经轻胶囊对动情后期高雌大鼠血清雌二醇、孕酮的影响

目的观察经轻胶囊对动情后期高雌抑郁模型雌大鼠血清雌二醇(E2)、孕酮(P)的影响。方法通过在动情期外源性的给予雌大鼠高剂量的雌激素,以期模拟经前的高雌激素状态,观察经轻胶囊对实验动物血清E2、P影响。结果中药经轻胶囊可以降低实验鼠过高的阴道角化细胞指数,降低大鼠血清E2、E2/P。结论经轻胶囊能够改善经前抑郁可能与其能够调节雌、孕激素含量及E2/P有关。     

经前平颗粒对PMS肝气逆证大鼠海马5-HT受体表达的影响

目的:通过观察经前平颗粒对中枢神经递质受体亚型的表达,探讨中药治疗情志障碍及经前期综合征(PMS)的微观机制。方法:PMS肝气逆症大鼠模型分别给予不同药物,连续4个月经周期,免疫组化法检测海马5-HT1A受体、5-HT2受体阳性细胞。结果:经前平颗粒能缓解焦虑症状,并使模型大鼠海马5-HT1A受体阳性细胞率明显增多(P<0.05),5-HT2受体阳性细胞率显著减少(P<0.05)。结论:中药经前平颗粒可通过调节中枢5-HT1A和5-HT2受体的表达,治疗与PMS有关的情志障碍。     

经轻胶囊对肝郁雌性大鼠神经递质作用的实验研究

目的:研究经轻胶囊治疗肝郁证大鼠的作用机制。方法:将雌性SD大鼠随机分为正常组、模型组、经轻胶囊组,每组10只。除正常组外的大鼠用绷带束缚大鼠四肢,外加束缚桶进行造模。观察各组大鼠一般情况、阴道脱落细胞,并用荧光分光光度法检测大鼠中枢单胺类神经递质NE、DA、5-HT的含量。结果:与正常组大鼠比较,模型组大鼠的一般情况变差,体重减轻,NE、DA的含量明显升高。与模型组比较,经轻胶囊组大鼠的一般情况明显好转,NE、DA的含量明显降低。3组大鼠之间,5-HT的含量无明显差异。结论:经轻胶囊能降低NE、DA的含量,这可能是其治疗肝郁证的作用机制。     

岩鹿乳康胶囊对乳腺增生大鼠乳腺组织及雌孕激素受体表达的影响

观察岩鹿乳康胶囊对乳腺增生大鼠乳腺组织及雌孕激素受体表达的影响,探讨其治疗乳腺增生的作用机制。方法用肌内注射外源性苯甲酸雌二醇及黄体酮的方法复制大鼠乳腺增生模型,观察各组大鼠乳腺组织变化,用免疫组织化学法检测雌激素受体亚型（ERα、ERβ）和孕激素受体（PR）的表达水平。结果岩鹿乳康胶囊能减少实验大鼠乳腺导管上皮细胞层数和腺泡数,同时降低乳腺组织ERα、PR的表达提高ERβ的表达,抑制乳腺组织增生。结论岩鹿乳康胶囊对大鼠乳腺增生具有抑制作用,其治疗机制可能与上调ERβ,下调ERα、PR 的表达有关。     

