HPLC法测定淫羊藿中木兰花碱、朝藿定C和淫羊藿苷的含量

目的:建立同时测定淫羊藿中木兰花碱、朝藿定C和淫羊藿苷含量的HPLC方法,研究淫羊藿(Epimedium brevicornu Maxim.)因产地不同带来的质量差异。方法:Venusil C18MP色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),乙腈-1%KH_2PO_4梯度洗脱;流速1 m L/min。结果:木兰花碱、朝藿定C和淫羊藿苷分别在4.0～52.0,6.4～206.0,7.0～242.0μg/m L范围内线性关系良好;回收率分别为97.66%、101.10%、96.76%,RSD分别为2.14%、2.20%、1.58%。结论:本方法适用于同时测定淫羊藿中生物碱和黄酮两种不同类型的成分;不同分布地区淫羊藿中朝藿定C、淫羊藿苷均呈现较大的变化,木兰花碱含量变化大,不适于作为质控成分。     

HPLC同时测定羊藿三七胶囊中朝藿定C和淫羊藿苷的含量

目的:建立同时测定羊藿三七胶囊中朝藿定C和淫羊藿苷含量的高效液相色谱法。方法:采用Agilent C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液(26∶74);流速为1.0 m L·min-1;检测波长为270 nm。结果:朝藿定C进样量在0.288~9.198μg、淫羊藿苷进样量在0.111~3.558μg与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 9);朝藿定C的平均回收率为103.0%,RSD=0.8%(n=6);淫羊藿苷的平均回收率为98.9%,RSD=1.8%(n=6)。结论:本方法简便、准确,重复性好,可作为羊藿三七胶囊中淫羊藿的含量测定方法。     

不同产地、不同成熟期淫羊藿叶中淫羊藿苷和朝藿定C含量变化

目的:研究不同产地、不同成熟期淫羊藿叶中淫羊藿苷和朝藿定C的含量变化。方法:采用Elite SinoChromODS-AP色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈(A)-水(B),梯度洗脱(0～8 min,27%A;8～30min,27%～29%A),流速为1mL.min-1,检测波长为270nm。结果:不同产地粗毛淫羊藿的淫羊藿苷、朝藿定C的含量变化较大,依次分别为0.1%～0.44%、0.76%～2.59%;不同成熟期淫羊藿的淫羊藿苷和朝藿定C在嫩叶中的含量均高于老叶数倍。结论:试验结果表明:产地对粗毛淫羊藿中淫羊藿苷和朝藿定C含量影响较大;不同成熟期淫羊藿叶中淫羊藿苷和朝藿定C的含量变化可达2～11倍。     

HPLC法测定朝鲜淫羊藿及市售淫羊藿中淫羊藿苷等四种成分研究

目的:建立同时测定淫羊藿样品中淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C含量的HPLC方法,为完善淫羊藿市售药材及饮片的质量评价提供参考。方法:采用高效液相色谱法,以Agilent C18(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,柱温25℃,检测波长270 nm。结果:淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C分别在0.0800¹.60μg、0.01751.60μg、0.0175⁰.350μg、0.07750.350μg、0.0775¹.55μg、0.2331.55μg、0.233⁴.66μg(r≧0.9995)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为96.5%、97.4%、97.9%、97.4%,RSD分别为1.3%、1.5%、1.0%、1.8%。结论:所建立的方法简便、准确、重复性好,可以为朝鲜淫羊藿及市售淫羊藿质量评价提供参考。     

关于中国药典淫羊藿药材定量指标的商榷

目的:通过测定箭叶淫羊藿野生品和栽培品中朝藿定C、淫羊藿苷、鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ3种黄酮类成分含量,对中国药典淫羊藿药材定量指标的合理性进行评价。方法:建立HPLC-DAD方法,色谱柱为Alltima C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈(A)-水(B),梯度洗脱;检测波长270 nm。对野生和栽培箭叶淫羊藿及不同干燥方法处理的样品进行分析测定。结果:箭叶淫羊藿各样品中朝藿定C含量最高,达2.0%以上,未检测到淫羊藿苷。结论:中国药典淫羊藿药材以淫羊藿苷为定量指标,箭叶淫羊藿难以达标,造成资源浪费,建议中国药典修订定量指标或将箭叶淫羊藿单列。     

