吉西他滨联合槲皮素对胰腺癌细胞Panc-1凋亡的影响研究

目的研究吉西他滨联合槲皮素抑制胰腺癌细胞Panc-1增殖,促进其凋亡的效果.方法设立槲皮素(终浓度为50μM)、吉西他滨(50μg/ml)、吉西他滨联合槲皮素和对照组4组,MTS法检测药物对Panc-1细胞凋亡的影响,流式细胞仪检测联合药物处理对细胞凋亡和细胞周期的影响,最后应用荧光定量PCR法测定凋亡相关基因BCL-2家族蛋白的相对表达.结果吉西他滨联合槲皮素后,对胰腺癌促凋亡效果增强,同时改变细胞周期,使其S期减少,BCL-2家族促凋亡基因表达上调.结论槲皮素能够显著增强吉西他滨抑制胰腺癌恶性增殖的作用.     

基于胰腺癌患者来源异种移植模型的化疗药物筛选

目的 利用胰腺癌PDX 模型,评估临床化疗药物治疗效果,筛选个体化治疗方案?方法 将新鲜的胰腺癌手术标本移植裸鼠皮下,建立PDX 模型并稳定传代;利用STR 基因分型检测PDX 模型肿瘤组织的溯源性;选择临床使用的奥沙利铂?吉西他滨和伊立替康三种化疗药物进行治疗,并测量肿瘤体积;利用TGD 值数学模型方法,辅以血浆CA19 -9 检测评估三种化疗药物的治疗效果?结果 PDX 模型肿瘤组织样本的溯源性为99.99%,与原发瘤保持一致;与对照组相比,伊立替康组和吉西他滨组均具有显著的治疗效果(c =0.001),且吉西他滨抑瘤效果更为明显;伊立替康的药物毒性作用最小,吉西他滨次之?结论 成功建立胰腺癌PDX 模型并稳定传代,通过TGD 值数学模型法筛选,发现吉西他滨抑制肿瘤生长效果最为显著,推荐其作为该胰腺癌个体化治疗首选药物?     

大黄素联合吉西他滨对胰腺癌细胞生长的影响

目的 探讨大黄素联合吉西他滨对体内胰腺癌生长的影响及其机制.方法 建立胰腺癌裸鼠原位移植瘤模型,分别给予0.9%氯化钠溶液（对照组）、大黄素（大黄素组）、吉西他滨（吉西他滨组）及大黄素联合吉西他滨（大黄素联合吉西他滨组）治疗,观察各组对裸鼠胰腺肿瘤生长的影响,同时采用免疫组织化学法检测各组裸鼠胰腺肿瘤组织中Ki-67和Survivin表达的情况.结果 与对照组比较,其他各组均可明显抑制裸鼠胰腺肿瘤生长;与单药组和对照组比较,大黄素联合吉西他滨组肿瘤生长显著被抑制;大黄素单独或联合吉西他滨可下调裸鼠胰腺肿瘤中Ki-67和Survivin的阳性表达.结论 大黄素可增强吉西他滨对体内胰腺癌生长的抑制作用,该作用可能通过下调Survivin而实现.     

吉西他滨在多种肿瘤中的应用

西他滨是一种常用的广谱抗肿瘤药物,它除了是非小细胞肺癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、子宫癌、膀胱癌、胆囊胆管癌和恶性胸膜间皮瘤的一线化疗方案推荐用药外,在多种肿瘤中具有明确的治疗作用.本文回顾了吉西他滨在肺癌、胰腺癌、乳腺癌、鼻咽癌、卵巢癌、软组织肿瘤、膀胱癌、宫颈癌及其他肿瘤中的一线、二线治疗或辅助治疗的可选方案,并对常见及少见不良反应加以总结.     

