壮肝逐瘀煎对肝纤维化大鼠TGF-β1及TβR Ⅰ/ⅡmRNA表达的影响

目的:研究中药壮肝逐瘀煎对肝纤维化大鼠TGFβ1及TβR Ⅰ/ⅡmRNA表达的影响,探讨其抗纤维化的作用机制.方法:采用四氯化碳(CCl4)复合因素大鼠肝纤维化模型,给予壮肝逐瘀煎灌胃,取血清及肝组织做检测,双抗体夹心ABC-ELISA法测定血清TGF-β1含量,实时荧光定量PCR技术对肝组织TβR Ⅰ/ⅡmRNA进行定量分析.结果:治疗6周后,与病理模型组大鼠比较,壮肝逐瘀煎治疗组肝小叶结构趋于正常,纤维间隔明显变薄,TGF-β1及TβR Ⅰ/ⅡmRNA明显降低(P＜0.01).结论:壮肝逐瘀煎能够显著改善肝纤维化大鼠肝组织的病理变化,具有明显的抗肝纤维化作用,其作用机制可能与壮肝逐瘀煎抑制TGF-β1及TβRⅠ/Ⅱ mRNA表达有关.     

壮肝逐瘀颗粒抗肝纤维化的实验研究

目的：观察壮肝逐瘀颗粒抗肝纤维化的药效学作用。方法：取SD大鼠，按体重随机分为7组：肝纤维化模型组（A组），复方鳖甲软肝组（B组），秋水仙碱组（C组），壮肝逐瘀颗粒小、中、大剂量组（D、E、F组），正常对照组（G组）。造模后，各组分别给予相应的药物灌胃给药，每天1次。模型组予生理盐水灌胃，正常对照组予正常饮食。观察6周后，取血及肝组织标本，观察肝脏的病理变化。结果：壮肝逐瘀颗粒大、中、小剂量组可明显降低四氯化碳（CCl4）所致肝纤维化大鼠血清中HA、LN、PCⅢ、CIV、TGFβ1、TIMP-1、ALT、AST的含量。结论：壮肝逐瘀颗粒可有效拮抗大鼠肝纤维化；其机制可能是抑制肝纤维化组织TGFβ1和TIMP-1的表达。     

壮肝逐瘀煎对肝纤维化大鼠转化生长因子β1表达的影响

目的：观察壮肝逐瘀煎对肝纤维化大鼠血清及肝组织中TGF—β1表达的影响，探讨本方治疗肝纤维化的作用机理。方法：将100只Wistar大鼠随机分为正常对照组20只、观察组80只，参照相关文献复制大鼠肝纤维化模型，造模过程中，于第4周末随机处死正常对照组及观察组大鼠各5只，证实肝纤维化形成后，将观察组其余大鼠随机分为病理模型组、壮肝逐瘀煎大、中、小剂量组及秋水仙碱对照组，分别予生理盐水、壮肝逐瘀煎大、中、小剂量及秋水仙碱灌胃，日1次；12周后处死大鼠，应用ELISA法检测血清TGF—β1含量的改变，同时采用免疫组化观察肝脏组织中TGF—β1的表达水平。结果：壮肝逐瘀煎能降低欠鼠肝纤维化血清中TGF—β1的表达，拮抗肝纤维化大鼠肝组织中TGF—β1的分泌。结论：壮肝逐瘀煎能有效抗大鼠肝纤维化，其作用机制是通过抑制TGF—β1的活性来实现的。     

壮肝逐瘀煎对肝纤维化大鼠肝Smads表达的影响

目的:研究壮肝逐瘀煎对肝纤维化(HF)大鼠Smad3,Smad4,Smad7表达的影响,探讨其抗HF的作用机制。方法:采用CCl4复合因素法建立Wistar大鼠肝纤维化模型。对肝纤维化大鼠予壮肝逐瘀煎灌胃治疗,并予秋水仙碱及大黄虫丸为对照。12周后获取肝组织,苏木精-伊红染色观察肝纤维化的程度;免疫组织化学染色、图像分析方法对Smad3,Smad4,Smad7的组织分布进行半定量分析。结果:与病理模型组大鼠相比,壮肝逐瘀煎治疗组肝小叶结构趋于正常,纤维间隔明显变薄,肝组织Smad3、Smad4表达显著减少(均P<0.01),Smad7表达显著增加(P<0.01)。结论:壮肝逐瘀煎能够显著改善肝纤维化大鼠肝组织的病理变化,具有明显的抗肝纤维化作用,其作用机制可能与壮肝逐瘀煎调控Smad3,Smad4,Smad7的表达有关。     

