基于“表里关联”的大黄炭炮制过程颜色和成分变化关系研究

目的 研究大黄炭炮制过程颜色特征与化学成分的关联性规律，为建立基于颜色量化值的大黄炭炮制过程控制方法和终点判断标准奠定基础。方法 分别在不同温度和时间下制备大黄炭样品，以大黄炭炮制的经验判断为依据，利用视觉分析仪与紫外-可见光谱仪量化大黄炭不同炮制条件的粉末和饮片颜色。同时采用HPLC指纹图谱的方法评价大黄炭炮制过程中化学成分动态变化，利用多元统计学方法对大黄炭炮制过程样品颜色量化值与特征成分进行关联分析。结果 在大黄炭炮制过程中，随着炭化程度的增大，样品表观颜色由淡黄棕色逐渐加深至焦黑色，样品饮片和粉末的明度值（L^*）、红绿色值（a^*）、黄蓝色值（b^*）之间高度相关。HPLC指纹图谱上26个特征峰的面积与色度值均有不同程度的相关性，其中随炭化程度加深而含量递减的5个结合蒽醌类成分（芦荟大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄酸-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄酚-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷）和2个番泻苷类成分（番泻苷A、番泻苷B）与色度值呈线性相关关系，含量先增后减的5个游离蒽醌类成分（芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素、大黄素甲醚）、没食子酸和5-羟甲基糠醛（5-HMF）与色度值呈二次相关关系。结论 大黄炭炮制过程中的颜色主观判断与量化检测的分析结果一致，颜色量化值与14种已知化学成分的含量具有显著的相关性，初步推断颜色量化值可作为大黄炭炮制过程的质量控制和终点判定指标，以提高大黄炭饮片的质量水平及其一致性。     

金振口服液HPLC-UVD-ELSD特征指纹图谱及13个成分同时定量的整体质量控制研究

目的 建立金振口服液（Jinzhen Oral Liquid，JOL）高效液相色谱-紫外真空波-蒸发光散射检测器（HPLC-UVD-ELSD）特征指纹图谱，结合13个主要代表性成分（没食子酸、甘草苷、芦荟大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、甘草素、黄芩苷、白杨素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸、千层纸苷、汉黄芩苷、大黄酚-1-O-β-D-葡萄糖苷、大黄酚-8-O-β-D葡萄糖苷、甘草酸、猪去氧胆酸、胆酸）同时定量的方法，对市售制剂进行整体质量控制。方法 采用Cosmosil-C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；检测波长为254 nm；ELSD漂移管温度115℃；载气体积流量2.0 L/min；以甲醇-水（含0.1%甲酸）为流动相进行梯度洗脱，建立JOL的HPLC-UVD-ELSD特征指纹图谱，对主要特征峰进行明确化学指认并确定组方中药来源，运用相似度软件对15批市售制剂进行相似度评价，同时在市售制剂批间差异小的前提下测定主要代表性成分的含量。结果 建立了JOL的HPLC-UVD-ELSD指纹图谱结合13个代表性成分同时定量的方法；覆盖该复方4味组方中药的15个主要特征峰得到明确化学指认，分别为没食子酸（1号峰）、甘草苷（5号峰）、芦荟大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷（7号峰）、甘草素（11号峰）、黄芩苷（13号峰）、白杨素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸（16号峰）、千层纸苷（17号峰）、汉黄芩苷（18号峰）、大黄酚-8-O-β-D-葡萄糖苷（19号峰）、大黄酚1-O-β-D-葡萄糖苷（20号峰）、大黄酸（24号峰）、甘草酸（26号峰）、（18β，20α）-甘草酸（27号峰）、猪去氧胆酸（28号峰）、胆酸（29号峰），并初步确定了29个特征峰的组方中药来源分别为8、12、13、15～18号峰归属于黄芩，3～5、10、11、25～27号峰归属于甘草，1、6、7、9、14、19、20、24号峰归属于大黄，2号峰归属于平贝母，28、29号峰归属于人工牛黄，21～23号峰归属于辅料；15批市售制剂的指纹图谱与对照指纹图谱的相似度值在0.968～1.000；13个定量成分线性关系良好（R²＝0.999 0～0.999 9），且平均回收率为96.90%～102.84%，15批市售制剂定量成分的质量浓度分别为没食子酸51.82～148.27 μg/mL、甘草苷75.04～130.00 μg/mL、芦荟大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷31.72～39.84 μg/mL、甘草素14.24～43.65 μg/mL、黄芩苷610.37～867.40 μg/mL、白杨素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸12.87～34.09 μg/mL、千层纸苷62.45～101.48 μg/mL、汉黄芩苷155.41～205.86 μg/mL、大黄酚-1-O-β-D-葡萄糖苷11.56～23.72 μg/mL、大黄酚-8-O-β-D葡萄糖苷16.14～36.87 μg/mL、甘草酸222.97～310.32 μg/mL、猪去氧胆酸177.48～239.70 μg/mL、胆酸98.54～132.85 μg/mL。结论 所建立的金振口服液HPLC-UVD-ELSD特征图谱和定量测定分析方法为进一步提升制剂整体质量标准提供了重要证据。     