吉西他滨联合替吉奥(S-1)在晚期胰腺癌患者中的临床应用

胰腺癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,尽管现在的检测技术不断发展,确诊后只有4%的患者生存期可以超过5年,手术切除是其最佳的治疗方式,不幸的是,诊断为胰腺癌后,有超过80%~85%的患者已经是晚期[1],对于这些患者,化疗是可以接受的方案[2]。Burris等[3]研究证明了吉西他滨的化疗效果优于5-氟尿嘧啶（5-FU）,目前吉西他滨成已为胰腺癌的标准化疗药物,但是仍有许多研究尝试通过吉西他滨与其他细胞毒性药物或生物剂相结合,以提高胰腺癌患者的存活率[4],在日本吉西他滨联合S-I的II、III期临床试验结果提示联合用药可以显著提高患者的生存率,提高近期化疗疗效[5-6]。尽管有研究报道,替吉奥一线治疗晚期胰腺癌与传统的化疗药物相比,具有高效低毒的优越性,但其一线治疗地位尚未明确[7],本研究设置吉西他滨联合S-1联合化疗组和单用吉西他滨的单药组,目的是探讨吉西他滨联合S-1一线治疗胰腺癌的有效性及安全性。     

丛生蛋白反义核苷酸对裸鼠人膀胱癌模型的肿瘤抑制作用

 目的 观察单独使用丛生蛋白反义寡聚脱氧核苷酸(clusterin ASO)以及联合应用化疗药物吉西他滨对裸鼠人膀胱癌T24细胞生长的影响。 方法 将裸鼠随机分为空白对照组，clusterin ASO组，吉西他滨组和clusterin ASO +吉西他滨组。每只裸鼠右侧肩部皮下接种T24细胞，各组相应瘤体内注射clusterin ASO，尾静脉注射吉西他滨，连续观察6 周肿瘤细胞的生长变化。 结果 Clusterin ASO组和吉西他滨组裸鼠生存期延长，肿瘤体积得到抑制。Clusterin ASO +吉西他滨组肿瘤抑制明显，抑瘤率达94.68%。 结论 膀胱癌T24细胞在裸鼠体内的生长能被clusterin ASO所抑制。联合应用clusterin ASO和吉西他滨不仅对T24细胞在裸鼠皮下肿瘤的生长具有抑制作用，同时还可使肿瘤体积缩小，并可能增加T24细胞对吉西他滨的化疗敏感性。     

百里醌联合吉西他滨对人胰腺癌细胞株BxPC-3生长和凋亡的影响

目的探讨百里醌联合吉西他滨对人胰腺癌细胞株BxPC-3的影响。方法百里醌、百里醌联合吉西他滨分别作用于人胰腺癌细胞株BxPC-3,培养24、48及72 h后检测细胞存活率（两药联合培养72 h）。采用CCK-8法检测两组BxPC-3细胞的增殖情况,流式细胞术检测BxPC-3细胞凋亡情况。结果百里醌对BxPC-3细胞的增殖抑制作用呈明显浓度和时间依赖性。其联合吉西他滨作用72 h后胰腺癌BxPC-3细胞的存活率仅为27.43%,与单用百里醌（49.38%）比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;百里醌单用于BxPC-3细胞24 h后,胰腺癌细胞早期凋亡率为（4.80±1.53）%,联合用药BxPC-3细胞凋亡率为（21.40±3.15）%,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论百里醌可显著抑制人胰腺癌BxPC-3细胞生长,有效增强吉西他滨对人胰腺癌BxPC-3细胞的增殖抑制作用,其协同作用以诱导胰腺癌细胞凋亡方式为主。     

姜黄素联合吉西他滨对肝癌细胞HepG2增殖、凋亡的影响

目的:观察姜黄素、吉西他滨单药及联合用药对肝癌细胞HepG2增殖和凋亡的影响。方法:使用不同浓度的姜黄素、吉西他滨以及两药联合分别作用肝癌细胞HepG2 24h、48h、72h。MTT法检测上述药物单用或联用对HepG2细胞的生长抑制作用;采用流式细胞仪检测其对HepG2细胞凋亡率的影响。结果:姜黄素、吉西他滨单药及联合用药对HepG2细胞有明显的生长抑制作用,存在时间剂量依赖关系,均可诱导HepG2细胞凋亡,联合用药有协同作用。结论:姜黄素、吉西他滨能够抑制HepG2细胞增殖,诱导细胞凋亡,两药联用有协同作用。     

