线粒体DNA缺失与心肌病

研究线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）缺失与心肌病发生的关系。方法用大片段ＤＮＡ体外扩增技术，扩增心肌病患者心肌、骨骼肌血液标本的ｍｔＤＮＡ，并与冠心病患者、正常人的标本对照。结果在１例肥厚型心肌病（ＨＣＭ）患者心肌中发现ｍｔＤＮＡ缺失，缺失片段长度为４００个碱基对（４００ｂｐ），心肌中缺失ｍｔＤＮＡ的相对含量超过５０％。结论ｍｔＤＮＡ缺失可能是心肌病发病的一个重要病因。     

肥厚型心肌病患者心肌线粒体DNA的大片段缺失

目的：研究肥厚型心肌病与线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）缺失的关系。方法：应用ＬｏｎｇＰＣＲ技术扩增１例肥厚型心肌病（ＨＣＭ）患者心肌标本和血细胞ｍｔＤＮＡ。结果：在心肌ｍｔＤＮＡ中发现至少５ｋｂ缺失，而血细胞中未见缺失。结论：这支持ｍｔＤＮＡ缺失是心肌病的一个重要病因，且具有组织差异性。     

心肌疾病线粒体DNA突变研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增扩张型心肌病（ＤＣＭ）及急性心肌梗塞（ＡＭＩ）病人活检或尸检心肌及淋巴细胞线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）缺失常发区之一，并与正常对照比较。结果发现病人及正常对照ｍｔＤＮＡ８５３０～６００位之间（相距８．７ｋｂ）均存在不同程度的多重缺失，２例ＡＭＩ病人心肌及１０例ＤＣＭ病人心内膜心肌活检标本均扩增出１．ｌｋｂ片段，而２８例ＤＣＭ病人和１４例正常对照淋巴细胞内则多可扩增出４个片段，对应缺失长度在７／７～８．８ｋｂ之间，心肌内ｍｔＤＮＡ缺失几乎均可在淋巴细胞ｍｔＤＮＡ反映，１．ｌｋｂ片段阳性率有随年龄增大而升高的趋势，含缺失区的ｍｔＤＮＡ所占比例与年龄成正比；占总ｍｔＤＮＡ的比例小于１０％，ＳＳＣＰ分析发现Ｌ８５３／Ｈ９３３扩增片段存在有点突变。     

扩张型心肌病患者心肌病患者心肌线粒体DNA缺失突变及与？…

为探讨扩张型心肌病患者心肌线粒体ＤＮＡ缺失突变对心衰发病的意义，１０例ＣＣＭ患者心内膜活检心肌，用定量ＰＣＲ方法，以常发缺失型突变ｍｔ ＤＮＡ ４９７７ｂｐ（ｍｔＤＮＡ＾４９７７）和７４３６ｂｐ（ｍｔ ＤＮＡ＾７４３６）缺失率为损伤指标，观察心衰不同发展阶段ｍｔＤＮＡ所失程度与患者心肌线粒体呼吸酶活性改变及临床心功能受损不同关系。     

扩张型心肌病与线粒体DNA缺失片段的研究

通过对线粒体ＤＮＡ的分析试图从分子水平说明扩张型心肌病可能存在的发病机制。应用ＰＣＲ方法对１０例ＤＣＭ患者心肌组织ｍｔＤＮＡ进行检测，其中４例存在在７．４ｋｂ的；缺失；对照组中１例肥 厚型心肌病及２例心肌梗塞患者心肌组织中亦检验ｍｔＤＮＡ的异质性。     

线粒体肌病和脑肌病患者线粒体基因缺失的研究

目的 探讨线粒体肌病和脑肌病的骨骼肌线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）缺失情况。方法 从１例线粒体肌病和１例脑肌病（ＭＥＲＲＦ）患者骨骼肌活检标本中,提取总ＤＮＡ,以限制性内切酶ＰｖｕⅡ酶切,与ｍｔＤＮＡ全长探针进行分子杂交。结果 线粒体肌病和ＭＥＲＲＦ患者分别为１５ｋｂ和５ｋｂ和ｍｔＤＮＡ基因缺失。结论 ｍｔＤＮＡ基因缺失是线粒体肌病和脑肌病的重要病因之一。     

神经肌肉性疲劳患者线粒体DNA的缺失

目的：证实神经肌肉性疾病与线粒体ＤＮＡ缺失有效，方法：应用ＰＣＲ技术研究了９例神经肌肉性疾病患者的血细胞或（和）肌肉组织中的线粒体ＤＮＡ，共１５份标本，结果：１例线粒体脑肌病患者ｍｔＤＮＡ中存在至少２９６８ｂｐ的大片断缺失，缺失区位于呼吸链复合物１，４，５的编码区，结论：该ｍｔＤＮＡ突变可能导致神经肌肉性疾病。     

扩张型心肌病发病分子机理的研究

扩张型心肌病发病分子机理的研究徐军，李运有，杨春梅，张寄南，王敬良，马文珠扩张型心肌病（ＤＣＭ）是临床较多见的原发性心肌疾病，发病机理不清。本文研究了ＤＣＭ与线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）缺失和心肌β肌球蛋白重链（β－ＭＨＣ）错义突变的关系。ｍｔＤＮＡ的...     