壮肝逐瘀煎对模型大鼠肝Smads表达的影响

目的:研究壮肝逐瘀煎对肝纤维化(HF)大鼠Smad3、Smad4、Smad7表达的影响,探讨其抗HF的作用机制。方法:Wistar大鼠采用CCl4复合因素法进行肝纤维化造模。对HF大鼠予壮肝逐瘀煎灌胃治疗,并以秋水仙碱及大黄?虫丸为对照。6周后获取肝组织,苏木精-伊红染色观察HF的程度;免疫组织化学染色、图像分析方法对Smad3、Smad4、Smad7的组织分布进行半定量分析。结果:与病理模型组大鼠比较,壮肝逐瘀煎治疗组肝小叶结构趋于正常,纤维间隔明显变薄,肝组织Smad3、Smad4表达显著减少(P<0.01),Smad7表达显著增加(P<0.01)。结论:壮肝逐瘀煎能够显著改善HF大鼠肝组织的病理变化,具有明显的抗HF作用,其作用机制可能与壮肝逐瘀煎调控Smad3、Smad4、Smad7的表达有关。     

壮肝逐瘀煎对肝纤维化大鼠TβRⅠ/ⅡmRNA表达的影响

目的:研究中药壮肝逐瘀煎对肝纤维化大鼠TβRⅠ/ⅡmRNA表达的影响,探讨其抗纤维化的作用机制。方法:采用四氯化碳(CCl4)复合因素制备大鼠肝纤维化模型后,大鼠灌胃壮肝逐瘀煎,取肝组织作病理学检查,并通过实时荧光定量PCR技术对肝组织TβRⅠ/ⅡmRNA进行定量分析。结果:与病理模型组大鼠比较,RT-PCR显示经壮肝逐瘀煎治疗,大鼠肝内TβRⅠ/ⅡmRNA明显降低,肝小叶结构趋于正常,纤维间隔明显变薄。结论:壮肝逐瘀煎能够显著改善肝纤维化大鼠肝组织的病理变化,具有明显的抗肝纤维化作用,其作用机制可能与其下调TβRⅠ/ⅡmRNA表达的作用有关。     

壮肝逐瘀煎对肝纤维化大鼠血清学的影响

目的 通过大鼠肝纤维化动物模型,研究壮肝逐瘀煎防治肝纤维化的作用效果及其机理。方法采用CCl4复合因素大鼠肝纤维化模型,予壮肝逐瘀煎灌胃,观察其对肝纤四项及形态学的影响,以大黄(?)虫丸为对照。结果 壮肝逐瘀煎显著降低大鼠血清中HA、LN、Ⅳ-C、PCⅢ的水平,并能减轻肝脏炎症及纤维化程度。结论 壮肝逐瘀煎具有抗肝纤维化作用。     

壮肝逐瘀煎对肝纤维化大鼠肝星状细胞凋亡的影响

目的:观察壮肝逐瘀煎对肝纤维化大鼠肝组织中肝星状细胞凋亡的影响,从细胞凋亡的角度探讨本方治疗肝纤维化的作用机理.方法:将100只Wistar大鼠随机分为正常对照组20只、观察组80只,参照相关文献复制大鼠肝纤维化模型,造模过程中,于第4周末随机处死正常对照组及观察组大鼠各5只,证实肝纤维化形成后,将观察组其余大鼠随机分为模型组、壮肝逐瘀煎大、中、小剂量组及秋水仙碱对照组,分别予生理盐水、壮肝逐瘀煎大、中、小剂量及秋水仙碱灌胃,日1次;12周后处死大鼠,观察肝脏组织病理学变化,采用免疫组化TUNEL、a-SMA 双标记检测肝星状细胞的凋亡情况.结果:壮肝逐瘀煎能加速活化肝星状细胞的凋亡,改善肝组织的纤维化程度.结论:壮肝逐瘀煎能有效抗大鼠肝纤维化,其作用机制是通过诱导星状细胞凋亡来实现的.     

