补髓生血颗粒对于慢性再生障碍性贫血患者骨髓单个核细胞粘附分子CD11b水平影响的研究

目的:探讨补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血(简称慢性再障,Chronic Aplastic Anemia CAA)患者的整合素家族成员之一CD11b表达水平的影响;方法:将65例慢性再障患者随机分为补髓生血颗粒组(试验组)和再障生血片组(对照组),采用流式细胞术(FCM)检测试验组和对照组慢性再障患者治疗前后骨髓单个核细胞相关整合素家族粘附分子CD11b的抗原表达水平并进行比较分析,并与10例正常对照组进行比较;结果:CAA患者骨髓单个核细胞粘附分子CD11b处于低表达状态,治疗后表达水平升高,且补髓生血颗粒对CD11b表达的调整程度优于再障生血片组,疗后CD11b表达阳虚型与阴虚型有显著差异;结论:CAA患者粘附分子CD11b表达异常,可能与再障的发生密切相关.补髓生血颗粒能通过改善再障粘附分子的表达水平来改善CAA造血功能.     

补肾生血法对慢性再生障碍性贫血患者骨髓单个核细胞粘附分子VLA-5/CD49e表达水平的影响

目的:探讨补肾生血法对慢性再生障碍性贫血(简称慢性再障,Chronic Aplastic Anemia CAA)患者的粘附分子VLA-5/CD_(49e)表达水平的影响。方法:将45例慢性再障患者随机分为补髓生血颗粒组(实验组)和再障生血片组(对照组),采用流式细胞术(FCM)检测实验组和对照组慢性再障患者治疗前后骨髓单个核细胞相关整合素VLA亚家族粘附分子VLA-5/CD_(49e)的抗原表达水平并进行比较分析。结果:CAA患者骨髓单个核细胞粘附分子VLA-5/CD_(49e)处于低表达状态,疗后实验组和对照组表达水平均有所恢复,但组间差异显著,组内治疗前后差异显著,但与正常组比较仍有显著性差异,疗后VLA-5/ CD_(49e)表达阳虚与阴虚无显著差异。结论:慢性再障患者骨髓单个核细胞粘附分子VLA-5/CD_(49e)表达水平异常,它有可能是CAA造血微环境粘附造血异常调控的因素之一。     

补肾生血法对慢性再障患者表达整合素αLβ2/CD 11a水平影响的研究

目的:探讨补肾生血法对慢性再生障碍性贫血(简称慢性再障,CAA)患者粘附分子αLβ2/CD 11a表达水平的影响.方法:将60例慢性再障患者随机分为实验组和对照组,分别给予补髓生血颗粒和康力龙,采用RT-PCR方法检测αLβ2/CD 11a和的mRNA表达,流式细胞术(FCM)检测骨髓造血干祖细胞αLβ2/CD 11a的表达水平.结果:CAA患者造血细胞αLβ2/CD 11a表达异常,补髓生血颗粒剂对造血细胞αLβ2/CD 11a的表达水平有调节作用,与康力龙组比较无显著差异.结论:CAA可能存在造血干祖细胞与骨髓微环境功能缺陷,骨髓造血干祖细胞粘附分子水平异常导致其与骨髓基质细胞间的粘附功能降低,从而影响造血,所以调节骨髓造血千祖细胞粘附分子的表达,改善骨髓造血干祖细胞与骨髓基质细胞/细胞外基质间的粘附功能从而促进骨髓造血功能恢复可能是补髓生血颗粒治疗CAA的作用机理之一.     

补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者骨髓单个核细胞粘附分子VLA-6/CD49f水平影响的研究

目的：探讨补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血（简称慢性再障,ChronicAplasticAnemiaCAA）患者的整合素VLA亚家族粘附分子VLA-6/CD49f表达水平的影响。方法：将45例慢性再障患者随机分为补髓生血颗粒组（试验组）和再障生血片组（对照组）,采用流式细胞术（FCM）检测试验组和对照组慢性再障患者治疗前后骨髓单个核细胞相关整合素VLA亚家族粘附分子VLA-6/CD49f的抗原表达水平并进行比较分析,并与10例正常人进行比较。结果：CAA患者骨髓单个核细胞粘附分子VLA-6/CD49f处于低表达状态,疗后表达水平升高,且补髓生血颗粒对VLA-6/CD49f表达的调整程度优于再障生血片组,且肾阳虚与肾阴虚患者疗后VLA-5/CD49f表达有显著差异。结论：慢性再障患者骨髓单个核细胞粘附分子VLA-6/CD49f表达水平异常,它可能参与了CAA的造血调控,补髓生血颗粒可以通过调节骨髓细胞粘附分子表达水平来改善CAA的骨髓造血功能,是治疗CAA的有效药物。     

