HPLC同时测定盐肤木提取物中4种有效成分含量

目的建立HPLC同时测定盐肤木提取物中没食子酸、苔黑酚葡萄糖苷、没食子酸乙酯和五没食子酰葡萄糖4种成分含量的方法。方法采用Hypersil-Gold Dim C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长273 nm。结果没食子酸、苔黑酚葡萄糖苷、没食子酸乙酯、五没食子酰葡萄糖的进样量分别在0.025 7～0.514μg(r=1)、0.097 3～1.946μg(r=1)、0.040 1～0.801μg(r=1)、0.102 0～2.036μg(r=0.999 9)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.86%(RSD=2.10%)、99.34%(RSD=1.91%)、98.80%(RSD=2.39%)、100.79%(RSD=2.04%),方法的精密度、稳定性、重复性均满足分析要求。结论该方法简单、快速、高效,结果准确,重复性好,可用于盐肤木提取物的质量控制。     

粗叶悬钩子总生物碱对非酒精性脂肪肝的抗氧化作用

目的 探讨粗叶悬钩子总生物碱对模型大鼠的抗氧化作用. 方法SD大鼠30只,随机分为空白对照组、模型组、粗叶悬钩子总生物碱组,高脂饲料喂养12周,制备非酒精性脂肪肝大鼠模型,连续给药4周后取材,HE染色,观察肝组织病理变化,比色法检测血清中ALT、AST、SOD、MDA的含量变化,RT-PCR和免疫组化法检测COX-...     

CPBL教学法在病理生理学中的应用初探

CPBL(基于临床问题的学习)通过对临床病例与问题的分析达到掌握基础理论知识的目的.采取典型临床病例分组讨论及传统授课结合临床小问题讨论等CPBL教学形式,不仅能激发学生的学习兴趣、培养学生的创造性思维,培养学生临床思维,提升解决临床问题的能力,而且能提高教师的综合素质,改善师生关系.     

免疫毒素去除T细胞在异基因造血干细胞移植中的应用

观察应用免疫毒素部分去除T细胞(TCD)的方法进行人类白细胞抗原／混合淋巴细胞培养(HLA/MLC)不相合异基因造血干细胞移植的临床疗效。采用蓖麻免疫毒素部分去T细胞对13例恶性血液病患者行HLA-MLC配型不相合的造血干细胞移植，其中慢性髓性白血病(CP1)6例；急性淋巴细胞白血病CR1 1例，CR2 1例，复发1例；急性髓性白血病CR1 2例，CR2 1例；骨髓增生异常综合征转化成急性髓性白血病M4型(CR1)1例。结果表明：13例患者中8例成功植入，其中2例发生Ⅱ度急性移植物抗宿主病(aGVHD)，2例发生Ⅲ-Ⅳ度aGVHD。随访8-90个月，2例发生Ⅲ-Ⅳ度aGvHD患者早期死亡，另有1例患者死于迟发感染，其余5例均无病存活至今。5例未植活的患者中4例回输同一供者外周血造血干细胞后3例未植入，1例植活，但死于移植相关合并症；1例再次行同基因造血干细胞移植成功并无病存活至今。结论：采用蓖麻免疫毒素部分去T细胞的方法行HLA/MLC配型不相合的异基因造血干细胞移植可减少重度aGVHD的发生，但移植早期排斥率(HVG)较高，临床应用效果有待进一步评估。     

前列宁胶囊对BPH大鼠EGF、EGFR表达的影响

目的观察前列宁胶囊对良性前列腺增生模型大鼠血清表皮生长因子(EGF)含量及前列腺组织中EGF、表皮生长因子受体(EGFR)表达的影响。方法将雄性SD大鼠60只,随机分成正常组、模型组、保列治组、前列宁胶囊(低、中、高剂量)组;采用去势后,皮下注射丙酸睾酮复制大鼠前列腺增生模型,连续给药28d,观察各组前列腺湿重及指数,RT-PCR检测大鼠前列腺组织中EGF、EGFR的mRNA表达,免疫组化法观察前列腺组织EGF和EGFR的蛋白表达情况。结果模型组的前列腺湿重和指数明显增加,前列腺组织EGF、EGFR的mRNA和蛋白表达较正常组显著升高(P0.01);前列宁胶囊各剂量组和保列治组的前列腺湿重与指数及前列腺组织EGF、EGFR的mRNA与蛋白表达均较模型组显著降低(P0.05),并呈现一定的剂量依赖性。结论前列宁胶囊对BPH大鼠有明显的治疗作用,能显著地抑制BPH大鼠EGF、EGFR的表达,提示这可能是前列宁胶囊治疗BPH的重要机制之一。     

