桂枝茯苓丸抗卵巢癌作用机制的网络药理学研究

目的基于网络药理学方法探讨桂枝茯苓丸抗卵巢癌的作用机制。方法通过文献检索获取桂枝茯苓丸中的主要活性成分;利用TCMSP、SwissTarget Prediction数据平台筛选桂枝茯苓丸靶基因集合,并通过STITCH数据库构建桂枝茯苓丸活性成分-靶点关联网络;利用GeneCards、DisGeNET、OpenTargets、STRING数据库构建"桂枝茯苓丸靶基因-卵巢癌基因"互作网络,预测和筛选桂枝茯苓丸抗卵巢癌靶基因;利用ClueGO软件对靶基因进行GO(Gene Ontology)功能分析,通过DAVID v6.8平台对关键靶点进行KEGG通路分析。结果选择了桂枝茯苓丸中的肉桂酸、桂皮醛、苦杏仁苷、丹皮酚、芍药苷、茯苓酸等9种活性成分作为研究对象;共筛选出TP53、CASP3、BAX、BCL2、PTEN、HSP90AB1、TNF等21个桂枝茯苓丸抗卵巢癌靶基因;桂枝茯苓丸可能通过调控TNF信号通路、p53信号通路、PI3K-Akt信号通路、mTOR信号通路、HIF-1信号通路、VEGFR信号通路及雌性激素通路等发挥作用。结论桂枝茯苓丸可能通过调控多种抗卵巢癌基因及与肿瘤增殖、凋亡、肿瘤血管相关的多条信号通路发挥抗卵巢癌作用,具有"弱抑制-多靶点"抗卵巢癌药理学效应。     

莪术醇诱导人卵巢癌SKOV3细胞凋亡及对PI3K/Akt信号通路相关蛋白的影响

目的观察莪术醇对人卵巢癌SKOV3细胞的凋亡作用及对PI3激酶(PI3K)/丝氨酸/苏氨酸激酶(Akt信号通路相关蛋白的影响。方法采用MTT法检测不同浓度莪术醇以及临床常用抗肿瘤药物顺铂对人卵巢癌SKOV3细胞的生长抑制作用;流式细胞仪检测细胞凋亡率及对细胞周期的影响;Western blotting法检测莪术醇、顺铂及其两者联合诱导人卵巢癌SKOV3细胞凋亡过程中PI3K/Akt信号通路蛋白(PI3K、p-PI3K、Akt、pAkt)的表达。结果莪术醇对人卵巢癌SKOV3细胞具有生殖抑制作用,其生殖抑制作用呈剂量-时间正效应关系;莪术醇可以促进人卵巢癌SKOV3细胞的凋亡,细胞凋亡率随着莪术醇浓度增大而增强;不同质量浓度莪术醇处理SKOV3细胞48 h后,细胞周期分布发生明显改变,药物的作用将肿瘤细胞的生长阻止在G0/G1和S期;莪术醇、顺铂及其两者联合在诱导人卵巢癌SKOV3细胞凋亡时,下调了PI3K/Akt信号通路中p-PI3K、p-Akt蛋白的表达水平,且莪术醇和顺铂联合应用时具有协同效应,联合组p-PI3K、p-Akt蛋白表达下调最为明显。结论莪术醇可能通过抑制PI3K/Akt信号通路的激活来阻滞人卵巢癌SKOV3细胞周期,诱导细胞凋亡,进而阻止肿瘤细胞的生长或诱导其分化。     

