Gas6对类风湿关节炎小鼠Th17/Treg细胞平衡和炎症反应的调控作用

目的探讨生长停滞特异性蛋白6（Gas6）对类风湿关节炎小鼠的保护作用及与辅助性T细胞（Th）17/调节性T细胞（Treg）的关系。方法将24只雄性DBA/1J小鼠按照随机数字表法分为对照组、胶原诱导的关节炎（CIA）组、CIA+生理盐水组和CIA+Gas6组,每组6只。在小鼠尾根部皮下注射弗氏完全佐剂与牛II型胶原蛋白混合乳剂0.1ml,21d后再次以弗氏不完全佐剂与牛II型胶原蛋白混合乳剂0.1ml构建CIA小鼠模型。模型建立后第42天记录小鼠关节炎指数（AI）评分;采集下腔静脉血1ml,以酶联免疫吸附法（ELISA）检测细胞因子IL-17和IL-10的表达;无菌切取脾脏,采用流式细胞术检测CD4+IL-17+细胞和CD4+Foxp3+细胞的比例;切取右踝关节,HE染色观察关节损伤情况。结果与对照组小鼠相比,CIA小鼠AI评分增高,踝关节存在明显的炎症细胞浸润和软骨破坏,血IL-17和IL-10水平均显著增加（均P＜0.05）;CIA小鼠脾脏CD4+IL-17+细胞比例升高,而CD4+Foxp3+细胞的比例下降（均P＜0.05）。与CIA组小鼠相比,CIA+Gas6组小鼠AI评分下降,踝关节炎症细胞浸润明显,软骨破坏减轻,血IL-17水平下降而IL-10水平升高（均P＜0.05）;同时CD4+Foxp3+细胞比例明显增加,而CD4+IL-17+细胞比例下降（均P＜0.05）。结论Gas6能够减轻CIA小鼠的关节损伤,机制可能与其抗炎和对Th17/Treg细胞平衡的调控作用有关。     

洛伐他汀对胶原诱导性关节炎大鼠的抗炎机制探讨

目的：观察洛伐他汀对胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠的抗炎作用,并探讨可能的作用机制。方法：利用牛II型胶原建立Wistar大鼠CIA模型。结果：洛伐他汀组大鼠踝关节肿胀程度与CIA模型组相比有显著差异,关节炎评分与CIA模型组相比显著降低。洛伐他汀组血清中炎性细胞因子TNF-α的含量、踝关节滑膜组织中RANTES阳性细胞均显著低于CIA模型组。结论：洛伐他汀对CIA大鼠具有抗炎作用,其作用机制可能与抑制踝关节滑膜组织中RANTES的表达有关。     

半枝莲提取物对小鼠Ⅱ型胶原诱导性关节炎的治疗作用

目的探讨半枝莲提取物对Ⅱ型胶原诱导的小鼠关节炎动物模型(CIA)的治疗作用。方法取100只DBA/1小鼠随机分为5组(每组20只):完全对照组、0.9%氯化钠注射液对照组及半枝莲低、中、高剂量治疗组(建立CIA模型,分别给予30 mg/次、60 mg/次、90 mg/次剂量的半枝莲提取物治疗)。CIA模型构建成功后即开始给予灌胃治疗,每天1次,连续21 d。分别于造模第28、49天进行各组小鼠关节炎症状况评价;于第49天处死小鼠取血清,检测各组小鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-33(IL-33)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1Ra)的水平;同时取各组小鼠左、右后肢关节组织进行HE染色处理,进行病理分析。结果半枝莲提取物可剂量依赖性地减轻CIA小鼠关节的肿胀程度及关节炎评分。与0.9%氯化钠注射液对照组相比,半枝莲中、高剂量治疗组小鼠血清中炎症因子IL-1β、IL-6、IL-33、TNF-α表达水平降低(均P<0.01);半枝莲低、中、高剂量治疗组小鼠血清中抑炎因子IL-1Ra的水平有不同程度上调(均P<0.01)。0.9%氯化钠注射液对照组小鼠关节病理评分高于半枝莲中、高剂量组(均P<0.05);而半枝莲低剂量治疗组病理评分与0.9%氯化钠注射液对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论半枝莲提取物可有效地抑制IL-1β、IL-6、IL-33、TNF-α表达水平,并上调IL-1Ra的表达水平,最终减轻CIA小鼠关节炎症,改善CIA小鼠关节病理情况,提示半枝莲提取物对类风湿关节炎小鼠具有一定的治疗作用。     

