HPLC法同时测定骨折挫伤胶囊中7种成分的含量

目的建立HPLC法同时测定骨折挫伤胶囊中羟基红花黄色素A、血竭素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量。方法采用ZORBAX Eclipse Plus-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速:1.0 mL·min^-1,柱温:35℃,检测波长:403、440、254 nm。结果羟基红花黄色素A、血竭素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚质量浓度分别在2.111~21.11μg·mL^-1(r=0.999 1)、1.483~14.83μg·mL^-1(r=0.999 3)、1.180~11.80μg·mL^-1(r=0.999 7)、0.8182~8.182μg·mL^-1(r=0.999 7)、1.011~10.11μg·mL^-1(r=0.999 7)、1.075~10.75μg·mL^-1(r=0.999 6)和1.045~10.45μg·mL^-1(r=0.999 7)范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率(n=6)分别为100.30%(RSD=2.24%)、97.42%(RSD=1.63%)、96.21%(RSD=0.92%)、101.17%(RSD=2.74%)、95.84%(RSD=1.31%)、97.71%(RSD=2.49%)和95.50%(RSD=1.15%)。结论该方法准确度高、重复性好,可为骨折挫伤胶囊的质量控制提供参考。     

UPLC-MS/MS法测定大鼠灌服稳心颗粒后血浆中3个皂苷成分及其药动学研究

目的:采用UPLC-MS/MS法测定大鼠灌服稳心颗粒后血浆中3个皂苷成分的浓度,并研究其药动学特征。方法:血浆样品以甲醇-乙腈(1:1)沉淀蛋白,采用CORTECS-C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.6μm),以0.1%甲酸水(A)-乙腈(含0.1%甲酸)(B)为流动相进行梯度洗脱,于ESI负离子模式下检测。结果:人参皂苷Rd和Rg1在0.5~20 ng/m L,人参皂苷Rb1在1~40 ng/m L范围内线性关系良好(r大于0.99),3个成分的提取回收率为人参皂苷Rd105.2%~120.7%,人参皂苷Rg1 101.9%~123.9%,人参皂苷Rb1 92.8%~116.9%。结论:该方法简便、准确、灵敏,可用于稳心颗粒药动学研究。     

HPLC法同时测定麦芽总碱提取物中生物碱及麦黄酮的含量

目的建立HPLC法同时测定麦芽总碱提取物中3种生物碱和1种黄酮类成分含量的方法。方法色谱柱:phenomenex■C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.1 mol·L^-1磷酸二氢钾溶液,梯度洗脱;流速:1.0 mL·min^-1;柱温:30℃;进样量:20μL;检测波长:276 nm。结果辛弗林、大麦芽碱、芦竹碱、麦黄酮质量浓度分别在5~250μg·mL^-1(r=0.9997),5~250μg·mL^-1(r=0.999 9),5~250μg·mL^-1(r=0.9996)范围内线性关系良好,精密度、稳定性、重复性及加样回收率的RSD均小于3%。结论该方法操作简便,稳定性、重复性好,可用于麦芽总碱提取物中辛弗林、大麦芽碱、芦竹碱、麦黄酮的含量测定。     

五指柑药材质量标准研究

目的建立五指柑药材的质量标准。方法以隐绿原酸、异牡荆苷和木犀草素-3’-葡萄糖醛酸苷为对照,建立五指柑薄层鉴别方法;建立异荭草苷和木犀草素-3’-葡萄糖醛酸苷含量的HPLC测定方法,采用Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱;检测波长:340 nm;流速:1.0 mL·min^-1;柱温:30℃。结果五指柑在薄层色谱中检出隐绿原酸、异牡荆苷和木犀草素-3’-葡萄糖醛酸苷,且分离效果较好;含量测定结果表明,异荭草苷在11.64~116.4μg·mL^-1,木犀草素-3’-葡萄糖醛酸苷在21.2~212.0μg·mL^-1质量浓度范围内具有良好的线性关系,回归方程分别为Y=52 474X+35 233,r=0.999 6;Y=82 694X-1 199.4,r=0.999 9,平均回收率分别为97.19%、97.06%,RSD为1.92%、1.35%。10批五指柑异荭草苷的含量为0.24~0.80 mg·g^-1,木犀草素-3’-葡萄糖醛酸苷的含量为0.26~1.57mg·g^-1。结论所建立的方法具有良好的专属性和准确性,可用于五指柑药材的质量控制。     