龟鹿二仙胶对创伤后应激障碍模型大鼠行为学及海马GR、5-HT受体表达的影响

目的:观察龟鹿二仙胶对创伤后应激障碍(posttraumatic stress disorder,PTSD)模型大鼠行为学,海马糖皮质激素受体(glucocorticoid receptors,GR)及5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)受体1A亚型(5-HT1A)、2A亚型(5-HT2A)表达的影响。方法:采用单一延长刺激方法制作大鼠PTSD模型,通过旷场实验、拒俘反应实验以及Morris水迷宫实验观察大鼠的情感行为和学习记忆能力的改变。采用RT-PCR法检测海马GR、5-HT1A和5-HT2A受体表达。结果:PTSD大鼠表现出多种情感行为障碍,学习能力显著降低(P0.01)。海马GR表达增强(P0.01),5-HT1A受体表达下降(P0.05),5-HT2A受体表达则升高(P0.05)。龟鹿二仙胶(2.025 g·kg~(-1))和淫羊藿总黄酮(0.06 g·kg~(-1))能显著改善PTSD大鼠的情感行为障碍,提高学习记忆能力(P0.05或P0.01)。龟鹿二仙胶(2.025 g·kg~(-1))和淫羊藿总黄酮(0.06 g·kg~(-1))可以明显降低PTSD大鼠海马GR的表达水平,升高5-HT1A受体表达水平和降低5-HT2A受体表达水平(P0.05或P0.01)。结论:龟鹿二仙胶对PTSD具有良好的干预治疗作用,其作用机理与改善情感行为和认知功能以及调节海马GR、5-HT1A和5-HT2A受体表达有关。     

四逆散活性成分对慢性应激诱导的抑郁症模型大鼠大脑皮层与海马5-HT1A受体mRNA表达的影响

目的研究慢性应激所造成的抑郁症模型大鼠在四逆散活性成分治疗后皮层与海马5-HT1A受体mRNA表达数量的变化.方法采用原位杂交方法分析5-HT1A受体mRNA表达的数量,以探讨四逆散活性成分抗抑郁机制.结果慢性应激所造成的抑郁症模型大鼠海马与皮层5-HT1A受体mRNA表达数量明显下降(P＜0.01),四逆散活性成分能显著升高海马5-HT1A受体mRNA表达数量(P＜0.01),对皮层的5-HT1A受体mRNA表达数量也有升高(P＜0.05).结论调节5-HT1A受体mRNA的表达数量是四逆散活性成分的抗抑郁机制之一.     

去势大鼠体温改变与下丘脑视前区5-HT2A受体表达

目的观察大鼠去势后体温改变与下丘脑视前区5-羟色胺2A（5-HT2n）受体亚型表达之间的关系。方法用数字温度计TM902C检测大鼠的肛温，酶联免疫吸附试验测定血清激素水平，根据5HLn受体互补DNA序列合成相应的特异性引物，用PCR法观察大鼠去卵巢后下丘脑视前区5-HT2n受体表达。结果①大鼠去势组（OVX）白第八周末肛温明显高于假去势（sham）组（P〈0．05）。②OVX组大鼠血清17β-雌二醇（17β-estradiol，E2）较sham组下降，LH水平升高，差异显著（P〈0．05）。③OVX组下丘脑视前区5-HT2A受体表达增强，与sham组比较有显著性差异（P〈0．05）。结论大鼠卵巢摘除后体温升高，下丘脑视前区5-HT2A受体表达增强，提示5HT在低雌激素状态下的体温升高调节中起一定作用。     

壬基酚对大鼠5-羟色胺及其2A受体的影响

目的 观察壬基酚(NP)对大鼠血浆和尿液中5-羟色胺(5-hydroxy tryptamine,5-HT)及血小板中5-HT和5-HT2A受体含量的影响,探讨壬基酚对大鼠5-HT和5-HT2A受体影响的毒效应机制。方法 将24只SD雄性大鼠分为阴性对照组和NP低、中、高剂量组[30、90、270mg/(kg·d)],隔日灌胃染毒28d后检测大鼠血浆中5-HT、血小板中5-HT和5-HT2A受体含量,并检测灌胃后收集到的24h尿液中5-HT的含量。结果 染毒28d后,随NP暴露的剂量增加,各组大鼠血浆、血小板及尿液中5-HT含量升高,血小板中5-HT2A受体表达则下降。NP暴露中、高剂量组大鼠血浆及血小板中5-HT含量均高于对照组(P<0.01;P<0.01),NP暴露高剂量组大鼠血小板5-HT2A受体表达低于对照组(P<0.01)。第4~28天,NP暴露低、中、高剂量组大鼠的尿液5-HT含量均高于对照组(P<0.01)。结论 NP暴露剂量与大鼠血小板5-HT、5-HT2A受体及血浆和尿液中5-HT含量均呈剂量-效应关系,提示NP通过影响大鼠5-HT水平和5-HT2A受体表达而产生毒效应。     