玻璃酸钠对单侧踝关节骨性关节炎的疗效及患者本体感觉的影响

目的探讨玻璃酸钠踝关节腔内注射治疗对单侧踝关节骨性关节炎患者本体感觉的影响。方法纳入单侧踝关节骨性关节炎患者50例,采用随机数字表法分为玻璃酸钠组33例和0.9%氯化钠溶液组17例,同时招募性别、年龄、BMI匹配的无下肢疾患的健康者50例作为空白对照组。玻璃酸钠组和0.9%氯化钠溶液组患者分别接受3次间隔1周的踝关节腔内玻璃酸钠和0.9%氯化钠溶液注射治疗。对两组患者的本体感觉进行评估,包括4项临床平衡测试和位置觉。比较两组患者注射前、完成第1次、第2次和第3次注射1周后踝关节骨性关节炎评分（AOS）和美国足与踝关节协会踝与后足功能评分（AOFAS）。结果46例患者完成研究,其中玻璃酸钠组31例,0.9%氯化钠溶液组15例。患者组治疗前本体感觉基线数据较空白对照组均出现减退,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。玻璃酸钠组患者治疗后各随访时点4项临床平衡测试指标均较0.9%氯化钠溶液组改善,AOS总分、AOS疼痛评分和AOS伤残评分均较0.9%氯化钠溶液组下降,AOFAS评分均较0.9%氯化钠溶液组升高,第3次注射后1周随访时绝对角误差值较0.9%氯化钠溶液组明显改善,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。两组患者均未发生严重不良反应。结论3次间隔1周的玻璃酸钠踝关节腔内注射短期内能明显改善踝关节骨性关节炎患者的本体感觉、疼痛及功能状态。     

IL-17和RANKL在胶原诱导性关节炎大鼠关节滑膜的表达及^99Tc-TDP的干预作用

目的：探讨白细胞介素17（IL-17）和细胞核因子-κB受体活化因子配基（RANKL）在胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠关节滑膜病变发生发展中的作用及^99锝-亚甲基二膦酸盐（^99Tc—TDP）的干预作用。方法：通过完全弗氏佐剂乳化的鸡Ⅱ型胶原构建CIA大鼠模型。模型大鼠随机分为模型对照组和^99Tc—TDP组,^99Tc-TDP组予0．05μg·（kg·d）^-1^99Tc尾静脉注射,正常对照组与模型对照组予等量生理盐水尾静脉注射。关节炎指数（AI）评分评价关节炎程度,各组大鼠用ELISA法检测血清及关节液IL-17和RANKL浓度,显微镜观察滑膜病理变化,免疫组化法半定量检测滑膜IL-17和RANKL蛋白表达。结果：与正常对照组相比,模型对照组和^99Tc-TDP组血清及关节液IL—17浓度、关节液RANKL浓度、滑膜病理积分、滑膜IL-17和RANKL蛋白表达均增加（P〈0．05）,^99Tc—TDP组上述指标较模型对照组均降低（P〈0．05）,各组血清RANKL浓度无显著性差异（P〉0．05）。结论：IL-17和RANKL参与了CIA大鼠关节滑膜病变的发生发展,^99Tc—TDP可能通过抑制滑膜IL—17和RANKL的表达延缓关节滑膜病变的进展。     

