谷胱甘肽转移酶基因多态性与2型糖尿病的相关性研究进展

2型糖尿病(T2DM)是一种复杂的多基因遗传病。谷胱甘肽S-转移酶(GST)属于多功能同工酶,在解毒、氧化应激损伤的生理过程中发挥重要作用,并具有非常广泛的生物催化作用。GST基因多态性可导致GST蛋白功能异常,使活性氧类调节紊乱,进而促进T2DM的发生、发展。GST的生理功能、GST基因多态性与T2DM相关性的研究进展,为阐明T2DM发病机制提供了科学依据。     

N-乙酰基转移酶2基因多态性研究进展

N-乙酰基转移酶2是人体内重要的Ⅱ相代谢酶,可催化芳香胺类和杂环胺类物质的乙酰化过程。我国人群中NAT2基因以快乙酰化基因表型为主,最常见的基因型为NAT2*4A、NAT2*6A、NAT2*7B。NAT2慢乙酰化代谢基因型与膀胱癌的发生相关,与异烟肼所致的药物性肝炎相关。研究NAT2基因多态性对评价肿瘤的发生、判断预后及指导药物个体化治疗、减少或减轻药物不良反应有着重要的意义。     

SHMT2在肿瘤中的研究进展

肿瘤细胞的异常增殖和转移都受到细胞代谢变化的支持,其中代谢酶已经被证明是治疗肿瘤的有效靶点,丝氨酸羟甲基转移酶2(SHMT2)是连接丝氨酸/甘氨酸合成途径和一碳代谢的关键酶,与肿瘤生长和转移密切相关。本文结合相关文献对SHMT2在肿瘤中的表达及作用机制进行综述。     

2型糖尿病患者血清肝酶谱与胆汁酸的关系

目的 分析2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus, T2DM）患者血清肝酶与胆汁酸（bile acid, BA）的变化,探索它们之间的相互关系,了解影响肝酶水平的因素。方法 收集住院治疗的T2DM患者700例,根据肝酶是否升高分为肝酶升高组（187例）和肝酶正常组（513例）,再将所有患者的丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase, ALT)、谷氨酰胺转肽酶(glutamyl transferase, GGT)分别按三等分进行分组。比较两组间及ALT、GGT三等分组间BA水平差异,分析ALT、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase, AST)、GGT与BA的相关性及肝酶升高的影响因素。结果 肝酶升高组较肝酶正常组总胆汁酸（total bile acid,TBA）、甘胆酸（glycocholic acid, CG）升高（P<0.05）;随着ALT或GGT的升高,TBA、CG逐渐升高（P<0.05）。相关性分析显示,TBA、CG与ALT、AST、GGT均呈正相关,且不受年龄、病程、BMI、腹围及糖脂代谢等的影响。Logistic回归分析显示,病程和餐后2h血糖（2h postprandial blood glucose, 2hPBG）是T2DM患者肝酶升高的影响因素。结论 T2DM患者中BA水平与肝酶的变化密切相关。     

H2O2可诱导ICR小鼠高脂血症

目的探讨外源性H2O2对ICR鼠血脂的影响。方法腹腔注射不同的浓度的H2O2处理ICR小鼠6周后,分光光度计法分别检测各组血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)及高密度脂蛋白/低密度脂蛋白比值(HDL/LDL)。结果与对照组相比,浓度为0.75%、1.5%H2O2处理组血清TC、TG水平升高,而HDL/LDL比值降低,但差异不显著(P>0.05);而3%H2O2处理组血清TC、TG水平显著升高(P<0.01),HDL/LDL比值显著降低(P<0.01)。结论 H2O2可诱导ICR小鼠高脂血症。     

CHADS_2/CHA_2 DS_2-VAS_C评分的应用

临床上CHADS2评分和CHA2DS2-VASC评分主要用来对非瓣膜性心房颤动(房颤)血栓栓塞的风险进行评估。由于CHA2DS2-VASC评分系统更为全面,并能筛选出不需要抗凝治疗的"真正的低危患者",因此现多应用此评分系统。然而,两种评分系统所包含的危险因素同样适用于其他心血管疾病,两者也可以被用来对房颤风险、左心房功能进行评估,同时也可对非房颤患者进行预后评估。     

