缺氧调节基因/产物参与CoCl2预处理对分化SH-SY5Y细胞缺氧损伤的保护

目的 探讨缺氧调节基因/产物在CoCl2化学缺氧预处理抵抗神经型细胞缺氧损伤中的作用.方法 分化的SH-SY5Y细胞分为对照组、化学缺氧预处理组(细胞先用50 μmol/LCoCl2预处理3 h,换液后常氧培养1 h,然后在2%的低氧孵箱内缺氧28 h)、缺氧组(2%的低氧孵箱内缺氧28 h).RT-PCR测VEGF、GLUT-1、EPO、LDH-A的mRNA表达.通过应用重组人VEGF纯品,进一步确定VEGF在化学缺氧预处理组中的保护作用.结果 化学缺氧预处理组细胞GLUT-1、EPO mRNA表达显著高于缺氧组(P＜0.05),VEGF mRNA表达显著高于缺氧组(P＜0.01),LDH-A mRNA表达在两组之间没有显著性差异(P＞0.05).MTT细胞活力测定显示,重组人VEGF可模拟预处理组的保护作用.结论 CoCl2化学缺氧预处理很可能通过促进VEGF、GLUT-1、EPO等缺氧调节基因/产物表达,发挥其神经保护作用.     

促红细胞生成素对大鼠即刻再植牙牙髓血运重建的促进作用

目的：探讨血管内皮细胞生长因子（VEGF）在大鼠即刻再植牙牙髓愈合过程中的表达,阐明促红细胞生成素（EPO）对大鼠即刻再植牙牙髓血运重建的作用及机制。方法：80只4周龄健康雄性Wistar大鼠随机分为未拔牙组、阴性对照（生理盐水）组、阳性药对照（庆大霉素）组和EPO组,每组20只,各组大鼠拔除的牙齿在其相对应的溶液中浸泡4min后再植,于再植术后3、7、14、21和28 d分别处死4只大鼠,制作术区标本,行HE染色观察各组大鼠在不同时间段内再植牙牙髓血运重建的情况,免疫组织化学染色观察不同时间段各组大鼠再植牙牙体组织中VEGF蛋白表达水平。结果：HE染色,与未拔牙组比较,生理盐水组大鼠再植牙牙髓组织中炎症较重,牙根发育情况较差,修复性牙本质和牙骨质沉积较少,根尖孔较宽;庆大霉素组和EPO组大鼠再植牙牙髓组织中炎症较轻,牙根发育情况相对较好,修复性牙本质和牙骨质沉积较多,根尖孔缩窄。免疫组织化学染色,与未拔牙组比较,3、7和14 d时生理盐水组、庆大霉素组和EPO组大鼠再植牙牙体组织中VEGF呈强阳性表达,随着时间的延长,VEGF阳性表达强度逐渐减弱;VEGF阳性表达区的平均吸光度（AOD）值,EPO组 > 庆大霉素组 > 生理盐水组 > 未拔牙组。与未拔牙组比较,3、7、14和21 d时生理盐水组、庆大霉素组和EPO组大鼠牙体组织中VEGF蛋白表达水平明显升高（P<0.05）,而在28 d时各组大鼠牙体组织中VEGF蛋白表达水平差异无统计学意义（P>0.05）;与生理盐水组比较,3、7、14和21d时庆大霉素组和EPO组大鼠牙体组织中VEGF蛋白表达水平明显升高（P<0.05）,而在28 d时庆大霉素组和EPO组大鼠牙体组织中VEGF蛋白表达水平差异无统计学意义（P>0.05）;与庆大霉素组比较,各时间点EPO组大鼠牙体组织中VEGF蛋白表达水平差异均无统计学意义（P>0.05）。结论：EPO通过上调VEGF表达,诱导牙髓组织中血管新生,为再植牙提供了丰富的血管床,从而发挥牙髓的防御修复潜能,促进了再植牙的牙髓愈合。     

