肝片形吸虫和华枝睾吸虫的同工酶盘电泳研究

本文应用聚丙烯酰胺凝液盘电泳对肝片形吸虫和华枝睾吸虫成虫的苹果酸脱氢酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、酯酶和过氧化物酶进行了分离和研究。两种吸虫4种酶的同工酶电泳型在区带数和/或迁移率、活性上均不相同,显示两个虫种之间有明显差异。但两种吸虫的苹果酸脱氢酶和酯酶存在着位置相同的同工酶带,说明两种吸虫在遗传上有一定的联系。本研究显示两种吸虫同工酶型的差异为从分子水平上区分和鉴定它们提供了证据。     

华枝睾吸虫和东方次睾吸虫囊蚴的形态同工酶及蛋白质等比较研究

本文对中华枝睾吸虫囊蚴和东方次睾吸虫囊蚴的形态鉴别进行了比较研究,同时用聚丙烯酰胺园盘电泳(PAGE)法对两种囊蚴的乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)和酯酶(Est)同工酶进行了比较研究,两种囊蚴的LDH第三带的Rf值有所不同,MDH有明显不同,Est明显不同,蛋白质染色相同,糖类染色相同,脂类染色区带的Rf值有所不同。     

实验感染华支睾吸虫家兔血清抗体动态的初步观察

我们曾应用竦根过氧化物酶联葡萄球菌A蛋白(HRP—SPA)为第二抗体做酶联免疫吸附试验(ELISA)检测感染华支睾吸虫病人及感染动物血清的特异性抗体,已经取得较好效果。但对于感染华支睾吸虫后抗体水平的变化尚不了解。本文采用此法对家兔感染华支睾吸虫后血清抗体消长动态进行了初步观察,现将结果报告如下:     

华支睾吸虫颗粒蛋白在虫体及宿主中的表达

目的探讨华支睾吸虫颗粒蛋白(CsGRN)在虫体和宿主中的表达。方法使用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测华支睾吸虫成虫、囊蚴和虫卵及猫的肝脏、胆管组织和全血CsGRN基因mRNA表达水平;免疫组化检测CsGRN在成虫及宿主猫、人和实验感染的Balb/c小鼠肝脏中的定位。结果 CsGRN基因mRNA在虫体的各阶段都有表达,在感染的猫肝和胆管组织中高表达;CsGRN主要定位在成虫的睾丸、外膜和虫卵,在宿主人、猫和小鼠中主要分布在胆管上皮和肝细胞。结论 CsGRN可能参与虫体的生长发育,它作为分泌排泄抗原之一可能损害肝胆管组织,有进一步研究价值。     

华支睾吸虫病的流行概况

华支睾吸虫病又称肝吸虫病，是华支睾吸虫感染引起的人兽共患性疾病。华支睾吸虫成虫寄生于人或其它终宿主的肝胆管内，虫体的代谢产物及虫体本身的机械刺激，可引起胆管，特别是引起次级胆管的炎症反应，中度感染胆管可出现局限性扩张，管壁增厚，管腔狭窄，如合并细菌感染，可引起胆管炎和胆管肝炎，周围纤维组织增生，晚期可发生肝硬化。虫卵、死亡的虫体及其碎片可能构成结石的核心，诱发结石症。越来越多的证据表明，华支睾吸虫感染可使原发性肝胆管癌患病率增加。     

感染华支睾吸虫后小鼠肝脏的病理学观察

目的:了解小鼠感染华支睾吸虫后肝脏的病理变化,为研究华支睾吸虫的致病机制提供参考依据。方法:胃蛋白酶消化法获取华支睾吸虫囊蚴,人工灌胃法感染小鼠,采用病理学方法取材、固定及染色,观察小鼠肝脏的病理学变化。结果:不同感染时间的炎症反应程度存在差异,出现纤维组织增生、胆管壁增厚、嗜酸性囊肿等病理学现象。结论:小鼠感染华支睾吸虫后肝脏出现了显著的病理学改变,这种现象对于研究人体内华支睾吸虫的致病作用具有一定的参考价值。     

广州地区中华支睾吸虫等三种吸虫的DNA含量与同工酶分析

用聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析了三种吸虫的苹果酸脱氢酶和脂酶同工酶酶谱,测量了其DNA相对含量。结果表明,三种吸虫DNA相对含量相差非常显著。DNA相对含量依次为布氏姜片吸虫20.78±2.56、鹿同盘吸虫19.58±2.46和中华支睾吸虫18.38±2.57。苹果酸脱氢酶三种吸虫均显示出一条酶带;酯酶则不相同,布氏姜片吸虫和鹿同盘吸虫有两条酶带,中华支睾吸虫只有一条酶带。     