高脂饲料对胶原诱导关节炎大鼠关节的影响

目的通过比较不同饮食对胶原诱导关节炎（collagen-induced arthritis,CIA）大鼠关节的影响,明确高脂饲料对关节炎的作用。方法选用Wistar大鼠建立关节炎模型,给予普通和高脂饲料,观察不同饮食条件下大鼠关节炎指数积分、滑膜HE染色以及检测血清中血脂和炎症因子的浓度。结果与普通饲料CIA大鼠组比较,高脂饲料的CIA大鼠关节炎指数积分增加且持续加重,病理切片的滑膜增生层次、血管翳形成和炎性细胞浸润均明显增高,高脂饲料CIA组血清中TC、LDL-C水平明显升高（P〈0.01）,而HDL-C则明显降低（P〈0.05）,前炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-17的浓度也明显升高（P〈0.05）。结论高脂饲料可能通过增强滑膜增生和促进炎症因子来促进CIA关节炎的进展。     

栀子苷对类风湿性关节炎大鼠Th17/Treg平衡和局部炎症因子的影响

目的考察栀子苷对类风湿性关节炎大鼠Th17/Treg平衡和局部炎症因子的影响。方法建立大鼠胶原诱导关节炎模型,通过病理切片观察踝关节组织变化,ELISA检测血清TNF-α,Western blot法检测转录因子Foxp3和ROR-γt的蛋白表达,免疫组化法检测关节滑膜组织IL-10、IL-17表达。结果模型组血清TNF-α、IL-17以及ROR-γt和关节滑膜IL-17表达较正常组显著升高(P0.01),而模型组血清IL-10浓度以及Foxp3和关节滑膜IL-10表达较正常组显著降低(P0.01),栀子苷中、高剂量组血清TNF-α、IL-17浓度以及ROR-γt和关节滑膜IL-17表达较模型组显著降低(P0.05~0.01),而血清IL-10浓度、Foxp3和关节滑膜IL-10表达较模型组显著升高(P0.05~0.01)。结论大鼠胶原诱导关节炎模型成模之后Treg/Th17会失衡,栀子苷可升高IL-10、Foxp3表达,降低IL-17、ROR-γt表达,提示其可能通过诱导Treg细胞生成同时抑制Th17细胞分化,从而恢复病变部位Treg/Th17的平衡。     

MiR-145-5p对胶原诱导的关节炎小鼠关节炎症的影响

目的:探讨miR-145-5p对胶原诱导的关节炎（CIA）小鼠关节变化的影响。方法:采用牛Ⅱ型胶原免疫DBA/1小鼠诱导CIA,对关节指数评分及足跖肿胀程度进行比较,成模后随机分为agomiR-145-5p组和agomiR空载体（agomiR-NC）组进行干扰,采用足爪micro-CT摄片,踝关节病理检查评分及石蜡切片、HE染色进行处理,并通过免疫组化方法（IHC）检测踝关节中金属蛋白酶-1（MMP-1）、金属蛋白酶-3（MMP-3）、金属蛋白酶-9（MMP-9）、金属蛋白酶-13（MMP-13）、白细胞介素17（IL-17）和金属蛋白酶17（ADAM17）的表达。结果:成功建立CIA小鼠模型,与agomiR-NC组相比,agomiR-145-5p组micro-CT分析显示骨侵蚀更严重,组织病理学显示滑膜炎症减轻,免疫组化结果显示MMP-3、MMP-9、MMP-13和IL-17水平升高, MMP-1水平无差异,ADAM17水平降低（P<0.05）。结论:成功建立CIA小鼠模型,并发现miR-145-5p加重关节破坏的同时部分抑制了CIA小鼠的关节炎症。     

青蒿琥酯干预大鼠胶原诱导性关节炎中Foxp3的表达

目的 研究青蒿琥酯干预下表达Foxp3的调节性T细胞在大鼠胶原诱导性关节炎(CIA)脾淋巴细胞及滑膜中表达及意义.方法 建立大鼠CIA模型,分为对照组、CIA模型组、CIA模型+不同浓度青蒿琥酯组、CIA模型+甲氨蝶呤(MTX)组、CIA模型+硫酸羟氯喹组、CIA模型+甲基泼尼松龙组.流式检测脾淋巴细胞中Foxp3表达,免疫组化检测Foxp3在大鼠踝关节滑膜细胞中表达.结果 CIA模型+20 mg· kg-1·d-1青蒿琥酯组中Foxp3在脾淋巴细胞及滑膜组织中的表达明显高于其他浓度青蒿琥酯组、CIA模型+硫酸羟氯喹组(P＜0.05),与CIA模型+甲基泼尼松龙组在脾淋巴细胞表达中有差异(P＜0.05),与CIA模型+甲氨蝶呤组无差异(P＞0.05).结论 青蒿琥酯可上调T淋巴细胞及滑膜中Foxp3的表达,且与剂量呈正相关,当剂量在20 mg· kg-1·d-1时效果最明显.     

