NE刺激对HaCaT细胞分泌NE、Trappin-2的影响及银屑1号的干预

目的:观察银屑1号含药血清对中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)刺激HaCaT细胞分泌NE、Trappin-2的影响。方法:体外培养HaCaT细胞,以10 ng/mL的肿瘤坏死细胞因子(TNF)-α刺激HaCaT细胞,建立银屑病细胞模型。实验设置5组:空白组、模型组、NE组、1/3中药组、NE+1/3中药组,体外培养48 h。采用ELISA法检测培养上清中NE、Trappin-2水平,采用RTq-PCR法检测HaCaT细胞中NE、Trappin-2水平。结果:模型组的NE、Trapppin-2的蛋白表达及mRNA表达与空白组比较均显著升高(P <0. 01)。与模型组比较,NE组、1/3中药组、NE+1/3中药组的NE、Trapppin-2的蛋白表达及mRNA表达均显著下降(P <0. 01)。与NE组比较,1/3中药组、NE+1/3中药组的NE、Trapppin-2蛋白表达明显下降(P <0. 01)。NE+1/3中药组Trappin-2的mRNA表达下降(P <0. 05),NE+1/3中药组NE的mRNA表达未见明显差异(P> 0. 05)。与1/3中药组比较,NE+1/3中药组的NE、Trapppin-2的蛋白表达及mRNA表达明显下降(P <0. 01)。结论:银屑1号能降低HaCaT细胞中NE、Trappin-2的浓度,调节NE、Trappin-2的表达水平,达到动态平衡,减轻炎症反应,治疗银屑病。     

银屑I号治疗寻常型银屑病的疗效及对外周血中NE、Trappin-2表达的影响

目的:观察银屑I号方对寻常型银屑病患者外周血中NE及Trappin-2表达水平的影响。方法:将135例银屑病患者随机分为雷公藤组、中药组、中药+雷公藤组。根据PASI评分评价疗效,并通过ELISA法检测NE和Trappin-2表达水平。结果:雷公藤组总有效率为61.9%,中药组总有效率为67.4%,雷公藤+中药组总有效率为83.0%;雷公藤+中药组优于雷公藤组、中药组,差异有统计学意义(P0.05)。3组治疗后PASI评分、NE及Trappin-2表达水平均较治疗前下降,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:银屑I号联合雷公藤治疗寻常型银屑病具有较好疗效,其作用机制可能是通过减少NE、Trappin-2的表达,维持两者平衡,从而抑制炎症反应。     

银屑1号含药血清对银屑病中性粒细胞分泌NE、trappin-2的影响

目的:观察银屑1号含药血清对银屑病患者体外培养的中性粒细胞分泌NE、trappin-2的影响,探讨其治疗银屑病的机制。方法:分离培养18例寻常型银屑病患者外周血中的中性粒细胞,实验设置6组:4个浓度的中药含药血清(即原液中药组、1/2中药组、1/4中药组、1/8中药组)、雷公藤多苷阳性对照、生理盐水空白对照。采用ELISA法检测各组分泌的NE、trappin-2表达水平。结果:NE表达水平:与生理盐水组比较,原液中药组NE表达水平最低,生理盐水组表达水平最高,随着中药含药血清浓度的降低,NE的表达水平随之升高(P<0.05)。trappin-2表达水平:与生理盐水组比较,原液中药组trappin-2表达水平最低,生理盐水组最高,随着中药含药血清浓度的升高,trappin-2的表达水平逐渐降低。NE/trappin-2比值方面:生理盐水组比值显著高于其余5组。原液中药、1/2、1/4、1/8中药组显著低于阳性对照雷公藤组与对照组生理盐水组,并且NE/Trappin-2的比值伴随中药含药血清浓度的升高而降低(P<0.05)。结论:银屑1号治疗银屑病的机理可能是通过降低银屑病患者外周血中中性粒细胞NE、trappin-2的表达,使两者达到平衡,从而减轻炎症反应。     

