富集AT序列的特异性结合蛋白1通过激活核糖核苷酸还原酶#br# 小亚基M2促进非霍奇金淋巴瘤的恶性进展

目的：探讨富集AT序列的特异性结合蛋白1(special AT rich sequence binding protein-1,SATB1)与核糖核苷酸还原酶(ribonucleotide reductase,RR)小亚基M2(RRM2)在非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin lymphoma,NHL)恶性进展中的相互作用机制。方法：收集NHL及慢性淋巴结炎患者各42例。Western印迹检测NHL及慢性淋巴结炎患者颈部淋巴结冰冻组织中的SATB1和RRM2的蛋白表达水平;RT-PCR检测过表达和干扰SATB1后RRM2 mRNA的表达水平的变化;MTT及EdU渗入法检测过表达SATB1及同时干扰RRM2后对细胞生长增殖的影响。Transwell法检测过表达SATB1及同时干扰RRM2后对细胞迁移和侵袭的影响。结果：NHL患者淋巴结冰冻组织中SATB1及RRM2表达水平明显高于慢性淋巴结炎患者,且两者的表达水平呈正相关。过表达SATB1后,RRM2蛋白和mRNA的表达水平上调;干扰SATB1后,RRM2蛋白和mRNA的表达水平下降。MTT及EdU检测结果表明过表达SATB1后NHL细胞生长增殖能力增加,而同时干扰RRM2后生长增殖能力受到抑制。Transwell结果表明过表达SATB1后NHL细胞迁移侵袭能力增加,而同时干扰RRM2后迁移侵袭能力受到抑制。结论：SATB1在NHL中高表达,其可能通过上调RRM2基因的表达促进NHL的生长增殖、迁移和侵袭。     

基于Wnt/β-链蛋白信号通路观察高糖环境对大鼠下颌骨骨髓基质细胞增殖的影响

目的 观察高糖环境对大鼠下颌骨骨髓基质细胞增殖的影响,并结合Wnt/β-链蛋白信号通路初步探讨高糖对骨髓基质细胞增殖的影响。方法 从Wistar大鼠下颌骨中分离培养骨髓基质细胞,分别给予不同糖浓度(5.5和16.5 mmol/L)干预,采用噻唑蓝法观察骨髓基质细胞1、3、5、7 d时的增殖情况,采用流式细胞仪对高糖干预5 d细胞进行细胞周期检测,Western免疫印迹检测5 d时β-链蛋白和细胞周期蛋白D1的表达,实时定量多聚酶链反应检测淋巴增强因子-1和细胞周期蛋白D1的mRNA表达。结果 噻唑蓝法检测结果显示,1 d骨髓基质细胞在两种糖浓度中的光密度值差异无统计学意义(P=0.700),3、5、7 d时16.5 mmol/L组的细胞光密度值显著低于5.5 mmol/L组(P=0.006,P=0.002,P=0.003)。5 d的细胞周期结果显示,与5.5 mmol/L组细胞相比,16.5 mmol/L组细胞可以抑制细胞从G1期向S期转化,16.5 mmol/L组细胞的增殖指数显著低于5.5 mmol/L组(P=0.014)。与5.5 mmol/L组相比,16.5 mmol/L组细胞明显抑制β-链蛋白的表达,同时Wnt/β-链蛋白通路中淋巴增强因子-1 mRNA及下游细胞周期蛋白D1 mRNA和蛋白的表达也受到明显抑制。结论 高糖环境可以通过抑制Wnt/β-链蛋白信号通路中关键因子β-链蛋白、淋巴增强因子-1及下游与细胞增殖相关靶基因细胞周期蛋白D1的表达,进而抑制骨髓基质细胞的增殖。     

促血管生成素-1对人胃癌细胞黏附和转移作用的研究

目的:探讨促血管生成素-1(Ang-1)对人胃癌细胞中整合素β1(integrin β1)和CD44V6的作用,研究其对肿瘤细胞黏附和转移的影响及可能的作用机制. 方法:利用腺病毒为载体,将已构建成功的、含Ang-1基因的重组腺病毒(Ad-Ang-1)瞬时转染人胃癌细胞株BGC-823,转染含绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒(Ad-GFP)作为阴性对照,未转染的正常细胞作为空白对照,用细胞黏附法检测转染前后细胞与细胞外基质黏附率的改变,再分别用半定量RT-PCR和Western blot方法对3组细胞中整合素β1和CD44V6的mRNA和蛋白表达水平进行分析. 结果:细胞黏附实验显示,转染Ad-Ang-1后,细胞与细胞外基质之间的黏附率明显增强(P<0.01);RT-PCR、Western blot结果显示整合素β1、CD44V6 mRNA和蛋白的表达在Ad-Ang-1组明显高于空白对照组及Ad-GFP组. 结论:转染Ang-1能明显提高人胃癌细胞BGC-823中整合素β1、CD44V6 mRNA、蛋白的表达,从而促进肿瘤细胞的黏附和转移.     

