食蟹猴疟原虫在斯氏按蚊体内发育的研究

为了给体外培养子孢子提供对比依据,有必要从事疟原虫蚊体期发育过程的系统观察。由于食蟹猴疟原虫(plasmodi-um cynomolgi,又称猴间日疟原虫)和间日疟原虫(P.vivax)在形态和生活史方面十分近似,用食蟹猴疟原虫感染斯氏按蚊(Anopheles steqhemsi),详细观察原虫在蚊体内发育的各个时期,可作为对间日     

青蒿琥酯对食蟹猴疟原虫在按蚊体内发育的影响

目的 观察青蒿琥酯(Artesunste)对食蟹猴疟原虫在大劣按蚊体内发育的影响。方法 受疟原虫感染实验猴在肌注和静注青蒿琥酯各60mg之前、之后0h、2h各感染一批大劣按蚊；另取部分药前感染的大劣按蚊在感染后第3天和10．5天吸药血，另设一对照组吸正常猴血。各组实验蚊均在感染后第9天解剖蚊胃和第13天解剖涎腺，观察疟原虫在蚊体内发育情况。结果 药前组和药后0h组的蚊胃及唾腺感染阳性率均为100％，两组蚊胃卵囊平均密度、卵囊平均大小、子孢子平均感染度都无显性差异(P＞0．5)；药前组和药后2h组蚊胃卵囊平均密度有显性差异(P＜0．5)；大劣按蚊感染后第3天和10．5天吸药血组和吸正常血组，蚊胃卵囊平均密度、卵囊大小、子孢子平均感染度都无显性差异(P＞0．1，P＞0．5)。结论 青蒿琥酯对食蟹猴疟原虫在蚊体内的配子生殖、孢子增殖及子孢子进入唾腺无直接的抑制作用。     

食蟹猴疟原虫-斯氏按蚊系统猴疟模型的一些生物学特性和对常用抗疟药物的生物效应

本文证明在一定条件下,斯氏按蚊对食蟹猴疟原虫的感染率为77±0.15％;恒河猴易感性强,对照组的感染率非常稳定,用10~5个以上子孢子静脉接种恒河猴可100％获得感染,在食蟹猴疟原虫—斯氏按蚊系统猴疟模型上,常用抗疟药如乙胺嘧啶、伯喹显示有病因性预防作用。伯喹剂量达到     

猪尾猴疟原虫广西株在巴拉巴按蚊体内的发育

1、本文报告用巴拉巴按蚊感染猪尾猴疟原虫广西株获得十分满意的结果,胃感染率为100％,感染度极重,64.90％的阳性蚊胃卵囊数达500个以上。腺感染率为100％,且均为3～4度,尤以4度为多,占79.55％,故巴拉巴按蚊是广西株的良好媒介。 2、猪尾猴疟原虫广西株在巴拉巴按蚊体内完成孢子增殖的时间25℃时为12天,27℃时为11天,显较猪尾猴疟原虫的孢子增殖时间为短。 3、讨论了卵囊分化的时间、发育速度、卵囊最大体积和色素的排列型式,广西株虽与猪尾猴疟原虫其他虫株有所差别,这些差别仅为株的差异。     

食蟹猴疟原虫感染对大劣按蚊存活的影响

在疟疾的传播流行过程中,蚊媒寿命是个重要因素。因此,感染疟原虫对蚊寿命有无影响,成为不少学者关注的问题,但至今没有定论。1988年3～5月,笔者对感染食蟹疟原虫B株后大劣按蚊的存活情况进行了观察,以便了解我国南方某些地区的重要传疟媒介——大劣按蚊的媒介能量提供参考数据,并为食蟹猴症原虫B株——大劣按蚊系统这一重要实验模型的应用提供有益的资料。     

