丹参红花混煎液中丹参素、羟基红花黄色素A、迷迭香酸、紫草酸和丹酚酸B的HPLC测定方法

目的:建立同时测定丹参红花混煎液中丹参素、羟基红花黄色素A、迷迭香酸、紫草酸和丹酚酸B含量的HPLC法.方法:采用梯度洗脱高效液相色谱法,色谱柱为ZORBAX Eclipse Plus C18柱(4.6 mm×100 mm,1.8μm);以甲酸-500 mmol·L-1甲酸铵-水(0.5:10:90)为流动相A,0.5％甲酸-乙腈为流动相B;检测波长280 nm(丹参素、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B)和380 nm(羟基红花黄色素A);流速0.5 mL·min-1;柱温30℃.结果:建立了同时测定丹参红花混煎液中5种成分含量的方法.丹参素、羟基红花黄色素A、迷迭香酸、紫草酸和丹酚酸B质量浓度分别在3.51 ～ 84.2,3.48～83.5,1.90～ 45.6,2.47 ～59.3,37.9～909.6 mg·L-1与峰面积积分值线性关系良好(R2＞ 0.999 3),加样回收率分别为99.1％,102％,102％,98.5％,101％.建立的HPLC具有良好的精密度、重复性和稳定性.结论:该方法操作简便,精密度好,结果准确可靠.     

大狼把草的化学成分液质联用快速鉴定分析

目的:建立大狼把草化学成分的液质联用定性表征方法并总结裂解规律。方法:按照化学成分数据库构建-液质数据采集-数据库检索-质谱数据解析的步骤,采用HALO C_(18)色谱柱(2.1 mm×150 mm,2.7μm);0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱(0~10 min,5%~25%B;10~30 min,25%~45%B;30~35 min,45%~70%B;35~45 min,70%~90%B;45~60 min,90%~100%B;60~70 min,100%B)。柱温25℃,流速0.2 mL·min-1,进样量5μL;质谱条件为采用ESI离子源,在正离子模式下进行检测,对大狼把草中的橙酮、查尔酮、苯丙素等进行分析。结果:从大狼把草的提取液中,鉴定出黄酮类22个,苯丙素类5个,有机酸2个,碳烯1个,发现在正离子模式下,绿原酸及其衍生物会有规律的断裂产生[奎尼酸+H-H_2O]+,[咖啡酰基+H]+,多羟基酸会脱水裂解。黄酮类化合物,主要会丢失CO,H_2O等碎片,橙酮类化合物会产生286,270,230等碎片离子。结论:采用高效液相-飞行时间液质联用法可以快速有效的对中药中已知化学成分进行定性分析,为大狼把草的物质基础表征提供质谱依据。     

HPLC-MS/MS法测定十批参芦中人参皂苷Rg1、Re和Rb1的含量

目的:建立同时检测参芦中人参皂苷Rg1、Re和Rb1含量的HPLC-MS/MS方法,测定十批参芦中人参皂苷Rg1、Re和Rb1的含量。方法:采用液质联用法(HPLC-MS/MS),色谱柱为SHIMADZU VP-ODS(4.6mm×150mm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水,流速0.5mL/min,柱温40℃。质谱条件:正离子检测模式,用于定量分析的离子对分别为:Rg1m/z823.3→643.6,Rem/z969.7→789.6和Rb1m/z1131.5→365.3。结果:人参皂苷Rg1、Re、Rb1线性关系良好。结论:该方法简便、准确、快速,可用于参芦中人参皂苷Rg1、Re和Rb1的含量检测。     