UFLC法同时测定栀子中4种活性成分的含量

目的建立超快速液相色谱(UFLC)法同时测定栀子中京尼平苷、京尼平1-β-D-龙胆双糖苷、京尼平苷酸和绿原酸的含量。方法采用Shim-Pack XR-ODS柱(75 mm×3.0 mm,2.2μm);流动相为0.1%甲酸(A)-乙腈(B),梯度洗脱(0~5 min,7%~12%B;5~11 min,12%~13%B);平衡时间为2 min;流速为0.4 m L·min~(-1);检测波长为240 nm;柱温为35℃。结果京尼平苷、京尼平1-β-D-龙胆双糖苷、京尼平苷酸和绿原酸分别在20~200μg·m L-1(r=0.999 9)、4.0~40μg·m L~(-1)(r=0.999 7)、4.0~40μg·m L~(-1)(r=0.999 9)和4.0~40μg·m L~(-1)(r=0.999 9)浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率分别为99.0%、99.6%、96.9%和98.7%(n=9)。结论该方法简便、快速,重复性良好,可为栀子药材的质量控制提供依据。     

UPLC-MS/MS法同时测定降脂活血片中5种成分

目的建立超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)法同时测定降脂活血片(何首乌、黄芪、川芎等)中5种成分的含有量。方法该药物50%甲醇提取液的分析采用Restek UItra Bi Ph色谱柱(100 mm×2.1 mm,5μm);以乙腈(含0.1%甲酸)-0.1%甲酸为流动相,梯度洗脱;体积流量0.4 mL/min;柱温40℃。结果二苯乙烯苷、丹参酮Ⅱ_A、大黄素、阿魏酸、葛根素分别在4.01~1 027、0.73~187、1.48~380、3.98~1 020、4.285~1 097 ng/mL范围内线性关系良好(r0.994 0),平均加样回收率98.57%~101.0%,RSD(n=6)均小于4.79%。结论该方法专属性强,灵敏度高,可用于降脂活血片的质量控制。     

UPLC-MS/MS法同时测定安喘舒丸中腺苷和黄芪甲苷含量

目的:建立同时测定安喘舒丸中腺苷、黄芪甲苷含量的方法。方法:采用液质联用技术,以甲醇-0.1%甲酸溶液为流动相等度洗脱,以Agilent ZORBAX SB-C_(18)色谱柱为分析柱,通过电喷雾离子源,选择正离子模式多反应监测方式检测。结果:腺苷、黄芪甲苷的线性范围分别为10~320 ng·m L~(-1)(r=0.996 8)、5~160 ng·m L~(-1)(r=0.995 5),加样回收率在96.17%~99.48%,RSD均低于1.14%。结论:该法专属性强、快速灵敏,可用于安喘舒丸中腺苷、黄芪甲苷的含量测定。     

附子理中丸中制附子的6种生物碱成分含量测定

目的:建立高效液相色谱-三重四级杆串联质谱(HPLC-QQQ-MS)法同时测定附子理中丸中制附子6种生物碱成分含量的方法。方法:采用Thermo Accucore RP-MS色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.6μm),以0.1%甲酸水-0.1%甲酸乙腈为流动相,流速0.3 m L·min-1,柱温30°C。质谱条件:采用电喷雾电离源(ESI),正离子检测模式,扫描方式为多反应离子监测模式(MRM),定量分析离子分别为苯甲酰新乌头碱m/z 105.0,苯甲酰乌头碱m/z 105.0,苯甲酰次乌头碱m/z 542.3,新乌头碱m/z 572.3,乌头碱m/z 586.3,次乌头碱m/z 556.3。结果:苯甲酰新乌头碱、苯甲酰乌头碱、苯甲酰次乌头碱、新乌头碱、乌头碱、次乌头碱线性范围分别在0.184 80~1.848 ng(r=0.999 6),0.035 36~0.353 6 ng(r=0.999 6),0.129 60~1.296 ng(r=0.999 8),0.011 65~0.116 5 ng(r=0.999 8),0.002 95~0.029 5 ng(r=0.999 8),0.036 96~0.369 6 ng(r=0.999 8),6种生物碱的含量在一定范围内线性关系良好(r0.999 6)。加样回收率在91.93%~106.70%,RSD均6.00%。结论:该方法简单、准确、灵敏、重复性好,可用于附子理中丸中制附子生物碱成分的含量测定。     