不同性别初发2型糖尿病患者转氨酶与胰岛素抵抗、代谢紊乱的相关性

目的：探讨不同性别的初发2型糖尿病患者血清转氨酶与胰岛素抵抗、代谢紊乱的相关性。方法：对134例初发2型糖尿病患者(男82例、女52例)进行体格检查,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST),并检测空腹血糖、空腹胰岛素、血脂及尿酸等代谢指标,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。分别对不同性别的新发2型糖尿病患者的转氨酶水平与糖、脂、尿酸、HOMA-IR进行相关性分析。结果：①不同性别初发2型糖尿病患者的ALT和AST水平无明显统计学差异;②所有初发2型糖尿病患者中ALT与体重指数(BMI)、HOMA-IR及血尿酸(UA)有明显正相关。男性患者的相关性与总体患者相一致,但男性患者的ALT还与糖化血红蛋白(HbA1c)水平存在明显的负相关;而在女性患者中ALT水平则与BMI、HOMA-IR、甘油三酯(TG)呈正相关;③所有患者AST与BMI、HOMA-IR及UA有明显的正相关。男性患者的相关性与总体患者相一致,男性患者的AST还与HbA1c水平存在明显的负相关。而在女性患者中AST水平则与BMI、HOMA-IR、TG呈正相关,还与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)呈明显负相关。结论：在初发2型糖尿病患者中血清转氨酶(ALT和AST)水平与血糖、血脂、尿酸代谢紊乱及胰岛素抵抗有明显的相关性,男性和女性患者基本一致。ALT和AST可能是反映初发2型糖尿病患者胰岛素抵抗和代谢紊乱的一个重要参考指标,即使ALT、AST的数值在正常范围内。     

核因子E2p45相关因子2基因在茶多酚调节结肠癌细胞尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1A及其同工酶表达中的作用

目的探讨核因子E2p45相关因子2(Nrf2)基因在茶多酚中的主要化学物质epigallocatechin gallate(EGCG)诱导结肠癌细胞尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT)1A及其同工酶UGT1A8、UGT1A10表达中的调节作用。方法EGCG分别作用Caco-2及HT-29结肠癌细胞12h,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测基因表达水平的变化,免疫细胞化学及激光共聚焦显微镜观察细胞内Nrf2蛋白定位的改变。此外,利用RNA干扰技术抑制细胞内Nrf2基因的表达,观察阻断前后EGCG对基因表达水平影响的改变。结果(1)Caco-2及HT-29结肠癌细胞系、结肠癌及癌旁组织中UGT1A、1A8、1A10基因表达水平存在差异。(2)EGCG作用Caco-2及HT-29细胞后Nrf2、UGT1A、1A8、1A10表达升高1.8~9.2倍(均P<0.05),免疫细胞化学及激光共聚焦显微镜检测到Nrf2蛋白向细胞核内聚集。(3)酶切分析和测序证实成功构建了RNA干扰真核表达载体pSilence-Nrf2-A、B、C、D及随机序列对照pSilence-CON。(4)pSilence-Nrf2-B质粒转染可显著抑制Nrf2基因的表达,在Caco-2及HT-29细胞中抑制率分别为81.46%±1.68%及84.72%±2.08%(实验重复3次);稳定筛选建立的Nrf2低表达的细胞系Caco-2-siNrf2、HT-29-siNrf2,不仅基础UGT1A酶的表达水平降低,而且EGCG作用后酶诱导表达的作用消失。结论Nrf2基因参与了EGCG诱导UGT1A及其同工酶表达的过程并在其中起关键作用,为进一步论证EGCG在结肠癌化学预防中的作用及其可能的机制提供了新的论据。     