塞来昔布与吉西他滨合用对胰腺癌的抑制作用及其机制

目的探讨环氧合酶2(COX2)选择性抑制剂塞来昔布和吉西他滨抑制胰腺癌生长的影响及其机制。方法观察塞来昔布与吉西他滨联合作用对裸鼠SW1990胰腺癌细胞移植瘤生长的影响,并与两者单独应用作比较,免疫组织化学染色观察肿瘤组织增殖细胞核抗原(PCNA)和细胞周期蛋白D1表达的变化;四唑蓝法、克隆形成试验观察塞来昔布和吉西他滨体外对SW1990细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期变化;Western印迹检测细胞周期蛋白D1、A和B1表达的变化。结果药物作用于裸鼠移植瘤32d后,对照组、吉西他滨组、塞来昔布组和联合组肿瘤体积分别为(2.31±0.41)cm3、(0.41±0.12)cm3、(1.56±0.17)cm3、(0.05±0.04)cm3,塞来昔布和吉西他滨联合可明显抑制胰腺癌移植瘤的生长,对照组PCNA、细胞周期蛋白D1呈强阳性表达,吉西他滨组PCNA、细胞周期蛋白D1阳性细胞数明显减少,塞来昔布组PCNA阳性细胞数较对照组略有减少,细胞周期蛋白D1阳性细胞数则无明显减少,而联合组中PCNA、细胞周期蛋白D1阳性细胞数较前3组明显减少。塞来昔布和吉西他滨剂量依赖性抑制SW1990细胞增殖,两药联合应用,对细胞增殖的抑制有增强作用。药物作用24h或72h后,塞来昔布组和联合组凋亡细胞数较对照组及吉西他滨组明显增加(P<0.05)。药物作用24h后,塞来昔布组和联合组G0/G1期细胞比例明显增加,G2/M期细胞明显减少,吉西他滨组G0/G1期细胞明显减少,而S期和G2/M期细胞明显增加,药物作用72h后,塞来昔布组和联合组G0/G1期细胞进一步增加,S期细胞明显减少,G2/M期细胞进一步减少,而联合组在作用24h和72h,G2/M期细胞比例均为0。细胞周期素的表达与细胞周期的分布相一致。结论COX2选择性抑制剂塞来昔布可增强吉西他滨对胰腺癌增殖的抑制作用,其机制可能部分通过调节细胞周期素的表达,诱导细胞周期阻滞和胰腺癌细胞凋亡而实现的。     

人参炔醇联合吉西他滨对胰腺癌干细胞分化及活性的影响

目的: 探讨人参炔醇和吉西他滨联合作用对胰腺癌干细胞(pancreatic cancer stem cell, PCSC)干性及活性的影响。方法: 体外悬浮培养法培养和富集人胰腺癌PANC-1细胞系干细胞,采用荧光激活细胞分选法（fluorescence activated cell sorting,FACS）分选出CD133⁺的细胞亚群;将分选的CD133+细胞分为PBS（对照）组、人参炔醇组、吉西他滨组和人参炔醇与吉西他滨联合组,人参炔醇与吉西他滨最终浓度分别为164 μmol/L,2 μmol/L。流式细胞术检测各组细胞CD133+比例;CCK-8实验检测细胞增殖率;Annexin-V/PI双染流式细胞术检测各组细胞凋亡率;蛋白质印迹法检测增殖相关蛋白Ki-67及凋亡相关蛋白Bcl-2的表达。结果： 各组细胞处理48 h后,与对照组相比,人参炔醇组、吉西他滨组和联合组CD133⁺细胞比例明显减少, 而两药联合作用CD133⁺细胞比例减少更显著(P<0.01);人参炔醇和吉西他滨均可抑制胰腺癌PANC-1干细胞增殖并促进细胞凋亡(P<0.05),而联合作用对干细胞增殖能力的抑制作用更显著(P<0.01),促进细胞凋亡更明显(P<0.01);与人参炔醇组和吉西他滨组相比,联合组的Ki-67和Bcl-2表达明显下降。结论： 人参炔醇联合吉西他滨可促进胰腺癌干细胞体外分化,并抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,从而抑制细胞活性。     