中药复方壮肝逐瘀煎对肝纤维化模型大鼠微循环的影响

目的利用中药复方本身具有的多途径、多环节、多靶点的特点,探讨壮肝逐瘀煎及其不同拆方组合对肝纤维化模型大鼠微循环的调控。方法采用四氯化碳(CCl4)复合因素大鼠肝纤维化模型,观察各组大鼠肝纤维化情况;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中血管活性物质[内皮素1(ET-1)、一氧化氮(NO)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的含量;用RT-PCR技术检测各组VEGF、PDGF的含量;应用超声微泡造影评估各组大鼠肝脏微循环、微血管血流状态和速度。结果①C组及不同组合分组和G组均能不同程度改善肝纤维化大鼠肝脏病理组织、减轻大鼠肝纤维化的程度,与G组相比,有统计学意义;②与正常对照组相比,病理模型组中各给药组对ET-1、NO、iNOS含量均有明显的影响(P<0.01或P<0.05),肝纤维化程度越高,ET-1、NO、iNOS的含量越高;VEGF、PDGF的含量也越高;各用药组HVAT、HA-HVTT均有不同程度的延长(P<0.01)。③与病理模型组比较,各用药组血清ET-1、NO、iNOS含量均有不同程度的降低(P<0.05),其中C组(壮肝逐瘀煎全方组)下降最为明显;各用药组VEGF、PDGF的表达量均下降(P<0.05),而C组与G组(大黄?虫丸组)比较(P>0.05),无明显差异;各用药组HVAT、HA-HVTT均有不同程度的延长(P<0.01),其中以C组明显。     

壮肝逐瘀煎对肝纤维化大鼠血清Fas/FasL表达的影响

目的观察壮肝逐瘀煎对肝纤维化大鼠血清Fas/Fas L表达的影响,探讨该组方抗肝纤维化的作用机制。方法将SD大鼠随机分为空白组、模型组和治疗组,除空白组外其余大鼠均采用CCl4复合因素法制作肝纤维化大鼠模型,模型制作成功后,治疗组给予壮肝逐瘀煎灌胃,空白组及模型组仅予等容量生理盐水灌胃。10周末所有大鼠经股静脉采血后处死并获取肝组织,HE染色光镜观察肝组织结构变化,ELISA法测定血清Fas、Fas L水平。结果光镜观察空白组肝小叶完整、结构正常,造模组肝纤维化程度明显,治疗组肝纤维化程度较轻;ELISA测定显示治疗组大鼠血清Fas和Fas L水平显著低于模型组(P均0.05)。结论壮肝逐瘀煎可有效治疗大鼠肝纤维化,其作用可能是通过下调Fas、Fas L的表达,抑制肝星状细胞凋亡而实现的。     

防风对桃红四物汤活血化瘀治疗肝纤维化的增效作用研究

目的:探讨防风对桃红四物汤活血化瘀治疗肝纤维化的增效作用及其机制。方法:清洁级雄性SD大鼠随机分为正常对照(A)组8只,造模组42只。CCl4大豆油溶液诱导肝纤维化模型。将造模组随机分为模型组、秋水仙碱组、防风桃红四物汤组,桃红四物汤组及防风组。检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原蛋白(PCⅢ)、Ⅳ型胶原蛋白(Ⅳ-C)的变化。Western Blot及免疫组织化学法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果:与秋水仙碱组比较,防风桃红四物汤组大鼠血清中的ALT、AST、HA、PCⅢ、Ⅳ-C及肝组织中TGF-β1及α-SMA蛋白的表达量均显著下调(P<0.05)。结论:防风具有增效桃红四物汤活血化瘀的作用,其机制可能与下调TGF-β1及α-SMA蛋白的表达有关。     