三苯氧胺对鼠乳腺雌、孕激素受体状况的影响

目的 探讨三苯氧胺(TAM)对大鼠乳腺雌、孕激素受体(ER、PR)受体状况的影响。方法 采用外源性雌激素，复制乳腺增生动物模型，分别设置空白对照(A)组、药物对照(B)组、5倍(C)组、10倍(D)组、15倍(E)组、20倍(F)组治疗剂量TAM组。实验30d后取大昆乳腺用SP法检测ER、PR状况。结果 20倍剂量TAM的ER、PR的阳性率明显低于药物对照组。结论 实验结果提示，较大剂量的TAM有下降ER、PR表达的作用。     

术芍易激胶囊对腹泻型肠易激综合征模型大鼠结肠黏膜5-HT和5-HT_3R表达的影响

目的 观察术芍易激胶囊对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)模型大鼠结肠黏膜5-羟色胺(5-HT)和5-羟色胺3受体(5-HT3R)的表达的影响.方法 将48只SD雌性大鼠随机分为正常组、模型组、得舒特组和术芍易激胶囊高、中、低剂量组,分别予生理盐水、得舒特、术芍易激胶囊灌胃2周.取大鼠结肠黏膜一块,以免疫组化方法检测5-HT和5-HT3R的表达.结果 与模型组比较,术芍易激胶囊各剂量组容量阈值增加(P＜0.01),5-HT和5-HT3R的表达明显降低(P<0.01),尤以术芍易激胶囊高剂量组为优.结论 术芍易激胶囊能抑制D-IBS模型大鼠结肠黏膜5-HT和5-HT3R的表达,可能通过进一步影响肠道动力学和肠道敏感性来实现其治疗作用.     

帕罗西汀对心理应激大鼠海马5-HT及C—fos表达的影响

目的观察帕罗西汀对心理应激大鼠海马5-HT及C—los表达的影响,以揭示帕罗西汀治疗心理应激引起焦虑的中枢作用机制。方法建立大鼠心理应激模型,观察各组旷场行为和海马5-HT、C—fos的表达。结果与正常对照组比较,各应激组大鼠旷场活动明显增多,海马c—fos表达显著增加,5-HT表达减少,而帕罗西汀给药能减少应激大鼠旷场活动,下调海马c—fos表达,增加5-HT表达。结论帕罗西汀可能是通过下调海马c—los的表达,增加了海马5-HT表达,保护了海马的功能,从而发挥了中枢抗焦虑作用。     

电针印堂、百会对获得性无助大鼠不同脑区内单胺类神经递质的影响

电针针刺抑郁模型大鼠印堂、百会穴,探讨针刺治疗抑郁症的机制并探索抑郁症对神经系统的影响.应用韩氏电针仪簇形波,频率10 Hz,强度使动物不挣扎嘶叫保持安静,20 min/ d针刺获得性无助大鼠的印堂、百会穴,连续治疗4 d后取大鼠下丘脑、海马及前额叶皮层,应用高效液相电化学检测仪检测单胺类神经递质.结果显示:电针印堂、百会穴后,增加了获得性无助大鼠下丘脑5-羟色胺(5-HT)、降低下丘脑5-羟吲哚乙酸(5-HIAA); 说明电针印堂、百会穴对抑郁症的调节机制可能与影响下丘脑内5-HT和5-HIAA的代谢有关.     

