质谱成像技术及其在药用植物研究中的应用

质谱成像(mass spectrometry imaging,MSI)作为一种重要的分子成像技术,通过专用成像分析软件将质谱仪记录的特定区域离子化分子的离子强度、质荷比和坐标等信息转换为像素点模型,重新构造出被测化合物的空间离子分布图像,具有样品前处理简单、灵敏度高、无需标记等优势。近年来,MSI技术在医学、药学、植物学等领域得到广泛应用。其中,MSI技术在药用植物研究中的应用为明确药理机制、提高疗效、跟踪毒性成分分布等提供了新的技术思路,为药用植物的深度开发利用做了重要贡献。该文综述了近几年来MSI技术在药用植物鉴定、代谢物分布、有效成分合成途径、药用安全性及植物防御等方面的研究成果,讨论了不同研究方法的优缺点。最后,简要指出了MSI技术在药用植物研究中的优点和实际应用时存在的障碍,并对MSI技术和药用植物研究未来发展前景进行了展望。     

光声成像与中医药研究

光声成像是生物医学应用领域中的一种新兴的功能型成像方式，其基于光声效应发展而来。光声成像技术可以对生物组织中的结构，功能和分子异常进行无创检测，可对微观和宏观世界的多尺度信息进行检测。该技术已经发展成为神经科学领域最新的研究方法之一。中医诊断疾病主要是通过四诊合参的方法直接根据宏观病症信息，以中医药理论为指导，结合长期的临床实践和丰富的临床经验，以了解病理机制和制定治疗方案。但是，传统中医药理论缺乏现代意义上物质化证据的支持，使其研究和发展受到一定的制约，并阻碍中医药国际化的进程。光声成像技术能从微观形态结构及其功能变化提供诊断信息，为中医药辨证施治提供体内外变化的依据。有利于推进中医药现代化、国际化、标准化的研究进程。     

两种脾虚证大鼠肝脏线粒体自噬及细胞凋亡的比较研究

目的比较脾气虚证和脾不统血证两种脾虚证模型大鼠肝脏线粒体自噬及细胞凋亡水平，探讨脾虚证发生发展过程中，肝脏细胞状态变化及可能的机制。方法32只SD大鼠随机分为4组：正常对照组（8只）、低分子肝素钠对照组（8只）、脾气虚组（8只）、脾不统血组（8只）。采用劳倦过度加饮食失节的方法复制脾气虚证大鼠模型，在脾气虚证的基础上采用低分子肝素钠诱导出血的方法构建脾不统血证大鼠模型；使用化学发光法检测大鼠肝组织三磷酸腺苷（ATP）含量；JC-1荧光探针法检测大鼠肝组织线粒体膜电位；Western Blot法检测各组大鼠肝组织线粒体自噬相关蛋白PINK1、Parkin、LC3Ⅱ/Ⅰ的表达水平和细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Cleaved caspase-3、线粒体外Cyt-C的表达水平；使用荧光定量法检测PINK1、Parkin、Bcl-2 、Bax mRNA水平。结果与正常对照组及低分子肝素钠组比较， 两种脾虚证大鼠肝组织线粒体膜电位，ATP含量，PINK1、Bcl-2蛋白及mRNA水平显著降低（P<0.05， P<0.01）， 线粒体外Cyt-C蛋白水平、Bax mRNA水平显著升高（P<0.01）。与正常对照组比较，两种脾虚证大鼠LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白比值、Parkin蛋白水平显著降低（P<0.01）。与脾气虚证大鼠比较，脾不统血证大鼠肝组织线粒体膜电位、ATP含量降低（P<0.05， P<0.01），线粒体外Cyt-C蛋白水平、Bcl-2蛋白及mRNA 水平下降 （P<0.05， P<0.01），Cleaved caspase-3 蛋白水平、Bax 蛋白及mRNA 水平上升（P<0.05）。结论脾虚证大鼠肝组织细胞凋亡可能机制为，线粒体过度损伤导致线粒体自噬紊乱，进一步导致了细胞凋亡，随着脾虚证的加重，肝组织细胞凋亡程度加深。     