速效止泻胶囊质量标准的研究

目的建立速效止泻胶囊(盐酸小檗碱,拳参)中没食子酸和绿原酸的定量检测方法。方法速效止泻胶囊50%甲醇液的分析采用高效液相色谱法;Waters Symmetry SheildTMRP18色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm);流动相为乙腈-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量为0.8 m L/min;柱温30℃;检测波长为290 nm。结果没食子酸和绿原酸质量浓度分别在5.73~183.39μg/m L(r=1)及6.52~208.65μg/m L(r=0.999 9)范围内与峰面积线性关系良好;加样回收率(n=5)分别为101.2%(RSD为1.1%)和103.6%(RSD为0.8%)。结论该方法准确简便、灵敏度高,可用于速效止泻胶囊的质量控制。     

HPLC法测定不同产地大叶冬青叶中4种三萜类成分的含量

目的建立HPLC法测定大叶冬青叶中羽扇豆醇、豆甾醇、α-香树脂素和苦丁冬青苷D含量的方法,对比分析26批来自不同产地及不同采收期大叶冬青叶中4种成分的含量,为其质量标准的完善提供参考。方法采用YMC-ODS C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇(A)-0.4%磷酸水溶液(B)为流动相等度洗脱,流速1 mL·min^-1,检测波长205 nm,柱温30℃,进样量20μL,建立同时测定羽扇豆醇、豆甾醇、α-香树脂素含量的方法;以乙腈(A)-0.4%磷酸水溶液(B)为流动相等度洗脱,流速1 mL·min^-1,检测波长254 nm,柱温30℃,进样量10μL,建立测定苦丁冬青苷D含量的方法。结果在上述色谱条件下羽扇豆醇、豆甾醇、α-香树脂素分离度良好,分别在质量浓度18.88~906.00μg·mL^-1(r=1.000 0,n=6)、15.06~723.00μg·mL^-1(r=0.999 9,n=6)、22.75~1 092.00μg·mL^-1(r=0.999 9,n=6)呈良好的线性关系,平均加样回收率(n=6)分别为100.43%(RSD=1.96%)、98.72%(RSD=0.88%)、102.86%(RSD=2.47%)。苦丁冬青苷D在质量浓度9.55~573.00μg·mL^-1(r=0.9999,n=6)呈良好的线性关系,平均加样回收率为101.35%(RSD=0.25%)。结论所建立的测定方法简单方便、结果准确、重复性好,可用于测定大叶冬青叶中羽扇豆醇、豆甾醇、α-香树脂素和苦丁冬青苷D的含量,为大叶冬青质量标准的建立提供理论依据。不同产地及不同采收时期大叶冬青叶中4种三萜类成分含量存在明显差异。     

超高液相色谱法测定盐肤木中8种成分含量

目的建立超高效液相色谱法同时测定盐肤木中8种成分含量方法,为盐肤木药材的质量控制提供依据。方法采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱,流速0.3 mL/min,柱温35℃,检测波长275 nm。结果没食子酸、苔黑酚葡萄糖苷、没食子酸甲酯、3,5-二羟基甲苯、鞣花酸、漆黄素、五没食子酰葡萄糖和根皮苷的线性范围分别为23.31~1165.5 ng(r=0.9992)、27.02~1351.5 ng(r=0.9991)、6.30~315.0 ng(r=0.9992)、12.36~618.0 ng(r=0.9992)、17.14~857.5 ng(r=0.9996)、9.24~461.5 ng(r=0.9998)、25.29~1264.5 ng(r=0.9996)和6.18~309.0 ng(r=0.9993),平均加样回收率为96.77%~99.41%(RSD为2.23%~3.24%)。盐肤木样品经聚类分析和主成分分析可分为两类,且没食子酸、五没食子酰葡萄糖、没食子酸甲酯和漆黄素等成分在两类中的分布存在差异。结论本研究建立的方法可为完善盐肤木药材的质量标准和加强质量控制提供依据。     

HPLC-PAD法同时测定复方黄柏液涂剂中9种成分的含量

目的:建立同时测定复方黄柏液涂剂中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、盐酸黄柏碱、连翘酯苷A、异绿原酸B、异绿原酸C、盐酸小檗碱和连翘苷含量的方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent extend C18(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.5%磷酸为流动相(梯度洗脱),流速为1.0 m L·min-1;柱温为25℃;PAD检测器。结果:9种成分含量测定的线性关系良好,线性范围和相关系数分别为12.37~185.55(r=0.999 9)、38.80~582.06(r=1.000 0)、15.90~238.50(r=0.999 9)、1.52~22.86(r=0.999 8)、48.26~723.87(r=1.000 0)、5.90~88.56(r=0.999 3)、6.58~98.64(r=1.000 0)、9.79~119.58(r=0.999 9)、16.91~253.71μg·m L-1(r=0.999 9);平均加样回收率分别为98.63%、102.57%、101.31%、97.95%、102.59%、98.41%、97.59%、98.77%、101.31%;方法的精密度良好,RSD均小于2.0%(n=6)。结论:该方法准确,可靠,可用于复方黄柏液涂剂的质量控制。     