鬼针草化学成分研究

目的 研究鬼针草Bidens bipinnata的化学成分。方法 应用硅胶、Sephadex LH-20、制备液相等多种色谱技术进行分离纯化,并通过多种波谱分析方法鉴定化合物。结果 从鬼针草95%乙醇提取物中分离得到18个化合物,分别鉴定为槲皮素-5-O-β-D吡喃葡萄糖苷（1）、奥卡宁-4′-O-β-D-(2″, 4″, 6″-三乙酰基)-吡喃葡萄糖苷（2）、奥卡宁-4′-O-β-D-(3″,4″-二乙酰基-6″-反式-对-香豆酰基)-吡喃葡萄糖苷（3）、木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（4）、山柰酚-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（5）、山柰酚-3-O-β-D-芸香糖苷（6）、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（7）、槲皮素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（8）、金丝桃苷（9）、芦丁（10）、柚皮素（11）、芹菜素（12）、槲皮素（13）、5, 7-二羟基色原酮-7-O-β-D-葡萄糖苷（14）、咖啡酸（15）、没食子酸（16）、β-谷甾醇（17）、胡萝卜苷（18）。结论 化合物1和11为首次从鬼针草属植物中分离得到,化合物3～7、14、15、18为首次从鬼针草中分离得到。     

朝鲜白头翁抗炎有效部位化学成分研究

目的 筛选朝鲜白头翁Pulsatilla cernua的抗炎有效部位并研究其化学成分。方法 将朝鲜白头翁干燥根以70%乙醇回流提取,提取物经大孔吸附树脂柱色谱洗脱,依次得到水及30%、50%、95%乙醇洗脱组分,通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验以确定其抗炎有效部位;采用各种柱色谱分离纯化抗炎有效部位中的化合物,根据理化特征并结合波谱学数据分析鉴定化合物的结构。结果 朝鲜白头翁根经大孔吸附树脂柱色谱,50%乙醇洗脱组分具有较强的抗炎活性,对其进行系统的化学成分研究,共分离得到12个化合物,分别鉴定为 (+)-8-羟基松脂素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（1）、3, 4:3′, 4′-bis (methylenedioxy)- 9′-hydroxyl-lignane-9-methyl-O-β-D-glucopyranoside（2）、prinsepiol-4-O-β-D-glucopyranoside（3）、(+)-环合橄榄树脂素-6-O-β-D-葡萄吡喃糖苷（4）、6-O-(E)-feruloyl-β-glucopyranoside（5）、6-O-(E)-feruloyl-α-glucopyranoside（6）、齐墩果酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖（7）、常春藤苷基-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖- (1→3)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖（8）和常春藤苷基-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖（9）、齐墩果酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷（10）、刺囊酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷（11）和羽扇豆醇（12）。结论 朝鲜白头翁50%乙醇洗脱组分为其抗炎有效部位,该部位中得到的化合物2～4、6、8和9为首次从白头翁属植物中分离得到。     