胆总管结扎术大鼠血清通过调控AP-2α对骨髓间充质干细胞旁分泌功能影响的实验研究

目的:观察肝肺综合征胆管结扎术(CBDL)大鼠模型血清对骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)旁分泌功能的影响,并探索可能机制。方法:选择200 g左右雄性SD大鼠24只,将其随机分为Sham手术组(S组)和CBDL手术组(C组)两组,术后4周分别取各组大鼠血清刺激体外培养的BM-MSCs;分别在刺激12 h、24 h、48 h后测定细胞AP-2α表达及旁分泌血管内皮生长因子(VEGF)、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)和血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)水平。siRNA转染抑制AP-2α表达水平,通过经Western blot检测siRNA转染效果,并检测各组细胞旁分泌功能的变化。结果:与S组相比,C组血清刺激后,BM-MSCs中AP-2α的表达以及SDF-1、VEGF的分泌在各个时间点均较S组明显升高,且呈递增趋势(P<0.05),而PDGF-BB的分泌仅在C组血清刺激后48h明显升高(P<0.05)。Western blot结果显示,AP-2αsiRNA转染可明显降低AP-2α的表达水平(P<0.05)。ELISA试验结果显示,siRNA降低AP-2α的表达后能明显抑制C组血清刺激引起的SDF-1、VEGF、PDGF-BB分泌增加(P<0.05)。结论:CBDL大鼠血清刺激可明显增加体外培养的BM-MSCs旁分泌SDF-1、VEGF、PDGF-BB的水平,这可能与AP-2α的表达增高相关。     

通冠胶囊对颈动脉球囊损伤后大鼠血清基质细胞衍生因子-1和血管内皮生长因子表达的影响

[目的] 观察通冠胶囊对颈动脉球囊损伤模型大鼠基质细胞衍生因子-1(SDF-1)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.[方法] 复制大鼠左颈总动脉球囊损伤模型,将54只造模成功的SD大鼠随机分为通冠胶囊组(剂量为600 mg·kg-1·d-1)、模型组和辛伐他汀组(剂量为2 mg·kg-1·d-1);于术后第4、8、12周处死动物,采用苏木素-伊红(HE)染色及弹力纤维染色法观察血管壁增生情况,采用计算机图像分析内、中膜面积比值(Ai/Am)观察通冠胶囊对新生内膜形成的影响,采用酶联免疫吸附法检测SDF-1、VEGF水平. [结果] 通冠胶囊组、辛伐他汀组与模型组比较,VEGF、SDF-1水平在颈动脉球囊损伤后不同时段大鼠的血清中表达显著增高(均P<0.01),8周时通冠胶囊组SDF-1表达较辛伐他汀组显著升高(P<0.05),12周通冠胶囊组VEGF表达与辛伐他汀组比较,差异有显著性意义(P<0.05).球囊损伤后4周内膜增生明显,8周形成的增生内膜有少量减少,12周时形成的新生内膜减少明显.通冠胶囊可使损伤后4、8、12周形成的新生内膜较模型组显著减少,Ai/Am较模型组显著降低(均P<0.01).[结论] 通冠胶囊可以促进大鼠颈总动脉球囊损伤后血清中SDF-1及VEGF的表达,并减少新生内膜的形成.     

薏苡仁对实验性腹腔粘连大鼠腹腔液炎性相关因子及粘连组织血管内皮生长因子、血管内皮标志物CD_(34)表达的影响

目的观察薏苡仁对腹腔粘连的防治效果,并探讨其对腹腔粘连防治作用的机制。方法 Sprague Dawley大鼠60只随机分为对照组、模型组及薏苡仁高、中、低剂量组和地塞米松组,每组10只。除对照组外,其余各组大鼠均制备腹腔粘连模型。对照组和模型组大鼠腹腔注射生理盐水2 mL,地塞米松组大鼠腹腔注射地塞米松磷酸钠10 mg·kg-1,薏苡仁低、中、高剂量组腹腔注射薏苡仁注射液(1、2、4 g·kg-1),连续给药2周。各组于术后第15天用酶联免疫吸附法测定腹腔液白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,并取腹腔粘连组织检测血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮标志物CD34的水平,同时记录大鼠腹腔粘连级别。结果与对照组比较,模型组大鼠腹腔液IL-6、IL-1β和TNF-α水平均增高(P<0.01),粘连组织中VEGF、CD34表达增加(P<0.01)。与模型组比较,薏苡仁中、高剂量组大鼠腹腔液IL-6、IL-1β、TNF-α水平明显降低(P<0.05或P<0.01),而低剂量组大鼠腹腔液IL-6变化不明显,IL-1β、TNF-α水平与模型组比较明显降低(P<0.05)。薏苡仁高剂量组大鼠腹腔液IL-6、IL-1β、TNF-α水平明显低于中剂量组(P<0.05),薏苡仁中、高剂量组腹腔液IL-6、IL-1β、TNF-α水平明显低于低剂量组(P<0.05或P<0.01)。薏苡仁中、低剂量组降低腹腔液IL-6、IL-1β、TNF-α作用明显弱于地塞米松组(P<0.05或P<0.01),薏苡仁高剂量组作用与地塞米松组比较差异无统计学差异(P>0.05)。与模型组比较,薏苡仁低、中、高剂量组大鼠粘连组织VEGF、CD34水平均明显降低(P<0.05或P<0.01)。薏苡仁高剂量组大鼠粘连组织VEGF、CD34水平明显低于中剂量组(P<0.05),薏苡仁中、高剂量组大鼠粘连组织VEGF、CD34水平明显低于低剂量组(P<0.05或P<0.01)。薏苡仁高、中剂量组大鼠降低粘连组织VEGF、CD34水平作用明显强于地塞米松组(P<0.05或P<0.01),薏苡仁低剂量组作用与地塞米松组比较差异无统计学差异(P>0.05)。结论薏苡仁腹腔注射可减轻腹腔粘连的程度,其作用可能是通过抑制炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表达及通过下调VEGF、CD34表达,抑制纤维蛋白原渗出而达到预防粘连的作用。     