钆喷葡胺不良反应的观察及护理

钆喷葡胺（Gd-DTPA）又名钆喷葡酸胺，是一种用于磁共振成像的顺磁性造影剂，进入体内后能缩短组织中质子的T1及T2弛豫时间，从而增强图像的清晰度和对比度。由于本品不良反应发生率低，易被忽视。现将我院1996年2月-2006年4月磁共振成像应用钆喷葡胺为造影剂致不良反应及护理经验总结如下。     

靶向超声对比剂在乳腺癌诊断与治疗中的研究进展

〔摘 要〕 靶向超声对比剂是一种将传统超声对比剂与能和特定细胞抗原表位或其他指示疾病的受体相结合的配体 通过各种理化方式组合在一起制成能实现对疾病相关分子特征进行影像学检测、局部药物递送等功能的新型对比剂。 目前在乳腺癌的诊断与治疗方面已表现出强大的潜力。很多新型超声对比剂可以实现乳腺癌的靶向成像和多模态 成像，利于乳腺癌的早期检出和分型，具多重优点。但靶向超声对比剂距离乳腺癌的临床应用仍有一段距离。     

益气活血方对肺纤维化黏附分子表达影响的实验研究

[目的]通过观察中药益气活血方对博莱霉素肺纤维化大鼠肺组织黏附分子[细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞间黏附分子-1(VCAM-1)]的影响,进-步探讨中药益气活血方治疗肺纤维化的机制.[方法]采用经典的博莱霉素肺纤维化模型,将80只符合实验标准的大鼠随机分为4个组,即正常对照组、模型组、泼尼松组、益气活血方组,镜下观察各组病理形态学表现及肺组织炎症积分的情况,并采用免疫组化法观察各组肺组织黏附分子ICAM-1、VCAM-1的表达,将结果进行统计学分析.[结果]益气活血方能减轻博莱霉素肺纤维化大鼠肺泡炎程度;益气活血方能下调黏附分子ICAM-1、VCAM-1在肺组织的表达.[结论]中药益气活血方能下调黏附分子ICAM-1、VCAM-1在肺组织的表达,这可能是其治疗防治肺纤维化的机制之-.     

基于Notch2/TGF-β1通路探讨针刀疗法对颈椎病兔颈后肌纤维化的影响

目的 基于Notch2/TGF-β1信号通路观察针刀疗法对颈型颈椎病家兔颈后肌纤维化的影响，探讨针刀治疗颈型颈椎病的分子机制。方法 12只新西兰兔适应性喂养1周，采用随机数字表法分为空白组、模型组和针刀组，每组4只。空白组予正常饲养，不做任何造模和干预；针刀组和模型组采用长期低头位法建立兔颈型颈椎病动物模型。模型建立后模型组不进行干预，针刀组基于弓弦网眼理论应用针刀松解颈后肌，每周1次，共干预4次。超声多模态评估3组家兔颈后肌形态学和弹力变化；HE和Masson染色观察颈后肌组织病理变化；qPCR检测颈后肌组织神经源性位点缺口同源蛋白2(Notch2)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原蛋白（Collagen I）mRNA表达水平；Western blot法检测颈后肌组织Notch2、TGF-β1、α-SMA、CollagenⅠ蛋白表达量。结果 超声结果显示，模型组颈后肌超声声像肌纤维排列紊乱，肌束膜、肌外膜轮廓模糊，弹性成像为高弹性图；针刀组颈后肌超声声像为肌纤维排列、肌束膜和肌外膜轮廓趋于正常，弹性成像为中弹性图。HE和Masson染色结...     

