用反向间接血凝法检测乙型肝炎e抗原

1972年 Magnius 等用琼脂双向扩散法(下称 ID法)从 HBsAg 阳性血液中发现HBeAg,其后 ID 法是检测 HBeAg 和抗-HBe的主要方法。我们在用反向间接血凝法(简称RPHA 法)检测 HBsAg 的基础上建立检测HBeAg 的方法。材料和方法一、材料抗-HBe 阳性血清:经国家标准品测定,ID 法滴度1:32。     

酶免疫竞争一步法和两步法检测抗-HBe的结果比较

目的比较酶免疫竞争一步法和两步法检测抗-HBe的结果。方法对一步法HBeAg和抗-HBe结果同时阳性的45份血清标本,再用两步法进行检测,比较2种方法的结果。结果一步法HBeAg和抗-HBe结果同时阳性的45份血清标本,两步法检测抗-HBe结果仅有21份阳性,差异有统计学意义。结论对于一步法HBeAg和抗-HBe结果同时阳性的血清标本,应该用两步法复检,确保检验结果准确。     

应用酶联免疫吸附测定法检测HBeAg和抗-HBe

目前国内多采用免疫扩散法(ID)检测乙型肝炎e抗原(HBeAg)和e抗体(抗-HBe),该法敏感度很低。我们试用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测这一系统,取得较好效果。 材料与方法 (一)材料 待测血清:106份采自住院肝炎患者,其中63份 HBsAg阳性,标准HBeAg和抗-HBe:采自乙肝病人急性期和恢复期,经WHO药盒标化,阴性对照血清:采自正常人,经Abbott RIA药盒检查,高效价抗-HBe血清:采自献血员;HBsAg偶联Seeharose 4B柱:按文献1方法提纯的HBsAg,     

微量固相放射免疫法检测抗—HBs及HBeAg

目前国内检测抗-HBs,一般实验室多用被动血凝法(PHA),该法验出的阳性率不高,阳性血清的抗-HBs滴度也较低;检测HBeAg多用琼脂扩散法(ID),这种方法的检出率也较低且较费时。为此,我们于1984年采用了敏感的微量固相放射免疫法(SPRIA),用于检测抗-HBs及HBeAg,现将结果报告如下。材料和方法一、检测对象:用1983年石嘴山市、吴忠市、固原县、平罗县HBsAg携带者配对调查中体检正常、HBsAg阴性者血清检测抗-HBs;用上述HBsAg携带者的血清检测HBeAg。检测对象包     

小鼠抗—HB_S单克隆抗体XM—B_5在免疫诊断中的初步应用

小鼠杂交瘤 XM—B_5 细胞培养上清液和小鼠腹水均含高滴度抗—HBs 抗体。经稀释后两者可直接用于免疫扩散法(ID)检测 HBsAg。上清液和腹水之抗—HBs 经纯化,可用于:1、致敏血球建立反白血凝法(RPHA),2、结合辣根过氧化物酶建立酶连免疫法(ELISA)。用三种方法(ID、RPHA、ELISA)检测132份血清标本,HBsAg 阳性率分别为46.21%,64.4%和70.4%。同时用市售北京生物研究所马抗—HBs2和 RPHA 检测时血球阳性率为37.9%和75%。     

单克隆多克隆抗体不同标记ELISA技术对HBeAg/抗-HBe检测评估

采用抗-HBe单克隆和多克隆抗体进行生物素或酶标记作酶免疫试剂检测HBeAg及抗-HBe,结果显示单克隆抗体(McAb)敏感性高于多克隆抗体(PcAb)。生物素试剂在检测HBeAg的稀释度为1:5000,比酶标法ELISA高1倍多,与RIA相当,且稳定性优于RIA。生物素标记抗体至少1年内保持效价不变,1年内批间变异系数为5.8％,相同标本重复检测变异系数为5.94％,是一种较理想的检测e系统的方法之一。另外,研究发现一孔一期法同时测HBeAg/抗-HBe时,无论标记抗体为单克隆或多克隆,其包被只能用单克隆抗体。     