正源方抗肝纤维化的网络药理学预测分析及实验验证

目的:基于网络药理学、分子对接技术预测正源方抗肝纤维化的作用机制,并进行细胞水平实验验证。方法:使用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)及文献检索获得正源方活性成分,通过PubChem、SwissTargetPrediction、Similarity Ensemble Approach数据库筛选活性成分潜在靶点,通过OMIM、GeneCards疾病数据库收集肝纤维化的相关靶点,运用Venny平台获得正源方与肝纤维化交集靶点,利用String数据库建立蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,并通过Cytoscape-CytoNCA拓扑分析筛选核心靶点,利用String数据库进行基因本体功能注释(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,利用Cytoscape软件构建药物-成分-靶点-通路网络,使用AutoDock Vina软件模拟关键候选活性成分与核心基因的结合活性。建立人转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肝星状细胞LX2活化模型,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,蛋白免疫印迹法(WB)检测磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)信号通路相关蛋白表达。结果:网络药理学筛选得到正源方活性成分145个及相关靶点1109个,肝纤维化靶点1573个,正源方抗肝纤维化潜在作用靶点415个,拓扑分析得关键靶点61个;PPI网络分析核心靶点为Akt1、血管内皮生长因子A(VEGFA)、白细胞介素-1β(IL-1β)等,GO富集分析得到1753个条目,其功能主要与细胞凋亡、细胞增殖、酶结合等有关;KEGG富集分析得到174个条目,主要涉及癌症通路、PI3K-Akt通路、细胞凋亡通路等;分子对接显示,槲皮素、木犀草素、熊果酸等与Akt1、VEGFA、Jun原癌基因(JUN)等靶点结合活性较强;细胞实验结果表明,不同剂量的正源方给药后,可以显著抑制TGF-β1诱导的LX2细胞的活化,降低磷酸化PI3K(p-PI3K)/PI3K、磷酸化Akt(p-Akt)/Akt蛋白表达,且具有质量浓度依赖性。结论:正源方可能通过多靶点、多通路发挥抗肝纤维化作用,其机制可能与抑制肝星状细胞活化、调控PI3K-Akt信号通路有关。     

凤香洗液中“丁香-苦参”配伍干预子宫内膜癌的活性成分及作用机制预测分析

目的:基于网络药理学研究凤香洗液中“丁香-苦参”配伍治疗子宫内膜癌(EC)的作用机制。方法:使用中药系统药理学分析平台(TCMSP)对丁香-苦参的活性成分进行检索和筛选,通过Gene Cards数据库、OMIM数据库筛选EC相关靶点,构建活性成分-靶点网络图。将筛选到的靶点利用String数据库构建蛋白互作(PPI)网络,并进行GO功能注释和KEGG通路富集分析,最后构建活性成分-靶点-信号通路网络图。结果:共筛选到31个潜在活性分子,690个中药成分靶点,1627个EC相关靶点,药物-疾病的共同靶点146个,共同靶点以多种方式参与RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控、凋亡过程的负调控等595个生物过程,并参与癌症通路、PI3K/Akt信号通路、乙肝通路、癌症蛋白聚糖信号通路等115条信号通路。结论:丁香-苦参通过作用于PTGS2、Akt1、PTGS1、RELA、PRSS1、MAPK1等靶点调控癌症、PI3K/Akt、乙肝、癌症蛋白聚糖等信号通路,从而发挥干预EC的作用。     

基于网络药理学的桂枝茯苓丸治疗子宫腺肌病分子作用机制研究

目的:探索桂枝茯苓丸治疗子宫腺肌病的潜在通路与物质基础。方法:通过数据库联用与文献挖掘检索桂枝茯苓丸主要活性成分及其作用靶点、子宫腺肌病相关靶蛋白,使用Cytoscape 3.2.1软件绘制蛋白质相互作用网络图,结合网络特征分析网络关键靶点,并将其投射到KEGG与GO数据库中进行通路富集分析。结果:共得到90个活性成分、165个成分作用靶点、78个疾病靶蛋白。经网络药理学分析,得到MAPK与PI_3K/AKT两条潜在通路,丹皮酚、芍药苷等16个潜在物质基础。结论:桂枝茯苓丸中的丹皮酚、芍药苷等有效成分可能通过MAPK通路与PI_3K/AKT通路抑制异位内膜组织生长、侵袭与黏附,达到治疗子宫腺肌病的目的。     

