小鼠肾近曲小管上皮细胞顶侧膜钾通道的膜片钳研究

目的研究小鼠肾脏近曲小管上皮细胞顶侧膜K 通道的生理学特性.方法采用膜片钳细胞贴附式单通道记录急性分离的近曲肾小管上皮细胞顶侧膜K 通道电流.结果该通道在超极化状态下表现为内向电流,斜率电导为(11.4±0.6)pS,且通道开放活动随极化程度增大而增加.在反极化状态下表现为外向电流,并具有内向整流特性.结论小鼠肾脏近曲小管上皮细胞顶侧膜上存在一类低电导的K 通道,其分布广泛,可能参与钾离子转运、调节细胞体积及维持电势能的稳定.     

1,25-二羟维生素D_3对其D_3受体mRNA表达的细胞特异性调节

在支气管平滑肌细胞膜上，研究了钾离子单通道特性，正常平滑肌细胞的静息膜电位为－70．3±35mV．通道电导为75．2±5．1pS，翻转电位为－73±8mV，与钾离子的平衡电位（－75mV）相近．内面向外式与细胞贴附式记录相比较，通道电导无统计学差异。通道动力学特性显示，在膜电位－30mV时，τol、τo2分别为1.25±1.31ms和29．44±8．17m．两个关闭时间常数τcl、τo2分别为0.41±0．28ms和1．41±0．60ms．通道开放无时间依赖性失活．结果提示，75pS的钾通道的开放时间、Po、关闭时间等通道活动状态均受膜电位的影响。与其它组织细胞上的同类通道有差异．     

大鼠纹状体边缘区神经元中乙酰胆碱激活的离子通道特性

用细胞贴附式膜片钳技术研究了急性分离的新生SD大鼠纹状体边缘区神经元中乙酰胆碱激活的离子通道的特性。发现通道有25PS和60PS两种电导状态,25PS通道为主要类型,因此,本文主要报道25PS通道的特性。ACh激活的单通道电流为快速内向电流,随着超极化程度增加而增加,反转电位约为0mV。通道开放具单个开放和簇状开放,其开放时间均可权指数拟和,单个开放时间常数为0．29ms和1.84ms,簇状开放时间常数为1．96ms和18.24ms。平均关闭时间也可双指数拟和,两个时间常数为1．70ms和54．00ms。通道开放概率为0．012,未表现出电压依赖性。提示纹状体边缘区神经元上存在乙酸胆碱受体离子通道。根据特性证实为烟碱型离子通道。     

肾上腺髓质瘤无性繁殖细胞的延时整流单钾离子通道

用片膜钳技术,在大鼠肾上腺髓质瘤无性繁殖细胞(PC12细胞)膜记录电压依赖性单钾离子通道活动:在细胞贴附式下去极化电流可激活一个电导为35～55皮西门(pS)的外向钾离子单通道。通道开放呈爆发型和快速闪动型,平均开放时间在0.5～20ms范围,其潜伏期随去极化程度增大而略变小。由撕开的膜片测得的翻转电位表明此通道选择性地让钾离于通过。通道在低钙(10 nmol/L自由钙离子)溶液中开放,增高胞浆侧钙离于浓度对通道开放无明显影响。20mmol/L四乙铵(TEA)可阻断该通道。在200ms的去极化脉冲中通道开放时间所占比例随去极化程度增大而增大,每20～30mV电位可使开放比率增高e(2.73)倍。在7～25秒长的去极化维持电位中,通道进入然后退出一个长时间的失活状态。以上结果表明,这类通道属于延时整流型钾通道。     

人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞Ca2+通道的电生理特性

目的研究人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞L型Ca2+通道的特性及其激动剂BayK 8644对通道的影响.方法培养SK-N-SH细胞,用膜片钳细胞贴附式技术记录和研究L型Ca2+通道的特性.结果SK-N-SH细胞L型Ca2+通道电导为(27.8±2.56)pS,平均开放时间为(0.65±0.08)ms,平均关闭时间的短关闭时间常数(0.53±0.05)ms,长关闭时间常数(6.02±3.46)ms.Bay K 8644使Ca2+通道平均开放时间延长(P＜0.05),但不影响其电导(P＞0.05).结论人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞上存在L型Ca2+通道,与其他神经元上L型Ca2+通道特性相近.     

