蛇毒金属蛋白酶及去整合素的结构与功能

蛇毒金属蛋白酶是蛇毒主要功能性蛋白质之一,它直接作用于局部组织的毛细血管,影响毛细血管内皮细胞与基底膜之间的相互作用;蛇毒去整合素与蛇毒金属蛋白酶来自共同的前金属蛋白酶原,这些酶原都含有4个共同的结构域:信号肽、前导肽、蛋白酶结构域、间隔区.去整合素因能特异性识别整合素而得名,蛇毒去整合素为低分子量蛋白质,含有多个Cys残基,它能阻断整合素与其配体的结合,抑制整合素介导的细胞与细胞、细胞与细胞外基质之间的黏附反应,在血小板聚集、感染、炎症反应、肿瘤转移等病理过程中发挥重要作用.     

以整合素为作用靶点的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸模体毒素研究进展

整合素为一类αβ异源二聚体膜蛋白,调节细胞外基质与胞内细胞骨架间的相互作用。精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)序列为整合素的结合位点,存在于多种重要的细胞外基质蛋白中。整合素与RGD序列结合可调节多种细胞生理活动,RGD模体还存在于来自蛇毒和其他物种来源的多种毒素蛋白中,这些RGD模体毒素能够特异性抑制整合素与细胞外基质的结合,从而成为整合素的强效拮抗剂。本文对整合素的结构与功能、去整合素作为整合素拮抗剂的结构特征做一综述,并对整合素和以RGD为模体结构作为潜在药物靶点的应用加以讨论。     

ADAM9基因真核表达质粒的构建及表达

目的:构建人源性去整合素金属蛋白酶9(ADAM9)基因真核表达载体并表达其编码蛋白(转染293T细胞).方法:利用包含ADAM9全长编码核酸序列的质粒PCR4-TOPO作为模板,用PCR扩增其核心编码区,将其克隆至PMD18-T Vector中构建PMD18-T-ADAM9质粒,同时双酶切PMD18-T-ADAM9及P...     

肺间质纤维化中去整合素金属蛋白酶17的表达及作用机制

目的 观察去整合素金属蛋白酶17(ADAM17)在肺结节病、肺结核、非小细胞肺癌等肺间质纤维化疾病中差异表达情况,并探讨其作用机制.方法 实时RT-PCR分别检测肺结节病、肺结核、肺癌和正常人的肺组织中ADAM17基因表达,采用Western blot方法检测相互作用因子-Ⅲ型胶原蛋白、整合素6的蛋白表达.结果 肺组织中ADAM17 mRNA、Ⅲ型胶原蛋白、整合素6的蛋白在肺结节病组、肺结核组、非小细胞肺癌中的表达水平均明显高于正常对照组(P＜0.05);肺癌组中以上指标的表达水平与正常对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01),与肺结节病组、肺结核组比较差异亦有统计学意义(P＜0.05).结论 肺纤维化疾病的机制可能与ADAM17导致细胞外基质成员Ⅲ型胶原蛋白、整合素6的高表达有关.     

去整合素-基质金属蛋白酶在肿瘤细胞中的作用研究进展

去整合素-金属蛋白酶(ADAM)家族是许多细胞外基质(ECM)的成分。根据其结构的不同分为膜锚定型和分泌型,这些分子在各种生物活动(如细胞黏附、细胞融合、细胞迁移、膜蛋白脱落和蛋白水解)中发挥作用。一些ADAMs成员在恶性肿瘤的病理过程中发挥作用。ADAMs的活性受基因表达、胞质和周围细胞的调控,酶原和抑制因子也参与调控。尽管现在还不清楚具体的作用机制,但是它们中大多数具有调控生长因子活性,整合、诱导细胞增殖和侵袭的作用。     