神经肌肉性疾病患者线粒体DNA的缺失

目的：证实神经肌肉性疾病与线粒体ＤＮＡ缺失有关。方法：应用ＰＣＲ技术研究了９例神经肌肉性疾病患者的血细胞或（和）肌肉组织中的线粒体ＤＮＡ，共１５份标本。结果：１例线粒体脑肌病患者ｍｔＤＮＡ中存在至少２９６８ｂｐ的大片断缺失，缺失区位于呼吸链复合物１，４，５的编码区。结论：该ｍｔＤＮＡ突变可能导致神经肌肉性疾病。     

慢性进行性眼外肌麻痹与线粒体DNA缺失的关系

目的：对２例慢性进行性眼外肌麻痹（ｃｈｒｏｎｉｃ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅ ｅｘｔｅｒｎａｌ ｏｐｈｔａｌｍｏｋｅｇｉａ,ＣＰＥＯ）患者的骨髂肌中的线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）进行缺失突变分析。方法：用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交和放射自显影等方法。结果：在２例ＣＰＥＯ患者的骨骼肌标本中均存在线粒体ＤＮＡ的单一的大片段缺失突变;缺失的长度分别为４．５ｋｂ和５．５ｋｂ;突变型ｍｔＤＮＡ在总体ｍｔＤＮＡ中所占的比     

Kearns—Sayre综合征与线粒体DNA缺失的关系

目的：研究ＫＳＳ与线粒体ＤＮＡ缺失之间的关系。方法：提取患者骨骼肌标本中的总体ＤＮＡ，用ＰｖｕⅡ酶解的进行琼脂糖电泳分离，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ转移后用经放射性标记的线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）作探针进行杂交和放射自显影。     

内耳缺血及线粒体DNA缺失与老年性耳聋发病的关系

目的 探讨内耳缺血及ｍｔＤＮＡ４９７７缺失与老年性聋的关系,确定老年性耳聋颞骨中ｍｔＤＮＡ缺失的病理基础。方法 对４１例不同分组的６７侧颞骨应用巢式ＰＣＲ和三重巢式ＰＣＲ检测ｍｔＤＮＡ４９７７缺失,应用图像分析技术测量血管管腔与血管的截面积比值。结果 在老年性聋组检出ｍｔＤＮＡ４９７７缺失的总发生率为５０．０％（１７／３４,缺失阳性耳数／总耳数）。在老年对照组检出ｍｔＤＮＡ４９７７缺失总发生率为２１．１％（４／１９）,与病变组比较差异无显著意义（Ｐ〈０．０５）。非老年对照组１０例１４耳均未检出ｍｔＤＮＡ４９７７缺失,缺失率为０。ｍｔＤＮＡ４９７７缺失阳性的老年性耳聋颞骨的神经滋养血管管壁增厚,管腔狭窄程度较缺失阴性组严重。并且ｍｔＤＮＡ缺失与内耳血管管腔狭窄程度的关系较ｍｔＤＮＡ４９７７缺失与年龄的关系更为密切     

风湿性心脏病心肌线粒体DNA^4977的定量研究

为了探讨风湿性心脏病（风心病）心肌慢性缺血、缺氧损害心肌功能的机理，作者采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测了１６例风心病患者心肌线粒体ＤＮＡ４９７７片段（ｍｔＤＮＡ４９７７）缺失率，同时测定了心肌丙二醛（ＭＤＡ）含量和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性。ＰＣＲ结果显示：正常对照组（ｎ＝１０）、年龄＞４５岁，ｍｔＤＮＡ４９７７缺失水平低，缺失率最高为０．００４２％，风心思音ｍｔＤＮＡ４９７７均有缺失，缺失率为０．０２％～１．２６％，明显高于对照组。由于ｍｔＤＮＡ４９７７缺夫导致氧化磷酸化复合物的蛋白质基因丢失，使氧化磷酸化抑制，ＡＴＰ合成减少，致使心肌功能恢复较差，另外．氧自由基可导致ｍｔＤＮＡ的损伤并产生缺失，风心病心肌ＭＤＡ含量增加，ＳＯＤ活力下降，表明心肌氧自由基量增加，序在ｍｔＤＮＡ４９７７缺失的内部条件。     

线粒体DNA片段缺失的检测及意义

线粒体ＤＮＡ（ＣｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌＤＮＡ，ｍｔＤＮＡ）突变与某些疾病及生物衰老的发生发展密切相关。利用内源自身模板竞争性ＰＣＲ方法半定量检测模拟缺血性脑血管疾病的小鼠缺血大脑发现，ｍｔＤＮＡ片段缺失发生率为：突变型ｍｔＤＮＡ占总线粒体ＤＮＡ的百分率大约为青年对照组（Ｙｎ）Ｏ，老年对照组（Ｏｎ）１６．５％，青年缺血组（Ｙｉ）３６％，老年缺血组（Ｏｉ）６０％，各组间比较具显著性差异（Ｐ＜０．０５），说明ｍｔＤＮＡ片段缺失与缺血及增龄成正相关。因而，ｍｔＤＮＡ片段缺失可作为缺血性脑血管疾病及生物衰老等的一种分子生物学诊断标志     