瓦山安息香树皮的化学成分研究

目的 研究瓦山安息香Styrax perkinsiae树皮的化学成分.方法 采用硅胶柱色谱、大孔吸附树脂等方法进行分离纯化,根据波谱数据并参考文献鉴定其化学成分.结果 从瓦山安息香树皮正丁醇部位分离得到10个木脂素类化合物,分别鉴定为obassioside B(1)、落叶松脂醇-4-O-β-D-葡萄糖苷(2)、(-)-开环异落叶松脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3)、落叶松脂醇-4'-O-β-D-葡萄糖苷(4)、lanicepside A(5)、异落叶松脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)、(+)-落叶松醇-9-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、isotachioside(8)、2R^*,3S^*-dihydrodehydrodiconiferyl alcohol 4'-O-β-D-glucopyranoside(9)、松脂醇(10).结论 化合物2～9为首次从安息香属植物中分离的得到.     

缬草水提取物的化学成分研究

目的 对缬草Valeriana officinalis水提取物中的化学成分进行研究。方法 运用正相硅胶柱色谱、ODS反相柱色谱、制备高效液相色谱等分离手段进行分离纯化,采用核磁共振、质谱等多种波谱学技术鉴定化合物的化学结构,并采用Griess法评价其对脂多糖诱导的小胶质细胞BV-2神经炎症的抑制活性。结果 从缬草水提取物中分离得到了12个化合物,分别为tinnevellin-8-O-β-D-glucopyranoside（1）、大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（2）、(2R,3S)-肥牛木素（3）、左旋橄榄素-9''-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（4）、左旋马尾松树脂醇-3a-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（5）、金色酰胺醇乙酸酯（6）、松脂素（7）、8-羟基松脂素（8）、松脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（9）、8,8''-二羟基松脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（10）、(2S)-橙皮苷（11）和香蜂草苷（12）。结论化合物1～4和6均为首次从缬草属植物中分离得到。其中,化合物3～4、6、9、11～12在不影响BV-2的细胞活力前提下,可以抑制脂多糖诱导的BV-2细胞神经炎性因子一氧化氮（NO）的产生。     

洋金花叶化学成分研究（I）

目的 研究洋金花Datura metel 叶的化学成分。方法 应用乙醇提取洋金花叶,采用硅胶、AB-8大孔吸附树脂、ODS和Sephadex LH-20等柱色谱以及制备液相等技术分离纯化化合物,根据理化性质及波谱数据进行结构鉴定。结果 从洋金花叶中分离得到14个化合物,分别鉴定为naphthisoxazol A（1）、刺龙芽糖苷I（2）、L-色氨酸（3）、槲皮素3-O-2-(E-咖啡酸)-α-L-阿拉伯糖-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖-7-O-β-D-葡萄糖苷（4）、正丁基-O-α-D-呋喃果糖苷（5）、金线莲碱（6）、二氢催吐萝芙木醇-O-β-D-葡萄糖苷（7）、(6S, 7E, 9S)-9-[(β-D-glucopyranosyl)-oxy] megastigma-4, 7-dien-3-one（8）、山柰酚-3, 7-二- O-β-D-吡喃葡萄糖苷（9）、山柰酚-7-O-β-D-葡萄糖苷（10）、槲皮素-7-O-葡萄糖苷（11）、(6S, 9R)-6-羟基-3-酮-α-紫罗兰醇-9-O-β-D-葡萄吡喃糖苷（12）、豆甾醇（13）、豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷（14）。结论 化合物1～8为首次从茄科中分离得到。     

白芍中1个新的单萜苷化合物

目的 对白芍进行化学成分研究。方法 综合应用多种现代色谱分离技术进行系统的分离和纯化，根据化合物的理化性质和核磁共振波谱数据进行结构鉴定。结果 从白芍65%乙醇提取物中分离得到11个化合物，分别鉴定为（4S）-紫苏酸α-L-阿拉伯糖基-（1''→6''）-β-D-葡萄糖苷（1）、4，9-二羟基-8，10-去氢百里香酚-1-O-β-D-葡萄糖苷（2）、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷（3）、白藜芦醇（4）、苯甲酸葡萄糖苷（5）、猫儿刺酚苷A（6）、儿茶素（7）、没食子酸甲酯（8）、没食子酸乙酯（9）、3-甲氧基没食子酸（10）、1，2，3，4，6-O-五没食子酰葡萄糖苷（11）。结论 化合物1为新化合物，命名为紫苏酸苷；化合物2和5为首次从芍药属植物中分离得到。     