全反式维甲酸对骨髓基质细胞黏附功能及JWA基因表达变化的影响

目的探讨全反式维甲酸对骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells, BMSC)黏附功能及JWA基因表达的影响.方法全反式维甲酸(all trans retinoic acid, atRA)作用BMSC后,流式细胞仪检测BMSC细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1, ICAM-1)和血管黏附分子-1(vascular adhesion molecule-1, VCAM-1)的表达,检测共培养条件下BMSC细胞对Jurkat细胞的黏附率及Jurkat细胞生长曲线变化,RT-PCR方法检测BMSC JWA mRNA表达变化.结果 atRA作用后,BMSC表面ICAM-1、VCAM-1蛋白表达增加,BMSC对Jurkat细胞的黏附能力增强,并可促进Jurkat细胞增殖,BMSC内JWA-mRNA表达增强.结论 atRA可增强骨髓基质细胞黏附功能,并上调JWA基因表达.     

当归多糖对小鼠骨髓基质细胞黏附分子表达和黏附功能的影响

目的：研究当归多糖（APS）对小鼠骨髓基质细胞（BMSCs）生长、粘附分子ICAM-1和VCAM-1表达及其对骨髓单个核细胞黏附功能的影响．方法：观察APS对小鼠BMSCs消化时间的影响;MTT法检测APS对小鼠BMSCs增殖及对骨髓单个核细胞黏附功能的影响;流式细胞术检测APS对BM—SCs表面ICAM-1和VCAM-1表达的影响．结果：100,200mg／LAPS使BMSCs达80％贴壁后消化时间明显缩短（P〈0．05）;50,100mg／LAPS组BMSCs增殖能力较对照组增强（P〈0．05）;200,300mg／LAPS能使BMSCs表面ICAM-1表达降低,而50,100,200,300mg／LAPS均可使VCAM-1表达降低（P〈0．05）;体内注射APS后BMSCs表面ICAM-1和VCAM-1表达均降低（P〈0．05）;100,200,300mg／LAPS使小鼠BM．SCs对单个核细胞黏附率减弱（P〈0．05）．结论：APS能促进小鼠BMSCs增殖,降低其表面黏附分子ICAM-1和VCAM-1的表达,进而使小鼠BMSCs达80％贴壁后消化时间明显缩短,对骨髓单个核细胞的黏附率减弱．     

基质细胞衍生因子-1/CXCR4轴介导非霍奇金淋巴瘤肿瘤浸润的实验研究

目的探讨基质细胞衍生因子-1（SDF-1）及其受体CXCR4在非霍奇金淋巴瘤（NHL）中的表达及其与NHL肿瘤浸润的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测淋巴结和骨髓基质细胞中SDF-1α的表达,采用流式细胞术检测淋巴结和骨髓中淋巴瘤细胞CXCR4受体的表达,并采用Tranawell微孔隔离室实验检测淋巴瘤细胞在体外向重组人SDF-1α（rhSDF-1α）的趋化反应。结果侵犯骨髓的NHL患者骨髓淋巴瘤细胞和未侵犯骨髓的NHL患者骨髓单个核细胞表面CXCR4受体的表达均明显高于正常骨髓（84．10±12．12,72．76±8．73和33．20±7．73,P〈0．01）,而NHL患者来源于淋巴结的淋巴瘤细胞CXCR4的表达亦显著高于反应性增生淋巴结炎患者（101．04±21．89V834．81±9．90,P〈0．01）。此外,被淋巴瘤侵犯的骨髓基质细胞高表达SDF-1α,而未被淋巴瘤侵犯的骨髓及正常骨髓基质细胞表达SDF-1α低下,二者比较差异有统计学意义（P〈0．01）;且NHL患者淋巴结基质细胞SDF-la的表达高于反应性增生淋巴结炎患者（P〈0．01）。趋化实验发现三种不同来源的NHL患者淋巴结和骨髓的单个核细胞均能向rhSDF-1α发生趋化反应,且抗CXCR4单抗可明显抑制上述细胞的迁移。结论SDF-1／CXCR4生物学轴是介导NHL肿瘤侵袭的重要机制,CXCR4在淋巴瘤细胞表面以及SDF-1在淋巴瘤转移部位的同时高表达与NHL瘤细胞的转移和浸润密切相关。     