淫羊藿-仙茅药对中6种成分的含量测定方法及配伍影响研究

目的:以淫羊藿-仙茅药对为研究对象,分析淫羊藿和仙茅配伍前后的水提物、醇提物中化学成分及含量的变化。方法:采用HPLC-DAD法,XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈(A)-0.1%醋酸溶液(B),梯度洗脱。结果:药对配伍后,水提物中苔黑酚葡萄糖苷含量不变,朝藿定A和仙茅苷含量稍有降低,朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷的含量提高;醇提物中苔黑酚葡萄糖苷、朝藿定A、朝藿定B的含量降低,仙茅苷、朝藿定C、淫羊藿苷的含量均有提高;药对水提物的干浸膏和粗多糖质量均有提高。结论:该方法简便快速,结果准确可靠,可为淫羊藿-仙茅的配伍研究及临床应用提供科学依据。     

不同产地淫羊藿中4种活性成分含量的高效液相色谱法测定

目的 用HPLC法同时测定淫羊藿中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C及淫羊藿苷的含量,对不同产地淫羊藿进行品质评价.方法 采用Dikma C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相以乙腈(A)-水(B)梯度洗脱(0～ 35 min,15 ％A～27 ％A;35～55 min,27％A～35 ％A),流速:1.0 ml·min-1,检测波长:270 nm,柱温:30 cC.结果 4种成分均能达到基线分离,线性良好.不同产地淫羊藿中4种成分含量差异较大,其中产自甘肃的淫羊藿品质较好.结论 该方法操作简便,重现性好,可作为淫羊藿的品质评价方法.     

天平山淫羊藿不同居群基于淫羊藿多苷成分的质量评价

目的利用高效液相色谱法对天平山淫羊藿覆盖其分布区的8个居群基于4种主要活性成分,即朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和淫羊藿苷(合称为淫羊藿多苷,ABCI)进行含量测定,开展系统全面的质量评价研究。同时,为淫羊藿属植物药用种质筛选和资源开发利用提供参考和启示。方法采用Zorbax SB-C8柱(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-1.44%乙酸水,流速1.0 ml/min,柱温25℃,检测波长272 nm。结果 8个居群的天平山淫羊藿质量均优于淫羊藿苷0.5%的药典标准及淫羊藿多苷1.3%的建议标准。但居群间质量差异显著,朝藿定A和朝藿定B的含量分别从低于检测限到1.42%和2.39%,朝藿定C和淫羊藿苷的居群间变异范围分别为2.18%~7.80%和0.51%~7.76%。结论:综合考虑天平山淫羊藿的丰富资源和优异质量,支持其作为药用。其中,贵州产天平山淫羊藿普遍优于其他产区,可作为优异种质资源重点筛选。     

不同产地15个品种淫羊藿的质量评价

目的评价不同产地15个品种淫羊藿Epimedii Folium的质量。方法采用UPLC-MS/MS法,测定淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅰ、淫羊藿次苷Ⅱ、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、箭藿苷A、箭藿苷B、鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ、宝藿苷Ⅱ的含有量。淫羊藿40%乙醇提取液的分析采用Phenomenex C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,3μm);以0.1%甲酸-乙腈为流动相,梯度洗脱;体积流量0.2 m L/min;柱温40℃。再进行主成分分析。结果 10种成分在各自范围内线性关系良好(r0.999 0),平均加样回收率97.6%~104.5%,RSD 1.37%~2.93%。46批样品中朝藿定C含有量最高,朝藿定A次之,淫羊藿次苷Ⅰ最低。小花、大花品种中各成分含有量有明显差异。结论该方法灵敏快速,可为淫羊藿开发利用提供依据。     

淫羊藿提取物中总黄酮含量测定方法的改进

目的:对《中国人民共和国药典》方法和改进法在测定淫羊藿提取物中总黄酮含量的研究分析。方法:以朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷4个不同的对照品为对照按照《中国人民共和国药典》方法测定混合对照品的含量,与改进法通过折合分子量计算校正因子,再通过校正因子计算淫羊藿提取物中总黄酮的含量,将结果进行比较。结果:《中华人民共和国药典》中测定淫羊藿中总黄酮含量的方法误差较大,而改进法以朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷为对照品测定淫羊藿提取物的含量,乘以相应的校正因子,得到的含量结果接近真实值。结论:改进方法简便易行,专属性强,是理想的测定淫羊藿提取物中总黄酮含量的方法。     