缺血再灌注对大鼠心脏MCP-1和HO-1表达的影响及促红细胞生成素的心肌保护作用

目的:探讨缺血再灌注(Ischemic reperfusion,I-R)对单核细胞趋化蛋白-1(Monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)和血红素氧和酶-1(Heme oxygenage-1 protein,HO-1)基因和蛋白表达的影响及促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)对I-R损伤的保护作用.方法:建立24只在体大鼠I-R模型,随机分成3组:假手术组(F组)、缺血再灌注组(O组)、促红细胞生成素组(E组),缺血45 min,再灌注180 min,E组在手术前24 h腹腔注射EPO(4 000 U/kg).用免疫组织化学及逆转录聚合酶联反应(RT-PCR)分别测定3组大鼠心肌组织MCP-1和HO-1蛋白和mRNA的表达.结果:与F组比较,O及E组大鼠心肌组织内MCP-1和HO-1蛋白和mRNA表达显著增高(P<0.01).E组心肌组织MCP-1蛋白和mRNA表达水平介于其它2组之间(P<0.05),而HO-1蛋白和mRNA表达水平又显著高于O组(P<0.01,P<0.05).结论:EPO预处理可能通过增加HO-1蛋白和mRNA表达及抑制MCP-1蛋白和mRNA的表达,从而起到抗心脏I-R损伤的作用. kg).用免疫组织化学及逆转录聚合酶联反应(RT-PCR)分别测定3组大鼠心肌组织MCP-1和HO-1蛋白和mRNA的表达.结果:与F组比较,O及E组大鼠心肌组织内MCP-1和HO-1蛋白和mRNA表达显著增高(P<0.01).E组心肌组织MCP-1蛋白和mRNA表达水平介于其它2组之间(P<0.05),而HO-1蛋白和mRNA表达水平又显著高于O组(P<0.01,P<0.05).结论:EPO预处理可能通过增加HO-1蛋白和mRNA表达及抑制MCP-1蛋 和mR     

黄疸大鼠脾细胞白细胞介素-4、γ-干扰素、蛋白激酶CαmRNA的表达及茵陈蒿汤的干预效应

目的 探索黄疸大鼠脾脏Th1/T2细胞因子、蛋白激酶C(PKC)αmRNA的表达情况及茵陈蒿汤的干预效应.方法 大鼠随机分为3组:正常对照组、黄疸模型组、茵陈蒿汤组.ELISA法、原位杂交法检测大鼠脾细胞分泌IL-4、IFN-γ水平及PKCαmRNA表达.结果 黄疸模型组IFN-γ/IL-4比值明显低于正常对照组(P<0.01),而茵陈蒿汤IFN-γ/IL-4比值与正常对照组比较无显著差异(P>0.05).黄疸模型组脾细胞PKCαmRNA表达明显高于正常组(P<0.1),而茵陈蒿汤治疗后,脾细胞PKCαmRNA表达明显减少.结论 黄疸大鼠脾脏Th1/Th2细胞因子分泌呈紊乱状态,与PKCαmRNA表达水平有关,而茵陈蒿汤具有调节作用,可能是其治疗黄疸的机制之     

牛蒡子对糖尿病大鼠肾组织基质细胞衍生因子1表达的影响

目的:研究牛蒡子对糖尿病大鼠肾脏基质细胞衍生因子1(SDF-1)表达的影响。方法:建立糖尿病大鼠模型,利用荧光实时定量PCR和Western blot检测经牛蒡子治疗后糖尿病大鼠肾脏组织中SDF-1mRNA和蛋白表达水平的变化。结果:荧光实时定量PCR结果显示糖尿病大鼠组肾脏组织中SDF-1mRNA(1.499±0.03)明显较正常大鼠组(1.231±0.02)升高,而牛蒡子治疗组大鼠肾脏SDF-1的mRNA(1.27±0.01)较糖尿病大鼠组明显降低,组间比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示牛蒡子治疗组大鼠肾脏中SDF-1蛋白的相对表达量为0.93±0.22,明显低于糖尿病模型组1.60±0.21(P<0.05),与正常组大鼠肾脏表达量接近(0.80±0.13)。结论:牛蒡子能够下调糖尿病大鼠肾脏组织中SDF-1的表达。     