补髓生血颗粒剂对慢性再生障碍性贫血患者骨髓造血祖细胞c-kit、CxCR4受体表达的影响

目的 :探讨补髓生血颗粒剂对慢性再生障碍性贫血 (CAA)患者骨髓造血祖细胞c -kit、CXCR4受体表达水平的影响。方法 :采用免疫荧光法及流式细胞技术分别对使用该颗粒剂治疗前后的CAA患者骨髓造血祖细胞c-kit、CXCR4 受体表达水平进行检测 ,并与再障生血片对照组及正常组作比较研究。结果 :补髓生血颗粒剂组临床疗效与再障生血片组疗效存在显著差异(P <0 .0 5 ) ;两组疗前c -kit受体表达高于正常组 ,治疗后均表达下调 ;补髓生血颗粒剂组治疗后CXCR4 受体表达与再障生血片组存显著性差异(P <0 .0 5 )。结论 :慢性再障骨髓造血衰竭并非c -kit受体低表达所致 ;补髓生血颗粒剂在临床疗效与CXCR4 受体表达上调作用上优于再障生血片组 ,提示补髓生血颗粒剂通过提高造血祖细胞增殖分化与黏附归巢能力而刺激造血     

补髓生血颗粒对慢性再障患者粘附分子VLA-4mRNA表达的影响

造血干/祖细胞及骨髓造血微环境中粘附分子表达异常,可能参与了再障骨髓造血功能衰竭的病理过程。研究采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测慢性再障患者治疗前后骨髓单个核细胞VLA-4的mRNA表达水平。结果表明,慢性再障患者VLA-4的mRNA蛋白均呈低表达状态,补髓生血颗粒能提高其表达。结论提示,慢性再障患者存在粘附功能异常,补髓生血颗粒可能通过调节骨髓基质细胞粘附分子的表达来改善慢性再障造血细胞与造血微环境的粘附功能状态。     

补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者骨髓造血细胞黏附作用影响的研究

目的:探讨补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血(chronic aplastic anemia,CAA)患者骨髓造血细胞相关黏附分子表达水平的影响.方法:采用免疫荧光法及流式细胞技术分别对使用该颗粒治疗前后的CAA患者骨髓造血干(祖)细胞受体c-kit、CXCR4、骨髓基质细胞的淋巴细胞归巢受体(HCAM/CD44)、细胞间黏附分子(ICAM-1/CD54)表达进行检测,并与再障生血片对照组(简称对照组)及正常组做比较研究.结果:两组患者治疗前c-kit/CD117表达明显高于正常组,而CXCR4、HCAM/CD44、ICAM-1/CD54水平明显低于正常组,治疗后两组患者CXCR4、HCAM/CD44、ICAM-1/CD54表达均有所升高,并且补髓生血颗粒实验组(简称实验组)CXCR4水平优于对照组,治疗后c-kit/CD117与正常组比较无显著差异,亦优于对照组.结论:CAA患者骨髓造血干(祖)细胞受体c-kit、CXCR4、骨髓基质细胞HCAM/CD44、ICAM-1/CD54表达异常,补髓生血颗粒可能是通过提高CXCR4、HCAM/CD44、ICAM-1/CD54的表达以及降低c-kit/CD117的表达而促进骨髓造血的.     

补髓生血颗粒对CAA患者骨髓单个核细胞HGF受体mRNA表达水平的影响

目的 通过观察慢性再生障碍性贫血(CAA)患者治疗前后骨髓单个核细胞HGF mRNA含量的变化,探讨补髓生血颗粒治疗CAA的疗效作用机理.方法 60例CAA患者随机分为治疗组和对照组,治疗组给予补髓生血颗粒,对照组给予再障生血片,采用逆转录-聚合酶链法( RT - PCR)检测CAA患者治疗前后骨髓单个核细胞HGF受体mRNA表达水平的变化.结果 两组基本治愈、缓解率分别为73.33％和57.14％,明显高于对照组57.14％,(P＜0.05).各组治疗前CAA患者骨髓单个核细胞HGF受体mRNA表达水平明显升高,高于正常对照组,经治疗后各组均有不同程度下降,并且以补髓生血颗粒组表达水平的下调程度优于再障生血片组(P＜0.05).结论 CAA患者骨髓单个核细胞HGF mRNA的表达存在异常,补髓生血颗粒剂可能通过调节骨髓造血细胞HGF受体mRNA的表达来改善CAA患者的骨髓造血功能,促进骨髓造血功能恢复.     