黄芪注射液对小鼠骨髓基质细胞黏附分子表达的影响

目的:观察黄芪注射液对小鼠骨髓基质细胞表面细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞间黏附分子-1(VCAM-1)表达的影响.方法:(1)小鼠骨髓基质细胞体外培养;(2)倒置相差显微镜动态观察、HE染色光镜及透射电镜观察小鼠骨髓基质细胞的形态;(3)MTT法检测黄芪注射液对骨髓基质细胞增殖的影响;(4)采用流式细胞术检测黄芪注射液对小鼠骨髓基质细胞表面VCAM-1和ICAM-1的表达.结果:(1)MTT法检测黄芪注射液浓度为400μg/mL和600μg/mL均可促进小鼠骨髓基质细胞增殖(P<0.05),且两种剂量组间比较无差异;(2)与对照组比较,黄芪注射液能够增加小鼠骨髓基质细胞表面VCAM-1和ICAM-1蛋白表达(p<0.05).结论:黄芪注射液能促进小鼠骨髓基质细胞的增殖及表面VCAM-1和ICAM-1蛋白的表达.提示黄芪注射液对造血微环境有改善作用.     

ppGalNAc-T2对胃癌细胞株SGC-7901生物学性能的影响

目的探讨多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶2（ppGalNAc-T2）对胃癌细胞株SGC-7901细胞性能的影响。方法构建ppGalNAc-T2RNA干扰真核载体（pSilenCircle-SiT2）、正义真核表达载体（pEGFP-C1-T2）及空载体（pEGFP-C1）,分别转染胃癌细胞株SGC-7901细胞。MTT法检测上述各组转染后细胞对SGC-7901细胞增殖的影响;细胞黏附和穿膜实验分别检测其黏附力和迁移力的变化;同时采用RT-PCR和Westernblot检测MMP2、MMP14、TGF-β1等与肿瘤细胞浸润、转移、增殖相关基因mRNA及蛋白的表达水平。结果转染正义真核表达载体的SGC-7901细胞,随着ppGalNAc-T2表达量的增加,细胞的生长增殖受到抑制,并对纤连蛋白、基质胶和透明质酸的黏附能力降低,但其侵袭迁移能力变化不明显;而转染ppGalNAc-T2RNA干扰载体的SGC-7901细胞,细胞生长最快。ppGalNAc-T2与肿瘤细胞相关因子TGF-β1、MMP2的mRNA表达水平成负相关,但对MMP14无明显影响,Western blot检测相关蛋白结果与mRNA表达水平基本一致。结论ppGalNAc-T2可影响胃癌细胞株SGC-7901细胞的增殖、黏附能力,并影响与肿瘤细胞浸润、转移、增殖相关基因mRNA及蛋白的表达水平。     

VEGF-C反义寡核苷酸对卵巢癌细胞SKOV3的黏附、侵袭能力的影响

目的:探讨VEGF-C反义寡核苷酸(VEGF-C,ASODN)对人卵巢癌细胞SKOV3黏附、侵袭能力的影响.方法:以VEGF-C基因编码区为靶点合成反义寡核苷酸,脂质体介导转染.MTT法检测卵巢癌细胞与细胞外基质黏附能力;利用transwell小室,检测卵巢癌细胞侵袭人工基底膜的能力;免疫组化法检测细胞中VEGF-C蛋白表达,western blot检测细胞中MMP-2蛋白表达.结果:与空白对照组及正义序列转染组相比,ASODN组对细胞外基质黏附率明显降低(P＜0.01),穿透重组基质膜数目明显下降(P＜0.01),细胞中VEGF-C、MMP-2蛋白表达明显下降(P＜0.01).结论:VEGF-C ASODN可明显抑制卵巢癌细胞体外实验中的黏附和侵袭能力,下调MMP-2的表达可能是其作用途径.     