恒河猴感染华支睾吸虫的初步观察

用恒河猴感染华支睾吸虫获得成功。两只恒河猴获虫率分别为9.9％及31.59％。所得虫体都已发育成熟。感染后30天所得虫体平均长5.15mm,宽1.005mm。感染后48天所得虫体平均长8.0625mm,宽1.34mm。两猴粪便中都发现成熟虫卵。说明恒河猴可作为华支睾吸虫的终宿主。‘ 猴华支睾吸虫病早期表现主要特点有三:嗜酸性粒细胞增多症(感染后30天);慢性炎症时(感染后48天)病灶区内浆细胞显著增多;肝内胆管上皮细胞腺瘤样增生,其分泌功能亢进,经奥辛蓝染色,上皮细胞核上区呈深蓝色,提示富含酸性粘多糖。     

人体5种小型吸虫病原形态观察

目的通过对东方次睾吸虫(Metorchisorientalis)、华支睾吸虫(Clonorchissinensis)、钩棘单睾吸虫(Haplorchispumilio)、扇棘单睾吸虫(Haplorchistaichui)和台湾棘带吸虫(Centrocestusformosanus)的形态观察,为鉴别这些人体寄生虫病病原提供科学依据。方法收集5种吸虫的成虫、虫卵、囊蚴,并进行形态、大小测量和寄生部位观察。结果东方次睾吸虫和华支睾吸虫成虫寄生部位完全相同,都是在胆管和胆囊内。其他3种则在小肠内。囊蚴寄生部位:除台湾棘带吸虫在鱼鳃外,其余4种均在鱼肉内。虫卵特征:5种吸虫除卵盖和外壳光洁度有些差别外,其余差别甚微。囊蚴特征:东方次睾吸虫囊壁很厚,而其他4种则很薄。其它特征:台湾棘带吸虫的排泄囊呈“工”字形,扇棘单睾吸虫生殖吸盘上的小棘呈杆状排列成葵扇状;而钩棘单睾吸虫则呈点状并围成一圈。成虫特征:华支睾吸虫最大,呈葵花仔状;东方次睾吸虫其次,呈叶片状;钩棘单睾吸虫和扇棘单睾吸虫居中,两者均呈鞋状;台湾棘带吸虫最小,呈酒瓶状。结论发现上述5种吸虫的成虫、虫卵及囊蚴时,必须根据各自形态、大小等特征,认真鉴别。     

两型肝片吸虫PGM同工酶等电点聚焦电泳比较研究

本文首次以等电点聚焦电泳对两型肝片吸虫磷酸葡萄糖变位酶(PGM)同工酶进行比较研究。结果显示,两型肝片吸虫呈现明显不同的特征性酶谱,提示两型肝片吸虫已发生一定程度的遗传分化。此外,实验结果证实PGM同工酶谱对两型肝片吸虫具鉴定价值。     

斯氏肺吸虫和华支睾吸虫基因组态DNA的初步分析

目的 比较分析斯氏肺吸虫和华支睾吸虫基因组多态ＤＮＡ的多态性和探讨两吸虫间的相似基因。方法 应用随机扩增多态性（Ｒａｎｄｏｍ ａｍｐｌｉｆｉｅｄ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ＤＮＡ，ＲＡＰＤ）技术对斯氏肺吸虫和华支睾吸虫的基因组多态ＤＮＡ进行扩增，扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后分析结果。结果 引物Ｐ１和Ｐ２扩增产生斯氏肺吸虫和华支睾吸虫的成虫ＤＮＡ图谱，而Ｐ３引物未扩增出产物。斯氏肺吸虫和华支睾吸虫的Ｐ１     

华支睾吸虫成虫抗原纯化及鉴定

用葡聚糖凝胶Sephadex G-200柱层析法、三氯醋酸-乙醇提取物DEAE-Cellulose(DE52)柱层析法、尿素提取物Sepharose 4B柱层析法对华支睾吸虫成虫可溶性抗原进行部分纯化,获得8种不同的抗原活性组分.并用免疫电泳、聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳(PAGE)、薄层等电聚焦电泳、微板法动力学酶联免疫吸附试验进行鉴定.认为经纯化的抗原组分较粗抗原更适宜于临床诊断及考核疗效     

华支睾吸虫病流行区流行病学研究

目的 为了解广州市番禺区华支睾吸虫流行情况，于2000年6月～2002年10月在番禺沙湾镇的紫坭村和石基镇的前锋村开展了华支睾吸虫病流行病学调查。方法 采用改良加藤氏厚涂片法粪便检查人群华支睾吸虫卵；华支睾吸虫感染静脉采血作转氨酶、乙肝表面抗原、核心抗体检测和腹部B超检查；开展中间宿主和保虫宿主调查。结果 华支睾吸虫总感染率13．7％。其中紫坭村感染率18．2％；前锋村感染率8．O％；男性感染率为22．3％，女性感染率为6．6％，以20～50岁年龄组最高。华支睾吸虫感染HBsAg阳性率为20．9％，HBeAb阳性率为40．3％；42．4％感染出现不同的肝胆道病变；在当地鱼塘的鱼苗中找到华支睾吸虫囊蚴；解剖当地犬、猫中，均发现华支睾吸虫成虫。结论 番禺区是华支睾吸虫重点流行区之一，且华支睾吸虫已对当地群众的身体健康造成了严重危害。     