小鼠双侧杏仁核去5-HT支配后的抑郁样行为学变化及杏仁核内FosB／△FosB的异常表达

目的探讨双侧杏仁核去5-羟色胺（5-HT）支配后小鼠的行为学变化,投射到杏仁核的5-HT能神经纤维的精确来源以及杏仁核神经元的异常功能活动,为验证杏仁核-中缝核群5-HT在抑郁症发病机制中的联系提供实验资料。方法雄性昆明小鼠32只,随机分为对照组和实验组,每组各16只,应用脑立体定位注射技术向双侧杏仁核注射5,7-双羟色胺（5,7-DHT,5μg／侧）,悬尾实验和强迫游泳实验检测抑郁行为;脑石蜡切片H—E染色检测5-HT能投射神经元的位置;脑冰冻切片免疫组织化学染色检测杏仁核FosB／AFosB的表达。结果①行为学检测：实验组小鼠强迫游泳无动时间和悬尾无动时间较对照组显著减少（P〈0．01）;②H—E染色：实验组小鼠中缝背核尾侧份与中缝正中核嘴侧份的部分神经元胞体皱缩变形,胞质呈深紫伊红色染色,尼氏小体溶解或消失,胞核缩小或消失;③免疫组织化学染色：FosB／△FosB阳性神经元在实验组小鼠杏仁核明显增多,与对照组相比差异显著（P〈0．01）。结论杏仁核的5-HT能纤维投射主要来自中缝背核的尾侧和中缝正中核的嘴侧;单独的杏仁核去5-HT支配即可引发小鼠产生抑郁样行为;杏仁核内的即早基因FosB／△FosB在抑郁样行为形成的相关精神病理学机制中占有重要地位。     

5-羟色胺及其受体与抑郁症

抑郁症作为情感性精神障碍性疾病具有高患病率、高自杀率和低治疗率等特点,其神经生物学机制远未阐明。目前一线抗抑郁药主要基于"单胺策略"而研发,主要包括单胺重摄取抑制剂、单胺氧化酶抑制剂和单胺受体配体药物等。尽管效应明确,但也存在有效率不高、起效延迟等较严重缺陷。长期研究证实,抑郁症与5-羟色胺(5-HT)神经系统功能低下密切相关(经典单胺假说);现代单胺理论认为,5-HT及其单胺自身受体(如5-HT1A等)的适应性和可塑性调节与抑郁症治疗密切相关。近些年对5-HT及其转运蛋白和受体研究取得了系列进展,如对5-HT转运体连锁区域中短(S)等位基因在情绪及认知方面积极作用的发现,5-HT相关受体新拮抗剂或激动剂药理学作用的发现等。5-HT能药物研究也取得了重要突破(如2011年在美国上市的5-HT1A部分激动和5-HT重摄取抑制双靶标新药维拉唑酮)。本文就近年来5-HT神经调节与抑郁症之间关系研究的相关进展进行综述。     

山楂水提物对肠易激综合征大鼠结肠黏膜5-HT和5-HT3R表达的影响

目的：探讨山楂水提物对肠易激综合征（IBS）大鼠结肠黏膜5-HT和5-HT3R的影响,探讨其改善消化功能的作用机制。方法：采用乳鼠结肠PTCA球囊刺激法复制IBS大鼠模型。随机分为模型组、空白组、西沙必利组、山楂水提物高、中、低剂量组,给药2周后,应用免疫组化法检测大鼠结肠黏膜5-HT和5-HT3R表达变化。结果：与空白组比较,模型组大鼠结肠黏膜5-HT和5-HT3R水平显著升高,差异有统计学意义（P〈0．01）;给药组大鼠5-HT和5-HT3R的表达明显降低（P〈0．01;P〈0．05）。结论：山楂水提物可抑制IBS模型大鼠结肠黏膜5-HT和5-HT3R的过分表达,从而改变肠道敏感度,达到改善肠道消化功能作用。     

