荧光抗体法及厌氧菌培养法检出类杆菌与梭状杆菌的质量控制

本文为1983年1月至1984年7月374例次临床标本的脆弱类杆菌、产黑类杆菌与核粒梭状杆菌的荧光抗体法(IFA)与厌氧菌培养法的对比,并对二法的质量控制如符合率、敏感性、特异性、预示值、抗血清的保存期限作了比较。说明二法符合率良好(88.5～95.99％)。IFA有快速诊断的优点外,并有下列的特点: 1.IFA可检查厌氧菌培养法的质量,经对比,证明我们现用厌氧菌培养法宜于分离产黑类杆菌、核粒梭状杆菌,不宜于分离脆弱类杆菌,对后一种厌氧菌培养法有待改进。 2.国外已有压氧菌专用荧光抗体试剂出售,国内并无此项专用试剂,但可自制厌氧菌抗血清,向北京或上海生物制品研究所购买羊抗兔免疫球蛋白荧光抗体,可作IFA的间接法快速诊断之用. 3.经三年来(1982～1983年102例次,1983～1984年的374例次)三种厌氧菌的IFA与厌氧菌培养法对比,都证明IFA可提高阳性检出率。 并对二法存在的问题略加讨论。     

Identification of some anaerobic bacteria in nonspecific anaerobic infections in animals.

Over 200 anaerobic bacterial isolates were recovered in a veterinary diagnostic laboratory from nonspecific infectious disease from 72 specimens originating from ten animal species. The majority of isolates were nonsporeforming bacteria and about half were identified to species. Bacteroides species formed the major group and included B. oralis, B. fragilis, B. corrodens, B. ruminicola subspecies ruminicola, B. ruminicola subspecies brevis and various subspecies of B. melaninogenicus. Gram-positive anaerobic cocci constituted the next major group of isolates and the main species identified in cattle was Peptococcus indolicus. Clostridial species were uncommon. Nine specimens yielded a pure culture of an anaerobe and, in samples containing mixtures of bacterial species, each specimen yielded an average of 3.1 anaerobic and 1.4 aerobic bacterial species. The failure to identify many of the isolates is discussed.     

抗脆弱类杆菌和产气荚膜杆菌McAb池在外科感染快速诊断中的应用

目的 制备抗脆弱杆菌和抗产气荚膜杆菌单克隆抗体池,并用于快速诊断及时指导临床治疗。方法 采用间接免疫荧光抗体染色法（IFA）和免疫酶标抗体染色法（ELA）对我院1998～1999年191例外科感染患者的标本进行细菌学检测,并与常规培养法进行比较。结果 3种方法从191份标本中分别检出脆弱类杆菌53株（27.7%）和55株（28.8%）以及25株（13.1%）;检出产气荚膜杆菌12株（6.3%）和11株（5.8%)以及6株（3.1%）。IFA和ELA法2种厌氧菌检出率明显高于CM法。但IFA和ELA法之间检出率差异无显著性。结论 自制脆弱类杆菌和抗产气荚膜杆菌的McAb池,检测平时常见的脆弱类杆菌和战时常见的产气荚膜杆菌,敏感性高,简便,快速、便于推广。     

成年型牙周炎病人龈下菌群的探讨

采用无菌纸捻吸取法用一种非选择培养基和两种选择性培养基对20例成年型牙周炎病人周袋中细菌进行了厌氧菌培养、分离和鉴定。结果表明厌氧菌的检出率为100%,周袋中菌群主要由厌氧的革兰氏阴性杆菌组成,优势菌群为拟杆菌属,占厌氧菌的51.39%。分离鉴定出的重要菌种有产黑色素拟杆菌、赖氏拟杆菌、口腔拟杆菌、多毛拟杆菌、脆弱拟杆菌、具核梭杆菌、小韦荣氏球菌及厌氧消化链球菌等。     

肛周脓肿细菌感染菌群分布研究

①目的探讨肛周脓肿厌氧与需氧茵的菌群分布。②方法选择31例肛周脓肿患，对其脓液中的厌氧茵和需氧菌进行培养鉴定。③结果肛周脓肿感染患中男27例，女4例；感染中共分离出51株细菌，其中厌氧菌30株，需氧菌21株。厌氧菌总检出率为96．8％，需氧菌总检出率为67．4％。单纯厌氧菌感染检出率为32．3％，单纯需氧菌检出率为32％。、厌氧和需氧菌混合感染捡出率为64．5％。在所分离出的30株厌氧菌中，脆弱类杆菌占80％，消化链球菌占13％，普通类杆菌和产黑色素类杆菌各占33％21株需氧菌中，大肠杆菌占71％，肺炎克雷伯菌、产气肠杆菌、阴沟肠杆菌各占9．5％。④结论肛周脓肿男性患病率高于女性；细菌感染菌群分布以脆弱类杆菌和大肠杆菌为主；感染类型以厌氧和需氧菌混合感染居多。     