剪切波弹性成像技术在肌骨系统及中医领域的研究进展

超声弹性成像通过压力对组织的作用获取相关弹性信息进行成像，弥补了X射线、超声成像（US）、磁共振成像（MRI）、计算机断层扫描（CT）等传统医学成像模式不能直接提供组织弹性的不足，以其无创、简便、快捷等优点，被广泛应用于多个领域。该技术已在慢性肝病、甲状腺癌及乳腺癌的定量和鉴别上取得一定成果。超声波技术亦在肌肉骨骼系统检查中发挥着至关重要的作用，剪切波弹性成像（SWE）技术可实时监测肌肉等组织的变化，是具有广阔前景的肌肉骨骼系统诊断方法，成为目前医学弹性成像的一个研究热点。故本文将重点探讨SWE技术在肌肉、肌腱、神经等肌骨系统及中医领域的研究进展。     

基于质谱成像技术的独活鲜根中香豆素类成分的空间分布特征研究

目的 基质辅助激光解吸质谱成像技术是一种新型的分子成像和原位检测技术,具有免标记,高灵敏度和高通量等优势。采用质谱成像技术研究独活Angelica pubescens中香豆素类化合物的空间分布特征。方法 以蛇床子素和二氢欧山芹醇当归酸酯等为对照品分别在正、负2种离子检测模式下对基质2,5-二羟基苯甲酸、9-氨基吖啶和α-氰基-4-羟基肉桂酸进行筛选。根据质谱信号确定α-氰基-4-羟基肉桂酸为基质,并在正离子模式下进行成像分析。以收获期独活作为研究对象,将基质喷涂于25μm的独活根组织切片上进行质谱成像分析,研究了根和根皮中香豆素类化合物的空间分布信息及特征。结果 通过质谱成像分析,在独活根和根皮中分别鉴别出25和28个香豆素类成分。其中蛇床子素、东莨菪内酯、白花前胡醇、紫花前胡素、佛手酚和川白芷素6种成分主要分布在韧皮部分泌腔和分泌道等分泌组织中,二氢欧山芹醇乙酸酯、二氢欧山芹醇当归酸酯、白当归素和新比克白芷内酯4种主要分布在除分泌腔以外的木质部和韧皮部,其他成分在根中均匀分布,无明显特征。结论 建立的质谱成像方法能简便、快速和直接的对独活中的香豆素类活性成分进行原位分析,对观察植物组...     

医学成像技术在腧穴研究中的应用概况与展望

医学成像技术很好地满足了腧穴研究中普遍存在的客观化、可视化需要,极大地推动与深化了腧穴有关研究。文章从活体光学成像、X线计算机断层成像、超声成像、放射性核素成像、核磁共振成像、红外热成像六个方面入手,结合腧穴研究中的关键科学问题,对医学成像技术在腧穴研究中的应用情况进行了概述。文献回顾表明,医学成像技术在阐释腧穴作用及其相关配伍的中枢与外周机制、论证腧穴特异性及其机制、探讨腧穴主治的中枢与外周基础、深化腧穴解剖结构及安全性研究、促进腧穴定位研究等方面具有重要意义。针对有关研究存在的成像技术缺乏合理与深度运用、对腧穴的动态性与整体性有所忽略、细胞与分子水平成像相对缺乏的三方面不足,未来研究应进一步促进成像技术升级与合理运用,完善基于腧穴特性的科研设计及其标准化,借助分子影像学技术将腧穴基础研究推进至细胞分子水平。     