穴位埋线对大鼠CIA模型Treg/Th17相关细胞因子及滑膜组织病理形态学的影响

目的通过观察穴位埋线对大鼠胶元诱导型关节炎(CIA)模型血清Treg/Th17相关细胞因子及滑膜组织病理形态学的影响,从细胞因子角度以及组织病理形态学改变探讨其的作用机制。方法建立Ⅱ型胶原诱导大鼠胶原性关节炎模型,造模成功的大鼠随机分为模型组、来氟米特组、穴位埋线治疗组、来氟米特+穴位埋线治疗组。动态观察大鼠一般情况、各项关节炎活动指标、HE染色观察滑膜病理改变、ELISA法检测血清中IL-6、IL-17和TGF-β1含量。结果与模型组比较,各治疗组均能有效改善CIA大鼠关节肿胀以及关节炎指数;提高血清中TGF-β1含量和降低血清中IL-6、IL-17含量,各治疗组能有效减轻CIA模型滑膜组织关节炎炎症及病理形态的改变。结论穴位埋线治疗具有免疫调节作用,其可能调节Th17/Treg细胞平衡而显著减轻关节炎症和破坏。     

人参皂甙Rg3对脓毒症小鼠炎症反应及淋巴细胞内CleavedCaspase-3蛋白的影响

目的探讨人参皂甙Rg3对脓毒症小鼠炎症反应的保护作用和对淋巴细胞内凋亡相关蛋白裂解的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（CleavedCaspase-3）蛋白表达的影响。方法采用区组随机法将40只小鼠分为对照组、人参皂甙Rg3组、脂多糖（LPS）组、人参皂甙Rg3+LPS组,每组10只。其中LPS组、人参皂甙Rg3+LPS组小鼠通过腹腔注射LPS的方法制备脓毒症模型。对照组用0.3ml0.9%氯化钠溶液灌胃,1次/d,连续7d,第4天腹腔注射0.3ml0.9%氯化钠注射液;人参皂甙Rg3组将人参皂甙Rg3按30mg/kg溶于0.3ml0.9%氯化钠溶液后,灌胃,1次/d,连续7d,第4天腹腔注射0.3ml0.9%氯化钠注射液;LPS组用0.3ml0.9%氯化钠溶液灌胃,1次/d,连续7d,第4天腹腔注射0.3mlLPS溶液（15mg/kgLPS溶于0.3ml0.9%氯化钠注射液）;人参皂甙Rg3+LPS组将人参皂甙Rg3按30mg/kg溶于0.3ml0.9%氯化钠溶液后,灌胃,1次/d,连续7d,第4天腹腔注射0.3mlLPS溶液（15mg/kgLPS溶于0.3ml0.9%氯化钠注射液）。第7天通过腹主动脉采血,采用ELISA法检测各组小鼠血清炎性因子TNF-α、IL-6、IL-1β水平;并处死小鼠,取小鼠脾脏组织,称重、记录脾脏指数;分离脾脏淋巴细胞采用Westernblot法检测淋巴细胞CleavedCaspase-3蛋白表达。结果与对照组比较,LPS组、人参皂甙Rg3+LPS组小鼠TNF-α、IL-6、IL-1β水平、脾脏指数、CleavedCaspase-3蛋白表达水平均升高（均P＜0.05）;与LPS组比较,人参皂甙Rg3组、人参皂甙Rg3+LPS组小鼠TNF-α、IL-6、IL-1β水平、脾脏指数、CleavedCaspase-3蛋白表达水平均降低（均P＜0.05）。结论人参皂甙Rg3具有降低脓毒症小鼠体内炎症反应的作用,并能降低淋巴细胞内CleavedCaspase-3的表达。     