乙肝标志物中HBsAg假阴性分析

乙肝标志物(HBVM)五项指标(HBsAg、抗-HBs、HBeAg,抗-HBe、抗-HBc)是临床常用的检测项目，我们在实际工作中用酶联免疫(ELISA)一步法发现HBsAg及抗-HBc阳性血清而HBsAg呈阴性反应；用传统的反向间接血凝二步法(R-PHA)检测呈不同滴度的阳性反应，对此我们分析了1465份血清，现报告如下。     

单克隆多克隆抗体不同标记ELISA技术对HBeAg／抗HBe检测评估

采用抗-HBe单克隆和多克隆抗体进行生物素或酶标记作酶免疫试刑检测HBeAg及抗-HBe，结果显示单克隆抗体(MgAb)敏感性高于多克隆抗体(PcAb)。生物素试剂在检测HBeAg的稀释度为1：5000，比酶标法ELISA高1倍多，与RIA相当，且稳定性优于RIA。生物素标记抗体至少1年内保持效价不变，1年内批间变异系数为5．8％，相同标本重复检测变异系数为5．94％，是一种较理想的检测e系统的方法之一。另外，研究发现一孔一期法同时测HBeAg／抗-HBe时，无论标记抗体为单克隆或多克隆，其包被只能用单克隆抗体。     

检测乙型肝炎“e”系统的新方法——Sepharose4B—固相酶免疫法

乙型肝炎“e”系统的检测,国内多沿用琼脂双相扩散法(ID),但ID法的灵敏度、稳定性尚不理想,试验方法亟待改进。自1977年国外先后采用血凝法、酶免疫法和放射免疫法检测“e”系统以来,国内也相继建立了“e”系统检测的反向间接血凝法和酶联免疫吸附试验(ELISA)微板法。武汉市第七医院肝病实验室在应用ELISA微板法的同时,建     

乙肝ELISA检测中HBeAg和抗-HBe双阳性原因分析

目的分析HBeAg和抗-HBe双阳性的原因。方法初筛试验用一步法检测。复核试验HBeAg仍用一步法和微粒子酶免分析法，抗-HBe用二步法和微粒子酶免分析法。结果63份HBeAg和抗-HBe双阳性标本经复核：18份HBeAg阴性，45份抗-HBe阴性。结论“e”系统双阳多为操作误差和一步法造成，必需进行复核。     

ELISA(双抗体夹心法)共系统检测抗-HBe与HBeAg结果分析

目的探讨用双抗体夹心法检测HBeAgEIA商品试剂盒共系统检测抗-HBe与HBeAg的可行性及结果判定方法。方法用双抗体夹心法检测HBeAgELISA试剂盒结合配套中和(竞争)抑制法检测抗-HBeELISA试剂盒中的中和试剂(HBeAg)等试剂组分共系统检测1000份随机血清(浆)标本抗-HBe与HBeAg,并分别以常规ELISA检测抗-HBe与HBeAg作平行对照。结果ELISA共系统检测抗-HBe与HBeAg易于目测;它们的比色判定临界值同常规ELISA易于设定(或使用临界值血清,检测HBeAg时也使用抗-HBe阴性对照),与常规ELISA检测比色判定无显著性差异(配对计数资料比较的χ2检验:相关检验均为P<0.005,υ=1,a=0.05;抗-HBe优劣检验(ELISA共系统检测抗-HBe前两项COV与抗-HBe临界值血清)均为P>0.900,υ=1,a=0.05;HBeAg优劣检验依次为HBeAg临界值血清:(1)P>0.900,υ=1,a=0.05,抗-HBe阴性对照;(2)0.100>P>0.050,υ=1,a=0.05,ELISA共系统检测HBeAgCOV;(3)0.100>P>0.050,υ=1,a=0.05,但χ21<χ22<χ23)。结论用双抗体夹心法检测HBeAgELISA试剂盒与配套中和(竞争)抑制法检测抗-HBeELISA试剂盒试剂组分重组共系统检测抗-HBe与HBeAg是可行的,两种试剂盒能够相互替代,在有优质现代酶标仪的实验室,可以省去常规ELISA试剂盒其中之一,实用价廉,值得推广。     