大黄?虫丸中基于血小板P2Y1及P2Y12受体作用的抗血小板聚集活性成分筛选＊

目的 结合分子对接和血小板聚集实验对大黄?虫丸中基于血小板P2Y1及P2Y12受体作用的抗血小板聚集活性成分进行初步筛选。方法 以P2Y1及P2Y12受体作为靶受体，分别与大黄?虫丸中9种主要成分（大黄酚、大黄素、大黄酸、大黄素甲醚、芦荟大黄素、黄芩苷、苦杏仁苷、芍药苷和甘草酸）进行分子对接，计算结合能并分析分子间作用力，与P2Y1及P2Y12受体自带活性配体进行比较。随后以腺苷-5''-二磷酸钠（ADP）为诱导剂，观察大黄?虫丸中9种主要成分在同一浓度下对血小板聚集的作用，以此初步验证分子对接的结果。结果 分子对接结果显示，甘草酸、黄芩苷和大黄酸与P2Y1受体结合能较低，结合位置与自带配体较相似；大黄酸、大黄酚、大黄素、大黄素甲醚和芦荟大黄素与P2Y12受体结合能相对较低，结合位置与自带配体相对较相似。ADP诱导的血小板聚集实验中，2 nmol·L^-1的大黄酸和芦荟大黄素与空白组相比具有显著的抑制作用，聚集率分别为41.3%和73.1%，抑制率为51.2%和13.5%。结论 结合分子对接和血小板聚集实验结果，推测大黄酸和芦荟大黄素可能是大黄?虫丸中基于P2Y1及P2Y12受体通路的抑制血小板聚集的主要活性成分。     

PET——未来诊断学的宠儿

正电子发射断层扫描技术 ,简称ＰＥＴ。ＰＥＴ是利用特征性的药物来反映疾病的分子生化改变。把需要研究的分子标记上特定的核素注入体内 ,再使用特殊的探测成像设备 ,就可以在体外无创伤、定量、动态地观察这些物质进入人体后的生理、生化变化 ,从分子水平洞察代谢物或药物在正常人或病人体内的活动。因此 ,ＰＥＴ技术也被称为“活体生化成像”。其特点 :①ＰＥＴ从分子水平诊断许多疾病 ,可以更早期、准确、定量、客观 ,特别适用于肿瘤、冠心病和脑部疾患 ;②ＰＥＴ能够在体外无创伤地“看到”生命的现象 ;③ＰＥＴ可揭示人脑的奥秘 ;④Ｐ…     

基于超分子“气析”理论构建中药制剂靶向性评价方法及实验验证

目的 构建基于超分子“气析”理论的中药制剂的靶向性评价方法，并对柴胡影响片仔癀的肝靶向性进行研究。方法 采用分子连接性指数分析主要归肝经的药材、片仔癀中的各成分“印迹模板”特征及肝靶向趋势；利用中药多成分“印迹模板”自主作用特征，结合靶区动力学和总量统计矩原理建立中药制剂的靶向性评价方法，并对片仔癀组、柴胡组、片仔癀+柴胡组、空白组4组作用的肝癌大鼠进行实验验证。结果 扣除主要归肝经药材分子连接性指数平均值后，片仔癀组与柴胡组的分子连接性指数相似度0.376 8，片仔癀+柴胡组与柴胡组的分子连接性指数相似度0.988 2，预测柴胡可增强片仔癀的肝靶向性。建立中药复方靶向性的评价体系，包括相对总量摄取率（RUE_T），相对总量浓度（RC_T），相对“印迹”趋势（RIT_T）及相对“印迹”方差（RIV_T）；各组织中肝脏的RUE_T和RC_T均为最大（RUE_T=1.88>1，RC_T=2.30>1），其他组织这2个参数则均<1，说明片仔癀结合柴胡后能增加其在肝脏的分布，肝靶向性增强；除血浆外，其他组织的RIT_T及RIV_T均在1.0附近波动，说明靶向修饰不改变片仔癀的“印迹”作用趋势，对成分种类也无明显影响。结论 在超分子“气析”理论指导下，可建立以分子连接性指数和总量统计矩参数表征中药制剂多成分“印迹”作用的靶向性评价参数体系，实现对中药制剂靶向性的评价，柴胡的加入可增加片仔癀的肝靶向性。     

激光共聚焦显微技术及其在抗肿瘤药物研究中的应用

激光共聚焦显微镜(1aser scanni con focal microscope，ISCM)是一项集激光技术、电子技术、光学设计及计算机于一体的高科技产品，由激光器、荧光显微镜、共聚焦探测系统和图像分析系统等几部分组成，是近代生物医学图像分析仪器最重要的发展之一，它是在荧光成像基础上加装激光扫描装置，利用计算机进行图像处理，使用紫外线或可见光激发荧光探针，从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像，在亚细胞水平上观察诸如Ca2 、pH值、膜电位等生理信号及细胞形态的变化，成为形态学、分子细胞生物学、神经科学、药理学、遗传学等领域中新一代强有力的工具。     