广西熊猴体内发现的一种疟原虫的研究

1975年在广西产的一只熊猴体内首次发现了一种自然感染的猴疟原虫,并对其形态和生活史进行了研究。一、这种猴疟原虫的红细胞内裂殖周期为72小时,其形态特征基本上与猪尾猴疟原虫相似。二、这种疟原虫不能感染雷氏按蚊;在斯氏按蚊体内能发育即卵囊分化,但迅即出现退变,不能完成孢子增殖;在巴拉巴按蚊体内发育良好,12天(25℃)完成孢子增殖。三、用阳性巴拉巴按蚊感染一只熊猴和4只恒河猴,原虫血症前期前者为8天,后者一致为9天。四、观察了这种猴疟原虫对恒河猴的感染过程。正常不切脾猴引起中等度感染;切脾猴则引起重度感染,感染猴出现严重贫血,甚至死亡。五、根据文献,对这种猴疟原虫与猪尾猴疟原虫进行了比较和讨论,认为这是猪尾猴疟原虫的一个株。     

食蟹猴疟原虫—斯氏按蚊系统猴模型的建立及应用于杀组织期抗疟药的实验研究

本文对食蟹猴疟原虫一斯氏按蚊(Plasmodium cynomolgi—Anopheles stephensi)系统猴实验模型的生物学特性、用于对杀组织期抗疟药的试验方法及该模型的实际应用进行了研究。初步证明5-对氟苯氧基伯喹等药物对食蟹猴疟原虫红细胞前期有杀灭作用,并证明此动物模型适用于组织期杀灭药的试验。     

猴疟B株感染后猴抗体水平与虫血症对蚊媒感染情况的观察

用食蟹猴疟原虫Ｂ株子孢子感染３只恒河猴，虫现前期分别是８、１０和１１ｄ，虫血症高峰时间在１４－２５ｄ，３只猴均有两个以上高峰，原虫密度波动于０．０３％－５９．６％。初次抗疟原虫抗体反应於感染后１３－１７ｄ测得，抗体高峰在感染后１６－２０ｄ。在虫血症显著期供４６批大劣按蚊血餐，获得好的感染蚊３０批，平均为１０批，好的感染蚊批的血餐时间分布在抗体滴度高峰期前为２３．３３＾，高峰期为３３．３３％，平均为     

亚致死剂量球形芽孢杆菌对按蚊传疟能力的影响

目的 探讨亚致死剂量球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus,Bs)对斯氏按蚊传疟能力的影响.方法 利用亚致死剂量Bs 2 362株处理斯氏按蚊Ⅳ龄幼虫,收集存活按蚊并常规饲养.正常对照组按蚊Ⅳ龄幼虫不进行Bs处理,常规饲养.对3～5d龄的斯氏按蚊成蚊进行约氏疟原虫攻击感染,并于按蚊吸血后第9天解剖蚊胃,观察卵囊的发育情况,比较分析Bs处理对斯氏按蚊传疟能力的影响.结果 正常对照组和Bs处理组按蚊对疟原虫的感染率分别为92.1％和97.6％,Bs处理组感染率高于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).Sigma 3.5统计软件分析显示,正常对照组和Bs处理组斯氏按蚊对疟原虫的感染度分别为(56.69±69.29)和(84.19 ±75.64),Bs处理组按蚊卵囊数量显著高于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 亚致死剂量Bs 2362株处理显著增加约氏疟原虫对斯氏按蚊的感染率和感染度,提高了按蚊的传疟能力.     

我国目前实验室内保有的食蟹猴疟原虫的生物学特征及对其株型的探讨

根据近十年来的实验研究资料,本虫株具有下列特征。外期:形态不规则,第7天胞质内可出现液泡,分叶,第8天成熟,同一天末即可在周围血流内找到原虫。复发率为60％左右。内期:喜入侵晚期网织红细胞(Ⅳ期);血传感染持续期较长,可长达6年以上。孢子增殖期:在巴拉巴按蚊、斯氏按蚊及雷氏按蚊体内都能完成孢子增殖,但巴拉巴按蚊为最适宜蚊种,在雷氏按蚊体内发育不良,黑孢子形成率可高达42.3％;巴拉巴按蚊体内,子孢子最早可于7.5天进腺。卵囊园形或椭园形,其最大径未超过60微米。根据上述特点,与本疟原虫的各虫株进行了比较。初步认为本虫株可能属于柬埔寨株。对虫株的复发特性及血传感染持续期之长进行了讨论分析。     