桂枝茯苓丸“异病同治”甲状腺结节、乳腺结节及子宫肌瘤网络药理学机制研究

目的采用网络药理学及分子对接方法探究桂枝茯苓丸治疗足厥阴肝经疾病甲状腺结节、乳腺结节及子宫肌瘤的作用机制。方法通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)和SwissTargetPrediction数据库检索桂枝茯苓丸组方药物的化学成分并获取靶点,通过GeneCards、OMIM数据库查询疾病相关靶点,获得二者交集靶点基因。采用Cytoscape3.7.2软件构建药物-成分-疾病-靶点网络和蛋白相互作用网络,利用R语言对靶点进行GO富集分析和KEGG通路富集分析,运用PyMOL软件进行分子对接。结果共筛选出桂枝茯苓丸活性成分116个,对应有效靶点1109个,与3种疾病的交集靶点79个。对交集靶点富集分析发现,桂枝茯苓丸治疗甲状腺结节、乳腺结节及子宫肌瘤的共同关键通路为AGE-RAGE信号通路、MAPK信号通路及PI3K-Akt信号通路。根据KEGG通路富集分析结果确定7个核心靶点(TP53、CCND1、EGFR、SRC、ESR1、VEGFA、GAPDH)。结论桂枝茯苓丸可能通过调控AGE-RAGE信号通路、MAPK信号通路及PI3K-Akt信号通路,作用于TP53、CCND1、EGFR、SRC、ESR1、VEGFA、GAPDH等靶点,发挥活血、化瘀、消癥功效,可为桂枝茯苓丸“异病同治”机制研究提供参考。     

基于网络药理学和体外实验探讨驻景丸治疗老年性黄斑变性的作用机制

目的运用网络药理学和体外实验探讨驻景丸治疗老年性黄斑变性（AMD）的作用机制。方法检索 Genecards、OMIM 数据库与AMD 相关的作用靶点,使用Jvenn 在线工具获取驻景丸活性成分与AMD 的交集靶 点,构建“药物-成分-靶点”网络以及蛋白互作（PPI）网络。采用DAVID 数据库对交集靶点的GO 功能和 KEGG 通路富集分析,将网络中度值较高的成分与靶点进行分子对接。通过体外MTT 实验和Western Blot 实 验,使用驻景丸有效成分干预人视网膜色素上皮细胞（ARPE19）,进行核心靶点和通路的初步验证。结果网 络药理学结果显示,共筛选出驻景丸中38 个活性成分、150 个交集靶点。蛋白互作网络显示关键靶点有 MAPK1、Akt1、VEGFA 等。GO 富集分析涉及到247 个生物过程、36 个细胞组分和64 个分子功能。KEGG 通 路分析得到HIF-1 信号通路、PI3K-Akt 信号通路、前列腺癌等85 条相关通路。分子对接结果显示驻景丸治疗 AMD 的主要活性成分可以与MAPK1、Akt1、STAT3 和MAPK3 有较稳定的结合,其中Akt1 与异鼠李素结合性 最强。MTT 结果显示驻景丸活性成分异鼠李素、槲皮素和山柰酚均可以促进碘酸钠损伤的ARPE19 细胞增 殖（P < 0.05,P < 0.01,P < 0.001）。Western Blot 结果证实碘酸钠通过激活STAT3 信号通路诱导细胞凋亡相关 蛋白Caspase-3、PARP、BAD 表达（P < 0.01,P < 0.001）,异鼠李素、槲皮素和山柰酚则可以通过抑制STAT3 信号通路进而抑制Caspase-3、PARP、BAD 凋亡蛋白表达（P < 0.05,P < 0.01,P < 0.001）。结论本研 究从网络药理学角度预测了驻景丸治疗AMD 的药效物质基础及分子机制,并通过体外实验进行核心靶点和通 路的初步验证,为驻景丸等中药复方研究提供了新的思路。     