珠海市农村地区2010年华支睾吸虫感染情况调查及其危险因素分析

目的了解珠海市农村地区华支睾吸虫感染和流行现状,为制定防治规划提供科学依据。方法采用改良加藤厚涂片法(kato-katz法)检查华支睾吸虫虫卵,并进行华支睾吸虫知晓和防治状况调查。结果本次抽样调查斗门区5个乡镇共1000人,检出华支睾吸虫感染者63人,以中年男性为主,总感染率为6.3%(63/1000)。被调查者对于肝吸虫防治知识的知晓率为87.8%,生熟食品砧板分开成为感染华支睾吸虫病的保护性因素(OR=0.11,OR95%C.I.(0.02-0.62)。结论珠海市农村地区华支睾吸虫感染率低于全省平均水平,肝吸虫防治知识知晓率较高,生熟食品砧板分开是感染华支睾吸虫病的保护因素。     

Interspecies Phylogenetic Analysis of Clonorchis sinensis in High-incidence Areas of Hunan Province,China

Objective This study aims to investigate the infection of Clonorchis sinensis (C. sinensis) in high-incidence areas of Hunan Province, China. The phylogenetic analysis of the C. sinensis species in the highly infected areas was carried out.Method Infection of the definitive human host and intermediate fish host by C. sinensis was investigated, and the mitochondrial genes cox1 and Nad1 were used as genetic markers for phylogenetic analysis. Results In 2016–2020, the average population infection rate of Hunan was 1.38％, while in Tongdao County the rate was up to 26.90％, and the highest fish infection rate was detected in Qiyang County (99.44％ in the dorsal fin of crucian carp). High genetic sequence similarity was observed in the samples from Qiyang and Lengshuitan which exhibited high homology with those from Guangdong and Gansu, whereas the parasitic species from Tongdao was highly homologous with those located in high-latitude areas. Moreover, no significant difference was found in the gene sequence of the parasitic species in definitive hosts dogs and cats. Conclusion The systematically study of C. sinensis infection in the high-incidence areas will contribute greatly to the prevention and effectively controlling the spread of Clonorchis sinensis in Hunan Province The endemic of C. sinensis infection in Hunan Province is the result of co-action of local and foreign parasite species.     

韶关市武江区华支睾吸虫感染状况调查

目的了解韶关市武江区华支睾吸虫感染状况,为制定防治方案提供依据。方法采集1岁以上的常住人群粪便为标本,用清水沉淀集卵法对感染者进行虫卵计数;常见螺蛳分类后压碎于解剖镜下找尾蚴;捕捉淡水鱼分类后取鱼肉压片找囊蚴;清水沉淀集卵法查找家畜粪便虫卵,解剖野鼠肝胆寻找成虫。结果6个点人群粪检3397例,感染者292例,感染率为8.6%。其中轻度感染276例,占94.5%;中度感染14例,占4.79%;重度感染2例,占0.68%。解剖纹绍螺11083只,感染32只,感染率为0.29%;长角涵螺440只,感染4只,感染率为0.91%。解剖淡水鱼334尾,272尾感染,感染率为81.43%。家畜猫粪检33份,感染17份,感染率为51.52%;猪粪58份和牛粪27份,未发现虫卵。解剖猫6只,均找见成虫,猪58头及野鼠43只未发现成虫。结论韶关市武江区存在华支睾吸虫感染,经多年大力防治取得了成绩,人群感染轻度占多数,但仍需继续开展防治工作。     

东莞市淡水鱼华支睾吸虫感染情况调查

目的了解目前东莞地区淡水鱼华支睾吸虫囊蚴感染情况。方法在渔场和鱼塘采集鲩鱼110条和非洲鲫鱼217条,采用消化法检查淡水鱼肉中的华支睾吸虫囊蚴。结果鲩鱼华支睾吸虫囊蚴感染率约为82．72％,非洲鲫鱼未检出囊蚴。结论东莞地区鲩鱼中存在华支睾吸虫囊蚴感染,且感染率较高。     

江门市蓬江区华支睾吸虫病感染调查及流行病学分析

目的 了解江门市蓬江区华支睾吸虫病感染情况及流行因素.方法 采用清水沉淀法粪检华支睾吸虫虫卵,在江门市的蓬江区选择5个镇(区),每个镇(区)选择1个自然村,每个村抽取500人进行人群及中间宿主、保虫宿主的感染情况调查.结果 共调查了2 501人,肝吸虫平均感染率为21.47％,5个自然村感染率差异有统计学意义(x2=258.70,P＜0.05);随着年龄的增大,感染率也逐渐增高,男性41岁以上人群感染率高达50.12％,男性感染率明显高于女性,差异有统计学意义(x2=51.55,P＜0.05).检查了6种鱼共156条,鱼体内肝吸虫囊蚴平均检出率为9.62％;保虫宿主感染率以狗最高,猫次之,未发现猪体感染.蓬江区各人群对华支睾吸虫病防治知识知晓率均低于30.00％.结论 江门市蓬江区是华支睾吸虫病重度流行区,应采取综合防治措施控制华支睾吸虫病的流行.