大鼠前额叶锥体神经元的 NMDA受体的单通道特性

【目的】探讨大鼠前额叶皮层神经元N 甲基 D 天冬氨酸 (NMDA)受体通道的特性 ,为研究人脑前额叶锥体神经元的NMDA通道提供动物实验依据。【方法】对急性分离的大鼠前额叶的神经元进行细胞贴附式单通道膜片钳记录。【结果】前额叶神经元NMDA受体通道的开放呈现多电导状态 ,表现为 5 5 1,36 5 ,18 6 pS 3种状态 ,以 18 6 pS为优势电导。开放时间主要表现为快时程和慢时程两种状态 ,时间常数均值分别为 :(0 5 5± 0 38)ms和 (13 5 9± 3 2 6 )ms,以短时程为主。关闭时间常数为 (0 34± 0 2 7)ms和 (19 73± 2 4 1)ms。开放概率为 (0 2 5± 0 0 9)。【结论】前额叶神经元NMDA受体通道呈多电导 ,以低电导 18 6pS为优势。开放时程短者占优势 ,关闭时间短暂 ,开放概率高 ,表明前额叶锥体神经元NMDA受体通道的活动以快速短暂样开放为主。     

海马神经元乙酰胆碱受体通道的动力学特性

用膜片钳技术研究了新生大鼠海马神经元乙酰胆碱受体通道的特性。通道有３种电导状态。本文分析３１ｐＳ迈过有以下特性：①随超极化程度增加，内向电流幅度增加，反转电位为０ｍＶ。②通道开放以单个事件为主，簇状开放不常见。③该通道对钠钾离子无选择性。④开放时间分布直方图需双指数拟合，两个时间常数分别为０．３１ｍｓ和１．５１ｍｓ，分别占６６％和３４％。平均关闭时间也需双指数拟合，两个时间常数为０．３ｍｓ和８６ｍｓ，各占７１％和２９％。⑤开放概率为０．００８５，无电压依赖性．提示神经元上存在着不同的乙酰胆碱受体通道。     

缺氧缺糖对大鼠大脑皮层神经元电压依赖性钾通道的影响

目的：研究在缺氧缺糖状态下，大鼠大脑皮层神经元膜电压依赖性钾通道的开关动力学变化。方法：急性分离大鼠大脑皮层神经元和细胞贴附膜片钳技术。结果：与对照组相比，在缺氧缺糖状态下，电压依赖性钾通道开放时间常数τ１和τ２分别由对照组的０．４２９ｍｓ和８．２０９ｍｓ增加至１．８５５ｍｓ和１７．４６４ｍｓ（Ｐ＜０．０１），关闭时间常数τ和通道的电流幅度无明显变化。结论：缺氧缺糖可导致大鼠皮层神经元电压依赖性钾通道开放显著增加，对胞外钾离子聚集起重要作用，从而提高细胞的兴奋性，参与神经元的损伤。     

肾上腺髓质瘤无性繁殖细胞膜上的异常整流钾通道

作者用斑片钳技术,在传代培养的大鼠肾上腺髓质瘤无性繁殖细胞(PC12 cell)膜上记录电压依赖性钾离子通道活动。观察到两种超极化时激活的内向离子流,电导为30～60皮西门(PS)及大于100 pS。电导大的通道活动常呈大的闪动样关闭及簇状猝发。电导30～60 pS的钾通道具有如下特征:①明显的电压依赖性。在膜超极化到阈电位水平(30 mV)时,通道开放。同一电压下,单通道电流幅度基本一致,呈正态分布。不同钳位电压下,随着超极化程度增大,电流幅度渐增大。②平均开放时间和开放概率随超极化程度增大而增大,关闭时间则随之而减小。③I-V曲线上显示翻转电位接近K~ 的平衡电位。④钾通道阻断剂TEA能阻断该通道。     