基于网络药理学预测苦参治疗肝癌的分子机制

目的:运用网络药理学的方法,探讨苦参治疗肝癌的作用机制。方法:通过中医药系统药理学数据库分析平台(TCMSP)筛选出苦参活性成分及作用靶点;在OMIM和Genecards中获取疾病靶点。通过R语言对基因进行匹配并绘制韦恩图;在String网站构建活性成分-蛋白质-蛋白质相互作用网络图;Cytoscape 3.6.1软件构建成分-靶点网络;通过R软件进行GO富集分析和KEGG通路富集分析。结果:共筛选出45个活性成分和176个潜在作用靶点;GO及KEGG功能富集显示苦参主要影响PI3K/Akt/mTOR通路及HIF-1a等信号通路。结论:苦参可能通过影响PI3K/Akt/mTOR通路及HIF-1a等信号通路,从而调控肝癌细胞侵袭及转移。     

化痰消瘀方治疗胃癌前病变的分子机制研究

目的:基于网络药理学预测和胃癌前病变(PLGC)大鼠模型验证的方法,探讨化痰消瘀方治疗胃癌前病变的分子机制。方法:利用网络药理学技术筛选化痰消瘀方治疗胃癌前病变的关键活性成分及其作用靶点,并进行蛋白质间相互作用分析,GO功能富集和KEGG通路富集。建立PLGC大鼠模型,给予化痰消瘀方干预治疗12 w,苏木精-伊红染色法观察大鼠胃黏膜组织的病理学改变,AB-PAS染色法观察大鼠胃黏膜组织的肠上皮化生病理改变,免疫组化法对预测结果中PI3K/Akt信号通路的相关蛋白表达进行分析。结果:网络药理学结果显示:化痰消瘀方含有98个活性成分,作用于129个靶点,主要涉及酶结合、药物反应、细胞凋亡调控等生物学途径以及PI3K/Akt、TNF等信号通路。动物实验验证结果显示:与模型对照组比较,化痰消瘀方干预治疗后可改善PLGC大鼠胃黏膜组织病理学改变,并减轻肠上皮化生等病理改变,PI3K/Akt信号通路中相关蛋白p-Akt、p-PI3K、mTOR表达下调,PTEN表达上调。结论:化痰消瘀方通过多成分、多靶点、多通路共同作用治疗PLGC,其中PI3K/Akt信号通路是其作用的主要通路之一。     

淫羊藿素对人卵巢癌SKOV3细胞增殖抑制及促凋亡作用

基于PI3K/Akt信号通路,观察人卵巢癌SKOV3细胞在不同浓度淫羊藿素(icaritin)干预下的增殖与凋亡变化过程,探讨可能存在的分子机制。研究对象为人卵巢癌细胞SKOV3,设置空白对照组和淫羊藿素不同浓度组(5,10,20μmol·L^-1),药物干预48 h,采用cell counting kit-8(CCK-8)法检测淫羊藿素对卵巢癌SKOV3细胞增殖的抑制效果;通过EdU试验检测SKOV3细胞增殖能力;采用Hoechst 33342荧光染色法观察各组SKOV3细胞凋亡形态变化,通过流式细胞术检测各组细胞周期分布状况和细胞凋亡率;实时荧光定量PCR(quantitative Real-time PCR)法检测各组细胞中PTEN,PI3K,Akt基因的表达情况;Western blot法检测PTEN,PI3K,Akt,p-Akt蛋白的表达情况。结果显示,与空白对照组比较,各浓度淫羊藿素组SKOV3细胞增殖抑制率升高(P<0.05),Edu阳性细胞率均降低(P<0.05),SKOV3细胞均呈现凋亡形态学改变,SKOV3细胞凋亡率均显著上升(P<0.05),SKOV3细胞G0/G1期细胞比例均降低(P<0.05),S期细胞比例均升高(P<0.05),SKOV3细胞中PTEN的基因和蛋白表达升高,PI3K和Akt的基因表达下降,PI3K和p-Akt的蛋白表达下降(P<0.05)。结果表明,淫羊藿素可能通过调控PI3K/Akt信号通路,抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖、诱导细胞发生凋亡并影响细胞周期分布。     