高效液相色谱法测定冠心丹参滴丸中丹酚酸B的含量

目的测定冠心丹参滴丸中丹酚酸B的含量。方法HPLC法,ODS2-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:(甲醇-乙腈)∶(甲酸-水)=37∶63,其中甲醇∶乙腈=3∶1,甲酸∶水=1∶29;流速1.0 ml.min-1;检测波长为286 nm。结果丹酚酸B浓度在0.1~0.9μg范围内线性关系良好(r=0.9995,n=5)。加样回收率为101.56%,RSD=2.86%(n=6)。结论该实验提取丹酚酸B处理方法简单,测定结果稳定可靠,可作为冠心丹参滴丸中丹酚酸B的定量分析方法。     

RP-HPLC同时测定金银花、连翘药对提取物中6个成分的含量

目的:建立RP-HPLC同时测定金银花、连翘药对提取物中绿原酸、咖啡酸、连翘酯苷A、木犀草苷、连翘苷和槲皮素6种成分含量的方法。方法:Thermo Scientific ODS-2 HYPERSIL色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm),流动相乙腈(A)-0.2%甲酸溶液(B)梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长280 nm,柱温30℃。结果:绿原酸、咖啡酸、连翘酯苷A、木犀草苷、连翘苷和槲皮素质量浓度在40.40~404.0 mg·L-1(r=0.999 5),0.203 2~2.032 mg·L-1(r=0.999 9),30.20~302.0 mg·L-1(r=0.999 8),1.012~10.12 mg·L-1(r=0.999 9),6.980~69.80 mg·L-1(r=0.999 9),1.980~19.80 mg·L-1(r=0.999 9)与峰面积呈良好的线性关系;加样回收率分别为102.6%,99.6%,100.4%,98.3%,100.8%,99.7%,其RSD分别为0.9%,2.0%,1.1%,0.4%,2.1%,0.9%。结论:该方法简便、准确,可用于金银花、连翘药对提取物的质量控制。     

HPLC法测定清补平衡膏方中没食子酸、5-HMF和芍药苷的含量

目的:建立同时测定清补平衡膏方中没食子酸、5-HMF和芍药苷含量的高效液相色谱法。方法:采用Hibar ODS柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,流速为1.0 m L·min-1,检测波长为230 nm,柱温35℃,进样量10μL。结果:没食子酸在13.45~672.75μg·m L-1(r=0.999 4)范围内,5-HMF在10.76~537.9μg·m L-1(r=0.999 8)范围内,芍药苷在17.69~884.61μg·m L-1(r=0.999 8)范围内,对照品进样浓度和色谱峰峰面积线性关系良好,加样回收率分别为99.80%、96.94%和99.46%,RSD值分别为2.91%、2.93%和2.97%。结论:建立的高效液相色谱法简单易行,结果准确可靠,可有效地用于清补平衡膏方的质量控制。     

高效液相色谱法测定人血浆中氯氮平浓度及其临床应用

目的:建立测定人血浆中氯氮平浓度的高效液相色谱法。方法:以Agilent C18反相柱(150 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相为0.05 mol·L~(-1)醋酸铵(调p H=5.8)-乙腈-甲醇(15:15:70);流速:1.0 m L·min-1;柱温控制在40°C;灵敏度设置为0.01 AUFS。以乙酸乙酯和二氯甲烷(80:20)为提取剂。结果:氯氮平的低、中、高(100.0 ng·m L~(-1),400.0 ng·m L~(-1),800.0 ng·m L~(-1))3种浓度平均回收率分别为99.28%,98.63%,101.5%,提取回收率分别为73.13%,75.72%,77.58%;日内、日间相对标准偏差(RSD)均低于15%(n=5);分析方法的检测限为10.0 ng·m L~(-1);线性范围为50.0~1200.0 ng·m L~(-1)。线性方程:Y=0.202X-0.991,r=0.9998(n=6)。结论:本方法在测定人血浆中氯氮平浓度的实验研究有着显著的应用价值,检测结果准确度高,操作简单快速,灵敏度高,能够广泛应用于氯氮平血药浓度的检测。     