TGFβ1-Smad信号通路参与IL-33诱导的A549细胞上皮间质转化

目的:探讨TGFβ1-Smad信号通路在IL-33诱导的A549细胞上皮间质转化中的作用。方法:体外培养人肺泡上皮细胞来源的A549细胞株,将传代培养的细胞分为对照组、TGFβ受体抑制剂(LY2109761)组、IL-33组、IL-33+TGFβ受体抑制剂(LY2109761)组。给予相应处理,24h后收集各处理组细胞。RT-PCR和Western blot检测转化生长因子β1(TGFβ1)、上皮细胞标志物E钙黏素(E-cad)和间质细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平。Western-blot检测Smad信号通路Smad3、p-Smad3的表达水平。结果:与对照组比较,TGFβ受体抑制剂组Smad3蛋白,p-Smad3蛋白,TGFβ1、E-cad、α-SMA的mRNA及蛋白表达表达水平均未见明显变化(P>0.05);与对照组比较,IL-33组Smad3蛋白表达水平无明显变化(P>0.05),但p-Smad3蛋白表达水平明显升高(P<0.05),TGFβ1mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.05),E-cad mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05),α-SMA mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.05);IL-33+TGFβ受体抑制剂组与IL-33组比较,Smad3蛋白表达水平无明显变化(P>0.05),但p-Smad3蛋白表达水平明显降低(P<0.05),TGFβ1的mRNA及蛋白表达未见明显改变(P>0.05),E-cad的mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.05),α-SMA的mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:TGFβ1-Smad信号通路参与IL-33诱导的A549细胞上皮间质转化。     

TGF-β1对肾间质成纤维细胞SDF-1表达的影响

目的 探讨大鼠肾间质成纤维细胞(NRK49F)基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)的表达及转化生长因子-β1 (transforming growth factor-β1,TGF-β1)对其表达的影响.方法 采用RT-PCR和 Western blot及免疫组化方法检测NRK49F细胞 SDF-1表达及不同浓度、不同时间的 TGF-β1 刺激对SDF-1表达的影响.结果 正常NRK49F细胞低表达SDF-1 mRNA,TGF-β1呈时间依赖性增加其表达,在24 h表达最高,为刺激前(2.924±0.235)倍,差异有统计学意义(P<0.05).在剂量反应曲线上,5 ng/mL TGF-β1刺激作用最强,为未刺激组的(2.113±0.314)倍,差异有统计学意义(P<0.05).与SDF-1 mRNA表达一致,正常NRK49F细胞SDF-1蛋白低表达,5 ng/mL TGF-β1 呈时间依赖性的增加SDF-1蛋白表达,24 h已非常明显,36 h达高峰,为刺激前的(2.572±0.238)倍,差异有统计学意义(P<0.05).加入TGF-β1中和抗体后, SDF-1蛋白的表达明显下降.结论 正常NRK49F细胞有SDF-1低表达.TGF-β1以剂量依赖及时间依赖的方式刺激NRK49F细胞表达SDF-1.SDF-1作为一个炎症趋化因子,可能参与了肾脏炎症反应及纤维化的发生发展.     

经络腧穴理论的形成与发展

从<脉书·十一脉><黄帝内经>等文献人手,梳理了血气、经络、腧穴理论的形成与发展,简要介绍了四肢部的基本腧穴、躯体部要穴,以及腧穴配伍的基本要义.     

教考合一与教考分离的统一——医学基础课综合性考试模式初探

考试是检验教学效果的有效方法,是教学过程中不可缺少的环节。多年来,人们对考试改革不断进行探索,总结出不同的考试模式,例如教考合一与教考分离就是2种完全不同的考试模式。通过对比2种考试模式的优势与劣势,提出适合医学基础课的综合性考试模式。     

载脂蛋白的结构和功能与病毒病的预防和治疗

载脂蛋白（apo）是脂蛋白的重要组成成分,其主要功能是调节酶活性,介导细胞受体与脂蛋白结合,保持脂蛋白结构的稳定性。目前已发现数十种载脂蛋白,其结构的显著特点是分子中具有多个双性alpha螺旋及Beta-折叠结构。载脂蛋白的这种双性alpha螺旋结构是其结合及转运脂质的结构基础。在HIV外壳结构中的一种糖蛋白（gP）也具有这种alpha螺旋结构。近年研究表明,载脂蛋白和由载脂蛋白组成的脂质体还具有抗肝炎病毒、抗HIV病毒、抗单纯疱疹和中和细菌内毒素的功能。以脂蛋白和载脂蛋白为主要成分构成的脂质体已成为运载抗病毒和抗肿瘤药物受体的靶向性载体。     