吉西他滨诱导的胰腺癌细胞外泌体促进胰腺癌细胞的增殖和侵袭

目的 探讨正常培养和吉西他滨处理后胰腺癌细胞分泌的外泌体对胰腺癌细胞增殖和侵袭的作用。方法 收集正常培养和吉西他滨处理后胰腺癌细胞上清液中的外泌体,利用透射电镜、纳米颗粒跟踪分析和Western blot法鉴定外泌体,分析外泌体的浓度和大小,将外泌体与胰腺癌细胞共孵育后检测细胞的增殖和侵袭能力,Western blot法检测CD147分子表达水平。结果 提取到的外泌体表达外泌体特异性的标志物,吉西他滨处理后外泌体的浓度和大小没有显著变化,与外泌体共孵育后胰腺癌细胞的增殖和侵袭显著增强,而与吉西他滨诱导的胰腺癌细胞外泌体共孵育后细胞的增殖和侵袭进一步增强,CD147表达水平明显升高。结论 吉西他滨诱导的胰腺癌细胞外泌体能够促进胰腺癌细胞的增殖和侵袭。     

西妥昔单抗联合吉西他滨对三阴性乳腺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的：研究表皮生长因子受体的单克隆抗体西妥昔单抗与吉西他滨联合应用对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖和凋亡的影响.方法：使用不同浓度药物联合处理MDA-MB-231细胞,四甲基偶氮唑蓝法检测药物的生长抑制效应;碘化丙啶染色流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot 测定MDA-MB-231 细胞bcl-2家族蛋白表达.结果：75 μg/ml的西妥昔单抗与10 μmol/L的吉西他滨联合作用于MDA-MB-231细胞的48 h 存活率为48.53%;75 μg/ml的西妥昔单抗与2 μmol/L的吉西他滨联合用药诱导的细胞凋亡率为 45.7%,较单用吉西他滨的凋亡率16.5%明显提高（P〈0.01）;单用吉西他滨可以使蛋白 bcl-2 表达下调,合用后较单用下调更加明显.结论：西妥昔单抗与吉西他滨对三阴性乳腺癌MDA-MB-23细胞有抑制增殖及促进凋亡的作用,两者联合表现为相加或协同作用.     

普伐他汀对人胰腺癌细胞SW1990的影响及其协同吉西他滨的抑瘤作用

目的研究普伐他汀(pravastatin,Pra)对人胰腺癌细胞SW1990增殖和凋亡的影响及其联合吉西他滨(gemcitabine,GEM)对该细胞的作用。方法MTT比色法测定普伐他汀对SW1990细胞生长的抑制作用。不同浓度普伐他汀处理细胞48 h后,流式细胞仪测定细胞凋亡率,光学显微镜下观察细胞形态学改变。吉西他滨、普伐他汀联合吉西他滨作用细胞48 h,MTT法测定各处理组的OD值,并计算相互作用指数。结果 MTT比色法显示普伐他汀对SW1990细胞具有抑制增殖的作用,5、15、25μmol/L普伐他汀处理SW1990细胞后,SW1990细胞出现典型的形态学改变,且凋亡百分率随浓度增大而逐渐增加。普伐他汀联合吉西他滨作用细胞后,GEM的IC50值降低。结论普伐他汀具有抑制胰腺癌细胞SW1990增殖和诱导该细胞凋亡的作用,普伐他汀联合吉西他滨对SW1990细胞具有协同抗瘤作用。     