补肾生血法对慢性再障患者表达α5β1／CD49e水平影响的研究

目的:探讨补肾生血法对慢性再生障碍性贫血(简称慢性再障,CAA)患者α5β1/CD49e表达水平的影响.方法:将60例慢性再障患者随机分为实验组和对照组,分别给予补髓生血颗粒和康力龙,采用逆转录,聚合酶链反应(RT-PCR)检测α5β1/CD49e的mRr NA表达,流式细胞术(FcM)检测骨髓造血干/祖细胞α5β1/CD49e的表达水平.结果:CAA骨髓单个核细胞整合素α5β1/CD49e mRNA及骨髓造血干/祖细胞α5β1/CD49e呈低表达状态,补肾中药补髓生血颗粒能促进其表达,与有效药物康力龙比较无显著差异(P>0.05).结论:CAA可能存在骨髓微环境功能缺陷,调节骨髓造血干/祖细胞粘附分子的表达,改善骨髓造血干/祖细胞与骨髓基质细胞/细胞外基质问的粘附功能,从而促进骨髓造血功能恢复可能是补髓生血颗粒治疗CAA的作用理之一.     

补髓生血颗粒对慢性再障患者细胞凋亡及Bax基因的影响

目的:探讨补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者骨髓造血细胞过度凋亡和Bax基因表达水平的影响及其与中医辨证分型的关系.方法:应用原位末端标记法及原位杂交法检测慢性再障患者应用补髓生血颗粒治疗前后骨髓造血细胞凋亡阳性指数及Bax基因表达阳性指数.结果显示:治疗后慢性再障患者骨髓造血细胞凋亡阳性指数及Bax基因表达水平均下降,且阳虚型细胞凋亡阳性指数接近于正常,阴虚型与正常组比仍有较显著差异;而治疗后两型Bax水平与正常对照组比仍有较大差异.结论:补髓生血颗粒对慢性再障患者骨髓造血细胞过度凋亡有抑制作用,下调Bax基因表达水平仅是其抑制细胞凋亡的机制之一.     

补髓生血颗粒对慢性再障患者骨髓单个核细胞MEK表达的影响

目的：探讨补髓生血颗粒对慢性再障患者（CAA）骨髓单个核细胞中丝裂原活化蛋白激酶（MEK）表达的影响及其作用机制。方法：采用蛋白质印迹（Western-blot）方法检测CAA患者、正常人骨髓基质细胞MEK表达水平。结果：CAA患者骨髓单个核细胞的MEK表达水平均低于正常组（P〈0.05）,经补髓生血颗粒治疗后,MEK表达水平有所上升,与治疗前相比具有显著性差异（P〈0.05）。结论：CAA患者骨髓基质细胞MEK呈低水平表达,它有可能参与了CAA的发病机制过程;中药补髓生血颗粒可能是通过调节MEK的表达水平而促进MEK抗凋亡作用,从而影响骨髓造血信号转导调控,促进骨髓造血功能。     

补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者骨髓NF-κΒ/p65表达的影响

目的：观察补髓生血颗粒对CAA患者骨髓单个核细胞中NF-κΒ磷酸化表达水平的影响,探讨补髓生血颗粒治疗CAA的作用机制。方法：40例CAA患者给予补髓生血颗粒治疗6个月,采用蛋白质印迹方法（Western-blot）观察CAA患者骨髓单个核细胞中NF-κΒ/p65的表达水平。结果：治疗前CAA患者骨髓单个核细胞NF-κΒ/P65表达水平低于正常对照组（P〈0.05）,经补髓生血颗粒治疗后,NF-κΒ/P65表达有所上升,与治疗前相比具有显著性差异（P〈0.05）。结论：CAA患者骨髓单个核细胞中的NF-κΒ/p65呈低水平表达,NF-κΒ/p65的异常表达可能参与CAA的发病机制过程,从而引起骨髓造血信号转导的异常。补髓生血颗粒可能通过调节NF-κΒ/p65的表达来改善CAA骨髓造血微环境。     

