石墨炉原子吸收光谱法测定尿铅中的应用

目的：探讨钯作为基体改进剂在石墨炉原子吸收光谱法测定尿铅中的应用价值。方法：用氯化钯作为基体改进剂,配制标准曲线,然后对非铅接触组和铅接触组尿液测定,用同法对尿铅标样进行测定,观察其相对误差。结果：标准1（尿比重≤1．016）的标准曲线为Y=0．746X＋0．04816（r=0．9999）;标准2（尿比重1．016～1．028）为Y=0．988X-0．03418（r=-0．9999）;标准3（尿比重〉1．028）为Y=O．948X＋0．05346（r=0．9999）;三个标准曲线铅的最低检出浓度均为2．0μg／L。精密度实验中,平均浓度为（26．75±1．19）μg／L、（73．24±1．33）μg／L的两尿样,RSD分别为5．27％、3．47％。准确度试验中,浓度为30．26、50．26、70．26μg／L的加标尿样测得的回收率分别为102．28％、98．55％、97．62％。用该法测定尿铅标样ZK103—1（82．00μg／L）、ZK103—2（221．00μg／L）相对误差分别为1．70％、1．41％。用该法均可测定正常人及铅接触人群的尿铅浓度。结论：石墨炉原子吸收光谱法应用基体改进剂测定尿铅速度快,准确度、灵敏度高,结果可靠。     

白藜芦醇对人宫颈癌SiHa细胞增殖与凋亡作用的影响

目的：探讨白藜芦醇（Res）诱导宫颈癌SiHa细胞凋亡的作用及可能的机制．方法：MTT法检测不同浓度（0,12．5,25,50,100,200,300,400和600μmol／L）Res处理24,48和72h对SiHa细胞的抑制率;流式细胞仪采用AnnexinV和PI双染检测细胞的凋亡率．荧光显微镜观测SiHa细胞的形态学改变．分光光度法检测Caspase-3活性．结果：Res在一定浓度范围内,以浓度和时间依赖的方式抑制宫颈癌SiHa细胞的生长（P〈0．05）．以0,200和300μmol／L Res处理细胞48h,SiHa细胞早期凋亡率分别为1．1％,8．9％和11．1％,晚期凋亡比例为3．1％,15．0％和14．0％．荧光显微镜下细胞呈现典型的凋亡性改变．200μmol／L Res处理8h后,Caspase-3活性增加,24h达高峰,后逐渐下降,经50,100和200μmol／L Res处理24h后,Caspase-3活性与对照组相比,分别增加了1．92倍,2．51倍和4．53倍（P〈0．05）．结论：白藜芦醇通过诱导Caspase-3活性增加以时间依赖和浓度依赖的方式抑制宫颈癌SiHa细胞增殖,诱导细胞凋亡．