脆弱类杆菌多糖复合物抗原的提取及其鉴定

经酸、ＥＤＴＡ、脱氧胆酸钠和加热处理后从脆弱类杆菌ＡＴＣＣ２５２８５和ＣＤＣ１４４６２提取到两种多糖复合物。每种复合物中糖类与蛋白质的比例接近１：１，两种复合物之间糖类和蛋白质的相对含量世接近，提示有共同的基本结构。三类糖基可能由荚膜多糖和脂多糖成分组成。免疫血清学鉴定的结果表明两种多糖复合物都是本菌特异的表面抗原决定簇。提示可建立更特异免疫学方法诊断本菌感染。     

54例女童阴道厌氧菌分析

本文报告54名3～5(11/12)岁正常女童阴道厌氧菌培养结果。54例培养均阳性。共分离出153株32种厌氧菌,分离率从高至低依次为拟杆菌(96.3％)、消化链球菌(59.3％)、消化链球菌(14.8)、小韦荣球菌(13％)、放线菌{9·3％)和梭杆菌(5·6％)。最多见的菌种是双路拟杆菌、锐利拟杆菌、脆弱拟杆菌、狄氏拟杆菌和真口腔拟杆菌,其次是黑色消化球菌不解糖消化链球菌、厌氧消化链球菌、小韦荣球菌和产生消化链球菌。提示这些厌氧菌是女童阴道正常菌群。厌氧菌在女童外阴阴道感染的病原学意义尚有待研究。     

国内筛选的脆弱类杆菌荧光抗体的评价

通过筛选得到5株脆弱类杆菌(Bacteroides fragilis,Bf),用作者改进后的方法免疫NZW兔,获得凝集效价为1∶1280～1∶5120的五份免疫血清,并制成荧光抗体。其中SFMC10012株的荧光抗体可使100％(69/69)的同种细菌染上4~+荧光,除1株多形类杆菌(B.thetaiotaomicron)染上荧光外,未发现与其它细菌有2~+以上的交叉荧光染色。SFMC 10012菌株的发现,可简化脆弱类杆菌多价荧光抗体的制备工艺,便于生产。     

1120份临床血标本厌氧培养结果分析

对１１２０份临床血标本进行厌氧菌的培养鉴定。厌氧菌培养阳性占３２３份，阳性率２８．４％；其中儿童组３１０份，阳性８８份，阳性率２８．３％；成年组８１０分，阳性２３５份，阳性率２９．０％。两组厌氧菌培养结果差别无显著性（Ｐ＞０．０５）。对３１１株厌氧菌作了１４种抗生素药敏试验的结果，显示厌氧菌对灭滴灵、先锋Ｖ、羧苄青霉素、氯霉素和丁胺卡具有高度敏感性。     

腹部脓肿的细菌学研究

报告75例腹部脓肿细菌培养和药敏试验结果。63例培养阳性,阳性率为84.0%,其中厌氧菌百分比为85.7%,需氧菌和厌氧菌混合感染为71.4%;共检出细菌159株,包括需氧菌64株、厌氧菌95林,其中以大肠杆菌和脆弱群拟杆菌为最多见。提示厌氧菌感染在腹部脓肿中占有重要地位,需氧菌和厌氧菌的混合感染是其特点之一。在抗生素选用上,应以丁胺卡那霉素或庆大霉素与甲硝唑合用为首选。     

厌氧菌培养及其抗生素敏感性试验

本文对521份临床标本进行了厌氧菌的培养鉴定,检出厌氧菌258株,检出率为49.5%。同时对256株厌氧菌作了19种抗生素药敏试验,发现厌氧菌对灭滴灵、利福平、氯霉素、林可霉素、庆大霉素等具有高度敏感性。98份临床标本(血液、脓、腹水、脑脊液)作了厌氧与常规培养对照,两者差异具有显著意义(P<0.01)。     