毛细支气管炎患儿外周血ADAM8、CD23水平及临床意义

毛细支气管炎（简称毛支）是婴幼儿最常见的下呼吸道感染。流行病学资料显示,毛支患儿在儿童期易患哮喘,毛支与哮喘的发病机制中有类似的细胞和炎症介质参与。研究发现去整合素金属蛋白酶家族（ADAMs）在炎症反应、肿瘤发生发展转移、免疫性疾病和过敏反应疾病中有着重要作用,其中以ADAM33、ADAM8与过敏性疾病的关系最为密切[1]。笔者检测毛支患儿血清中ADAM8、CD23的水平,并与喘息性支气管炎、肺炎患儿及正常儿童进行比较,探讨其临床意义。     

含三磷腺苷的Hanks平衡盐溶液处理张氏肝癌细胞诱导新去整合素金属蛋白酶相关蛋白的表达

目的研究不同条件下张氏肝癌细胞中去整合素金属蛋白酶(ADAMs)及ADAM相关蛋白的表达和功能改变。方法用热激、含有三磷腺苷(ATP)的Hanks平衡盐溶液(HBSS)处理张氏肝癌细胞,Western blotting检测AD-AM相关蛋白,对处理过的细胞构建cDNA文库,用ADAMs通用抗体对文库进行免疫筛选,对阳性克隆的插入序列测序并进行体外表达,分析蛋白的性质。结果包含ATP的HBSS处理张氏肝癌细胞诱导出2个新的相对分子质量为30 000和50 000的ADAM相关蛋白,热激处理未出现相同的反应。对处理细胞构建了cDNA文库,筛选出1个新的有碱性蛋白酶活性的ADAM相关蛋白。结论含有ATP的HBSS处理张氏肝癌细胞可以诱导出1种新的ADAM相关蛋白。     

ADAM33基因与支气管哮喘的相关研究进展

定位于人类等20号染色体短臂(20p13)上的ADAM33基因是解整合素-金属蛋白酶超家族中的一员。因ADAM33基因同样具有解整合素结构域和金属蛋白酶结构域,故称为解整合素-金属蛋白酶。自ADAM33基因被确定为哮喘的候选基因以来,ADAM33基因与不同种族及区域人群哮喘发病的相关性成为研究热点。现就ADAM33基因的几个重要位点在不同区域或种族中与哮喘的关联性研究予以综述。     

应用短发卡RNA慢病毒质粒载体抑制去整合素金属蛋白酶33的表达

去整合素金属蛋白酶33(a disintegrin and met-alloproteinase33,ADAM33)是最近发现的ADAM家族成员,与支气管哮喘和气道高反应性有关。本研究旨在通过构建ADAM33小发卡RNA(smallhairpin RNA,shRNA)质粒表达载体,抑制AD-AM33基因在小鼠成纤维细胞(NIH/3T3)中的表达,为进一步研究     

ADAM9在肺癌组织中的异常表达

去整合素-金属蛋白酶9(ADAM9)在多种恶性肿瘤组织中高表达,与肿瘤侵袭转移及预后不良密切相关;但ADAM9在肺癌组织中的表达及意义尚不清楚.本研究发现,与正常对照肺组织相比,ADAM9在非小细胞肺癌组织中的表达显著增高,提示ADAM9在肺癌的发生发展中起重要作用.     

ADAM在血管性疾病治疗中的作用

动脉粥样硬化也被认为是一种炎症,是造成人类死亡的主要血管性疾病之一。黏附分子在动脉粥样硬化等血管疾病的形成过程中起到了至关重要的作用。金属蛋白酶解离素（ ADAM）家族是一类含有去整合素和金属蛋白酶结构域的蛋白分子,具有蛋白水解、细胞间的黏附、融合、迁移、信号传导、生物活性因子释放等功能。在炎症反应中,ADAM可以介导L-选择素,VCAM-1,ICAM-1,CX3CL1和CXCL16等与动脉粥样硬化形成有关的黏附分子的脱落,从而调节炎症反应的发生,影响动脉粥样硬化等血管疾病的形成,未来可以作为新的药物靶点来治疗血管疾病,应用前景广阔。     