BaP通过AhR和Nrf2信号通路对HepG2细胞中GSTP1的影响

摘要：目的：探究苯并芘（benzo[a]pyrene,BaP）通过芳香烃受体（aryl hydrocarbon receptor,AhR）和核因子E2相关因子（subcellular localization of nuclear factor?E2-related factor 2,Nrf2）信号通路对HepG2细胞中谷胱甘肽-S-转移酶P1（glutathione S-transferase P1,GSTP1）的影响。方法：将体外培养HepG2细胞分为Control组、BaP（10μmol/L）组、BaP（10μmol/L）+AhR抑制剂（1μmol/L）组和BaP（10μmol/L）+Nrf2抑制剂（1μmol/L）组,BaP组给予10μmol/LBaP培养24小时,抑制剂组给予1μmol/L抑制剂半小时后,加入10μmol/L BaP培养24小时,Western Blot和qPCR实验方法检测各组AhR、Nrf2、细胞色素P450s（cytochrome P450s,CYPs）、血红素加氧酶-1（heme oxygenase-1,HO-1）及GSTP1基因和蛋白的表达。结果：与Control组相比,BaP组中AhR、Nrf2、GSTP1、CYP1A1及HO-1的mRNA和蛋白表达均升高（P<0.05）;与BaP组相比,BaP+AhR抑制剂组中AhR、GSTP1和CYP1A1的mRNA和蛋白表达均降低（P<0.05）,BaP+Nrf2抑制剂组中Nrf2、GSTP1和HO-1的表达均降低（P<0.05）;与BaP+AhR抑制剂组相比,BaP+Nrf2抑制剂组GSTP1 mRNA和蛋白的表达降低（P<0.05）。结论：BaP通过AhR和Nrf2两条信号通路增加GSTP1的表达,以Nrf2信号通路为主导影响GSTP1的表达。     

MMP-2/TIMP-2在乳腺癌中表达的临床意义

目的:探讨MMP-2/TIMP-2在乳腺癌中的表达及意义.方法:本实验采用免疫组织化学方法(immunohistochemistry,IHC)研究MMP-2/TIMP-2在20例正常乳腺组织、40例导管内癌、80例浸润性乳腺癌组织中的表达差异情况,并分析二者在乳腺癌中的表达与腋窝淋巴结受累数目、肿瘤大小(体积)、组织学类型、临床分期、激素受体等临床病理指标之间的相关性以及对乳腺癌患者生存状况的影响.结果:MMP-2/TIMP-2的平均灰度的比值在正常乳腺组织、原位癌、浸润癌中分别为0.96±0.168、0.61±0.064、0.40±0.081,t检验结果显示:MMP-2/TIMP-2的平均灰度比值在正常组与原位癌组、浸润癌组与原位癌原位癌之间比较均有显著性的统计学差异(两者P＜0.01),在原位癌、浸润癌中与预后均存在相关性.结论:MMP-2/TIMP-2在乳腺癌的早期阶段(原位癌)开始发挥作用,并一直持续到浸润癌阶段,而且与乳腺癌的转移、术后生存状况有关,故可以独立的预后参考指标.     

水蛭提取物对肝癌HepG2细胞DNA去甲基化作用研究

目的探讨水蛭提取物对肝癌HepG2细胞DNA甲基转移酶(DNMTs)表达的抑制作用。方法采用MTT法检测水蛭提取物对肝癌HepG2细胞的增殖抑制作用,根据回归方程计算出半数抑制浓度(IC50)。以1/2 IC50含药量的水蛭提取物处理肝癌HepG2细胞,并以5-脱氧杂氮胞苷(5-Aza-cdR)处理作阳性对照,处理72 h时采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组化等方法检测肝癌HepG2细胞DNMT1、DNMT3a、DNMT13b mRNA及蛋白表达水平。结果肝癌HepG2细胞DNMT1呈高表达,DNMT3a、DNMT3b呈中低度表达。经水蛭提取物处理后肝癌HepG2细胞DNMT1、DNMT3a表达水平明显下降,DNMT3b基本不表达,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),与5-Aza-cdR组比较,水蛭提取物组降低DNMT1作用弱于5-Aza-cdR,降低DNMT3a、DNMT3b作用明显优于5-Aza-cdR组(P<0.05)。结论水蛭提取物能抑制肝癌HepG2细胞DNTMs表达,参与DNA去甲基化作用可能是水蛭抗肿瘤的机制之一。     

Dab2/DOC-2基因的研究进展

Dab2/DOC-2是具有信号转导功能的磷蛋白,通过蛋白质的相互作用和蛋白磷酸化发挥作用,参与细胞内吞作用、血小板活化和T细胞功能调节等过程,并且与人体内皮细胞的形态发生有关。有研究表明,Dab2/DOC-2基因还和醛固酮的分泌有关。在肿瘤中,Dab2纯合子基因缺失时激活细胞抑癌机制,是抑癌基因的候选成员。Dab2/DOC-2还参与多种信号途径并发挥重要作用。     