水蛭素通过PI3K/Akt信号通路抑制卵巢癌细胞增殖的机制研究

目的：探讨水蛭素抑制卵巢癌的潜在分子机制。方法：培养卵巢癌SKOV3细胞株，将其分为空白组、水蛭素组、顺铂组、水蛭素+顺铂组，通过CCK-8法确定水蛭素的最佳抑制浓度，免疫组化评估各组PI3K/Akt通路相关因子的表达情况，流式细胞术检测各组细胞凋亡情况，通过Western blot法检测水蛭素对癌细胞IL-1及PI3K-Akt信号通路中相关蛋白表达量的影响。结果：水蛭素能明显降低卵巢癌SKOV3细胞组织中IL-1水平，水蛭素组、顺铂组及水蛭素+顺铂组诱导人卵巢癌SKOV3细胞的凋亡(P<0.05),下调了PI3K/Akt信号通路中p-PI3K、p-Akt蛋白的表达水平(P<0.01),且水蛭素+顺铂组的p-PI3K、p-Akt蛋白表达下调最为明显。结论：水蛭素对卵巢癌有抑制作用，其机制可能与激活PI3K/Akt信号通路有关。本研究为进一步深入阐释水蛭素抗卵巢癌机制提供了研究基础。     

基于网络药理学探究黄芪-桂枝药对防治化疗引起的神经毒性的作用机制

目的 基于网络药理学方法探究黄芪-桂枝药对防治化疗引起的神经毒性的作用机制。方法 通过中药系统药理学数据库分析平台（TCMSP）在线平台获取黄芪与桂枝的潜在活性成分及及其作用靶点,利用GeneCards数据库检索与化疗引起的神经毒性相关靶点,将上述二者共有的靶点输入STRING数据库,获取蛋白质-蛋白质相互作用（protein-protein interaction network,PPI）网络;通过Cytoscape 3.2.1软件中CytoNCA插件筛选潜在核心靶点,并构建“活性成分-核心靶点-疾病”网络;通过DAVID在线软件进行基因本体（gene ontology,GO）功能富集分析及京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）通路富集分析。结果 黄芪-桂枝药对经筛选得到38个潜在活性成分和442个潜在作用靶点,其中与化疗引起的神经毒性共同作用的靶点有242个,通过拓扑学层面挖掘得到核心靶点46个。GO功能富集分析发现黄芪-桂枝药对防治化疗引起的神经毒性主要与基因的转录表达、细胞凋亡及对药物的反应等相关。KEGG通路富集分析发现黄芪-桂枝药对防治化疗引起的神经毒性主要与癌症相关信号通路、乙型肝炎通路及磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinases,PI3K）-蛋白激酶B（protein kinase B,Akt）信号通路等相关。结论 黄芪-桂枝药对能够通过多成分、多靶点、多途径的作用方式,从基因的转录表达、细胞凋亡等方面发挥防治化疗引起的神经毒性的作用。     

基于PI3K/Akt信号通路的骨松益骨方对去势大鼠的骨保护作用

目的 基于网络药理学和动物实验探究骨松益骨方（黄芪、党参、当归等组成）治疗绝经后骨质疏松症（postmenopausal osteoporosis,PMOP）的机制。方法 通过TCMSP分析平台收集骨松益骨方活性成分、对应靶点；GeneCards、TTD等数据库收集疾病靶点；运用R语言将共同靶点取交集，绘制韦恩图；STRING数据库构建蛋白质互作网络；最后对所得共同靶点进行GO功能富集、KEGG通路富集。动物实验采用去卵巢SD大鼠动物模型，骨松益骨方灌胃12周，HE染色观察骨组织形态变化，分别采用qRT-PCR和Western Blot法检测胫骨近端骨组织中PI3K和Akt mRNA和蛋白质的表达。结果 获得骨松益骨方治疗绝经后骨质疏松症的91个活性成分、70个药物与疾病共有靶点；GO富集分析主要包含DNA结合转录激活剂活性、RNA聚合酶Ⅱ特异性，泛素蛋白连接酶结合等生物功能；KEGG通路主要包括PI3K/Akt信号通路、肿瘤坏死因子信号通路、细胞凋亡等相关通路。动物实验表明骨松益骨方组骨组织形态明显改善，PI3K、Akt mRNA及蛋白的表达水平均明显升高（P<0.01）。结论...     