GPR37在骨髓瘤细胞黏附介导的耐药中的作用及意义

目的：研究G蛋白耦联受体37（orphan G protein-coupled receptor 37,GPR37）在细胞黏附介导的多发性骨髓瘤细胞耐药过程中的表达变化及其生物学作用.方法：采用多发性骨髓瘤细胞株RPMI 8226与纤黏蛋白（fibronectin,FN）或骨髓基质细胞株HS-5共培养构建细胞黏附模型.Western Blot检测GPR37分别在悬浮和黏附状态的RPMI 8226细胞中的蛋白表达水平.钙黄绿素实验检测改变GPR37的表达对RPMI 8226细胞黏附的影响,并采用化疗药物多柔比星处理细胞,CCK-8试剂盒检测上述处理对RPMI 8226细胞活力的影响.结果：Western Blot结果显示GPR37在RPMI 8226细胞黏附模型中低表达.钙黄绿素实验结果显示RPMI 8226细胞过表达GPR37后其黏附能力显著降低.CCK-8实验结果表明GPR37过表达能显著增强RPMI 8226细胞对化疗药物多柔比星的敏感性.结论：GPR37可能通过影响骨髓瘤细胞与基质细胞的黏附能力从而影响其对化疗药物的敏感性.     

特异性下调GRP78基因表达对卵巢癌细胞耐药性的影响

目的:探讨RNA干扰技术沉默葡萄糖调节蛋白78（GRP78）基因对人卵巢癌细胞耐药性的影响,阐明GRP78基因沉默逆转肿瘤细胞耐药性的生物学机制。方法：构建pSilencerTM3.0-H1-GRP78 siRNA重组质粒,脂质体介导转染至SKOV3/DDP细胞;RT-PCR和Western blotting法检测GRP78基因的蛋白的表达;Western blotting法检测caspase-4和caspase-3蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡率。结果：转染GRP78 siRNA重组质粒的SKOV3/DDP细胞GRP78基因和蛋白表达较转染空质粒组明显降低(P<0.05);加用顺铂后,转染GRP78 siRNA重组质粒细胞组较未转染GRP78 siRNA重组质粒细胞组caspase-4和caspase-3表达明显增加(P<0.05),细胞凋亡率也明显增加(P<0.05)。结论：抑制GRP78基因表达能通过上调caspase-4和caspase-3表达及增加顺铂诱导的SKOV3/DDP细胞凋亡率,降低SKOV3/DDP细胞对顺铂的耐药性。     

人参皂苷Rg3抑制急性白血病骨髓基质细胞HIF-1α及VEGF的表达及其机制探讨

目的探讨人参皂苷Rg3对急性白血病骨髓基质细胞HIF-1α及VEGF表达的作用及其可能的机制。方法培养正常人及急性白血病患者的骨髓基质细胞,MTT法检测人参皂苷Rg3对正常及急性白血病骨髓基质细胞增殖的抑制作用;RT-PCR检测人参皂苷Rg3处理前后急性白血病骨髓基质细胞HIF-1α及VEGF mRNA表达的变化;Western blot、免疫荧光检测人参皂苷Rg3处理前后急性白血病骨髓基质细胞HIF-1α、VEGF、p-Akt、p-ERK蛋白表达的变化。结果人参皂苷Rg3对骨髓基质细胞增殖抑制的最适作用时间为24h,最适作用浓度为40μg/ml;处理24h后,急性白血病骨髓基质细胞HIF-1α、VEGF mRNA表达及蛋白表达均明显减少(P<0.05);p-Akt及p-ERK蛋白表达亦较处理前明显减少(P<0.05)。结论人参皂苷Rg3可明显抑制急性白血病骨髓基质细胞HIF-1α、VEGF mRNA及蛋白水平的表达,同时可抑制与血管形成密切相关的MAPK、PI3K/Akt途径中Akt、ERK蛋白的磷酸化,提示人参皂苷Rg3可能通过阻断PI3K/Akt、MAPK信号途径抑制急性白血病骨髓的血管生成。     

整合素β1对顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡的影响研究

目的 探讨整合素β1介导的细胞与细胞外基质(extraceUular matrix,ECM)的黏附,及其黏附对顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡抑制作用即耐药性的影响研究.方法 利用酶联免疫吸附实验(ELISA)及吖啶橙-溴化乙锭(AO-EB)双荧光染色法分析卵巢癌株型SKOV3、3AO、8910细胞由顺铂诱导的细胞凋亡情况,并采用分组对照的方法检测整合素β1及整合素β1与特异性配体的黏附作用在细胞凋亡中的作用.结果 卵巢癌3株细胞均可由顺铂诱导凋亡(P<0.01).经顺铂(10 μg/mL)作用48 h后,生长于整合素β1的配体-纤维粘连蛋白(fibronectin,FN)上的3株细胞的富集系数(enrichmentfactor,EF)明显低于生长于非整合素配体一多聚赖氨酸上的细胞EF值;吖啶橙-溴化乙锭双荧光染色法结果显示生长于FN上的细胞凋亡率明显低于生长于多聚赖氨酸上的细胞凋亡率,用整合素β1的特异性阻断抗体封闭过的细胞再次生长于FN上,EF又明显提高(P<0.01).结论 整合素β1介导的细胞与FN的黏附对顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡有抑制作用,提示细胞黏附可能通过抑制细胞凋亡而促使细胞产生耐药性.     