紫草素对晚期胶原性关节炎的作用研究

目的 研究紫草素对晚期Ⅱ型胶原诱导的关节炎小鼠的抗炎症、免疫调节作用.方法 紫草素(5 ms/kg)每日1次腹腔注射已经成模胶原性关节炎(collagen.induced arthritis,CIA)小鼠,连用10天,用关节炎评分评估CIA小鼠关节炎病情;用逆转录聚合酶链反应测定CIA小鼠髌骨及邻近滑膜组织的细胞因子表达水平;用组织学染色评价膝关节的软骨和骨破坏.结果 紫草素降低了晚期Ⅱ型胶原诱导的关节炎小鼠的关节炎评分,阻止了软骨破坏,髌骨及邻近滑膜组织的Th1型细胞因子(TNF-α和IL-12)和炎症性细胞因子IL-6的mRNA水平与对照组相比均显著被抑制.结论 紫草素免疫干预已发病的CIA小鼠,降低了关节炎评分阻止了软骨破坏,其机制可能为紫草素通过抑制了Th1细胞因子的表达发挥了抗炎症的作用.     

艾灸调节胶原诱导的关节炎小鼠Treg/Th17细胞及Galectin-9实验研究

目的:探讨艾灸对小鼠胶原诱导的关节炎(CIA)炎症、Th17和Treg细胞的影响及Galectin-9在其中的作用。方法:复制Ⅱ型胶原诱导的类风湿关节炎小鼠模型并予以艾灸治疗,观察艾灸治疗及Galectin-9注射对关节肿胀、关节滑膜病理表现的影响,流式细胞术分析Th17、Treg细胞变化,ELISA检测相关细胞因子IL-1β、IL-6、IL-10、IL-17、TGF-β、Galectin-9的含量。结果:CIA模型建立后,小鼠关节明显红肿,关节面粗糙、滑膜层变薄。经治疗,艾灸组、Galectin-9组小鼠关节红肿相对模型组有较明显的消退;而不治疗组、PBS组小鼠关节红肿无明显消退。上述4组小鼠关节评分组间差异经秩和检验比较,有统计学意义(P=0.04)。经艾灸治疗的小鼠病变关节面恢复平整,滑膜层较治疗前变厚,接近正常组。CIA模型小鼠Treg细胞显著下降、Th17细胞明显上升(P0.01);艾灸治疗和Galectin-9注入后,Treg细胞的数量有显著上升(P0.01),且两组无明显差异(P=0.36);艾灸治疗和Galectin-9注入后,Th17细胞数量显著性下降(P0.01),且两组无明显差异(P=0.71)。细胞因子Galectin-9在CIA模型小鼠脾脏中含量降低(P0.01),艾灸治疗和Galectin-9均能使其增高(P0.01),但艾灸治疗组不及Galectin-9组(P0.01)。CIA模型小鼠脾脏中IL-1β、IL-6、IL-17等致炎因子表达增高(P0.01);艾灸治疗及注入Galectin-9后它们的含量相应降低(P0.01),与不治疗组、PBS组比较差异有显著的统计学意义(P0.01);而抑炎因子IL-10、TGF-β在CIA模型小鼠脾脏中表达降低,艾灸治疗及Galectin-9注入后它们的表达明显提高(P0.01),与不治疗组、PBS组比较有显著的统计学差异(P0.01);Galectin-9注入后,Galectin-9组IL-1β、IL-6、IL-17含量提高(P0.01),与PBS组比较有显著的统计学差异(P0.01)。艾灸组中IL-1β、IL-6、IL-17、IL-10、TGF-β含量与Galectin-9组比较有显著差异(P0.01,P0.01,P0.01,P0.01,P=0.01)。结论:艾灸治疗能改善CIA小鼠关节炎症,调节Th17/Treg细胞失衡;其机制可能与促进Galectin-9分泌有关。     