基于网络药理学探讨“黄芪-桂枝”治疗慢性心力衰竭的作用机制

目的：运用网络药理学技术探讨“黄芪-桂枝”治疗慢性心力衰竭（CHF）的作用机制。方法：通过中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）筛选出“黄芪-桂枝”中潜在活性化合物及其潜在作用靶点,采用Gene Cards、OMIM数据库获得相关疾病靶点,通过String数据库构建关键靶点蛋白相互作用网络,使用Metascape在线工具对共同靶点基因进行GO功能和KEGG通路富集分析。并将相关数据导入Cytoscape 3.6.1软件进行可视化分析,构建“活性成分-CHF-靶点”网络模型和“靶点-GO-KEGG”网络模型。结果：筛选出27个主要活性成分,共涉及207个中药有效成分和175个中药-疾病关键靶点。“黄芪-桂枝”主要通过调控丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1（AKT1）、丝裂原活化蛋白激酶-1（MAPK1）、白细胞介素-6（IL-6）、转录因子Ap-1（JUN）、肿瘤坏死因子（TNF）等蛋白,以及参与癌症途径、乙型肝炎信号通路、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)-蛋白激酶B(Akt)信号通路、癌症蛋白多糖通路、人类T淋巴细胞瘤病毒Ⅰ型(HTLV-I)感染通路等发挥治疗CHF的作用。结论：本研究揭示了“黄芪-桂枝”组分中的有效化合物以多靶点、多通路、多途径治疗CHF的作用机制,为临床研究提供了新思路。     

基于网络药理学方法的左金丸治疗结直肠癌的作用机制分析

目的：运用网络药理学方法探究左金丸治疗结直肠癌的潜在效应机制。方法：依托中药系统药理学分析平台收集左金丸中黄连和吴茱萸的化学成分和靶点信息,通过疾病基因库收集结直肠癌疾病基因,并通过维恩分析、蛋白互作分析以及Cytoscape的可视化功能,构建化合物-靶点网络、蛋白互作(PPI)网络和成分-靶点-通路网络,分析左金丸治疗结直肠癌的效应机制。结果:从左金丸化合物-靶点网络得到234种成分和482个核心靶点(其中活性成分36个,核心靶点72个),结直肠癌基因737个,PPI网络包含50个蛋白,其主要蛋白涉及PIK3CA、AKT1、TP53、HIF-1α、BAX和MYC等。基因GO本体条目283条,涉及核质、细胞凋亡、基因表达调控等方面, KEGG通路58条,主要涉及有癌症的途径、癌症中的蛋白多糖、结肠癌、膀胱癌、乙型肝炎,以及HIF-1信号通路、PI3K信号通路和FOXO信号通路等,其结果有待进一步的实验验证。结论：结合文献报道和预测分析,左金丸可能的作用机制与以下相关：①调节机体免疫耐受能力,增强宿主免疫抵抗,抑制炎症对肠粘膜的持续性刺激,进而阻止了细胞的异常增生;②通过上调抑癌基因,下调癌症相关因子,促进肿瘤细胞发生凋亡;③降低肿瘤细胞的耐受缺氧环境,促进细胞细胞发生凋亡及上皮间质的转移。     