去整合素-金属蛋白酶17与肿瘤的研究进展

去整合素-金属蛋白酶17(ADAM17),是一种锌依赖的多结构域Ⅰ型跨膜蛋白,在人类的生长发育过程及炎症和肿瘤等病理过程中起重要作用。研究表明ADAM17在人类多种肿瘤呈高表达,作用机制主要通过水解细胞膜水的多种受体配体的功能而发挥切割转化生长因子α,EGFR-PI3K-Akt信号转导途径及血管的生成等方面来促进肿瘤的发生、进展。     

蛇毒蛋白与血小板血栓形成

多种蛇毒蛋白具有与血小板表面整多种蛇毒蛋白具有与血小板表面整合素、膜糖蛋白Ⅰb（GPⅠb）或血管性血友病因子（VWF）相互作用而影响血栓形成的功能。影响血小板血栓形成的蛇毒蛋白目前分为3类：去整合素、VWF调节蛇毒蛋白及GPⅠb结合蛋白。其中,去整合素具有高效抑制血小板聚集的功能;VWF调节蛇毒蛋白具有体外介导VWF依赖型血小板聚集的功能;而GPⅠb结合蛇毒蛋白又分为2组：GPⅠb激动剂和GPⅠb拮抗剂,分别起诱导血小板聚集与抑制VWF介导的血小板聚集的功能。本文将对上述影响血小板血栓形成的蛇毒蛋白的结构、功能及其在临床上的研究与应用进行综述。的结构、功能及其在临床上的研究与应用进行综述。     

张力蛋白的结构与功能及疾病相关性 研究进展

张力蛋白是一类多结构域的大分子蛋白质，目前，在哺乳动物中已发现张力蛋白家族的4个成员，即tensin–1、tensin–2、tensin–3、tensin–4。所有成员在蛋白的C末端均具有SH2功能域和磷酸酪氨酸结合域。张力蛋白定位于黏着斑，与α–肌动蛋白、踝蛋白、Kindlin蛋白、黏着斑蛋白、整合素等多种蛋白质一起构成复杂的跨膜复合体结构，将细胞内肌动蛋白细胞骨架与细胞外基质连接起来，从而介导细胞内外信号传导，调节细胞的黏附、迁移、侵袭、增殖、分化、机械传导等生物学过程，并与人类多种疾病密切相关。充分认识张力蛋白的结构与功能，有助于更好地研究张力蛋白在疾病中所发挥的作用，因此，本文对张力蛋白的结构、周围相关结构、生物学功能、疾病相关性的研究进展进行了综述。     

RGD序列合成肽抑制喉癌细胞增殖的实验研究

目的 研究含RGD序列合成肽对人喉癌Hep-2细胞株增殖能力的影响,并对其可能机制进行初步探讨.方法 化学合成RGD肽,免疫荧光技术检测RGD肽与Hep-2细胞结合能力;MTF法检测不同浓度RGD肽对喉癌细胞增殖能力的影响;免疫细胞荧光技术检测RGD肽处理前后喉癌细胞整合素αv蛋白表达.结果 RGD肽与喉癌Hep-2细胞有特异性结合作用,经RGD肽处理后的喉癌细胞增殖能力显著降低,整合素αV表达明显降低.结论 作为整合素αv受体拮抗剂,RGD肽对喉癌细胞的增殖能力有明显的抑制作用,为喉肿瘤基因治疗方面提供一个新靶点.     