自制“清源调脂胶囊”作用机理的研究

目的:研究自制"清源调脂胶囊"的制血与作用机理。方法:选大鼠建立模型并设对照组与治疗组进行"清源调脂胶囊"对高脂血症大鼠低密度脂蛋白受体基因表达影响的实验研究和治疗高脂血症性脂肪肝实验研究及大鼠实验性动脉粥样硬化形成影响的研究。结果:"清源调脂胶囊"能降低大鼠血总胆固醇TC、TG、LDE-C水平,并对动脉粥样硬化早期病变产生明显的抑制作用,还能有效改善肝脏脂肪沉积,对高脂血症性脂肪肝有显著治疗作用。结论:清源调脂胶囊可用于治疗和改善高脂血症。     

5-HT_(1B/1D)受体亚型在大鼠三叉神经节及肺动脉表达差异性研究

目的 :研究大鼠三叉神经节与肺动脉 5 - TH1 B/1 D受体亚型基因表达 ,探讨肺动脉高压的 5 - HT受体机制。方法 :应用 RT- PCR技术研究 5 - HT1 B和 5 - HT1 D受体基因在大鼠三叉神经节及肺动脉的表达。结果 :5 - HT1 B和 5 -HT1 D受体 m RNA在大鼠三叉神经节均有表达 ,而在大鼠肺动脉只检测到 5 - HT1 B受体 m RNA,且其表达水平在慢性肺动脉高压大鼠肺动脉明显高于正常大鼠肺动脉。结论 :5 - HT1 B和 5 - HT1 D受体在大鼠三叉神经节和肺动脉的分布存在差异 ;慢性肺动脉高压大鼠肺动脉 5 - HT1 B受体 m RNA表达水平增高     

Research of Quercetin’s Estrogen-Like Action on Central Nervous System and Its Mechanisms

目的：大量临床和流行病学数据表明,女性更年期雌激素水平下降可能诱发阿尔茨海默病（Alzheimer's disease,AD）,雌激素有提高神经元活力和减少Aβ聚集的作用,可通过多种方式对神经元发挥保护作用。但绝经后妇女的临床试验数据显示,雌激素疗法存在不良反应,使其临床应用受限。植物雌激素（Phytoestrogen）与雌激素化学结构类似,被称为选择性雌激素受体调节剂,具有雌激素样神经保护作用,同时减轻因雌激素替代疗法产生的副作用。研究表明,槲皮素（quercetin,Que）作为植物雌激素,对大脑缺血再灌注、β-淀粉样蛋白和重金属导致的神经元损伤都具有一定的保护作用。本课题组的前期研究也证实槲皮素可以通过结合雌激素α受体表现出雌激素样作用,促进人乳腺癌MCF-7细胞系的增殖。此研究延续前期研究,继续探讨槲皮素雌激素样作用对脑神经元的保护作用及其作用机制。方法：利用原代培养的大鼠海马神经元细胞、皮层神经元细胞,以及老化的Aβ25-35处理的PC12细胞,分别观察使用不同浓度的槲皮素进行药物干预24小时的作用。通过MTT实验检测槲皮素对神经元、PC12细胞活性的影响;通过免疫荧光染色比较槲皮素对海马、皮层神经元突触形态的影响;通过蛋白免疫印迹法检测PC12细胞模型中相关受体和蛋白的表达变化。并通过使用雌激素受体拮抗剂ICI182,780、雌激素受体α拮抗剂MPP和雌激素受体β拮抗剂PHTPP,深入探讨槲皮素发挥雌激素样神经保护作用的机制。结果：MTT实验结果显示,槲皮素可以提高大鼠海马神经元的活性（P<0.05）,且槲皮素对海马神经元的保护作用呈剂量依赖性增加。在低密度海马神经元中25μmol•L-1槲皮素对海马神经元有保护作用（P<0.05）。当雌激素受体拮抗后,50μmol•L-1槲皮素仍能提高海马神经元细胞的活性（P<0.05）,延长作用时间后三组不同浓度的槲皮素都可以提高海马神经元的活性。在PC12细胞的研究中,随着Aβ25-35作用浓度的增加,细胞活力所受抑制程度逐渐加强,与对照组相比Aβ25-3510μmol•L-1作用细胞24h后能够显著降低细胞存活率（P<0.01）。与模型组相比,三个不同浓度的槲皮素组的细胞存活率均显著增强（P<0.05）。免疫荧光染色结果显示,槲皮素可以提高海马神经元的突触数目和长度（P<0.05）,促进突触发生。槲皮素（50,100μmol•L-1）组明显促进皮层神经元突触形成,大部分神经元胞体饱满,神经元突触明显增粗,增长并连接成致密的神经网络。雌激素受体完全拮抗后,槲皮素仍可提高海马神经元的突触数目和长度（P<0.05）。槲皮素可以提高雌激素受体β拮抗后海马神经元的突触数目和长度,高于雌激素受体α拮抗（P<0.05）。Western blot结果显示,槲皮素可以提高雌激素受体α蛋白的表达。与模型组相比,槲皮素提高ERα和p-ERK1/2蛋白表达量（P<0.05）,对于ERβ蛋白表达量虽有增加但无显著性差异（P>0.05）。并且在PC12细胞实验中,Western blot结果显示,实验组凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax表达比值增加,Caspase-3蛋白表达下降（P<0.05）。当槲皮素雌激素受体受到ICI182,780抑制后,p-ERK1/2蛋白表达下降（P<0.05）,Bcl-2/Bax比值下降及Caspase-3蛋白表达增加（P<0.05）。当U0126作用于槲皮素后,Bcl-2/Bax比值下降及Caspase-3蛋白表达增加（P<0.05）。结论：槲皮素可上调雌激素受体α蛋白的表达,增加神经元突触的数目及长度,促进突触的生长及发生,从而改善神经元细胞的生长率和存活率,对大鼠海马和皮层的神经元发挥保护作用;槲皮素对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤的AD模型也具有保护作用,主要提高雌激素受体α蛋白的表达,通过经典的雌激素受体通路发挥其雌激素样神经保护作用,并可通过ERα介导激活MAPK信号通路,减轻凋亡。因此,槲皮素雌激素样作用对脑神经元和拟AD损伤具有保护作用,主要作用机制与调控雌激素受体α有关,并可影响ERα介导的MAPK信号通路。     