TLR9对胰腺癌裸鼠增殖生长及化疗耐药性的研究

目的 观察TLR9在不同的活化状态下对人胰腺癌裸鼠移植瘤生长及药物抗性的影响.方法 建立人胰腺癌PANC-1细胞裸鼠移植肿瘤模型,并随机分为6组:无菌生理盐水组、TLR9激动剂、TLR9抑制剂组、吉西它滨组、TLR9抑制剂+吉西它滨组、TLR9激动剂+吉西它滨组进行实验.游标卡尺记录肿瘤体积大小及生长情况,采用免疫组化方法检测肿瘤TLR9受体表达情况,核磁共振成像(MRI)观察肿瘤生长、转移及周围组织侵犯情况.结果 吉西他滨组、TLR9激动剂+吉西它滨组、TLR9抑制剂+吉西它滨组肿瘤摘除后体积及生长速度明显小于其他组(P＜0.05),TLR9激动剂+吉西它滨组生长速度及肿瘤摘除后体积明显大于TLR9抑制剂+吉西它滨组及吉西他滨组(P＜0.05),TLR9抑制剂+吉西它滨组与吉西他滨组比较,差异有统计学意义(P＜0.05),TLR9激动剂组、TLR9抑制剂组及生理盐水组差异无统计学意义(P＞0.05).种植后7周小鼠在MRI下观察,瘤成椭圆形,境界清楚,周围组织未见明显转移及对周围组织的侵犯;检测肿瘤组织中并鉴定表面明确有TLR9的表达.结论 胰腺癌裸鼠移植瘤中确有TLR9的阳性表达,TLR9的激活可以明显降低胰腺癌对吉西他滨化疗的敏感性,增加肿瘤的耐药性,相反促进肿瘤生长.     

PUMA与c-myc在吉西他滨诱导CaPan-1细胞凋亡中的作用

目的 研究吉西他滨体外对人胰腺癌CaPan-1细胞生长的作用及机制。方法 将CaPan-1细胞暴露于浓度分别为1、5、10、15μmol／ml的吉西他滨10μl中，RT-PCR法检测细胞中PUMA、bax、bcl-2和c-myc mRNA的表达，MTT检测细胞存活率，流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 吉西他滨促进CaPan-1细胞凋亡，抑制细胞生长，并有明显的剂量依赖性；药物处理的细胞凋亡伴有PUMA mRNA和c-myc mRNA上调，而bcl-2 mRNA和bax mRNA无明显变化。结论 吉西他滨通过促进体外CaPan-1细胞凋亡而抑制其生长，其诱导凋亡与表达上调的PUMA和c-myc的协同作用有关。     

高强度聚焦超声联合化疗治疗胰腺癌的疗效评价

目的:探讨高强度聚焦超声(HIFU)联合吉西他滨为主的化疗与单用吉西他滨为主的化疗治疗胰腺癌的临床效果。方法:31例胰腺癌分为两组,HIFU联合吉西他滨15例为联合组,单纯吉西他滨化疗16例为对照组,观察两组临床疗效和临床有效率,观察肿瘤标志物的变化、疼痛缓解情况、生活质量改善情况。结果:联合组临床疗效和临床有效率明显高于对照组,两组出现骨髓抑制、胃肠道反应、肝功能损失等不良反应相似,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:HIFU联合吉西他滨组有协同作用,可以提高临床疗效,改善患者的生存质量,无严重不良反应发生。     

晚期胰腺癌的化疗进展

胰腺癌是目前胃肠道肿瘤中预后差,且发病率呈逐渐上升趋势的一种疾病。目前晚期胰腺癌的治疗手段有限,是当前肿瘤治疗的难点之一,以吉西他滨为基础的化疗被认为是目前晚期胰腺癌的一线标准治疗。吉西他滨化疗失败后的晚期胰腺癌多选择单药或联合靶向药物挽救治疗。而靶向药物联合化疗是近年来治疗晚期胰腺癌的新的热点,在此结合新的临床证据对目前晚期胰腺癌治疗予以综述。     