苗药验方四大血可减少关节炎大鼠滑膜组织的坏死性凋亡和血管新生：基于抑制RIPK1/RIPK3/MLKL通路

目的 探究贵州苗医验方“四大血”（SX）对胶原诱导型关节炎（CIA）大鼠滑膜组织坏死性凋亡和滑膜血管新生的作用机制。方法 将42只SD大鼠均分为空白组（Nor）、模型组（Mod）、雷公藤多苷片阳性对照组（GTW,40 g/kg）和SX高、中、低剂量组（SX 40 g/kg、SX 20 g/kg、SX 10 g/kg）,7只/组。构建CIA大鼠模型。建模后测量大鼠双后肢足跖肿胀程度并进行关节炎指数评分。ELISA法检测血清中TNF-α、IL-1β和IL-17变化,HE染色法观察大鼠关节滑膜病理变化,Real-time PCR检测滑膜组织中VEGF、MMP-9、Ang-1、RIPK1、RIPK3、Caspase-8 mRNA表达水平,Western blot检测滑膜组织中VEGF、MMP9、Ang-1、STAT-3、RIPK1、RIPK3、MLKL、p-MLKL、Caspase-8蛋白表达水平。结果 GTW组和SX高、中、低剂量组足跖肿胀度及关节炎指数评分均小于Mod组（P<0.05）。在光镜下观察大鼠关节滑膜病理组织切片,Mod组可见大量炎性细胞浸润,各层组织结构混乱;而药物治疗组中,炎性细胞浸润、滑膜血管新生和滑膜增生程度均降低。且随SX剂量增高,治疗效果呈逐渐增强的趋势。与Mod组相比,GTW组和SX 40 g/kg组大鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-17含量,滑膜组织中RIPK1、RIPK3、VEGF、Ang-1、MMP9 mRNA和蛋白表达均降低（P<0.05）,Caspase-8 mRNA和蛋白表达水平增高（P<0.05）并下调Stat-3蛋白表达和MLKL的磷酸化水平（P<0.05）。结论 SX可以改善CIA大鼠滑膜血管新生,其机制可能与抑制RIP1/RIP3/MLKL信号通路激活,并下调促血管生长因子VEGF、Ang-1、MMP9、STAT-3表达有关。     

唾液乳杆菌对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠模型的脾脏T细胞及炎症因子影响

目的 探讨唾液乳杆菌对类风湿性关节炎（RA）的治疗效果及作用。方法 选择牛Ⅱ型胶原为免疫原,对雄性SD大鼠建立胶原诱导性关节炎（CIA）模型。随机选取24只造模成功的大鼠,随机分成CIA模型组、唾液乳杆菌组、甲氨蝶呤组,每组8只,另外选择8只大鼠作为健康组。健康组和CIA模型组均给予细菌培养基灌胃;唾液乳杆菌组给予唾液乳杆菌灌胃;甲氨蝶呤组给予甲氨蝶呤药物灌胃,每组连续灌胃4周。结束后评定关节炎指数,测量发病足厚度,观察踝关节组织病理改变并进行组织病理学染色;检测脾脏辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞（Treg）的含量,评估各组大鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平。结果 与健康组相比,CIA模型组、唾液乳杆菌组及甲氨蝶呤组的关节炎指数评分（t=82.31、257.33、234.21）,发病足厚度（t=21.47、56.14、51.44）,血清中IL-1β(t=3...     