原代培养猪冠状动脉平滑肌的电压依赖和钙激活钾通道

目的：研究原代培养的猪冠状动脉平滑肌电压依赖性和钙激活外向钾通道的特性。方法：离子通道电流采用膜片钳技术进行记录。结果：在内面向外式膜片构型,当膜内外K^ 浓度梯度类似生理状态时,该通道单位电导值约为100pS,而当膜内外K^ 浓度为对称的140mM浓度时,该通道单位电导值约270pS。其平均电流显示该通道具时间和电压依赖性激活特性,而无任何时间和电压依赖性失活特性。另外,通道的开放时间常数和开放概率随除极及胞内Ca^2 的增加而显著增加。通过用EGTA降低胞浆内Ca^2 浓度,可使外向电流抑制。动力学分析显示通道激活时存在一种开放状态和至少两种关闭状态。四乙胺（TEA）可在胞外侧阻断该电流,但高达15mM的4－氨基吡啶（4－AP）在胞内外都对通道无影响。在全细胞构型,对细胞膜进行除极可引出宏观外向电流。随着细胞的除极,该电流的激活时间常数逐渐缩短,并显示快速激活动力学特性。结论：在原代培养的猪冠状动脉平滑肌上存在有电压依赖和Ca^2 激活的K^ 选择性离子通道。该类通道具有非常高的单位电导值,除极时快速开放,对胞内Ca^2 高度敏感,但无失活等特性。     

Single voltage-dependent potassium channels in isolated habenula neurons(Preliminary report)

目的：观察和探讨缰核细胞膜上延迟整流钾电流（Ｉｋ）的性质。方法：应用细胞吸附式膜片钳记录技术。结果：去极化阶跃电压激活该通道电导为３０～３５ｐＳ的外向单通道电流；呈电压依赖性；平均开放时间随去极化电位的增长（０ｍＶ～６０ｍＶ）由３．７２±１．５ｍｓ提高到３２．２±５．６ｍｓ。可以认为，通道的开放不依赖于电极内Ｃａ２＋的存在，四乙基胺明显抑制通道的开放。结论：由以上结果判断，此电流为外向延迟整流钾电流（Ｉｋ）。     

应用膜片钳制技术对豚鼠耳蜗外毛细胞高电导钾通道电生理特性的研究

为了研究耳蜗外毛细胞的基本电生理特性，应用细胞膜片钳制技术对豚鼠耳蜗外毛细胞底侧膜的高电导的钾通道进行了初步研究。结果显示，其高电导钾通道有以下典型特征：①具有明显的电压依赖性。在膜去极化时，通道被激活，其去极化程度越高，通道活动越强。在非对称性钾浓度梯度下，其反转电位为－３０ｍＶ，斜率电导约１３３±３ｐＳ（ｎ＝５）；②通道活动能被特异性阻断剂四乙胺（ＴＥＡ）在较高浓度下（＞１０ｍｍｏｌ／Ｌ）阻断，ＴＥＡ的阻断效应呈浓度依赖性；③胞浆内钙浓度的增高，能显著激活该通道，增加其开放概率和平均开放时间。上述结果表明：豚鼠耳蜗外毛细胞存在着高电导的电压依赖的钙激活的钾通道。该研究为进一步开展通道活动的调控，以及药物等因素对通道活动影响的研究，提供了有价值的资料。     