基于明确靶标及分子对接验证技术探究五味子醇甲对阿尔茨海默病的作用机制

目的：明确五味子醇甲对阿尔茨海默病的作用机制。方法：选取24只大鼠按体质量随机分为空白组、模型组和给药组，每组8只。采用对大鼠海马CA1区注射Aβ_1-40的方法制备阿尔茨海默病大鼠模型，造模1 d后灌胃给予30 mg/kg的五味子醇甲溶液，造模7 d后，进行Morris水迷宫行为学测试。在此基础上，对与阿尔茨海默病明确相关的β-分泌酶、雌激素受体β(ERβ)、谷氨酸受体1(NMDAR1)等蛋白进行验证，以蛋白表达量及药物成分与靶标作用的分子对接能进行评价，并通过分子对接技术计算五味子醇甲与各蛋白的对接能，达到理论验证的目的。结果：与空白组比较，模型组大鼠海马组织匀浆中β-分泌酶的活性含量明显增加(P<0.01),大鼠海马组织中ERβ表达显著降低(P<0.01),P-P38/P38表达明显升高(P<0.01),BACE1表达显著升高(P<0.01),NMDAR1表达明显降低(P<0.01);与模型组比较，给药组大鼠海马组织匀浆中β-分泌酶的活性含量明显减少(P<0.01),给药组大鼠海马组织中ERβ表达显著升高(P<0.01...     

内镜窄带成像技术在早期喉癌及 癌前病变鉴别诊断中的价值

〔摘 要〕 目的：探讨内镜窄带成像技术在早期喉癌及癌前病变鉴别诊断中的临床价值。方法：选取 2019 年 1 月至 2020 年 12 月在梅州市人民医院耳鼻咽喉科就诊、经电子鼻咽喉镜筛查发现喉部肿物怀疑恶性病变的 96 例患者为研究对象，分别 应用普通白光电子喉镜、内镜窄带成像技术及病理活检进行检查，记录两种检测模式的良性、可疑恶性、恶性病变病例 数；并以病理活检结果作为金标准，比较两种检测模式的诊断效能。结果：96 例患者的病理活检结果显示，恶性病变率为 30.21 %（29/96），非恶性病变率为 69.79 %（67/96）；白光模式组的恶性病变诊断率为 22.92 %（22/96），非恶性病变诊 断率为 77.08 %（74/96）；内镜窄带成像模式组的恶性病变诊断率为 28.13 %（27/96），非恶性病变诊断率为 71.87 %（69/96）。 内镜窄带成像模式组的诊断灵敏度、特异度、准确度均比白光模式组高，差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。结论：内镜 窄带成像技术在早期喉癌及癌前病变鉴别诊断中的诊断效能较高，有利于及早发现病变，为后续治疗提供指导。     