抑制型离子色谱法测定益母草中水苏碱含量

目的:建立一种离子色谱测定益母草及其制剂中水苏碱的新型分离检测方法,以期为水苏碱的研究提供一种新的思路。方法:采用CS12A阳离子交换柱(4 mm×250 mm)为色谱柱,以CSRS 500(4 mm)自循环电的抑制方式抑制洗脱液的背景电离,抑制电流为16 m A,6 mmol·L~(-1)的甲磺酸溶液为淋洗液等度洗脱,流速为0.8 m L·min~(-1),柱温为30℃,检测方式为电导检测。结果:在上述色谱条件下,益母草中的水苏碱达到有效分离和快速检测。水苏碱质量在0.41~10.23 mg拥有良好的线性关系(r=0.999 9),检测限为0.11 mg·L~(-1),定量限为0.41 mg·L~(-1),重复性验证结果为7.88~8.38 mg·g~(-1),RSD为2.3%(n=6),加样回收验证结果的平均回收率为98.74%~101.82%,RSD为1.2%(n=6),8批不同产地的益母草中水苏碱的平均质量分数为7.16~15.63 g·L~(-1),其中贵州修文县中水苏碱含量最高为15.63 mg·g~(-1),平邑流峪中水苏碱含量最低为7.16 mg·g~(-1)。结论:该文建立的方法重复性好,准确性高,专属性强、操作简单,可用于益母草及其制剂中水苏碱的定量、定性检测分析,同时也为离子色谱法测定季铵型结构的化合物的实验研究提供方法依据。     

HPLC法同时测定金黄凝胶中5种成分的含量

目的:通过梯度洗脱的方法,建立了金黄凝胶中芦荟大黄素、大黄酸、姜黄素、大黄素、大黄酚的含量测定方法。方法:采用ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6×250 mm,5μm),以乙腈-4%冰醋酸为流动相梯度洗脱,柱温:30℃,检测波长:430 nm,流速:1.0 m L·min~(-1)。结果:在此条件下5种成分能够得到很好的分离,芦荟大黄素、大黄酸、姜黄素、大黄素、大黄酚的线性范围分别为0.316~6.32μg·mL~(-1)(r=1.0000,n=5),0.536~10.72μg·mL~(-1)(r=0.9999,n=5),0.325~6.50μg·mL~(-1)(r=1.0000,n=5),0.57~11.40μg·mL~(-1)(r=1.0000,n=5),0.491~9.82μg·mL~(-1)(r=1.0000,n=5)。平均加样回收率(n=6)分别为99.7%,98.8%,99.2%,97.4%,99.9%,RSD%分别为2.47%,2.55%,2.64%,1.50%,2.54%。结论:该方法简便、快速、准确,重复性好,可用于控制金黄凝胶的质量。     

红花中5种成分的含量测定

目的:建立同时测定云南红花药材中没食子酸、羟基红花黄色素A、原儿茶酸、芦丁和槲皮素含量的HPLC法。方法:使用LC-20A日本岛津高效液相色谱仪,Agilent ZORBAX SB-C_(18)(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,采用波长切换,0～15 min用254 nm,15～45 min用360 nm的波长;流动相:甲醇-0.2%磷酸水溶液,柱温30℃,进样量5μL,流速1.0 mL·min~(-1)。结果:25批云南不同产地红花药材中没食子酸、羟基红花黄色素A、原儿茶酸、芦丁和槲皮素的含量分别为1.24～3.37 mg·g~(-1)、61.47～97.92 mg·g~(-1)、7.74～34.19 mg·g~(-1)、11.24～83.66 mg·g~(-1)、1.36～19.51 mg·g~(-1),含量高低顺序为:羟基红花黄色素A芦丁原儿茶酸槲皮素没食子酸。结论:建立的同时测定滇产红花药材中没食子酸、羟基红花黄色素A、原儿茶酸、芦丁和槲皮素含量的HPLC法,操作简单,稳定性好,灵敏度高。     

HPLC法测定红花及其制剂颈腰康胶囊中羟基红花黄色素A含量

目的:建立HPLC法测定红花及颈腰康胶囊中羟基红花黄色素A的含量。方法:采用Ultimmate XB-C_(18)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-乙腈-0.025mol·L~(-1)磷酸二氢钾溶液(用磷酸调pH=2.5)(15∶5∶80);流速:1.0mL·min~(-1);柱温:30℃;波长:403nm,测定红花及颈腰康胶囊中羟基A的含量。结果:羟基红花黄色素A在0.112 48~0.674 88μg进样范围内呈良好的线性关系,羟基A平均加样回收率为100.07%,RSD=1.41%。结论:该方法简单、快速、准确,重复性好,为红花药材及颈腰康胶囊的质量标准提高及评价提供了可靠的参考依据。     