乙肝两对半两种检测方法比较分析

目的:比较微粒子酶免分析技术(MEIA)与酶联免疫法(ELISA )检测乙型肝炎病毒(HBV)表面标志物(HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc,以下简称乙肝两对半)的结果,探讨这二种方法的符合率.方法:分别用酶联免疫法和微粒子酶免分析技术检测98例成人血清标本乙肝两对半,将两种检测结果进行分析、比较.结果:两种方法检测乙肝两对半的HBsAg、表面抗体(HBsAb)和e抗原(HBeAg)无显著差异(P>0.05),e抗体(HBeAb)和核心抗体(HBcAb)有显著差异(P<0.05)结论: ELISA 法灵敏度高,易观察,适合大规模标本的测定.MEIA法定量检测乙肝两对半具有灵敏度高、特异性强、稳定性好等特点,是一种理想的乙肝两对半定量检测方法.     

微量固相放射免疫法检测HBeAg

自 Magnius 在 HBsAg 阳性血清中发现 HBeAg 后,HBeAg 在肝研究工作中的重要性日益受到重视。近年来,检测方法的进展很快,除特有的琼脂扩散法外,相继有血凝法、酶联免疫吸附法、放射免疫法的报道,为进一步对 e 本质、临床预后、流行病学的研究等提供了条件。我国对 e 系统的研究,大部分采用免疫扩散法(下称 ID),最近已有血凝法检测 e 抗原的报道。本文报道用微量固相放射免疫法(下称 M-SPRIA)检测 HBeAg,并对实验条件和影响灵敏度的因素作一讨论。     

酶法检测42例小儿各型肾小球疾病与HBV感染关系

乙型肝炎表面抗原(HBsAg)所致的免疫复合物肾炎,近年来引起了学者们的关注。作者采用ELISA法对住院47例肾小球疾病进行检测,分析如下。材科和方法一、对象为1989年2月至1991年2月我院儿科肾小球疾病患者。二、诊断标准依1984年南宁会议《病毒性肝炎防治方案》为诊断分型标准。三、血清病原学检测方法乙肝表面抗原(HBsAg),乙肝表面抗体(抗-HBs),乙肝e抗原(HBeAg),乙肝e抗体(抗-HBe),乙肝核心抗体(抗-HBcIgG)均用酶联免疫吸附试验(ELISA),试剂由沈     

时间分辨荧光免疫分析法检测乙肝病毒(HBV)血清标志物的临床应用价值分析

目的观察分析时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)检测乙肝病毒(HBV)血清标志物的临床应用价值。方法选取我院2014年2月至2015年2月收集的200例临床血清学标本,分别采用时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测,检测项目为乙肝病毒(HBV)血清标志物,分析两种方法检测结果。结果 TRFIA对HBsAg、HBeAg、抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc阳性率为28.00%、7.50%、52.00%、29.50%、35.00%;ELISA对HBsAg、HBeAg、抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc阳性率为25.00%、7.00%、46.50%、24.00%、28.00%,差异显著(P0.05)。结论时间分辨荧光免疫分析法检测乙肝病毒血清标志物具有稳定性好、线性范围宽、操作简单等优势,其检测特异性和敏感性可达到酶联免疫法水平,有利于及时发现和诊断乙型肝炎,值得临床推广应用。     

HBeAg/抗-HBe半定量与HBV DNA载量和丙氨酸氨基转移酶的关系

目的 探讨乙型肝炎患者HBeAg/抗-HBe与HBV DNA载量和丙氨酸氨基转移酶(ALT)的关系.方法 用实时荧光定量PCR法连续检测法检测578例HBeAg或抗-HBe阳性的乙型肝炎患者血清HBV DNA含量和ALT水平.结果 HBeAg( )/抗-HBe(-)模式组HBV DNA拷贝数、阳性率明显高于HBeAg(-)/抗-HBe( )模式组和HBeAg( )/抗-HBe( )模式组(P均＜0.01).HBeAg含量随HBVDNA升高而不断增加(P＜0.01);抗-HBe含量随HBV DNA升高反而降低(P＜0.01).HBeAg( )/抗-HBe(-)模式组ALT异常率28.7%,明显高于HBeAg(-)/抗-HBe( )模式组的17.5%(P＜0.01);HBV DNA阳性各组ALT异常率均高于阴性组(P＜0.01),HBV DNA不同载量组比较ALT异常率差异无显著性意义(P＞0.05).结论 定量检测HBeAg/抗-HBe可粗略判断病毒感染及复制水平,而且与肝脏功能有一定的相关性.ALT升高与HBV DNA的阳性有关,与其载量大小无关.     