慢波睡眠的药理学研究

睡眠有３种成分：浅睡眠、慢波睡眠（ｓｌｏｗｗａｖｅｓｌｅｅｐ,ＳＷＳ）和快眼动睡眠。提出催眠药物开发新构想,即ＳＷＳ是最重要的睡眠成分,选择性增加深睡眠的催眠药物最重要,它将对改善失眠,辅助治疗焦虑症、抑郁症和痴呆症具有重要意义。近十年研究进展包括：（１）腹外侧视前区结节乳头体可能是睡眠觉醒的中枢发生部位。基底前脑吻端ｐＧＤ２敏感性睡眠促进区参与睡眠调节;（２）生长激素释放激素、褪黑激素、ｐＧＤ２、ＩＬ１和腺苷均可增加ＳＷＳ。本系神经药理研究室关于ＳＷＳ的研究工作包括：（１）建立起家兔和大鼠睡眠成分自动分析系统（ａｕｔｏａｎａｌｙｓｉｓｓｌｅｅｐｉｎｇｓｔａｇｅｓｓｙｓｔｅｍｓ,ＡＳＳ）;（２）利用ＡＳＳ研究了免疫增强剂如转移因子、胞壁酰二肽、肿瘤坏死因子,以及５ＨＴ１Ａ受体激动剂和５ＨＴ２受体拮抗剂对睡眠成分的影响;（３）探讨５ＨＴ１Ａ受体、ＲＥＭ睡眠和５ＨＴ２受体间的关系。近十年睡眠调节的研究进展证明“构想”的可行性和正确性,并提示,在中枢可能存在免疫增强ＴＮＦ增多５ＨＴ更新率增加ＳＷＳ途径。激动５ＨＴ１Ａ自身受体与拮抗５ＨＴ２受体有类似效果,二者间有协同作用。开发选择性延长