POTASSIUM CHANNELS ON CARDIOMYOCYTES OF SELENIUM IODINE DEFICIENCY RATS AND IODINE DEFICIENCY RATS

INTRoDUt?Tl()NOneofthemainpathogenicfact()rofKeshandis-easeisselensiumdeflclencythatisprevaillngonalongstripregionfromeasttosouthwestinourcountry'Theiodinedeficiencydiseaselsendemicall()verourcountryexceptShanghai.Accordingtt)theinf()rmationofgeochem1stry,thesoilofepidemlcregioncontalnsmuchlessseleniumandiodinethanthatofnodiseaseregiondoes-Therefore,theseleniumandiodineinfoodproducedfromKeshandiseaseregionislessthannormalvalue.SeleniumisanessaserycomponentofSe(iSHPx(seleniumdependentglut…     

大鼠纹状体神经元的延时整流钾离子单通道

用膜片钳技术对培养的纹状体神经元胞体上的电压依赖性钾离子通道进行了研究。在细胞贴附式下，去极化可激活一个电导为５０ｐＳ的外向钾离子单通道。５０ｐＳＫ＋通道的特性表明该通道属于延时整流型钾通道。     

大鼠血清甲状腺素含量与肾近端小管细胞膜发育的相关研究

本文对血清T_3、T_4不同含量大鼠肾浅皮质近端小管上皮细胞刷状缘长度、侧基底细胞膜面积进行了立体计量学测算。并且对T_3、T_4含量与刷状缘长度、侧基底细胞膜面积进行了复相关分析。结果表明T_3、T_4与刷状缘长度、侧基底细胞膜面积呈正相关。复相关系数前者为R=0.833(P<0.005),后者为R=0.759(P<0.05)。标准回归方程前者为y=0.071-0.05x_1+0.87x_2,后者为y=68560.94+0.44x_1+0.35x_2。     

肿瘤坏死因子—α激活ECV304钙激活钾主G蛋白的增强效应

目的　观察肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)对人脐静脉内皮细胞株 ECV30 4钙激活钾通道 (BKca)的影响以及 G蛋白是否在此过程中起作用。方法　细胞贴附式膜片箝技术。结果　发现 ECV30 4细胞膜上存在大电导钙激活钾通道 (BKca) ,它的电导是 (2 0 2 .5 4± 16 .6 2 ) p S,其活动可被 2 0 0 U / m l TNF-α增强 ,G蛋白在此过程中起介导作用。结论　 TNF-α作用于内皮细胞 ,快速激活 BKca,促进钾离子大量外流 ,使细胞膜发生超极化 ,增大静息钙离子内流的电化学驱动力 ,开放静息钙通道升高静息胞内钙离子浓度。G蛋白可增强此激活效应。     

急性分离大鼠新皮层神经元KATP通道的多电导状态

在１９３例急性分离大鼠皮层神经元内面向外式记录膜片上，记录到２例能为ＡＴＰ和优降糖所阻断的含有亚电导的通道电流。其电流幅度分布直方图符合高斯分布，并能很好地进行二级拟合；主电导水平分别为１９１．８ｐＳ和１９４．５ｐＳ，亚电导水平分别为１５３．２ｐＳ和１１６.１ｐＳ；亚电导成份分别占单位事件总数的３５．０５％和２９.８４％；通道活动呈高电流水平与低电流水平交替开放状态，没有高低电流叠合现象。这些结果表明这种Ｋ_ＡＴＰ通道的多电导开放电流不是两个或多个独立通道的开放所致，而是同一通道的不同亚型状态交互活动（即高电导和低电导状态相互转换）的表现。从而提示神经细胞膜上的Ｋ_ＡＴＰ通道可能受某种或某些膜内外环境的变化影响导致其构象改变，从而引发多种亚型交替活动现象。     

NONLINEAR PROPERTY MEMBRANE RECTIFIER POTASSIUM CHANNEL AND INHIBITORY EFFECTS OF OXYGEN FREE RADICAL

There are at least eight kinds of different potassium chennels on cardiac cell membrane. This paperpresents a nonlinear property membrane outward; current going rectifying potassium channel and the in-hibitory efeets of oxygen free radical on this channel. The current-vohage relation of this nonlimmr-mem-brahe can be defined by an equation I=8a^3/(0.01v^2 4a^2)2 and the maximum conductance of this channel is-75.3pS.