三重四级杆液质联用法测定金樱子中白桦脂酸

目的:建立金樱子中白桦脂酸含量测定方法。方法:采用三重四级杆液质联用(HPLC-MS-MS)法,色谱柱Dia-monsil C18(2)(2.1 mm×150 mm,3μm),流动相甲醇-0.2%的甲酸溶液(84∶16),流速0.3 mL·min-1。柱温30℃,质谱采用大气压电喷雾离子源,选择性离子流模式(负离子)。结果:白桦脂酸的平均样回收率为98.3%(RSD 2.6%)。结论:该方法快速简便,灵敏度高,重复性好,可用于金樱子的质量控制。     

HPLC法研究当归-红花单煎及共煎液中有效成分含量的变化

目的 研究和探讨当归-红花单煎及共煎液中有效成分阿魏酸和羟基红花黄色素A含量的变化,初步探索两味中药配伍应用的变化规律.方法 采用Phenomenex C18柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),以甲醇-0.05%磷酸水溶液(pH=2.45,25:75)为流动相;流速:1.0 mL/min;柱温:30℃;进样温度:5℃;检测波长分别为320 nm、403 nm.测定追踪当归-红花共煎液与单煎液中主要有效成分阿魏酸和羟基红花黄色素A含量的变化.结果 阿魏酸回归方程为Y=3.837 2X+0.0219(r=0.999 8),在0.5～10.0μg/mL范围内线性关系良好,平均加样回收率为92.68～101.13%,RSD小于3.2%;羟基红花黄色素A回归方程为Y=1.364 7X-0.371 4(r=0.999 9),在5.0～100.0 μg/mL范围内线性关系良好,平均加样回收率为100.17～102.97%,RSD小于2.8%;当归红花共煎液中阿魏酸含量比当归单煎液中平均升高142.64%,羟基红花黄色素A含量比红花单煎液中平均升高145.37%.结论 当归-红花共煎液中阿魏酸和羟基红花黄色素A的含量高于各单煎液中含量,两者配伍具有一定的合理性.该法快速、简便、准确,可为评价提取物中阿魏酸和羟基红花黄色素A的质量提供依据.     

HPLC同时测定白癜风丸中羟基红花黄色素A和丹酚酸B的含量

目的:建立同时测定白癜风丸中羟基红花黄色素A和丹酚酸B含量的测定方法。方法:采用Welchrom C18色谱柱,流动相乙腈-0.1%磷酸梯度洗脱,流速1.0 m L·min~(-1),检测波长280 nm。结果:羟基红花黄色素A在4.91~36.86 mg·L~(-1)呈良好的线性关系(r=0.999 5),平均回收率99.12%,RSD 0.9%。丹酚酸B在14.99~112.42 mg·L~(-1)呈良好的线性关系(r=0.999 7),平均回收率为98.79%,RSD 1.0%。结论:该方法简便、准确、重复性好,可用于白癜风丸的质量控制。     

间接竞争酶联免疫吸附法快速筛检莲子中黄曲霉毒素B1的污染水平

建立间接竞争酶联免疫吸附法(ic-ELISA)快速筛检"药食同源"中药-莲子中黄曲霉毒素B1(AFB1)的污染水平,并采用超快速液相串联质谱(UFLC-MS/MS)进行结果确证。通过基质匹配,AFB1在0.171~7.25μg·L-1线性关系良好(R2>0.978),半数抑制浓度(IC50)为1.29μg·L-1,加样回收率为74.73%~126.9%,RSD<5%,检测限(IC10)为0.128μg·L-1。将ic-ELSIA法应用于20批莲子中AFB1的筛查,结果显示:于30℃,30%湿度条件下贮藏一年的1~15号样品中AFB1污染水平为1.19~115.3μg·kg-1,40%样品中AFB1含量超过限量标准(5μg·kg-1);新购买的16~20号样品中AFB1污染率为40%。以上结果经液质联用技术确证,通过计算ic-ELISA和液质测定结果之间的皮尔森相关系数可知,二者测定结果的匹配度达0.997。建立的ic-ELISA分析方法操作简便、灵敏、结果准确,可用于莲子中AFB1的高通量现场快速检测。     