沉默三联基序蛋白25基因对A549/DDP细胞株顺铂耐药性及凋亡的影响

目的：三联基序蛋白２５（tripartite motif containing 25,TRIM25）为泛素化E3连接酶,通过抑制TRIM25表达,研究其对肺癌顺铂（cis-dichlorodiamine platinum,DDP）耐药细胞株A549/DDP耐药性及凋亡的影响。方法：针对TRIM25基因设计4条不同序列shRNA,分别构建重组质粒载体pt1、pt2、pt3、pt4。利用脂质体将质粒转染至A549/DDP细胞,采用real-time PCR、Western blot检测抑制效果,MTT实验和流式细胞仪（flow cytometry,FCM）实验分别检测在DDP作用下细胞耐药性改变和凋亡情况。结果：干扰质粒pt1在mRNA和蛋白质水平上均能特异性地抑制TRIM25的表达;MTT法结果显示,抑制TRIM25表达后,干扰组pt1细胞IC50值低于pNC组（P=0.001）及对照组（P=0.000）;FCM结果显示,干扰组pt1的细胞凋亡率明显低于pNC组（P=0.005）、对照组（P=0.004）。结论：抑制 TRIM25表达后,能有效地降低 A549/DDP细胞株的DDP耐药性并促进其凋亡。     

骨髓基质细胞保护药物诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡的机制研究

目的研究原代正常骨髓基质细胞对多发性骨髓瘤细胞的保护作用及其内在机制。方法脂质体介导Notch1特异性小干扰RNA转染多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞与骨髓基质细胞共培养,采用细胞形态学观察和流式细胞术检测细胞凋亡,Western印迹检测Notch1及NF-κB p65蛋白表达变化。结果多发性骨髓瘤细胞与基质细胞共培养增加了Notch1活化形式(N1-ICD)蛋白的表达;共培养组与悬浮培养组药物诱导的细胞凋亡率分别为(15.30±2.21)%、(32.88±3.27)%;小干扰RNA有效的下调Notch1蛋白的表达;干扰共培养组与控制共培养组细胞的凋亡率分别为(41.47±4.01)%和(24.89±3.68)%;下调Notch1后NF-κB p65蛋白表达没有改变。结论骨髓基质细胞保护药物诱导的多发性骨髓瘤细胞的凋亡,该保护作用通过激活Notch1通路实现。下调Notch1共培养恢复药物诱导的凋亡作用不是通过NF-κB通路,可能存在其他机制。     

JWA抑制人肝癌细胞的黏附和迁移侵袭潜能

探讨JWA蛋白在人肝癌细胞黏附和迁移侵袭过程中的作用?方法:应用小干扰RNA下调低转移潜能人肝癌细胞株MHCC97L中JWA蛋白表达水平,MTT法检测MHCC97L增殖;应用细胞小室检测MHCC97L在JWA不同蛋白水平时的迁移及侵袭潜能变化;黏附试验检测MHCC97L细胞黏附能力变化?结果:研究发现人肝癌细胞株MHCC97L中的JWA表达水平下降后,肝癌细胞迁移及侵袭能力明显增强,细胞对细胞外基质纤维连接蛋白的黏附力增加?结论:RNA干扰JWA引起肝癌细胞的JWA蛋白表达水平下降,导致肝癌细胞的黏附?迁移及侵袭能力增强,结果提示JWA可能抑制人肝癌细胞侵袭和转移?     