大承气汤通过内源性抗菌肽mCRAMP对脓毒症小鼠肠屏障的保护作用及机制

目的 采用分子对接和体内动物实验探讨大承气汤对脓毒症小鼠肠屏障的保护作用及分子机制。方法 采用文本挖掘方法筛选大承气汤的活性成分，利用AutoDock Tools和Discovery Studio分子对接软件研究其关键活性成分与脓毒症主要作用靶点紧密连接蛋白-1（Claudin-1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、抗菌肽（mCRAMP）、Toll样受体4（TLR4）和髓样分化因子88（MyD88）的相互作用。动物实验采用C57BL/6小鼠50只，每组10只，随机分成5组，分别为假手术组、模型组、大承气汤低、高剂量（4、8 g?kg^-1）组和乌司他丁（50 000 U?kg^-1）组。造模前、手术当天和术后，各组给予相应的药物进行干预。除假手术组外，其余各组小鼠均采用盲肠结扎穿刺法（CLP）制备脓毒症模型。采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测小鼠血清D-乳酸水平，评估肠黏膜通透性；采用苏木素-伊红（HE）染色法观察回肠组织病理变化，评估肠黏膜损伤程度及炎症浸润；采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测小鼠回肠组织Claudin-1和Occludin蛋白表达水平，评估肠机械屏障功能；采用ELISA检测小鼠回肠组织TNF-α和IL-6水平，评估肠道炎症水平；采用免疫组化法（IHC）观察回肠组织mCRAMP蛋白表达；采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测小鼠回肠组织内mCRAMP、TLR4和MyD88的基因表达水平，探讨大承气汤对脓毒症小鼠肠屏障的保护机制。结果 分子对接结果表明，采用文本挖掘方法所筛选出的10个大承气汤活性成分中多数与脓毒症靶点具有结合活性，主要通过范德华力、氢键和其他共轭体系相连。动物实验结果表明，与模型组比较，大承气汤低、高剂量组小鼠血清D-乳酸水平显著降低（P<0.01）；回肠组织损伤、黏膜水肿减少，小肠绒毛完整性较好，炎症细胞浸润减少；回肠组织Claudin-1蛋白表达水平显著升高（P<0.01）；回肠组织IL-6水平显著降低（P<0.01）；回肠组织mCRAMP蛋白和mRNA表达水平显著升高（P<0.01）；回肠组织TLR4和MyD88 mRNA表达水平显著降低（P<0.01）；大承气汤高剂量组小鼠回肠组织TNF-α水平显著降低（P<0.01）和Occludin蛋白表达水平显著升高（P<0.01），大承气汤低剂量组小鼠回肠组织Occludin蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。结论 大承气汤对脓毒症小鼠肠屏障具有保护作用，其可减轻肠组织炎症水平，修复肠黏膜损伤，提高肠紧密连接蛋白水平，降低肠黏膜通透性，作用机制可能与内源性抗菌肽mCRAMP蛋白和基因表达的增加及其下游TLR4/MyD88炎症通路基因的下调有关。     

双光子成像在中医药领域的应用

双光子显微镜作为现代最重要的光学显微镜技术，具有3D成像、在体成像、光漂白和光毒性低等特点。该技术已被运用到与中医药相关的细胞成像、组织成像和在体成像研究中，为中医药治疗相关疾病提供更科学和直观的理论依据。本文对现有的双光子显微镜技术在中医药领域的应用研究进行概述，以期为中医药研究提供新方向。     

二陈汤加味通过Jagged1/Notch1/Hes1信号通路对慢性阻塞性肺疾病的抗炎机制

目的：观测二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠肺组织中Jagged1/Notch1/Hes1信号通路中关键分子表达的影响,探讨二陈汤加味通过Jagged1/Notch1/Hes1信号通路对COPD抗炎的作用及分子机制。方法：将60只SD大鼠随机分为6组,分别为正常组、模型组、二陈汤加味低、中、高剂量（5、10、20·kg-1）和γ-分泌酶抑制剂（DAPT）组,每组10只。以烟熏联合气管滴注脂多糖（LPS）的方法制备COPD大鼠模型。二陈汤加味各干预组灌胃（ig）给药;DAPT组ig DAPT(0.02 g·kg-1);正常组及模型组ig等体积生理盐水。采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定各组血清中Notch1、可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)、白细胞活化黏附分子（ALCAM）和可溶性血管黏附分子-1(sVCAM-1)的含量;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肺组织中Jagged1、Notch1和Hes1 mRNA表达,免疫组织化学（IHC）法检测大鼠肺组织中Jagged1、Notch1、Notch1胞内段（NICD1）和Hes1蛋白表达。...     

动态光散射法研究中药注射剂的分子形态

应用动态光散射法研究了17种中药注射剂的分子形态。结果表明,8种中药注射剂分子聚集体粒径主要分布在15nm左右;另外9种中药注射剂分子粒径小于1nm,以单分子形式存在,不存在分子聚集现象。