直接荧光抗体染色法快速诊断脆弱类杆菌感染

用1株SFMC 10012脆弱类杆菌(Bacteroides fragilis,Bf)制备的荧光抗体应用于临床快速诊断该菌感染,共检140份临床标本,并与培养法比较。结果示直接荧光抗体染色法敏感性为100％,特异性94.5％,阳性期望值83.3％,阴性期望值100％。我们认为:(1)该荧光抗体可用于临床Bf感染的快速诊断;(2)仅用1株Bf的荧光抗体即可取代过去多株Bf制备的混合荧光抗体,从而简化工艺便于生产。     

全自动血培养仪阳性病原菌种类及报警时间分析

目的：分析血培养阳性病原菌种类及仪器报警时间。方法：用BDBACTEC9120全自动血培养仪检测笔者所在医院2010年4月-2012年4月共计2180份血标本,分析血标本在需氧瓶和厌氧瓶中生长细菌的种类及仪器报警时间。结果：2180例血培养标本中报警阳性282例,其中真阳性263例,阳性率为12．1％。分离出细菌269株,其中革兰阳性球菌占40．1％,革兰阴性杆菌占57．2％,真菌占2．6％。其中仅需氧瓶报阳的阳性率为6．3％,仅厌氧瓶报阳的阳性率为2．8％,需氧瓶及厌氧瓶均报阳的阳性率为2．9％;最快阳性检出时间为5．02h,24h内检出的阳性数占69．1％,48h检出的阳性数占92．5％,72h检出的阳性数占97．O％;假阳性率为0．87％,假阴性率为O．09％。结论：应用BDBACTEC9120全自动血培养仪同时进行需氧瓶及厌氧瓶培养能提高血培养阳性率,缩短了阳性检出时间。     

牙周炎患者龈下厌氧菌群的分离和鉴定

从24例正常人、34例成年人牙周炎和18例青少年牙周炎患者龈下分离和鉴定了23种共296株革兰氏阴性无芽胞厌氧菌。产黑色素类杆菌、牙龈类杆菌、伴放线嗜血杆菌、核梭杆菌、衣氏和梅氏放线菌是牙周炎患者龈下优势厌氧菌群。两类患者龈下韦荣氏球菌的检出率与正常人相似。实验结果还提示,牙周炎非为单一的病原体所引起,而是多种厌氧菌共同作用的结果。     

In vitro activity of teicoplanin, vancomycin, A16686, clindamycin, erythromycin and fusidic acid against anaerobic bacteria

The in vitro activity of teicoplanin and A16686, two new glycopeptide antibiotics was determined against 196 isolates of anaerobic bacteria. The activity of teicoplanin and A16686, in comparison with that of vancomycin, clindamycin, erythromycin and fusidic acid was 2 to 16 times higher against the gram positive anaerobes, namely, Propionibacterium acnes, Clostridium perfringens, Clostridium difficile, Clostridium species, Peptococcus species and Peptostreptococcus species. However, Bacteroides fragilis was resistant to teicoplanin and A16686 while Bacteroides melaninogenicus and Bacteroides bivius were found to be sensitive.     

厌氧菌检测技术在口腔颌面部感染治疗中的应用

目的：探讨口腔颌面部感染患者的厌氧菌病原菌分布及耐药情况,以指导临床治疗。方法：对北京大学口腔医学院口腔颌面外科收治的61例口腔颌面部感染患者的脓液标本进行需氧菌和厌氧菌培养,应用API 20A试剂盒对耐氧试验阴性菌株进行菌种鉴定,采用Etest方法检测菌株进行药敏试验,确定病原菌类型及厌氧菌耐药情况。收集61例患者的临床治疗及抗菌药物应用情况,记录临床治疗效果。结果：61例脓液标本均培养分离出细菌,其中单纯需氧菌感染6例（9.8%）,单纯厌氧菌感染7例（11.5%）,厌氧菌与需氧菌混合感染48例（78.7%）。厌氧菌感染总例数为55例（90.2%）,共分离出 81株厌氧菌。分离率最高的革兰阳性厌氧菌为消化链球菌属（Peptostreptococcus）、双歧杆菌属(Bifidobacterium)和疮疱丙酸杆菌(Pemphigus propionbacterium),上述3类革兰阳性厌氧菌均未出现对头孢西丁、阿莫西林/克拉维酸耐药菌株;分离率最高的革兰阴性厌氧菌为卟啉单胞菌属（Porphyromonas）和普雷沃菌属(Prevotella),上述两类革兰阴性厌氧菌均未出现对甲硝唑、头孢西丁、阿莫西林/克拉维酸耐药菌株。根据药敏试验结果指导临床治疗48例口腔颌面部感染患者,临床治愈率达到81.3%。结论：口腔颌面部感染多为需氧菌和厌氧菌混合性感染,其中厌氧菌占有较高比例,厌氧菌的培养及药敏试验结果对临床治疗具有良好的指导作用。     