老年大鼠大脑皮质,海马和小脑的线粒体DNA缺失突变

目的 测定老年人大鼠脑缺失型ｍＤＮＡ比例,探讨ｍｔＤＮＡ缺失与脑衰老的关系,为研究其分子机制提供基础资料。方法 用碱裂解法抽提青年（３个月）ＳＤ大鼠１０只和老年（２４个月）ＳＤ大鼠１７只的大鼠皮质、海马和小脑的ｍｔＤＮＡ。稀释ＰＣＲ法测ｍｔＤＮＡ的缺失比例。结果 青年鼠和老年鼠大脑皮质、海马和小脑均存在缺失型ｍｔＤＮＡ,缺失片段为４８３４ｂｐ。青年鼠各脑区缺失型ｍｔＤＮＡ比例分别为０．０００１５６     

线粒体病研究进展

线粒体产生细胞生存所必需的能量,是细胞质内带有遗传信息的细胞器。近年来,线粒体机能异常与人类疾病的关系逐渐受到人们的关注,如线粒体脑肌病、线粒体心肌病、线粒体糖尿病［１,２］线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）突变所至的听力丧失以及ｍｔＤＮＡ突变与衰老［３］、细胞凋亡、Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ病、Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病、Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ病等疾病相关。由于线粒体异常产生的症状多种多样,现多称为线粒体病。１ ｍｔＤＮＡ和线粒体病［４］ 一个细胞有数千到上万个线粒体,一个线粒体有数个ＤＮＡ。即一个细胞有无数的ｍｔＤＮ…     

嗜肺巴氏杆菌蛋白及抗原图谱初步分析

为了应用ＲＦＬＰ分析猪线粒体ＤＮＡ Ｄ－ｌｏｏｐ的多态性。应用ＰＣＲ对西双版纳近交系小耳猪、广西巴马小型猪、贵州小型香猪、大约克夏猪、荣昌猪和长白猪血液总ＤＮＡ样品中线粒体ＤＮＡ控制（ｍｔＤＮＡ Ｄ－ｌｏｏｐ）进行扩增,２３种限制性内切酶消化,琼脂糖凝胶电泳检测。结果发展ｍｔＤＮＡ Ｄ－ｌｏｏｐ酶切多态性贫乏。因此根据现用酶,应用ｍｔＤＮＡ Ｄ－ｌｏｏｐ ＰＣＲ－ＲＦＬＰ分析,尚不能做猪品种品系鉴     

猪线粒体DNA D-loop PCR的建立

建立猪线粒体ＤＮＡ Ｄ－ｌｏｏｐ５‘端和３’端ＰＣＲ扩增方法。方法：设计三对引物,应用ＰＣＲ对西双版纳近交系小耳猪,广西巴马小型猪,贵州小型香猪,大约克夏猪,荣昌猪和长白猪血液总ＤＮＡ样品中ｍｔＮＤＡ Ｄ－ｌｏｏｐ,５‘端进行扩增,琼脂糖凝胶电泳检测,结果：三对引物扩增带清晰,与已知片段长度一致。结论：引物设计合理,扩增方法可行,为进一步应用ｍｔＤＮＡ Ｄ－ｌｏｏｐ ＰＣＲ－ＰＲＬＰ,５’端ＳＳＰ     

帕金森氏病和肌营养不良症（Erb型）中线粒体DNA的部分缺失

用ＰＣＲ技术对１２例神经肌肉性疾病患者的１６个标本进行了线粒体ＤＮＡ缺失情况的研究。发现２例帕金森氏病患者的肌肉组织以及其中１例的外周血和另１例肌营养不良（Ｅｒｂ型）患者的肌肉组织中线粒体ＤＮＡ至少有５２６ｂｐ的缺失。还对线粒体ＤＮＡ的部分缺失与疾病发生的关系进行了讨论。     

线粒体DNA在法医学中的应用及其研究进展

线粒体含核外ＤＮＡ基因组 ,且该基因组与核基因组分别独立复制。其序列在 1981年第一次由Ａｎｄｅｒｓｏｎ报道[1] 。现在Ａｎｄｅｒｓｏｎ序列已被作为序列比对时的参照标准。尽管与含 3亿ｂｐ的核ＤＮＡ相比较 ,仅有 16 5 6 9ｂｐ的环状线粒体ＤＮＡ基因组要小得多 ,但ｍｔＤＮＡ对于人类学、进化研究、法医学研究都具有相当重要的作用[2～ 6] 。在核ＤＮＡ与ｍｔＤＮＡ之间一点重要的差异在于其遗传方式 :ｍｔＤＮＡ来自于卵母细胞 ,很少或不含父亲成分 ,相反核ＤＮＡ却含有父母双方的成分[7] 。因此 ,核ＤＮＡ在每一代都要经过重组 ,而…