壮肝逐瘀煎治疗慢性病毒性乙型肝炎肝纤维化临床研究

目的 :观察壮肝逐瘀煎对慢性病毒性乙型肝炎肝纤维化患者的疗效。方法 :将120例患者按完全随机非盲法分为两组 ,观察组给予口服壮肝逐瘀煎免煎中药颗粒 ,每日1剂 ,以200ml开水冲后分2次温服 ;对照组给予口服大黄虫丸 ,每次6g ,每日2次。两组根据不同病情加用复合维生素B ,维生素C或强力宁等。3个月为1疗程 ,两组均观察1个疗程。治疗前、后检测血清透明质酸(HA)、层粘蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(ⅣC)、HBV血清标志物及肝功能。结果 :观察组疗效优于对照组(P<0.05);两组治疗前、后HA ,LN ,ⅣC明显下降(P<0.05),而观察组下降更显著(P<0.01) ,观察组与对照组比较有显著性差异(P<0.05) ;观察组HBV血清标志物改善也较对照 组明显(P<0.05)。结论 :采用壮肝逐瘀煎治疗慢性病毒性乙型肝炎肝纤维化有较好的疗效。     

黄芪多糖对继发性胆汁淤积性肝纤维化大鼠模型TGF-β1的影响

目的:观察黄芪多糖对大鼠胆管结扎肝纤维化模型TGF-β1的影响。方法:40只SD雄性大鼠采用随机分为假手术对照组(Sham,n=15)及胆汁淤积性肝纤维化模型对照组(M,n=20)及药物干预组(Y,n=20)。M及Y组采用胆总管结扎(bile duct ligation,BDL)制备胆汁淤积性肝纤维化模型,Sham组仅作胆总管分离,不作胆总管结扎。Y组于术后1周开始经灌胃给予黄芪多糖,1日1次,共4周。所有大鼠均于术后第5周处死取材。统计分析实验过程大鼠死亡率及腹水发生率,观察实验大鼠肝功能、肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量及肝组织学;采用Western blot及免疫组化观察实验大鼠肝组织TGF-β1蛋白表达。结果:与Sham组比较,M组大鼠肝功能显著异常,肝组织纤维增生程度、Hyp含量及TGF-β1蛋白表达量均显著增加(P<0.01);与M组比较,Y组大鼠死亡率、腹水发生率显著下降(P<0.05),肝功能显著改善(P<0.01),肝组织纤维增生程度、Hyp含量及及TGF-β1蛋白表达量显著下降(P<0.01)。结论:黄芪多糖可有效地抑制BDL大鼠肝纤维化模型肝组织TGF-β1表达,这可能也是黄芪汤组分干预胆汁淤积性肝纤维化的主要效应机制之一。     

湖北海棠叶总黄酮抗CCl4所致大鼠肝纤维化作用研究

目的:研究湖北海棠叶总黄酮对四氯化碳(CCl4)所诱导的大鼠肝纤维化的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:腹腔注射2ml/kg CCl4橄榄油溶液制备大鼠肝纤维化模型。首次注射后分别灌胃给药湖北海棠叶总黄酮120mg/kg和60mg/kg,每天一次,共8周。测定血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、透明质酸、羟脯氨酸、β1-转化生长因子以及肝组织中总抗氧化能力、丙二醛含量和总超氧化物歧化酶的活性;用免疫组化方法定量肝组织中α-平滑肌肌动蛋白的表达。结果:与模型组比较,湖北海棠叶总黄酮能够调低血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、透明质酸、羟脯氨酸、β1-转化生长因子含量,降低肝组织丙二醛含量,增加肝组织中总抗氧化能力和总超氧化物歧化酶活性,降低α-平滑肌肌动蛋白的表达;病理学切片显示湖北海棠叶总黄酮能明显减轻CCl4引起的大鼠肝损伤及纤维化程度。结论:湖北海棠叶总黄酮在实验的120mg/kg和60mg/kg两个剂量组对CCl4致大鼠肝纤维化都有防治作用,作用机制可能与其抗氧化作用有关,湖北海棠叶总黄酮能能增强组织抗氧化能力,降低CCl4引起的脂类过氧化,保护细胞膜免受损伤,抑制β1-转化生长因子等具有加重肝纤维化程度的生物因子的表达,减轻肝纤维化程度。     