RP-HPLC测定龙须藤中4种黄酮类成分的含量

目的用HPLC梯度洗脱法测定龙须藤中4种黄酮类成分的含量,考察了杨梅素、槲皮素、表儿茶素和5,6,7,3,4,5-六甲氧基黄酮4种成分在不同产地药材中的含量。方法采用RP-HPLC测定,以Shimadzu C18（4.6mm×250mm,5μm）为色谱柱;流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液,梯度洗脱（0min,乙腈-0.05%磷酸比例为20∶80,5min比例为30∶70;10min,比例为50∶50;30min,比例为50∶50）;流速1.0mL·min^-1,检测波长370nm。结果杨梅素在0.0716～0.716μg、槲皮素在0.1228～1.228μg、表儿茶素在0.1024～1.024μg、5,6,7,3,4,5-六甲氧基黄酮在0.0902～0.902μg内呈良好的线性关系;重复性的RSD分别为1.32%,0.93%,1.02%,1.17%。不同产地中黄酮成分含量大小依次为福建青云山地区、广西隆安、江西安福、湖北宜昌、浙江缙云地区样品。结论本方法精密度、重复性和分离效果好,分析快速,适合于该药材的含量测定,不同产地中成分存在一定的差异。     

复方熊胆茵陈颗粒对高脂模型大鼠肝脂肪含量及脂酶活性的影响

目的观察复方熊胆茵陈颗粒对高脂模型大鼠肝脂肪含量及脂酶活性的影响。方法高脂饮食饲养大鼠6周,并设正常组、模型对照组、复方熊胆茵陈颗粒高、低剂量组,药物干预4周后,采用索氏提取法检测肝脂肪含量,Elisa法测定肝脂酶浓度,比色法检测肝脂酶活性。结果复方熊胆茵陈颗粒可降低肝脂肪含量(P<0.05),提高肝脂酶活性(P<0.01)。结论复方熊胆茵陈颗粒可通过增强肝脂酶活性调节脂质代谢。     

片仔癀对四氯化碳诱导肝纤维化大鼠肝功能及核因子-κB蛋白表达的影响

目的观察片仔癀对CCl_4诱导的肝纤维化大鼠肝功能和核因子-κB(NF-κB)蛋白表达的影响,探讨其作用机制。方法将24只大鼠随机分为正常对照组、模型组、片仔癀组、秋水仙碱组,每组6只,50%CCl_4灌胃8周制备肝纤维化模型。末次给药1 h后,血清测定ALT、AST、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、层黏连蛋白和透明质酸含量,取肝脏计算肝指数,HE染色和VG染色观察肝组织病理形态,Western blot检测NF-κB蛋白表达。结果与正常对照组比较,模型组大鼠肝指数及ALT、AST、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、层黏连蛋白、透明质酸含量和NF-κB蛋白表达明显升高(P0.01);与模型组比较,各给药组大鼠肝指数及ALT、AST、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、层黏连蛋白、透明质酸含量和NF-κB蛋白表达均明显降低(P0.01)。结论片仔癀对CCl_4所致肝纤维化大鼠具有保护作用,其机制可能与抑制NF-κB的表达有关。     

石见穿多糖的提取及其对肝癌细胞增殖的抑制作用

目的：研究石见穿中多糖提取的最优条件及其在体外对人肝癌细胞增殖的抑制作用。方法1通过正交实验确定提取多糖的优化条件，用蒽酮-硫酸法测定多糖的含量。噻唑蓝还原法（MTT法）检测石见穿多糖对体外人肝癌细胞增殖的抑制作用。结果：水浴温度90℃，料液比1：10，提取时间2．5小时，提取4次为石见穿提取的最佳工艺，该条件下石见穿多糖含量最高，平均为0．0308g／g。3剂量的石见穿多糖对肝癌细胞增殖的抑制率分别为26．92％2，18．26％和5．95％。结论：该工艺可用于石见穿多糖的提取，石见穿多糖对肝癌细胞的增殖有明显抑制作用。     

石见穿多糖的含量测定及组分分析

目的测定石见穿多糖的含量及组分分析。方法用蒽酮-硫酸法测定石见穿含量；用薄层层析法分析石见穿多糖的组分。结果在2．18-10.90μg／ml内浓度与吸收度呈良好线性，回归方程A=0．0367C＋0.0412，r=0．9998，平均回收率为97.99％，RSD为1．28％；石见穿多糖的含量为3．15％。结论蒽酮-硫酸法测定石见穿，方法简便，结果准确，可作为石见穿质量的评价依据。