早期胚胎停止发育绒毛中IGF2、GCN5和p300/CBP的表达

目的研究胰岛素样生长因子2(IGF2)及组蛋白乙酰基转移酶(HATs)相关因子组蛋白乙酰基转移酶(GCN5)、p300/CREB结合蛋白(p300/CBP)在正常及早期胚胎停止发育患者绒毛中的表达及三者间的相关性。方法采用免疫组化SP法检测21例正常早期妊娠绒毛、29例胚胎停止发育绒毛组织中IGF2、GCN5和p300/CBP的表达情况。结果早期胚胎停止发育绒毛中,IGF2、GCN5和p300/CBP的阳性表达显著低于正常早孕绒毛(P=0.001、P=0.002和P=0.003);并且这些指标在胚胎停止发育绒毛中的表达,两两间均存在显著正相关(r=0.563、0.622和0.563,P<0.00)。结论 IGF2、GCN5及p300/CBP的表达下调可能与早期妊娠胚胎停止发育有关,GCN5及p300/CBP的表达下调有可能参与早期绒毛发育过程中IGF2的表观遗传调控。     

ERK1/2-PKM2/P53信号通路在喉癌Hep-2细胞株增殖中的作用

目的:探究ERK 1/2通过PKM2/P53信号通路调节喉癌Hep-2细胞株增殖的潜在机制。方法:采用细胞计数的方法统计经ERK 1/2抑制剂U0126、P53抑制剂PFTα处理后0,24,48 h时Hep-2细胞的细胞密度,实验随机分为空白对照组(Control)、对照组(Vehicle)、处理组(U0126或PFTα)。采用转染PKM2-siRNA或PKM2-cDNA的方法在Hep-2细胞株上抑制或过表达PKM2。采用免疫印迹(Western Blot)的方法检测不同处理情况下ERK 1/2、p-ERK 1/2、P53、PKM2的蛋白水平。结果:抑制ERK 1/2的磷酸化可抑制Hep-2细胞生长,抑制P53可阻断抑制ERK 1/2导致的Hep-2细胞生长变缓。同时,抑制ERK 1/2可下调PKM2水平,抑制或过表达PKM2可分别上调或下调P53。过表达PKM2可阻断抑制ERK 1/2引起的Hep-2细胞生长变缓。结论:抑制ERK 1/2的磷酸化可通过下调PKM2水平促进P53表达进而抑制Hep-2细胞生长。     

N乙酰化转移酶2基因多态性与异烟肼所致肝损伤研究进展

N-乙酰转移酶2是人体内重要的Ⅱ相代谢酶,在芳香胺类和肼类化学物质代谢中起重要作用.我国人群中NAT2基因以快乙酰化基因表型为主,最常见的基因型为NAT2*4A、NAT2*6A、NAT2*7B.NAT2慢乙酰化代谢基因型与异烟肼所致的药物性肝炎相关,NAT2*5等位基因频率的差异是导致慢乙酰化频率差异的主要原因之一.研究NAT2基因多态性对指导异烟肼个体化治疗、减少或减轻药物不良反应有着重要的意义.     

穿心莲内酯对HepG2细胞ACAT活性和基因表达的影响

目的探讨穿心莲内酯(andrographolide,AP)在Hep G2细胞中对胆固醇酰基转移酶(ACAT)活性和基因表达的影响。方法使用MTT法确定穿心莲内酯对Hep G2细胞生长无明显抑制的剂量。在此无毒剂量下展开实验,分别使用高效液相色谱法、荧光检测法和RT-q PCR技术测定细胞胆固醇含量、ACAT酶活性以及ACAT基因表达。结果 AP(质量浓度分别为40、80μg/m L)可以显著降低游离胆固醇(FC)和酯化胆固醇(CE)含量,明显抑制ACAT酶活性和ACAT2 mRNA表达。结论穿心莲内酯具有一定的抗动脉粥样硬化作用,其机制可能是通过下调肝脏中ACAT2 mRNA表达来降低ACAT活性。     

2型糖尿病患者血清γ-谷氨酰转移酶水平与代谢综合征的关系

目的 探讨2型糖尿病患者血清γ-谷氨酰转移酶(gamma glutamyltransferase,GGT)升高与代谢综合征的相关性.方法 回顾性分析281例2型糖尿病患者的临床资料,将研究对象按GGT是否升高分组,比较两组患者年龄、体质指数(BMI)、血压、血脂谱、非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)及代谢综合征的患病率.结果 高GGT组患者BMI、舒张压、血清三酰甘油、NAFLD及代谢综合征的患病率明显高于正常GGT组(P＜0.01).与正常GGT组比较,高GGT组代谢综合征的患病风险增加230%,超重风险增加118%,高三酰甘油血症的风险增加525%(P＜0.01);按性别分组后在男性患者中此种趋势更明显,而女性差异无统计学意义.结论 血清GGT升高可明显增加男性2型糖尿病患者代谢综合征及其各组分的患病风险,而在女性患者中无明显相关.     