HPLC-MS-MS法测定降糖类中成药中非法添加物格列波脲

目的建立液质联用法定性及定量测定降糖类中成药中非法添加格列波脲。方法液质联用定性筛查选用Dikma Spursil C18柱(150 mm×2.1 mm,3μm),以甲醇-0.01 mol/L乙酸铵溶液梯度洗脱,体积流量0.2 mL/min。经液质联用筛查为阳性的样品用液相色谱进行定量测定,选用Agilent Eclipse Plus C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-0.01mol/L乙酸铵溶液梯度洗脱,体积流量1 mL/min,检测波长235 nm。结果格列波脲在0.002⁰.2 mg/mL质量浓度范围内与峰面积有良好线性关系Y=217.88X+0.324 5,r2=0.999 8,平均回收率为96.3%,RSD为1.0%(n=9)。结论通过对30多批次降糖类中成药进行测定,其中2批检测结果为阳性,含有量分别为5.8 mg/g、3.5 mg/g。     

猪胆粉主要胆酸类成分的定性定量分析

建立基于UHPLC-LTQ-Orbitrap-MS技术快速鉴别猪胆粉中胆酸类成分的定性方法,建立HPLC-ELSD内标法测定猪胆粉中2种甘氨结合型胆酸的定量方法。定性分析采用UHPLC-LTQ-Orbitrap-MS,Waters Acquity UPLC HSS T_3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相为0.2%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱,负离子模式扫描。定量分析采用HPLC-ELSD,Diamonsil-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温30℃,流动相为0.2%甲酸水溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱,流速1.0 m L·min~(-1),柱温30℃;ELSD漂移管温度60℃,氮气流量1.4 L·min~(-1),增益为1。经过质谱精确质量数,二级、三级碎片,色谱保留行为及对照品比对,准确鉴定猪胆粉中的14种胆酸类成分。建立的HPLC-ELSD测2种主要甘氨结合型胆酸中,甘氨猪去氧胆酸在26.52～265.20 mg·L~(-1)线性关系良好(r=0.999 8),平均加样回收率为104.1%,RSD 2.0%(n=6)。甘氨鹅去氧胆酸在19.84～198.40 mg·L~(-1)线性关系良好(r=0.999 1),平均加样回收率为103.1%,RSD 2.4%(n=6)。通过UHPLC-LTQ-Orbitrap-MS联用技术,为鉴定猪胆粉中胆酸类成分提供了一种快速、高效的定性分析方法;建立的HPLC-ELSD内标法测定猪胆粉中2种甘氨结合型胆酸的定量分析方法准确、可靠,对猪胆粉质量标准提升具有参考价值。     

HPLC法测定肤疾洗剂中苦参碱的含量

目的:建立肤疾洗剂中苦参碱的含量测定方法。方法:采用HPLC法,使用C18柱色谱柱,流动相为0.016mol·L-1磷酸二氢钾-0.016mol·L-1十二烷基硫酸钠-乙腈(30:30:35),流速1.0mL·min-1,检测波长220nm。结果:在0.515～5.15μg范围内苦参碱线性关系良好,平均回收率为98.73%,RSD为1.01%。结论:该方法能够对肤疾洗剂中苦参碱进行准确、快速的定量检测。     