基于网络药理学及体外实验探讨青黄散抗急性髓系白血病的分子机制

目的 基于网络药理学与分子对接技术预测青黄散治疗急性髓系白血病（AML）的潜在活性靶点与信号通路，通过体外细胞实验进一步验证其作用机制。方法 基于中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）、中医药综合数据库（TCMID）、TargetNet、SwissTargetPrediction数据库获取青黄散活性成分和作用靶点；通过DrugBank、DisGeNET、GeneCards、在线人类孟德尔遗传数据库（OMIM）获取AML疾病相关靶点。筛选出青黄散与AML的共同靶点后，使用STRING数据库进行蛋白质-蛋白质相互作用网络分析，并通过RStudio软件使用R语言及clusterProfiler、Bioconductor等包进行基因本体论（GO）和京都基因和基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。同时应用Cytoscape软件进行“疾病-药物成分-靶点”与“化合物-靶点-通路”网络的构建。选取青黄散活性成分与“化合物-靶点-通路”网络排名前8个靶点进行分子对接。利用体外细胞实验及蛋白免疫印迹法（Western blot）进一步验证青黄散抗AML作用。结果 预测结果显示青黄散主要活性成分11个，收集青黄散与AML的共同靶点22个；KEGG通路分析结果显示磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）和丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路可能在青黄散治疗AML疾病中起到关键作用。“化合物-靶点-通路”网络分析显示排名前8的靶点包括Akt1、磷脂酰肌醇3-激酶催化亚基α（PIK3CA）、双特异性丝裂原活化蛋白激酶1（MAP2K1）、凋亡相关基因（TP53）、原癌基因丝苏氨酸蛋白激酶1（RAF1）、B细胞淋巴瘤-2基因（Bcl-2）、胱天蛋白酶-9（Caspase-9）和原癌基因（JUN）。分子对接结果表明3-吲哚基-β-D-吡喃葡萄糖苷与MAP2K1、异牡荆素与PIK3CA、靛玉红与Bcl-2对接最优。细胞实验表明3-吲哚基-β-D-吡喃葡萄糖苷、异牡荆素和靛玉红可有效抑制AML细胞增殖，并调控MAPK/PI3K信号通路，抑制Bcl-2蛋白的表达。结论 青黄散可通过多成分-多靶点-多途径方式协同作用治疗AML，其作用机制可能与调控MAPK信号通路及PI3K/Akt信号通路有关。     

基于网络药理学及体外实验验证研究茯苓-白术药对治疗胃癌的作用机制

目的：基于网络药理学及实验验证,探讨茯苓-白术药对治疗胃癌的作用机制。方法：根据口服生物利用度和类药性,在中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)筛选茯苓-白术药对活性成分,借助Swiss Target Prediction数据库,预测茯苓-白术药对活性成分的潜在靶点。在疾病相关基因数据库（DisGeNET）检索胃癌相关靶点,将2个靶点集导入Cytoscape软件做交集,通过筛选拓扑特征值获取茯苓-白术药对治疗胃癌的核心靶点集,构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络。并进行基因本体（GO）及京都基因和基因组百科全书（KEGG）富集分析。最后,通过体外实验对有效靶点及通路进行验证。结果：茯苓-白术药对含有36个有效活性成分,PPI网络关键靶点主要为MAPK3、PTGS2、EGFR、MAPK8、MAPK14、PPARG、ESR1等。预测茯苓-白术药对活性成分通过“Viral carcinogenesis”“PI3K-AKT signaling pathway”“Proteoglycans in cancer”等信号通路发挥作用。结论：茯苓-白术药对通过多成分、多靶点、多途径治疗胃癌,可通过靶向于PI3K-AKT信号通路及促分裂原活化的蛋白激酶3蛋白表达参与细胞增殖、侵袭,为进一步研究茯苓-白术药对治疗胃癌奠定了坚实基础。     