p,p′-DDT对乳腺癌细胞MCF-7黏附能力及黏附分子的影响

目的探讨有机氯残留物有效成分p,p′-DDT对乳腺癌细胞MCF-7黏附能力及黏附分子的影响。方法将10-7mol/L的p,p′-DDT作用于MCF-748h后,分别采用细胞聚集试验和结晶紫染色法分析其对MCF-7细胞间黏附率和细胞与基质间黏附率的影响,并采用RT-qPCR法和Westernblot法检测MCF-7中钙黏附蛋白E（E-cadherin）和CD29mRNA和蛋白表达水平。结果10-7mol/L的p,p′-DDT作用MCF-748h后,MCF-7细胞间黏附率明显降低,细胞与基质间黏附率明显升高;同时下调了E-cadherinmRNA和蛋白表达水平,上调了CD29mRNA和蛋白表达水平。结论p,p′-DDT具有降低MCF-7细胞间黏附并提高细胞与基质黏附的作用。p,p′-DDT可能通过改变黏附关键因子E-cadherin和CD29的表达来影响细胞黏附,进而促进肿瘤细胞的侵袭、转移。     

骨形成蛋白BMP2基因在人骨髓基质细胞中的表达及对其成骨分化的影响

目的：利用构建的人骨形成蛋白BMP2真核表达载体pcDNA3／BMP2,检测其转染人骨髓基质细胞后的表达及对其成骨分化的影响．方法：酶切鉴定构建的真核表达载体pcDNA3／BMV2,利用脂质体介导的转染技术,将所构建的载体导入骨髓基质细胞中,体外单层培养．分别于转染后48h和4wk,采用原位杂交、免疫组化和碱性磷酸酶、钙化学染色方法检测BMV2的基因蛋白表达以及对骨髓基质细胞成骨分化的影响．结果：pcDNA3／BMP2酶切片段的大小与理论相符,转染后细胞能检测到BMP2基因和BMP2蛋白表达,并促进成骨转化．结论：pcDNA3／BMP2转染骨髓基质干细胞中可获得短暂和长期表达,并加强骨髓基质细胞的成骨分化能力。     

特异性ILK-siRNA对膀胱癌EJ细胞侵袭和迁移的影响

目的设计合成有效的ILK-siRNA,并检测其对EJ细胞侵袭和迁移的影响。方法构建针对ILK基因mRNA的2个特异性siRNA表达载体pGenSil-1 siRNA1、pGensil-1 siRNA2和1个阴性对照载体pGenSil-1 siRNA3。稳定转染膀胱癌EJ细胞后,通过RT-PCR检测EJ细胞中ILK mRNA水平的表达,并通过Western blot和细胞免疫荧光检测ILK蛋白水平的表达;观察EJ细胞形态变化;检测EJ细胞迁移、黏附和侵袭能力及基质金属蛋白酶的变化。结果重组质粒构建成功。干扰组细胞ILK mRNA及蛋白的表达分别较3个对照组(未转染组、转空质粒组和转阴性对照质粒组)比较,呈显著性下降(P<0.05);HE染色结果显示,细胞铺展良好,核质比减小;转染干扰质粒的2个实验组细胞的黏附能力相对于对照组分别增加87%和76%,黏附能力显著升高,迁移及侵袭能力明显降低(P<0.05);与3个对照组比较,转染pGenSil-1 siRNA1与pGensil-1 siRNA2质粒到EJ细胞后,MMP-2及MMP-9的表达水平明显降低(P<0.05)。结论成功构建的干扰质粒能抑制ILK基因及蛋白水平的表达,显著抑制细胞的生长、侵袭及迁移能力。     

β-TrCP在乳腺癌组织中的表达及其对患者预后的影响

目的：探讨β-TrCP蛋白在乳腺癌组织中的表达及其对患者预后的影响。方法：采用免疫组化SP法检测56例乳腺癌及对应癌旁组织中β-TrCP蛋白表达情况,分析其表达与乳腺癌患者预后的关系。结果：β-TrCP蛋白在乳腺癌组织中的阳性率为71.4%（40/56）,在对应癌旁组织中的阳性率为14.3%（8/56）,差异具有统计学意义（χ2=37.333,P=0.000）;β-TrCP蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达与雌激素受体阳性（P=0.002)、孕激素受体阳性（P=0.004)、淋巴结转移（P=0.007)和TNM分期（P=0.004）有关;β-TrCP阴性表达患者5年生存率100%（16/16）,β-TrCP阳性表达患者5年生存率72.5%（29/40）,95%CI=0.559～0.837。log-rank检验差异有统计学意义（P=0.015）。Cox多因素分析提示β-TrCP蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达是乳腺癌患者预后不良的独立影响因素（RR=0.287,95%CI=0.120～0.683,P=0.005）。结论：β-TrCP蛋白在乳腺癌组织中的表达异常升高,且与乳腺癌患者不良预后相关,提示β-TrCP蛋白在乳腺癌发生发展中可能发挥重要作用。