三氧化二砷对胰腺癌 BXPC-3 细胞移植瘤的体内抑制作用

目的 探讨三氧化二砷在体内对胰腺癌 BXPC-3 细胞移植瘤的抑制作用,并探讨其初步机制。方法 建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型,随机分为4组：模型组,低剂量、高剂量 (2.5、5.0 mg/kg) 三氧化二砷组和吉西他滨组,各组 ip 给药,作用2周后,检测实验前后裸鼠体质量变化,观察药物对肿瘤生长的影响,免疫组化检测肿瘤细胞增殖因子 ki-67 的表达,TUNEL 法检测移植瘤组织的细胞凋亡。结果 给药2周后,各组裸鼠体质量变化差异不显著,三氧化二砷和吉西他滨均可抑制裸鼠移植瘤的体积和质量,且三氧化二砷 (5 mg/kg) 组作用较强;免疫组化结果显示三氧化二砷可明显降低细胞增殖因子 ki-67 的阳性表达;TUNEL 检测表明三氧化二砷可明显诱导移植瘤肿瘤细胞凋亡。结论 三氧化二砷可抑制胰腺癌 BXPC-3 细胞在裸鼠体内的生长;作用机制可能为抑制肿瘤细胞增殖及促进肿瘤细胞凋亡。     

顺铂耐药卵巢癌细胞化疗敏感性实验

【目的】 研究顺铂(DDP)。洛铂(LBP)。紫杉醇(PTX)。吉西他滨(GEM)对卵巢癌SKOV3细胞及顺铂耐药SKOV3 /DDP细胞增殖的影响。【方法】 培养基中不含药物的处理组为对照组,加入不同浓度化疗药物的处理组为实验组。在相差显微镜下观察细胞形态变化;用MTT法测定单药应用。双药联合使用对两种细胞生长的影响;流式细胞仪分析细胞周期和凋亡率的变化。【结果】 SKOV3∕DDP细胞耐药指数为7.10 ± 2.19。紫杉醇。洛铂。吉西他滨对两种细胞的抑制率无明显差别。洛铂。紫杉醇。吉西他滨两药联合组与相应单一用药组相比,能显著抑制肿瘤细胞的生长,其中吉西他滨 + 洛铂及紫杉醇 + 洛铂组抑制率明显增高。相同浓度顺铂作用48 h后,SKOV3/DDP细胞的凋亡率低于SKOV3细胞。洛铂。紫杉醇。吉西他滨作用两种细胞48 h后,细胞凋亡率差异无统计学意义。顺铂。洛铂与紫杉醇。吉西他滨主要作用于不同的细胞周期。【结论】 SKOV3/DDP细胞对紫杉醇。洛铂。吉西他滨无交叉耐药。联合用药有高效协同抑制细胞生长作用,临床治疗卵巢癌顺铂耐药患者可考虑选择吉西他滨 + 洛铂。紫杉醇 + 洛铂联合化疗。     

顺铂耐药卵巢癌细胞化疗敏感性实验

【目的】研究顺铂（DDP）、洛铂（LBP）、紫杉醇（PTX）、吉西他滨（GEM）对卵巢癌SKOV3细胞及顺铂耐药SKOV3/DDP细胞增殖的影响。【方法】培养基中不含药物的处理组为对照组,加入不同浓度化疗药物的处理组为实验组。在相差显微镜下观察细胞形态变化;用MTT法测定单药应用、双药联合使用对两种细胞生长的影响;流式细胞仪分析细胞周期和凋亡率的变化。【结果】SKOV3∕DDP细胞耐药指数为7.10&#177;2.19。紫杉醇、洛铂、吉西他滨对两种细胞的抑制率无明显差别。洛铂、紫杉醇、吉西他滨两药联合组与相应单一用药组相比,能显著抑制肿瘤细胞的生长,其中吉西他滨＋洛铂及紫杉醇＋洛铂组抑制率明显增高。相同浓度顺铂作用48h后,SKOV3/DDP细胞的凋亡率低于SKOV3细胞。洛铂、紫杉醇、吉西他滨作用两种细胞48h后,细胞凋亡率差异无统计学意义。顺铂、洛铂与紫杉醇、吉西他滨主要作用于不同的细胞周期。【结论】SKOV3/DDP细胞对紫杉醇、洛铂、吉西他滨无交叉耐药。联合用药有高效协同抑制细胞生长作用,临床治疗卵巢癌顺铂耐药患者可考虑选择吉西他滨＋洛铂、紫杉醇＋洛铂联合化疗。