静心止动方治疗小儿抽动障碍靶点的体外研究

目的：网络药理学分析静心止动方（JXZDF）治疗小儿抽动障碍（TD）的作用机制,并进行体外细胞验证。方法：利用中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）和中医药百科全书（ETCM）数据库筛选JXZDF的有效成分,借助SwissTargetPrediction数据库预测成分靶点。通过GeneCards、人类孟德尔遗传数据库（OMIM）、治疗性靶标数据库（TTD）、PharmGkb DisGeNET数据库获取TD疾病靶点。将成分和疾病2个靶点集取交集,即JXZDF治疗TD的潜在靶点。将交集靶点导入STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络;利用Cytoscape软件,构建“中药-活性成分-疾病靶点”网络图,并利用“CytoNCA”插件筛选核心靶点。最后通过基因本体（GO）富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析获得潜在的信号通路。通过活化的小胶质细胞进行实验验证,将JXZDF作用于活化的小胶质细胞,通过干预目标信号通路关键分子,采用蛋白质印迹法验证JXZDF作用于小胶质细胞的作用靶点。结果：网络药理学发现JXZDF的主要活性成分为槲皮素、豆甾醇、高车前素、β-谷甾醇、山柰酚等,PI3K/AKT信号通路可能是JXZDF治疗TD的关键通路。实验发现JXZDF能够下调活化后的小胶质细胞p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT蛋白表达（P<0.05）,而当JXZDF与PI3K激动剂740 Y-P联合应用后,该抑制效应被逆转（P<0.05）。结论：研究阐述了JXZDF治疗TD的潜在分子信号通路,证实了JXZDF能够通过下调PI3K/AKT信号通路干预小胶质细胞的功能,验证了网络药理学结果,为深入研究JXZDF治疗TD提供了依据。     

基于网络药理学探究红花注射液治疗原发性痛经的作用机制

目的基于网络药理学探究红花注射液治疗原发性痛经的作用机制。方法利用网络药理学技术筛选红花注射液治疗原发性痛经的潜在活性成分及靶点,构建"活性成分-潜在靶点"网络和潜在蛋白互作网络。筛选核心靶标,并对潜在靶点进行GO分析、KEGG通路富集及与临近基因的富集分析。建立原发性痛经大鼠模型,考察红花注射液干预后相关通路蛋白表达变化。结果共筛选出潜在活性成分23种,作用于EGFR、Akt1、MAPK、TNF-α、IL-6等43个潜在靶点,以及13个核心靶点,可能通过调控PI3K/Akt、MAPK等信号通路来参与调节细胞因子及炎症反应。红花注射液能改善大鼠血清生化异常,并作用于PI3K/Akt、MAPK、EGFR/STAT3等多条信号通路。结论红花注射液具有多成分、多靶点、多通路特点,可能通过改善子宫缺血缺氧环境、调控雌激素效应、抑制子宫炎症反应来发挥作用。     

桃仁膝康丸治疗骨性关节炎机制的网络药理学分析与验证

目的:以网络药理学方法探讨桃仁膝康丸治疗骨性关节炎的可能作用机制。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)搜索和筛选出桃仁膝康丸活性成分及作用靶点,检索GeneCards、OMIM和CTD数据库获得与骨性关节炎相关的非重复靶点,取交集获取中药抗骨性关节炎相关的药物活性成分靶点,使用String软件构建蛋白质-蛋白质相互作用网络,利用Cytoscape 3.8.2软件构建蛋白质-蛋白质相互作用网络图,筛选核心靶点和构建药物-活性成分-骨性关节炎相关靶点网络;借助DAVID数据库进行基因本体论(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;将活性成分与预测疾病核心靶点进行分子对接验证;免疫印迹法(Western Blot)验证对细胞凋亡效应蛋白半胱氨酸蛋白酶(Caspase,CASP)3靶点的干预。结果:从桃仁膝康丸中筛选出53个活性成分,主要作用于骨性关节炎相关55个的靶点,靶标作用主要涉及细胞凋亡、炎症、细胞自噬、细胞老化、活性氧代谢、免疫生物过程和通路;分子对接结果发现活性成分与核心靶标结合性能良好;Western Blot结果显示,桃仁膝康丸能显著抑制CASP3活化。结论:桃仁膝康丸治疗骨性关节炎是多靶点、多通路的复杂机制过程,可能主要与抗细胞凋亡、抗炎、诱导细胞自噬、阻滞细胞老化、抗氧化、抑制免疫相关。