析议痰瘀同源、互结、同治

目的:探讨痰瘀相关,意在梳理痰瘀知识、并强调痰瘀相关的重要性。方法:通过多角度地分析、刍议"痰瘀同源"、"痰瘀互结"、"痰瘀同治"等痰瘀经典理论的方式论述痰瘀相关。结果:痰与瘀是中医界里重要的元素,痰与瘀互结是许多疾患共同的病机,痰瘀同治是常用治法。结论:痰瘀同源、互结、同治,不但在临床上有着实用的指导意义,又能与时俱进、在探究中创新。     

神经病学与神经解剖学优化整合的评价与分析

目的评价神经病学与神经解剖学优化整合教学法的教学效果,寻找存在的问题及解决对策,为今后的神经病学教学改革提供参考。方法采用问卷调查、访谈的方式,分析神经病学教改后的教学效果、对学生学习态度的影响、教学中存在的不足。结果教改班的教学效果、对学生学习态度的改善优于非教改班(P<0.01)。结论神经病学与神经解剖学优化整合的教学改革效果显著,达到了预期的目的。     

卵巢子宫内膜样癌的CT、MRI诊断与病理分析

目的：探讨卵巢子宫内膜样癌（OEC）的CT、MRI表现及病理基础。方法：回顾性分析经手术病理证实的8例OEC的CT、MRI表现,并与手术和组织病理学结果进行对照分析。结果：8例OEC位于左侧5例,右侧3例。肿瘤最大径4．5～17．5cm,平均9．2cm。全部肿瘤均呈囊实性,6例形态不规则呈分叶状,2例呈圆形或卵圆形。肿瘤边界部分模糊7例,清楚1例。CT平扫：肿瘤实性成分cT值37～46Hu,平均4lHu,囊性成分cT值14～40Hu,平均25Hu;增强后肿瘤实性成分呈中等程度强化,动脉期cT值6l～77HIJ,平均66Hu,实质期cT值65～78HU,平均71HU。MR平扫：T2wI实性成分呈等信号,囊性成分呈低信号,T2wI实性成分呈稍高信号,囊性成分呈高信号,增强后肿瘤实性成分中等程度强化。8例OEC中合并子宫体内膜癌2例,其中l例经MRI检查,表现为子宫体部内膜不规则增厚,T2wI呈等信号,TnwI呈稍高信号,增强后呈中等程度强化,1例合并同侧卵巢巧克力囊肿。结论：CT、MRI能较好地反映OEC的病理特征,清晰显示肿瘤的形态、内部结构及邻近结构侵犯等情况,具有重要的定性价值,并为临床选择合理治疗方案提供依据。     

厚朴酚与和厚朴酚衍生物的合成及其生物活性

基于传统天然产物厚朴酚与和厚朴酚的多种药理活性,以治疗阿尔茨海默病为方向,设计了一系列厚朴酚与和厚朴酚衍生物,借助分子模拟平台Discovery Studio,以Aβ蛋白、Tau蛋白为靶蛋白,筛选出5种衍生物6a~6e。并通过化学方法对其进行合成,用硫碘素T检测目标化合物的生物活性。结果显示:化合物6a在100 μmol/L浓度下,对于两种靶蛋白的聚集都有抑制作用,具有进一步研究价值。     

胃肠道间质瘤的诊断和治疗

目的提高胃肠道间质瘤的诊断和治疗水平.方法收治1例十二指肠降部间质瘤并皮肤软组织转移,结合文献对胃肠道间质瘤的临床表现,诊断和治疗进行探讨.结果手术切除后病理诊断为间质瘤,随访3个月未再排黑便.结论胃肠间质瘤内科保守治疗效果差,宜行手术切除,根据良恶性程度选择手术方式.确诊胃肠道间质瘤必需病理及免疫组化检查.     

瘿病源流简析

以先秦两汉、隋唐、宋金元、明清四个时期,将瘿病的发展总结为理论奠基期、方药汇集期、方药充实期和应用发展期。通过对中国历代医学文献中有关瘿病内容的梳理,追溯有关瘿病理、法、方、药认识的历史,厘清前人对瘿病在不同历史时期的表述特点,以及前人对这一疾病认识的发展脉络,为现今中医药防治瘿病提供理论依据和启示。