膈下逐瘀汤抗大鼠免疫性肝纤维化的研究

目的:观察膈下逐瘀汤逆转大鼠肝纤维化的疗效和对肝损伤的保护作用。方法:大鼠随机分为空白对照组、膈下逐瘀汤组、猪血清组、猪血清+膈下逐瘀汤组。猪血清0.5 mL/只(2次/周)ip诱导大鼠免疫性肝纤维化模型,在制备模型的同时膈下逐瘀汤(含生药7.37 g.kg-1)ig干预,共12周。实验结束后处死大鼠,HE染色分析肝组织胶原纤维含量,ELISA法分析MMP胶原酶活性,分光光度法分析天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)活性。结果:与模型组比较,模型+膈下逐瘀汤组大鼠肝纤维化程度显著改善(U=2.57,P<0.05),AST和ALT活性显著降低(P<0.05),MMP胶原酶活性显著降低(P<0.05)。结论:膈下逐瘀汤对猪血清诱导的免疫性肝纤维化大鼠肝纤维化程度和肝损伤具有明显改善作用。     

丹芍化纤胶囊加食苹果对大鼠肝纤维化tsp-1及TGF-β1的影响

目的:探讨应用丹芍化纤胶囊加食苹果对大鼠肝纤维化tsp-1、TGF-β1的影响。方法:雄性健康SD大鼠46只,采用四氯化碳(CCl4)、高脂饮食加乙醇混合因素造模成功,随机分3组,分别给予相应药物及苹果汁灌胃观察8周。实验结束后RT-PCR检测血小板反应蛋白(thrombospondin-1,tsp-1)mRNA的表达,免疫组织化学技术检测肝组织转化生长因子β1(transforming growth factor,TGF-β1)的表达。结果:RT-PCR检测在正常对照组中tsp-1 mRNA有极少量表达,与正常对照组比较,肝纤维化模型组、自然恢复组tsp-1 mRNA表达显著升高(P<0.01),治疗8周后,丹芍组tsp-1 mRNA表达下降(P<0.05),丹苹组下降更显著(P<0.01)。免疫组化结果示正常肝脏组织只见很少量TGF-β1表达,治疗8周后与自然恢复组比较,丹芍组TGF-β1表达明显下降(P<0.05),丹苹组与下降更显著(P<0.01)。结论:应用丹芍化纤胶囊加食苹果能明显改善大鼠肝功能,降低肝组织tsp-1 mRNA和TGF-β1的表达,具有明显的辅助抗肝纤维化作用。     

化浊抗纤保肝汤联合恩替卡韦对慢性乙型肝炎后肝纤维化患者的临床疗效

目的探讨化浊抗纤保肝汤联合恩替卡韦对慢性乙型肝炎后肝纤维化患者的临床疗效。方法 104例患者随机分为对照组和观察组,每组52例,对照组给予恩替卡韦,观察组在对照组基础上加用化浊抗纤保肝汤,疗程3个月。检测临床疗效、肝功能指标[谷丙氨基转移酶(ALT)、谷草氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)]、肝纤维化指标[层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、透明质酸酶(HA)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)]、TGF-β1、MMP-1、TIMP-1、组织学评分、肝脾B超指标(肝门静脉主干内径、脾门厚度)变化。结果观察组总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后,2组肝功能指标、肝纤维化指标、TGF-β1和TIMP-1水平、组织学评分、肝脾B超指标降低(P<0.05),MMP-1水平升高(P<0.05),以观察组更明显(P<0.05)。结论化浊抗纤保肝汤联合恩替卡韦可有效改善慢性乙型肝炎后肝纤维化患者肝功能与肝纤维化程度,抑制TGF-β1表达,调节MMP-1/TIMP-1平衡。