莪术油对大鼠肝微粒体CYP1A2酶活性的影响

目的:建立非那西丁及其代谢产物的液质联用检测法,研究莪术油对大鼠肝微粒体CYP1A2酶活性的影响,为临床合理用药提供参考。方法:色谱柱为XDB-C18(150mm×2.1mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸,流速:0.4mL.min-1,柱温:30℃,以多反应监测方式采集数据。以非那西丁为探针药物,采用体外实验,实验组给予莪术油,对照组给予生理盐水,评价药物代谢酶CYP1A2酶活性的变化。结果:非那西丁和对乙酰氨基酚的检测浓度线性范围分别为4～1600ng.mL-1(r=0.9973)、3-2000ng.mL-1(r=0.9973)。实验组测得的扑热息痛/非那西丁的比值:11.30±0.71,对照组:9.60±1.04,t检验显示P<0.05,有统计学意义。结论:本法可用于检测大鼠肝微粒体孵育液中非那西丁及其代谢物浓度。莪术油对大鼠肝CYP1A2酶的活性,有体外诱导作用。     

UPLC-DAD同时测定杏苏止咳颗粒中甘草苷、橙皮苷、迷迭香酸含量

目的:建立UPLC-DAD法同时测定杏苏止咳颗粒中甘草苷、橙皮苷、迷迭香酸3种成分含量。方法:采用Agilent SB-C18色谱柱(1.8μm,2.1×100mm);乙腈-0.01%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱;流速为0.3 mL·min-1;检测波长为278 nm;柱温为30℃。结果:甘草苷、橙皮苷、迷迭香酸进样量分别在0.32~9.58 ng(r=0.99997)、4.63~92.06 ng(r=0.99996)、0.41~8.13 ng(r=0.99985)线性范围内线性关系良好,加样回收率分别为98.0%、97.8%、97.6%,RSD分别为0.67%、0.68%、0.73%。结论:本方法简便、快速、准确,可更好的控制杏苏止咳颗粒的质量。     

UPLC测定彝药满山香中芦丁含量

目的:建立超高效液相色谱法(UPLC)检测彝药满山香中芦丁含量的方法。方法:利用BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以水-乙腈(0.1%甲酸)为流动相,梯度洗脱,流速为0.50 mL·min~(-1),柱温为40℃,检测波长为375 nm。结果:芦丁在1.64~210μg线性关系良好,回归线方程为Y=340.3X-1 386.8(r=0.999 6,n=8),平均回收率为100.15%,RSD=2.62%。根茎中芦丁含量范围15.50~199.00μg·g~(-1),叶片中芦丁含量范围4.2~13.6 mg·g~(-1)。结论:该方法简单、重复性好、准确性高,可用于彝药满山香中芦丁含量的测定。     

LC-MS/MS同时测定不同产地雷公藤饮片中4种萜类成分的含量

目的建立简便、快速、灵敏的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)同时测定雷公藤饮片中雷公藤甲素、雷公藤红素、雷公藤内酯酮和雷公藤内酯甲的含量,为雷公藤饮片的质量控制与临床应用提供依据。方法采用液相色谱质谱联用技术。色谱条件:Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18(2.1 mm×150 mm,3.5μm)色谱柱,乙腈-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,流速为0.2 mL·min~(-1),柱温为35℃;采用电喷雾离子源(ESI),以正离子多反应监测模式进行检测,检测成分的离子对质荷比分别为:雷公藤甲素(361.1/145.1)、雷公藤内酯酮(358.9/143)、雷公藤红素(451.2/201.1)、雷公藤内酯甲(455.3/409.2)。结果雷公藤甲素、雷公藤内酯酮、雷公藤红素和雷公藤内酯甲分别在100~3000 ng·mL~(-1)、100~3000 ng·mL~(-1)、20~600 ng·mL~(-1)和50~1000 ng·mL~(-1)的浓度范围内,线性关系良好(r0.999)。平均回收率为100.45%~102.74%,其RSD3.15(n=6)。结论本研究所建立的LC-MS/MS色谱法稳定可靠、简便易行,可同时检测雷公藤饮片中雷公藤甲素、雷公藤红素、雷公藤内酯酮、雷公藤内酯甲4种萜类成分的含量,可为雷公藤饮片及雷公藤制剂的质量控制提供科学依据。不同地区的雷公藤饮片成分含量差异明显。