一测多评法测定淫羊藿中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C及淫羊藿苷的含量

目的:在HPLC法同时测定淫羊藿中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和淫羊藿苷含量的基础上,建立一测多评法的方法学考察模式,验证此方法在淫羊藿中应用的可行性和技术适应性。方法:以淫羊藿药材为研究对象,药材中4个主要有效成分为指标成分,分别建立淫羊藿苷与朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C的相对校正因子,计算朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C的含量,实现一测多评;同时采用外标法测定药材中该4个指标成分的含量,并比较计算值与实测值的差异,以验证一测多评法的准确性和可行性。结果:12批淫羊藿药材中4个指标成分的含量计算值与实测值间无显著差异。结论:用一测多评法控制淫羊藿药材的质量是可行的、准确的。     

HPLC测定仙灵骨葆胶囊中淫羊藿苷和淫羊藿定C含量

目的:建立仙灵骨葆胶囊(淫羊藿、丹参、补骨脂、地黄等)中淫羊藿苷和淫羊藿定C的含量测定方法.方法:采用RP-HPLC法测定含量.色谱柱为Spherisorb C18(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水为流动相梯度洗脱,流速为1.0mL/min,检测波长为270 nm,柱温为25℃.结果:淫羊藿定C在0.22～2.20μg内其含量与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为103.2%,RSD为3.1%.淫羊藿苷在0.04～0.40μg内其含量与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为97.8%,RSD为3.2%.结论:本方法分析时间短且重现性和稳定性较好,可作为仙灵骨葆胶囊的质量控制方法.     

高效液相色谱法测定淫羊藿中淫羊藿定C和淫羊藿苷的含量

目的 :测定不同种和不同产地的淫羊藿中淫羊藿定C和淫羊藿苷的含量 ,探讨淫羊藿药材的质量控制方法。方法 :色谱柱为HypersilBDS C₁₈(4mm×250mm ,5μm ) ,以乙腈 0.05%磷酸作为梯度洗脱流动相 ,G13 15A光电二极管阵列检测器 ,检测波长 272nm。结果 :淫羊藿定C和淫羊藿苷平均回收率分别为 99.7% ,102.5% ,RSD分别为 1.5% ,1.1%。结论 :本方法快速 ,重现性和稳定性好 ,可用于淫羊藿药材质量控制.     

LC-MS/MS法同时测定大鼠尿液中4种淫羊藿黄酮苷

目的应用高效液相色谱-串联质谱联用(LC-MS/MS)法建立大鼠尿液中朝藿定A、B、C及淫羊藿苷的同时测定方法,初步探讨淫羊藿提取物在大鼠体内的排泄规律。方法以人参皂苷Rg1为内标,选用Agilent Eclipse XDB-C_(18)色谱柱(2.1 mm×150 mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%乙酸水(30∶70);流速:0.3 m L·min~(-1);柱温:40℃;采用电喷雾离子源(ESI)负离子多反应检测(MRM)模式测定。结果朝藿定A、B、C以及淫羊藿苷在1~500 ng·m L~(-1)浓度范围内线性关系良好,日内精密度(RSD)均小于7.4%,日间精密度(RSD)均小于12.7%。大鼠口服灌胃给予淫羊藿提取物36 h后朝藿定A、B、C及淫羊藿苷的平均尿累积排泄量/给药量比值不超过0.27‰,0.20‰,0.30‰和0.43‰。结论本研究建立的LC-MS/MS方法简便灵敏快速,适用于尿液中朝藿定A、B、C以及淫羊藿苷的同时测定及淫羊藿提取物尿排泄动力学研究的应用,研究结果显示淫羊藿提取物原形药物基本不经尿液排泄,提示肾排泄不是其主要消除途径。     

不同厂家淫羊藿配方颗粒主成分含量对比研究

目的:对2厂家生产的淫羊藿配方颗粒中的主要黄酮类成分进行比较。方法:建立反相高效液相色谱法同时测定淫羊藿配方颗粒中5种主要黄酮类成分:淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、宝藿苷Ⅰ的含量。结果:2厂家生产的淫羊藿配方颗粒中朝藿定A的含量较一致,生产厂家A产品中朝藿定B的含量较高;生产厂家B产品中淫羊藿苷、朝藿定C、宝藿苷Ⅰ的含量较高。但按药典规定的药材中淫羊藿苷含量折算,2厂家产品淫羊藿苷的提取转移率均较低,只有25%~38%。结论:建议淫羊藿配方颗粒应进一步完善制备工艺,建立多种成分的含量测定方法,以全面控制淫羊藿配方颗粒的质量。     