补髓生血颗粒对慢性再障患者骨髓单个核细胞内Ca~(2+)水平及不同血液疾病间差别的影响

目的:通过观察慢性再障患者骨髓单个核细胞内钙离子浓度的变化,探讨补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血(CAA)的可能治疗机制。观察不同血液疾病骨BMMC内Ca2+浓度的变化,以期为血液疾病的诊断和治疗提供思路。方法:提取CAA患者BMMC,使用fluo3 AM进行荧光染色,采用流式细胞仪检测细胞内Ca2+浓度。同时提取慢性再障、骨髓增生异常综合征、特发性血小板减少性紫癜、缺铁性贫血患者及正常志愿者BMMC,进行细胞内Ca2+浓度的检测与对比。结果:CAA患者BMMC内Ca2+浓度明显高于正常组。经补髓生血颗粒治疗后,各组患者细胞内Ca2+浓度均出现下降,治疗组优于对照组,但仍高于正常组。MDS、CAA患者Ca2+浓度高于其他组;ITP、IDA组与正常组无明显差异。结论:CAA患者BMMC细胞内Ca2+浓度上升,是CAA患者疾病情况的重要标志。补髓生血颗粒能调节BMMC内Ca2+的释放,可能是其治疗CAA的作用机制之一。MDS、CAA、CITP、IDA不同血液疾病之间钙离子浓度存在明显差异,可能与疾病恶性程度及发病机理相关。     

大黄对糖尿病大鼠肾脏ICAM-1及VCAM-1表达的影响

目的 探讨大黄对糖尿病大鼠肾脏细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecular-1,ICAM-1)及血管细胞间黏附分了-1(Vascular Cell Adhesion Molecule-1,VCAM-1)表达的影响.方法 制备糖尿病大鼠模型,成模后,随机抽取24只分为模型组、大黄组各12只.大黄组给予人黄煎剂10 g(生药·kg体重-1)灌胃,正常组和模型组给予同等剂量纯净水灌胃.8周后,取肾脏制备病理切片,SP法免疫组化染色,观察ICAM-1、VCAM-1的表达.结果 大黄组、模型组ICAM -1及VCAM-1表达明显高正常组(P<0.05),大黄组肾脏ICAM-1、VCAM-1表达弱于模型组(P<0.05).结论 大黄能抑制糖尿病大鼠肾脏ICAM-1、VCAM-1表达(P<0.05),具有保护糖尿病大鼠肾脏的作用.     

补髓生血颗粒治疗慢性再生障碍性贫血患者67例

目的:观察补髓生血颗粒治疗慢性再生障碍性贫血(CAA)患者的临床疗效及骨髓单个核细胞(BMNC)中Ras同源基因家族成员(Rho)-鸟苷酸三磷酸酶(GTP)相关酶类如细胞分裂周期蛋白(CDC42),Ras相关的C3肉毒杆菌毒素底物(Rac)以及Rho家族成员A(Rho A)的蛋白表达。方法:将134例CAA患者按随机数字表法分为试验组67例和对照组67例,另设20名健康志愿者作为正常对照组。试验组采用补髓生血颗粒治疗,对照组采用再造生血片治疗,两组疗程均为6个月。观察治疗前后临床疗效、中医症状积分、中医证候疗效、外周血、骨髓增生程度变化,采用Western-blot方法检测CAA患者治疗前后BMNC中Rho-GTP相关酶类(CDC42,Rho A,Rac)的蛋白表达。结果:试验组临床疗效及中医证候疗效均优于对照组(均P0.05);经治疗后,两组中医症状平均积分及外周血均明显改善(P0.05),试验组中医症状平均积分及外周血白细胞计数(WBC)及血红蛋白含量(HGB)的改善优于对照组(均P0.05),两组血小板计数(PLT)改善程度无显著性差异;两组骨髓象改善比较无显著性差异;两组治疗前CDC42,Rho A,Rac的相对蛋白含量表达均低于正常对照组(均P0.05),治疗后两组CDC42,Rho A和试验组中Rac的相对蛋白含量表达明显升高(均P0.05),而对照组中Rac的表达较治疗前无明显变化,两组治疗后CDC42,Rho A,Rac仍低于正常对照组(均P0.05),且试验组CDC42及Rac的表达改善优于对照组。结论:补髓生血颗粒治疗CAA疗效显著,且一定程度上能改善CAA患者的骨髓造血功能。CAA患者BMNC中Rho A,CDC42及Rac的蛋白均表达异常,提示Rho GTP酶异常表达可能与CAA发病相关,补髓生血颗粒可能通过调节Rho-GTP相关酶类CDC42,Rho A,Rac的表达来改善造血干细胞与造血微环境调节进而改善其骨髓造血功能。     