尖吻蝮蛇毒素组双向电泳和二维液相色谱研究

目的：初步研究尖吻蝮蛇蛇毒的蛋白质组分及其活性。方法：利用双向电泳和二维色谱（IEX＋HPLC）分析尖吻蝮蛇蛇毒蛋白质组，并制备分离样品研究蛇毒中酶和毒素活性。结果：双向电泳分离检测得到128种蛋白质，其中24种蛋白质丰度较高，73种为酸性蛋白质，加种为碱性蛋白质。二维色谱展现58种蛋白质，其中26种蛋白质丰度较高。初步活性研究表明，尖吻蝮蛇蛇毒蛋白质多数属于丝氨酸蛋白酶、金属蛋白酶和磷脂酶A2家族，部分蛋白质可能属于去整合素家族。结论：双向电泳和二维色谱相互结合．有效分析了尖吻蝮蛇毒的蛋白盾组成和生物活性．     

成骨细胞及破骨细胞的整合素表达及其在骨质疏松中的意义

粘附分子 (ａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅ)是一类介导细胞与细胞、细胞与细胞外基质间粘附作用的膜表面糖蛋白。粘附分子种类很多 ,包括选择素家族、整合素家族、免疫球蛋白超家簇。整合素是一类细胞膜表面糖蛋白 ,其配体为细胞外基质 (ＥＣＭ)成份 ,如纤维粘连蛋白 (ＦＮ)、纤维蛋白原 (ＦＢ)、胶原蛋白 (ＣＡ)、体外粘连蛋白 (ＶＮ)、层粘蛋白 (ＬＭ)和ｖｏｎｗｉｌｅｂｒａｎｄ因子(ｖＷＦ)等。近年来 ,人们发现成骨细胞、破骨细胞表面均有整合素受体表达 ,其表达水平对骨形成及骨吸收有调控作用 ,与很多骨代谢性疾病的病理机制有很…     

Kindlin-2与整合素在机体中的研究进展

Kindlin-2蛋白是Kindlin家族成员之一,属于黏着斑蛋白,含有一个典型的FERM结构域。Kindlin-2可通过FERM结构域与整合素β亚基胞内段结合,在细胞-细胞间连接、细胞-细胞外基质黏附、细胞迁移、细胞骨架重构等细胞行为以及整合素介导的双向信号转导过程中发挥重要作用,参与胚胎形成、止血、免疫反应、肿瘤转移、器官发育等过程。Kindlin-2基因缺陷将导致胚胎、心脏及血管等组织器官发育异常,且Kindlin-2在很多恶性肿瘤中表达增加,影响肿瘤细胞的侵袭性和转移能力。因此,对Kindlin-2与整合素作用机制研究的深入,不仅有助于深化对Kindlin家族蛋白和整合素的认识,还有助于Kindlin-2相关疾病的诊断和治疗。     

CD151与肿瘤侵袭转移的关系研究进展

CD151蛋白是第一个被发现的四跨膜蛋白。α3、α6整合素可与CD151紧密结合形成CD151-α3β1/α6β1两种复合体,该两种复合体能够促进内皮细胞迁移和微血管增生,促进肿瘤细胞侵袭转移。CD151可直接与基质金属蛋白酶（MMPs）相互作用,调节其在细胞表面的定位、转运,溶酶体降解和蛋白水解活性。CD151蛋白作为细胞表面分子,有望成为肿瘤治疗的靶标。     

ADAM17蛋白在食管鳞癌中的表达及意义

目的:探讨去整合素-金属蛋白酶17(A disintegrin and metalloproteinase 17,ADAM17)蛋白在食管鳞癌中的表达及其与淋巴结转移的相关性。方法:采用免疫组化SP法检测80例食管鳞癌及对应的正常食管黏膜中ADAM17蛋白的表达水平。采用χ2检验、Pearson相关分析进行统计学处理。结果:食管鳞癌及其切缘的正常食管粘膜中ADAM17蛋白表达阳性率分别为66.25%和6.25%,差异有统计学意义(P<0.05)。食管鳞癌中ADAM17蛋白表达阳性率与淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。结论:ADAM17蛋白在食管鳞癌中高表达,在食管鳞癌的发生、侵袭转移中起重要作用。