淫羊藿总黄酮胶囊指纹图谱研究

目的:建立淫羊藿总黄酮胶囊HPLC指纹图谱测定方法。方法:以淫羊藿苷为参照物,色谱柱为Agilent Eclipse Plus C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水,梯度洗脱;流速为1.0 m L·min~(-1);柱温为25℃;检测波长为270 nm。结果:建立了淫羊藿总黄酮胶囊的指纹图谱,确定了淫羊藿总黄酮胶囊中14个共有峰,10批成品指纹图相似度在0.95以上,同时指认了淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和宝霍苷Ⅰ各色谱峰。结论:建立的HPLC指纹图谱有较好的精密度、重复性和稳定性,适用于淫羊藿总黄酮胶囊的质量控制。     

生长期巫山淫羊藿不同部位5种黄酮类成分的动态积累研究

目的 研究生长期巫山淫羊藿根、茎、叶中5种黄酮类成分朝藿定C、双藿苷A、淫羊藿苷、淫羊藿属苷A和淫羊藿属苷C的量,揭示几种活性成分的动态积累规律.方法 采用RP-HPLC方法 ,以美国Waters Sunfire~(TM_)C_(18)为色谱柱(带预柱),检测波长270 am,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,体积流量为1 mL/min.结果 在20 min内分离测定了5种异戊烯基黄酮,得到了这5种异戊烯基黄酮在生长期巫山淫羊藿不同部位中的分布积累规律.发现巫山淫羊藿不同部位中双藿苷A的量分别为:根1.090%～3.661%,茎0.001%～0.033%,叶0.095%～0.217%;淫羊藿属苷A的量分别为:根0.177%～0.971%,茎0.010%～0.089%,叶0.089%～0.323%;朝藿定C的量分别为:根0.223%～0.748%,茎0.024%～0.147%,叶0.905%～2.228%;淫羊藿苷的量分别为:根0.009%～0.128%,茎0.003%～0.044%,叶0.258%～0.929%;淫羊藿属苷C的量分别为:根0.080%～1.857%,茎0.002%～0.022%,叶0.004%～0.058%.结论 巫山淫羊藿叶中淫羊藿苷除4、5、7月份外,其余月份的量都低于0.5%,而朝藿定C的量平均在1.586%.巫山淫羊藿叶在其生长的任何月份都是朝藿定C的量远大于淫羊藿苷的量,积累高峰期有3个,朝藿定C是巫山淫羊藿叶中的主要成分.巫山淫羊藿根在其生长的任何月份都是双藿苷A的量远大于朝藿定C的量,质量分数平均在2.763%,双藿苷A为巫山淫羊藿根中的主要成分.     

巫山淫羊藿净制研究

目的:研究巫山淫羊藿净制的科学性。方法:紫外-可见分光光度法测定总黄酮含量,高效液相色谱法测定黄酮类单体成分——朝藿定C、淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的含量。结果:叶片、叶柄、叶中总黄酮含量分别为9.185%,2.143%,3.364%;朝藿定C含量分别为5.346%,0.653%,1.577%;淫羊藿苷含量分别为1.430%,0.047%,0.321%;淫羊藿次苷Ⅱ含量分别为0.328%,0.077%,0.078%。结论:叶片和叶柄中主要黄酮类成分含量差异明显;叶片中各成分的含量是叶柄的4.3～30.4倍,巫山淫羊藿摘取叶片入药时应摘除叶柄是科学的。     

HPLC法同时测定淫羊藿-骨碎补药对中7种成分

目的建立HPLC法同时测定淫羊藿-骨碎补药对中朝藿定A、新北美圣草苷、柚皮苷、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅰ的含有量。方法淫羊藿-骨碎补饮片60%乙醇提取物的分析采用采用Waters X Bridge C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;柱温25℃;体积流量1.0 mL/min;检测波长280 nm。结果 7种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9991);平均加样回收率95.06%～103.9%,RSD 1.1%～2.7%。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于淫羊藿-骨碎补药对的质量控制。     

炙淫羊藿炮制过程中5种黄酮类成分变化规律研究

目的:研究炙淫羊藿炮制过程中5种黄酮类成分的变化规律.方法:测定炙淫羊藿炮制前后朝藿定A,朝藿定B,朝藿定C,淫羊藿苷,宝藿苷Ⅰ的含量.结果:炙淫羊藿炮制过程中朝藿定A,朝藿定B,朝藿定C,淫羊藿苷,宝藿苷Ⅰ的含量发生了变化,不同品种、不同批次的炙淫羊藿呈现出不同的变化趋势.结论:炙淫羊藿的炮制工艺条件和黄酮类成分的比例关系决定了炙淫羊藿炮制过程中黄酮类成分的变化趋势.