不同方法检测乙型肝炎血清标志物结果评价

目的评价不同方法检测乙型肝炎血清标志物结果的效果。方法选取2010年5月-2012年5月我院收治的120例乙型肝炎患者为研究对象,根据临床检测方法的不同,将120例患者三组,其中,40例患者采用酶联免疫分析法,记为A组;40例患者采用ROCIIEE170免疫分析仪法,记为B组;剩余40例患者采用ARC IIIT ECT2000免疫分析仪法,记为C组。对比三组患者检测结果。结果 A组40例患者,0例HBeAg,40例抗-HBe阳性;B组40例患者,18例HBeAg阳性,40例抗-HBe阳性;C组40例患者,40例HBeAg阳性,40例抗-HBe阳性。结论采用ARC IIIT ECT2000免疫分析仪检测乙型肝炎患者血清标志物效果明显较优,值得临床推广和应用。     

多聚人血清白蛋白受体检测分析

多聚人血清白蛋白受体(PHSA-R)自从被证实存在于HBV表面及肝细胞表面以来引起人们的广泛重视,证实它与HBV复制成正相关,它可使HBV易于附着于肝细胞上,有利于病毒入侵。我们用ELISA法检测PHSA-R,探讨它与HBeAg、抗-HBe的关系,现介绍如下:1 材料及方法我们选择HBeAg(+)血清423份,其中确诊为无症状携带者35例,慢性肝炎83例(依南宁会议诊断标准),检测PHSA-R、HBeAg,抗-HBe,均用ELISA法,试剂为北京生化免疫试剂中心提供。2 结果与分析     

ELISA（双抗体夹心法）共系统检测抗-HBe与HBeAg结果分析

目的探讨用双抗体夹心法检测HBeAgEIA商品试剂盒共系统检测抗-HBe与HBeAg的可行性及结果判定方法。方法用双抗体夹心法检测HBeAgELISA试剂盒结合配套中和（竞争）抑制法检测抗-HBeELISA试剂盒中的中和试剂（HBeAg）等试剂组分共系统检测1000份随机血清（浆）标本抗-HBe与HBeAg,并分别以常规ELISA检测抗-HBe与HBeAg作平行对照。结果ELISA共系统检测抗-HBe与HBeAg易于目测;它们的比色判定临界值同常规ELISA易于设定（或使用临界值血清,检测HBeAg时也使用抗-HBe阴性对照）,与常规ELISA检测比色判定无显著性差异（配对计数资料比较的χ2检验：相关检验均为P〈0.005,υ=1,a=0.05;抗-HBe优劣检验（ELISA共系统检测抗-HBe前两项COV与抗-HBe临界值血清）均为P〉0.900,υ=1,a=0.05;HBeAg优劣检验依次为HBeAg临界值血清：（1）P〉0.900,υ=1,a=0.05,抗-HBe阴性对照;（2）0.100〉P〉0.050,υ=1,a=0.05,ELISA共系统检测HBeAgCOV;（3）0.100〉P〉0.050,υ=1,a=0.05,但χ^21〈χ^22〈χ^23）。结论用双抗体夹心法检测HBeAgELISA试剂盒与配套中和（竞争）抑制法检测抗-HBeELISA试剂盒试剂组分重组共系统检测抗-HBe与HBeAg是可行的,两种试剂盒能够相互替代,在有优质现代酶标仪的实验室,可以省去常规ELISA试剂盒其中之一,实用价廉,值得推广。     

486例急性病毒性肝炎血清分型调查分析

目的:通过486例急性病毒性肝炎血清分型调查分析,了解长春地区各型急性病毒性肝炎的发病情况及临床特点。方法:用酶联免疫法( ELISA)检测486例急性肝炎病人血清的抗-HAV、HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc、抗-HCV IgG、HEV IgM。结果:甲型肝炎73例,占15.02％;乙型肝炎...