UPLC-MS/MS法同时测定安喘舒丸中腺苷和黄芪甲苷含量

目的:建立同时测定安喘舒丸中腺苷、黄芪甲苷含量的方法。方法:采用液质联用技术,以甲醇-0.1%甲酸溶液为流动相等度洗脱,以Agilent ZORBAX SB-C_(18)色谱柱为分析柱,通过电喷雾离子源,选择正离子模式多反应监测方式检测。结果:腺苷、黄芪甲苷的线性范围分别为10~320 ng·m L~(-1)(r=0.996 8)、5~160 ng·m L~(-1)(r=0.995 5),加样回收率在96.17%~99.48%,RSD均低于1.14%。结论:该法专属性强、快速灵敏,可用于安喘舒丸中腺苷、黄芪甲苷的含量测定。     

HPLC同时测定红花逍遥片中芍药苷及甘草苷含量

目的:采用HPLC测定红花逍遥片中芍药苷及甘草苷含量。方法:Dikma Diamonsil C18(2)柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%磷酸(15∶85),流速1.0 mL.min-1,柱温30℃,检测波长230 nm。结果:制剂中芍药苷和甘草苷与其他组分的色谱峰均达到基线分离,加样回收率平均值分别为100.33%,98.06%,RSD分别为2.51%,1.91%。结论:该方法快速、准确,可作为红花逍遥片质量控制。     

蒙药制剂其格日木汤中羟基红花黄色素A含量的测定

目的:探讨测定蒙药制剂其格日木汤中红花(以羟基红花黄色素A计)含量的高效液相色谱法。方法:采用C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温40℃,以0.7%磷酸溶液-甲醇-乙腈为流动相,等度洗脱,流速1.0 mL·min~(-1),检测波长403 nm,进样量10μL,外标定量。结果:在0.776~7.760μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9996),平均回收率为100.9%(RSD=1.4%)。结论:羟基红花黄色素A含量测定方法符合方法验证要求,可用于其格日木汤中计算红花的含量。     

LC/MS/MS测定龙胆苦苷的尿药浓度

目的建立龙胆苦苷尿药浓度的液质联用测定方法(LC/MS/MS).方法以咖啡因作内标,固相萃取法处理尿样.色谱柱:RESCEK C8柱(150 mm×2.1 mm,5 μm),流动相为甲醇-10 mmol·L-1醋酸铵缓冲液(pH=6.5)-乙腈(50:40:10),流速为0.2 mL·min-1.样品经电喷雾离子源(ESI)正离子化后,通过三级四极杆串联质谱仪,采用多反应离子监测方式测定龙胆苦苷(m/z 374.1→195.2)和咖啡因(m/z 195.2→138.2)浓度.结果尿液中龙胆苦苷在30～9000 ng·mL-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9980),方法回收率为91.10%～96.21%,提取回收率为100.52%～103.83%,日内、日间精密度均＜10%.结论该方法灵敏、准确、快速、特异性强.     

红花黄色素指纹图谱研究

目的建立中红花黄色素高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。方法使用Dikma Diamonsil C18(5μm,250×4.6 mm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速:1.0ml·min-1,检测波长:332 nm,柱温:30℃。结果红花黄色素有专属的HPLC指纹特征图谱,与中药饮片红花HPLC图谱对照,具有高度关联性。结论红花黄色素HPLC指纹图谱具有特征性强、操作简便、灵敏度高、重现性好等特点,可以用作红花黄色素的质量控制方法。     

HPLC法测定蒙药希合日希精阿日乐嘎其(降糖1号)中羟基红花黄色素A的含量

目的:测定降糖1号中有效成分羟基红花黄色素A的含量,为制定其质量标准提供方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent TC-C18柱(150mm×4.6mm,5μm),柱温25℃,以甲醇-乙腈-0.7%磷酸溶液(26:2:72)为流动相,流速1mL·min-1,检测波长为403nm。结果:羟基红花黄色素A在0.1372～0.9601μg范围内呈良好的线性关系(r=1,n=7),(平均回收率为100.72%,n=9)。结论:本方法操作简单,重现性好,专属性强,可用希合日希精阿日乐嘎其(降糖1号)中羟基红花黄色素A的含量测定。