N-乙酰基转移酶2基因多态性与大肠癌遗传易感性的相关性研究

目的：探讨N-乙酰基转移酶2（NAT2）基因多态性和大肠癌遗传易感性的关系。方法：采用PCR．RFLP方法调查NAT2基因多态性在大肠癌组和对照组的分布，对患者临床资料进行统计分析。结果：基因型WT／M2在大肠癌组明显高于对照组（Χ^2=10．22，P〈0．01）。快速型和慢速型在大肠癌组和对照组的分布差异无显着性（Χ^2=0．13，P〉0．05）。吸烟者在大肠癌组的出现频率显着高于对照组，Χ^2=5．42，P〈0．05。高吸烟指数者中，WT／M2基因型在大肠癌组的分布频率显着高于对照组，Χ^2=5．45，P〈0．05。患者中WT／M2基因型频率在≥60岁组高于〈60岁组，差异有显着性（Χ^2=4．69，P〈0．05），在病理类型、性别、淋巴结有无转移、肿瘤浸润广度等方面差异无显着性。结论：NAT2 WT／M2基因型可能是大肠癌发生的高危因素，该基因型的个体吸烟剂量大、高龄可能增加大肠癌发病风险。     

CHA2DS2-VASc-BLAF评分对左心房血栓/自发显影形成的预测价值

目的 评估自行改良的CHA₂DS₂-VASc-BLAF评分对经食道超声(transesophageal echocardiography, TEE)检出左心房血栓/自发显影(left atrial thrombus/spontaneous echocardiographic contrast, LAT/SEC)的预测价值。方法 连续纳入2019年1月~2021年12月在上海仁济医院住院的790例非瓣膜性心房颤动(non-valvular atrial fibrillation, NVAF)患者,其中TEE检出LAT/SEC者240例(LAT/SEC组),未检出者550例(非LAT/SEC组)。对患者一般情况、既往病史、临床检验指标和超声影像学指标等相关因素进行单因素和多因素Logistic回归分析,根据Logistic回归和受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析结果,将独立预测因素左心房内径(left atrial diameter, LAD)>41.5mm、脑钠肽(brain natriuretic peptide, BNP)>93.4pg/ml和非阵发性心房颤动(non-paroxysmal atrial fibrillation, NPAF)各记为1分,加入CHA₂DS₂-VASc评分中组成新的评分方案CHA₂DS₂-VASc-BLAF。评估CHA₂DS₂-VASc-BLAF评分方案对NVAF患者LAT/SEC形成的预测价值。结果对CHA₂DS₂-VASc和CHA₂DS₂-VASc-BLAF两种评分进行ROC曲线检测发现,CHA₂DS₂-VASc预测价值偏低[曲线下面积(area under the curve,AUC)=0.661, P<0.001], CHA₂DS₂-VASc-BLAF预测价值显著升高(AUC=0.771, P<0.001)。在中危组中,若BNP>93.4pg/ml或LAD>41.5mm或存在NPAF时,LAT/SEC发生率显著升高。结论 CHA₂DS₂-VASc-BLAF评分较CHA₂DS₂-VASc评分系统能更好地预测NVAF患者的LAT/SEC形成。在中危患者组中,若BNP或LAD大于阈值,或存在NPAF,LAT/SEC发生率显著升高。     

2型糖尿病患者血清丙氨酸转氨酶水平与代谢综合征的相关性研究

目的探讨2型糖尿病患者血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平与代谢综合征(MS)的相关性。方法确诊为2型糖尿病的患者257例,按照有无代谢综合征,分为MS组、非MS组。比较两组ALT水平,并分析其与MS各组分相关性。结果 MS组的ALT、BMI、血压、尿酸(UA)、三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)均显著高于非MS组(P<0.05),相关性分析显示:ALT与BMI及TG呈显著正相关,与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)呈显著负相关(P<0.01),多元逐步回归分析,结果显示ALT与BMI呈显著正相关(P<0.01),与HDL-C呈显著负相关(P<0.01)。结论 2型糖尿病合并MS患者血清ALT水平明显增高,ALT可能为糖尿病合并MS的特征性指标。