荔枝核的化学成分及生物活性研究

目的 研究荔枝Litch chinensis核正丁醇部位的化学成分及生物活性。方法 利用硅胶、D101大孔树脂、MCI、ODS、Sephadex LH-20及半制备型高效液相等色谱技术进行分离纯化，根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构；采用Griess法测定化合物对脂多糖诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7产生一氧化氮（NO）的抑制活性；采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-trinitrophenylhydrazine，DPPH）方法测定化合物的体外抗氧化活性。结果 从荔枝核正丁醇部位分离得到15个化合物，分别鉴定为柚皮素-7-O-(2'',6''-二-O-α-L-鼠李糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷（1）、litchioside D（2）、异鼠李素-3-O-(2'',6''-二-O-α-L-鼠李糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷（3）、山柰酚-3-O-(6-O-啡酰基)-β-葡萄糖基-(1→3)-α-鼠李糖-7-O-α-鼠李糖苷（4）、5''-O-β-D-葡萄糖苷茉莉酮酸甲酯（5）、5''-O-β-D-葡萄糖苷茉莉酮酸丁酯（6）、5''-O-β-D-葡萄糖苷茉莉酮酸（7）、松脂素-4-O-β-D-葡萄糖苷（8）、表松脂素-4-O-β-D-葡萄糖苷（9）、pyrafortunoside A（10）、苯乙基芸香苷（11）、苯甲醇-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（12）、methyl-1-(β-D-ribofuranosyl)-imidazolin-2-one-4-carboxylate（13）、莽草酸甲酯（14）和莽草酸（15）。体外抗炎活性结果表明，化合物13能明显抑制脂多糖诱导的RAW264.7细胞NO释放，其半数抑制浓度（median inhibition concentration，IC₅₀）为（27.9±2.8）μmol/L；化合物15具有一定的抑制活性，其IC₅₀为（62.4±9.7）μmol/L。体外抗氧化活性结果表明，化合物4对DPPH自由基具有一定的清除活性，其IC₅₀为（109.8±1.5）μmol/L。结论 化合物1、3～6、9～15为首次从荔枝核中分离得到。化合物13有较强体外抗炎活性，化合物15有一定的体外抗炎活性。化合物4具有一定的体外抗氧化活性。     

HPLC同时测定裸花紫珠中4种黄酮

目的： 建立同时测定裸花紫珠药材中木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、木犀草素、5,4’-二羟基-3,7,3’-三甲氧基黄酮和5-羟基-3,7,3’,4’-四甲氧基黄酮含量的反相高效液相色谱法。 方法： 采用HPLC,Venusil XBP-C₁₈色 谱柱（4.6 mm×200 mm,5 μm）,流动相甲醇-体积分数为0.1%磷酸水系统,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^﹣1,柱温室温,检测波长350 nm。 结果： 在上述色谱条件下测得木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、木犀草素、5,4’-二羟基-3,7,3’-三甲氧基黄酮和5-羟基-3,7,3’,4’-四甲氧基黄酮的质量浓度分别在0.000 8~0.016,0.001 6~0.032,0.004~0.08,0.002 4~0.048 g·L^-1 时与色谱峰面积之间线性关系良好;平均回收率为98.5%（RSD 1.7%）,98.6%（RSD 1.6%）,98.6%（RSD 1.4%）,98.6%（RSD 1.7%）。 结论： 该方法精密度高,重复性好,可用于裸花紫珠药材中木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、木犀草素、5,4’-二羟基-3,7,3’-三甲氧基黄酮和5-羟基-3,7,3’,4’-四甲氧基黄酮的含量测定。