IL-17和RANKL在胶原诱导性关节炎大鼠关节滑膜的表达及~(99)Tc-TDP的干预作用

目的:探讨白细胞介素17(IL-17)和细胞核因子-κB受体活化因子配基(RANKL)在胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠关节滑膜病变发生发展中的作用及99锝-亚甲基二膦酸盐(99Tc-TDP)的干预作用.方法:通过完全弗氏佐剂乳化的鸡Ⅱ型胶原构建CIA大鼠模型.模型大鼠随机分为模型对照组和99Tc-TDP组,99Tc-TDP组予0.05 μg·(kg·d)-1 99Tc尾静脉注射,正常对照组与模型对照组予等量生理盐水尾静脉注射.关节炎指数(AI)评分评价关节炎程度,各组大鼠用ELISA法检测血清及关节液IL-17和RANKL浓度,显微镜观察滑膜病理变化,免疫组化法半定量检测滑膜IL-17和RANKL蛋白表达.结果:与正常对照组相比,模型对照组和99Tc-TDP组血清及关节液IL-17浓度、关节液RANKL浓度、滑膜病理积分、滑膜IL-17和RANKL蛋白表达均增加(P＜0.05),99Tc-TDP组上述指标较模型对照组均降低(P＜0.05),各组血清RANKL浓度无显著性差异(P＞0.05).结论:IL-17和RANKL参与了CIA大鼠关节滑膜病变的发生发展,99Tc-TDP可能通过抑制滑膜IL-17和RANKL的表达延缓关节滑膜病变的进展.     

蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白治疗胶原诱导性关节炎大鼠的相关作用机制研究

目的探讨蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白（CⅡ）治疗胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠的相关作用机制。方法60只10周龄Wistar雄性大鼠按随机数字表法分为蕲蛇CⅡ高、中、低剂量组和空白组、模型组、塞来昔布（对照）组,每组10只。除空白组外,其余5组采用牛CⅡ-弗氏完全佐剂乳剂注射法构建CIA大鼠模型,2周后分别给予相应药物治疗,治疗30d后处死大鼠,获得左后足膝关节滑膜组织和肠系膜淋巴结。采用HE染色法观察大鼠关节滑膜组织病理学变化,ELISA法检测大鼠肠系膜淋巴结淋巴细胞（MLNLs）中IL-2、IL-4、IL-17和转化生长因子-β（TGF-β）水平,流式细胞术检测辅助性T细胞17（Th17）、调节性T细胞（Treg）细胞比例。结果与空白组比较,模型组大鼠膝关节滑膜组织细胞体积增大、炎症细胞浸润、新生血管生成,MLNLs中IL-2、IL-4水平明显降低（均P＜0.05）,TGF-β、IL-17水平明显升高（均P＜0.05）,Th17、Treg细胞比例明显升高（均P＜0.05）;与模型组比较,对照组和蕲蛇CⅡ高、中、低剂量组大鼠膝关节滑膜组织内炎症细胞聚集、新生血管明显减少,MLNLs中IL-2、IL-4、TGF-β水平明显升高（均P＜0.05）,IL-17水平明显降低（P＜0.05）,Treg细胞比例升高而Th17细胞比例降低（均P＜0.05）,其中蕲蛇CⅡ不同剂量组间呈一定的量效关系（均P＜0.05）。结论蕲蛇CⅡ治疗能改善CIA大鼠关节滑膜组织的病理性改变,其作用机制可能是通过调节MLNLs中细胞因子水平和Th17、Treg细胞比例实现的。     

草乌甲素对大鼠胶原诱导性关节炎的作用

探究草乌甲素对大鼠胶原诱导性关节炎的作用。方法 20只雄性SPF级SD大鼠随机选取5只作为对照组,剩下的15只SD大鼠用来建立胶原诱导性关节炎（CIA）模型,根据关节炎评分表评估CIA模型,建模成功后再随机分成模型组、低剂量草乌甲素治疗组（50 μg/kg）、高剂量草乌甲素治疗组（100 μg/kg）,此后每组大鼠连续给药干预30 d,第31天后处死大鼠。酶联免疫吸附法（ELISA）测定大鼠TNF-α、IL-6、IL-17、MMP-3水平,逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）测定关节滑膜组织中MMP-3 mRNA表达水平,蛋白印迹法（Western Blot）检测关节滑膜组织中MMP-3蛋白水平,HE染色观察滑膜组织病理变化。结果 与对照组比较,模型组及草乌甲素治疗组TNF-α、IL-6、IL-17、MMP-3水平明显升高（P＜0.05）;同时,与模型组比较,草乌甲素治疗组TNF-α、IL-6、IL-17、MMP-3水平明显降低（P＜0.05）。与对照组相比,模型组MMP-3 mRNA、MMP-3蛋白表达水平明显升高;同时,与模型组比较,草乌甲素治疗组MMP-3 mRNA、MMP-3蛋白表达水平降低（P＜0.05）。组织病理结果显示草乌甲素治疗组的关节滑膜处的炎症细胞浸润及滑膜增生情况均减轻。结论 草乌甲素可以抑制炎症因子分泌和降低MMP-3的表达,对大鼠胶原诱导性关节炎具有一定的治疗作用     