生血增白汤对骨髓移植后小鼠造血重建中黏附分子表达水平的影响

目的探讨生血增白汤对骨髓移植后小鼠骨髓中细胞间黏附分子-1（ICAM-1）表达水平的影响及其促进骨髓造血重建的机制。方法将实验动物随机分为5组：正常组、对照组、G-CSF组、生血增白汤组、G-CSF＋生血增白汤组,建立小鼠骨髓移植模型,生血增白汤组及G-CSF＋生血增白汤组胃饲生血增白汤浓缩煎剂。骨髓移植后第9天、第14天、第24天,采用免疫组化方法检测ICAM-1表达水平,进行外周血细胞和骨髓单核细胞计数,并做骨髓组织学观察。结果骨髓移植后第9天、第14天、第24天,生血增白汤组ICAM-1的表达水平、外周血细胞、血红蛋白、骨髓有核细胞计数及骨髓细胞增生程度均高于其他各组（P〈0.05或P〈0.01）。结论生血增白汤能促进骨髓移植后骨髓中ICAM-1的表达,可能是生血增白汤重建造血的机制之一。     

补髓生血胶囊治疗慢性再生障碍性贫血的临床观察

探讨补髓生血胶囊治疗慢性再生障碍性贫血的理论依据。采用造血细胞培养和流式细胞仪技术，对口服补髓生血胶囊的３５例患者治疗４个月前后的骨髓单个核细胞进行对比观察。１；本品具有恢复造血干／祖细胞膜ＩＬ－３，ＩＬ－６，ＩＬ－１１受体的作用；２．补髓生血胶囊的疗效优于西药；３．治疗组中肾阳虚与肾阴虚型治疗前的造血干／祖细胞在ＩＬ－３，ＩＬ－６，ＩＬ－１１刺激下，其细胞集落产生率和ＣＤ＾＋３４细胞率有显著性差     

补髓生血冲剂对慢性再障IL-6 IL-8水平的影响

应用补髓生血冲剂治疗慢性再生障碍性贫血 (简称CAA)患者 ,观察其骨髓造血细胞IL 6及IL 8水平的变化。采用原位杂交法检测治疗前后阳性细胞指数变化 ,并与正常组相比较。结果 ,治疗组疗前IL 6、IL 8阳性细胞指数明显高于正常组 ,疗后较疗前指数明显降低 ,与正常组相比差异不显著。IL 6及IL 8水平异常与CAA发病有关。补髓生血冲剂对这两种细胞因子有调节作用     

补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者血清酪氨酸激酶-3配体和纤维连接蛋白的影响

目的 观察补髓生血颗粒治疗慢性再生障碍性贫血(CAA)的临床疗效及其对血清FMS样酪氨酸激酶-3配体(FMS-like tyrosine kinase 3 ligand, FL)、纤维连接蛋白（fibronectin,Fn）表达水平的影响。 方法 将68例CAA患者分为两组,试验组35例应用补髓生血颗粒治疗,对照组33例使用再障生血片治疗,两组均治疗6个月。采用酶联免疫法检测患者外周血清FL和Fn治疗前后的表达水平。 结果 试验组和对照组治疗CAA的总有效率分别为74.3%(26/35例)和48.5%（16/33例）,两组比较差异有统计学意义 (P<0.05);且试验组阳虚型患者疗效〔93.8%（15/16例）〕优于肾阴虚型患者〔57.9%（11/19例）〕(P<0.05)。CAA患者外周血清FL和Fn均呈高表达状态,经治疗后两者均有一定程度下降,且试验组两项指标表达的调整程度皆优于对照组（P<0.05）,而肾阳虚型患者血清FL和Fn表达水平较肾阴虚型患者更易得到纠正。 结论 补髓生血颗粒在临床疗效及改善CAA相关黏附分子FL和Fn表达水平均优于再障生血片,CAA阳虚型患者疗效优于阴虚型患者。