猪尾猴疟原虫广西株慢性感染期对蚊媒感染性的研究

用猪尾猴疟原虫广西株感染猕猴，Ｍ１猴于接种后第３８０－４８７天期间，每天感染一批蚊媒，７２ｄ获阳性，阳性日可连续１５－３２ｄ，蚊媒感染率最高达６６．６％。Ｍ２猴于接种后第６７５－８４０天，原虫血症复燃６次，每次连续感染蚊媒３ｄ，１７批蚊媒均阳性，其中４次蚊媒感染率达９０％－１００％。     

抗生素对重组约氏疟原虫BY265株感染斯氏按蚊的影响

目的 探讨抗生素对斯氏按蚊感染重组约氏疟原虫BY265-GFP株的影响.方法 在疟原虫感染斯氏按蚊前后分别饲含抗生素的糖水,分别于7 d、16 d观察蚊胃卵囊和唾液腺子孢子情况.结果 饲加入抗生素糖水组蚊胃感染度和感染率、唾液腺子孢子数量明显高于对照组.结论 抗生素可提高重组约氏疟原虫对斯氏按蚊的感染能力.     

营养对约氏疟原虫在斯氏按蚊体内孢子增殖的影响

斯氏按蚊感染约氏疟原虫后,饲以10％的蔗糖水加入适量之对氨苯甲酸(PABA)并增加一次血餐,可促进疟原虫在蚊体内之发育。表现为:卵囊数较单饲以10％蔗糖水的对照组高出近一倍,卵囊发育较快,在第七天测量卵囊平均直径大于对照组。在24℃左右子孢子于第八天开始进腺,较对照组提早一天。腺感染率在第14天实验组达82％,对照组则为63.5％。     

温度对斯氏按蚊传疟能力的影响及分子机制初探

目的 研究环境温度对按蚊传疟能力的影响,并通过比较分析不同温度下斯氏按蚊天然免疫关键分子TEP1转录水平,初步探讨相关分子机制,为气候变化对疟疾传播和流行的影响提供理论依据。 方法 本研究利用斯氏按蚊-约氏疟原虫动物模型,分别在24 ℃和28 ℃的环境温度下利用约氏疟原虫感染斯氏按蚊,感染后9 d解剖蚊中肠,荧光显微镜下观察疟原虫卵囊发育情况并计数,比较不同温度条件下疟原虫感染率和感染度。然后,利用荧光定量PCR方法比较不同温度条件下,感染前后不同时间点的斯氏按蚊TEP1分子的转录水平。 结果 在24 ℃的环境温度下,斯氏按蚊的感染率为91.7%,感染度为(403.9 ± 37.09)个/蚊。在28 ℃的环境温度下,斯氏按蚊的感染率为38.8%,感染度为(38.63 ± 13.91)个/蚊。24 ℃组的按蚊感染率和感染度均显著高于28 ℃组（P<0.001）。于吸血感染当天但尚未吸血时和吸血感染疟原虫后的第5天、第7天及第9天,斯氏按蚊的TEP1转录水平在28 ℃的条件下均高于24 ℃,提示斯氏按蚊TEP1参与的感染前基础免疫力和疟原虫感染中后期的免疫杀伤力28 ℃组均高于24 ℃组。结论 环境温度对按蚊传疟能力的影响较大,24 ℃较28 ℃的环境更适宜于约氏疟原虫感染斯氏按蚊;TEP1参与的天然免疫反应可能是温度对按蚊传疟能力影响的原因和分子机制之一。     