HEPATOCELLULAR CARCINOMA GRADING AND HBAg DISTRIBUTION

The relationship between HBsAg and HBcAg distribution in cancer cells and hepa- toma grading is reported. On the basis of the morphology, atypia and frequency of mitotic figures etc, primary hepa- tocellular carcinoma is divided int0 3 grades (well, moderately and poorly differentiated). Among 125 cases of hepatoma, 2:4 (19.2To) are Grade l, 62 Grade 11 (49.6%) and 39 (31.2To) Grade III. Positive HBsAg and HBcAg cancer cells are detected not only in well differentiated hepato- ma, but also in moderately and poorly differen- tiated forms. Among 12 hepatoma cases (9.6'70) with positive HBsAg demonstrated by immuno- fluorescence, 2 are Grade I and 5 each Grades II and III. Of 11 positive HBcAg (8.8'70) cases de- monstrated by immunoperoxidase, 1 is Grade l, 7 Grade II and 3 Grade m. This suggest~s that HBAg can be replicated not only in well differentiated hepatoma, but also in the poorly differentiated. Hepatitis B virus (HBV) is probably a kind of biologic car- cinogenic substance, or an associated carcino- genic substance. Thus, prevention of HBV in- fection can minimize hepatoma incidence.     

临床厌氧菌的简易鉴定

在实验室中采集了90份临床标本，分离到厌氧菌254株，经简易鉴定后，确定为10个菌属30个菌种，临床标本厌氧菌的阳性检出率为52%，其中革兰氏阴性无芽孢厌氧菌-类杆菌属最常见，占41%，而且常被分离的菌种是脆弱类杆菌，占19%。临床上一般以混合感染为主。     

血培养厌氧瓶及双套送检的临床应用价值研究

目的 研究血培养瓶病原菌分离率及报阳时间（time to positivity,TTP）的区别,探讨厌氧瓶和双套送检方式对血流感染病原菌检出的价值。方法 回顾性分析2019年1月至2021年12月杭州师范大学附属医院临床送检的54582瓶血培养数据,分析厌氧瓶病原菌分离特点,比较厌氧瓶和需氧瓶病原菌分离率及TTP差异,分析双套送检方式病原菌分离数量特点。结果 仅从厌氧瓶分离出的血培养病原菌占13.11%,血培养厌氧瓶TTP显著短于需氧瓶,差异有统计学意义（P<0.001）。双套送检标本阳性检出率高于单套送检标本阳性检出率,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 双套送检比单套或非成套送检血培养标本更能及时准确地分离病原菌。     

先天性心脏病合并下呼吸道感染患儿痰培养及药敏结果分析

目的分析先天性心脏病合并下呼吸道感染患儿痰培养阳性率、病原菌分布及药敏试验结果,为临床防治感染提供选药依据。方法选择我院2008年7月-2011年6月住院的先天性心脏病合并下呼吸道感染患儿63例,对其痰液进行培养和药敏试验。结果63例标本痰液培养阳性46例,阳性率73．02％。检出菌种11种,革兰阴性菌（G-菌）6种,革兰阳性菌（G．菌）5种。阳性标本共分离出细菌53株,其中G-菌37株,占69．8l％,G＋菌16株,占30．19％。革兰阴性菌对左氧氟沙星、环丙沙星、阿米卡星、头孢他啶、头孢唑肟、头孢哌酮／舒巴坦、亚胺培南敏感率较高,对头孢曲松、头孢噻肟中度敏感,对阿奇霉素、复方新诺明耐药。革兰阳性菌对左氧氟沙星、环丙沙星、阿米卡星、万古霉素、阿奇霉素敏感,对头孢曲松、头孢他啶、头孢唑肟、亚胺培南、利福平中度敏感,对头孢噻肟、头孢哌酮／舒巴坦、复方新诺明耐药。结论先天性心脏病合并下呼吸道感染患儿的痰液培养病原菌种类多,耐药菌株多,临床用药限制多,应选择对致病菌敏感的抗生素为主,痰培养结果指导临床合理用药非常必要。