痛痹颗粒对Ⅱ型胶原关节炎小鼠炎性反应及NLRP3炎性小体表达的影响

目的?通过Ⅱ型胶原诱导关节炎（CIA）小鼠模型探讨痛痹颗粒对类风湿关节炎的作用机制。方法?将60只雄性小鼠随机分为6组,即正常组、模型组、高剂量组、中剂量组、低剂量组及雷公藤多苷片组,通过2次注射0.1?mL?CⅡ乳剂进行免疫刺激,构建CIA模型,造模成功后分别按照50、25、12.5?g/kg浓度对痛痹颗粒高、中、低剂量组灌胃给药,并对模型组及正常组给予等体积生理盐水、雷公藤多苷片组予0.12?g/kg浓度的雷公藤多苷片混悬液,每日1次,持续22?d。采用螺旋测微器观察痛痹颗粒对CIA小鼠足肿胀的改善程度,MTT法检测脾细胞增殖及粘附能力,放射免疫法对滑膜细胞培养上清液中IL-1β、TNF-α含量进行检测,Western blot法检测滑膜组织中NLRP3炎性小体的表达。结果?与正常组相比,模型组2次免疫后第13天就出现关节肿胀表现;与模型组比,痛痹颗粒高、中剂量组及雷公藤多苷片组均可明显减轻CIA模型小鼠的足肿胀程度、降低关节炎发生率与关节评分、抑制脾细胞增殖与粘附能力,并且抑制培养的滑膜细胞增殖以及降低滑膜细胞培养上清液中IL-1β、TNF-α含量,同时可抑制滑膜组织中NLRP3炎性小体的表达。结论?痛痹颗粒高、中剂量组均可能通过抑制NLRP3炎性小体的表达,从而抑制滑膜细胞增殖,调节炎性因子生成,进而抑制类风湿关节炎的炎性反应,以达到减轻关节损伤的作用。      

支气管哮喘小鼠细胞免疫因子及Th17细胞水平的变化及发病机制研究

目的探讨支气管哮喘小鼠细胞免疫因子及辅助性T细胞（Th）17细胞水平的变化及发病机制,旨在为支气管哮喘的临床治疗提供参考。方法选择SPF级昆明种小鼠24只,采用随机数字表法分为正常对照组和哮喘模型组各12只。哮喘模型组小鼠分别于实验开始当天和第8天腹腔内注入卵清蛋白（OVA）混悬液[含OVA/Al（OH）310mg/g]50滋g/次致敏,并于第16天给予雾化吸入含1%OVA的0.9%氯化钠溶液30~40ml进行激发,持续30~40min,1次/d,连续7d。正常对照组小鼠则给予等量的0.9%氯化钠溶液。比较两组小鼠行为变化情况、肺组织病理切片HE染色结果、肺泡灌洗液（BALF）中炎性细胞分类计数、BALF和血清中细胞免疫因子和Th17细胞水平。结果哮喘模型组小鼠肺组织内可见大量中性粒细胞和嗜酸性粒细胞,且相对阳性着色面积增大。与正常对照组小鼠相比,哮喘模型组小鼠BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞等炎性细胞分类计数均明显升高,BALF和血清中IL-4、IL-5、IFN-γ和IL-17水平均明显升高,而IL-10水平明显降低,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论支气管哮喘小鼠BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞等炎性细胞分类计数均明显升高,可能与BALF和血清中IL-4、IL-5、IFN-γ和IL-17水平明显升高,而IL-10水平明显降低密切相关。