硝喹治疗食蟹猴疟前后猴抗体水平

用间接荧光抗体技术系统地观察了五只恒河猴感染食蟹猴疟原虫并经硝喹或氯喹治疗后抗疟虫原抗体的动态变化。另外一只未经治疗的带虫猴作为对照。4只恒河猴接种子孢子,虫血症前期都是8天,在虫血症的第五天开始治疗:2只用复方硝喹,2只用氯喹基质。另一只恒河猴(4号)为再次感染,血传接种,虫血症前期2天,在感染后25天用复方硝喹治疗。各猴在开始服药后48～144小时内原虫消失。4只接种子孢子的恒河猴的初次抗体反应,在虫血症的第3—11(平均9)天测到;血传感染的4号猴在虫血症的第7天测到。5只恒河猴首次抗体高峰在感染后19—33(平均24)天测到。子孢子接种各猴的最高抗体水平分别为1:40和1:160。血传接种且虫血症期较长(27天)的4号猴,其最高抗体水平为1:640。经硝喹或氯喹治疗后,各猴上升后的抗体分别在感染后26—63(平均36)天开始下降。经硝喹治疗、无原虫复燃的两只恒河猴,抗体分别在感染后310天及373天转阴;经硝喹治疗而有原虫复燃的一只恒河猴,复燃后抗体水平从已下降到1:20上升到1:80,此水平比首次高峰高一个倍比稀释度,并至观察朋末(464天),抗体仍维持在阳性低水平。     

硝喹(Nitroquine)阻断鸡疟原虫孢子增殖机制的研究

抗疟药硝喹对鸡疟原虫、食蟹猴疟原虫、间日疟原虫及恶性疟原虫的孢子增殖均有明显的阻断作用。这种作用主要表现为:当宿主服硝喹后若干小时至数天后,其血中配子体在蚊媒体内,虽然仍有可能发育成卵囊,但这种卵囊感染率及感染度均远较对照组为低;而且这种卵囊的发育均受到明显的抑制,最后都退变死亡。至于硝喹通过什么机制抑制卵囊的     

血传、蚊传保种对约氏疟原虫毒力的影响及对其机制的探讨

本实验以同一来源的约氏疟原虫经血传和蚊传两种方式在小鼠及斯氏按蚊体内传代,观察了其毒力的变化,并对毒力变化的机制进行了探讨。蚊传保种的疟原虫感染小鼠死亡率为13.89％～22.73％,而血传保种疟原虫感染的小鼠10天内全部死亡。长期血传的原虫经一代蚊传感染鼠死亡率降为0％～15％。长期蚊传的原虫连续3代血传感染鼠死亡率达100％。长期血传的疟原虫改嗜成熟红细胞,引起脑部病变。切除脾脏、破坏胸腺不能阻止脑病变的发生。脾脏对鼠疟原虫毒力株无选择作用。     

疟原虫卵囊——子孢子体外培养初步研究

本文通过对约氏疟原虫约氏亚种及鸡疟原虫卵囊体外培养的研究,初步探讨了有关卵囊体外培养的条件。在修改的 M-Mc_3培养基中加入了某些氨基酸亚适当提高了培养基的渗透压,结果有一定促进作用。约氏疟原虫8天卵囊经体外培养3天后,鸡疟原虫7天卵囊体外培养4天后均形成形态成熟的子孢子。本实验还探索了污染的控制问题。结果表明在相同消毒方法处理下,斯氏按蚊与白纹伊蚊蚊胃的污染率不同,前者明显高于后者,其原因尚待进一步探讨。     

针刺治疗猴疟的初步实验观察

感染食蟹猴疟原虫的恒河猴16只,11只行针刺或电针治疗,取穴为大椎、陶道、间使等,5只为对照。结果针刺猴、对照猴均无1例外周血中原虫转阴,亦未见针刺有明显的抑虫作用。部分实验猴感染前后及针刺前后的 IgG、IgM 和体外 PHA 淋巴细胞转化试验亦无显著性差异。     

蚊血细胞对正常和退变之约氏疟原虫卵囊的反应及其在卵囊黑化中之作用

感染约氏疟原虫之斯氏按蚊，饲以1％二氟甲基鸟氨酸，使卵囊发生退变，第11天电镜下分别观察退变卵囊及对照组正常发育之卵囊外周血细胞之反应。结果表明，对照组中正常发育卵囊之周围无明显血细胞反应，但个别退变卵囊有血细胞趋附；用药组中卵囊均呈不同程度之退变，有的已开始黑化，其周围均有一个或多个血细胞，均属颗粒类细胞。血细胞胞浆内及血细胞与卵囊之间均有许多具微管结构之颗粒，提示卵囊退变后可诱使血细胞趋附，后者并可释放颗粒物质或许还有他种物质，促使包被卵囊和黑化卵囊。