甘草苷对中波紫外线诱导人皮肤角质形成细胞凋亡的影响

目的:研究甘草苷对中波紫外线(UVB)诱导人皮肤角质形成细胞(Ha Ca T)凋亡的影响。方法:以不同浓度的甘草苷作用于Ha Ca T细胞,噻唑蓝(MTT)比色法筛选甘草苷的有效安全浓度;用30 m J·cm-2的UVB作用于Ha Ca T细胞,建立光老化模型,MTT比色法检测光老化Ha Ca T细胞增殖率;流式细胞术检测各组细胞中活性氧自由基(ROS)含量和总凋亡率;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测光老化Ha Ca T细胞中半胱氨酸天冬氨酸-3(Caspase-3),半胱氨酸天冬氨酸-9(Caspase-9)mRNA表达水平;蛋白免疫印记法(Western blot)检测光老化Ha Ca T细胞中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Caspase-3,Caspase-9蛋白表达量。结果:筛选出甘草苷的最佳有效安全浓度为1×10-7,1×10-6,1×10-5mol·L-1。与空白组比较,UVB组细胞增殖率显著降低(P0.01),细胞中ROS含量和总凋亡率显著升高(P0.01),Caspase-3,Caspase-9 mRNA表达水平显著升高(P0.01);Bcl-2蛋白表达量显著降低(P0.01),Caspase-3,Caspase-9蛋白表达量显著升高(P0.01)。与UVB组比较,1×10-7,1×10-6,1×10-5mol·L-1甘草苷+UVB组细胞增殖率显著升高(P0.01);细胞中ROS含量和总凋亡率显著降低(P0.05,P0.01),Caspase-3,Caspase-9 mRNA表达水平显著降低(P0.05,P0.01);Bcl-2蛋白表达量显著升高(P0.05,P0.01),Caspase-3,Caspase-9蛋白表达量显著降低(P0.05,P0.01)。结论:甘草苷能通过促进抗凋亡因子Bcl-2蛋白的表达,减少促凋亡相关细胞因子Caspase-3,Caspase-9 mRNA和蛋白的表达,从而抑制UVB诱导的Ha Ca T细胞凋亡。     

银屑Ⅰ号对咪喹莫特诱导BALB/c小鼠银屑病模型的干预作用

目的观察银屑Ⅰ号对咪喹莫特(IMQ)诱导的BALB/c小鼠银屑病模型局部皮损及外周血的干预作用。方法 SPF级BALB/c小鼠30只,随机分为对照组、模型组、银屑Ⅰ号高、中、低剂量组,每组6只,除对照组外,其余各组每日外涂62.5 mg 5%IMQ诱导银屑病样动物模型,银屑Ⅰ号高、中、低剂量组小鼠造模期间同时灌胃相应剂量银屑Ⅰ号,共7日。分别观察小鼠背部皮损厚度变化、皮损面积和疾病严重程度指数(PASI),光镜下观察局部皮损组织病理变化,对局部皮损组织依次使用反转录聚合酶链式反应(qPCR)、免疫印迹(Western Blot)法检测维生素D受体(VDR)、血管内皮生长因子(VEGF)在mRNA及蛋白水平表达,采用ELISA法检测外周血白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)含量。结果与对照组比较,模型组小鼠背部皮损皮肤显著增厚,并出现典型银屑病表现,PASI评分随时间推移显著上升;与模型组比较,银屑Ⅰ号各组小鼠背部皮损红斑及鳞屑相对较少、浸润程度较轻,造模区域皮肤厚度及PASI评分与剂量梯度成反比。光镜下模型组小鼠背部皮损表皮全层增厚,呈典型银屑病病理改变;与模型组比较,银屑Ⅰ号高剂量组病理改变最轻,中剂量组次之,低剂量组与模型组比较,差异无统计学意义(P0.05)。与对照组比较,模型组VDR mRNA及蛋白表达降低(P0.01,P0.05),VEGF mRNA及蛋白表达及外周血中IL-6、TNF-α、IFN-γ含量显著升高(P0.01);与模型组比较,银屑Ⅰ号中、高剂量组VDR mRNA及蛋白表达升高(P0.05,P0.01),VEGF mRNA、蛋白表达及外周血IL-6、TNF-α、IFN-γ含量均显著降低(P0.01),低剂量组VEGF mRNA及蛋白表达均显著降低(P0.01),外周血中IL-6含量有所降低(P0.05),VDR mRNA及蛋白表达、TNF-α、IFN-γ含量差异无统计学意义(P0.05)。结论一定剂量的银屑Ⅰ号可通过抑制异常新生血管形成及炎症环境改善IMQ诱导银屑病小鼠模型的银屑病表现,这可能与其调控VDR/VEGF信号网络有关。     

中药复方银屑1号对角质形成细胞增殖影响的相关研究

目的:探讨中药复方银屑1号方对人角质形成细胞增殖及细胞生长周期的影响,从细胞水平为银屑1号方临床治疗寻常型银屑病提供理论依据。方法:将浓度为8%的PBS、雷公藤多甙片、复方银屑1号含药血清,分别处理HaCaT细胞,于24h、48h采用酶联免疫法检测其对细胞增值的影响,用流式细胞术分析细胞周期。结果:银屑1号方能抑制HaCaT细胞增殖,并导致HaCat细胞G1期比例显著增加,S期与G2期比例则显著下降,并可抑制G1/G2期转换。中药组与雷公藤组和PBS组比较,P<0.01,均有统计学意义。结论:中药银屑1号能对人角质形成细胞可产生明显抑制并诱导其分化的作用,为其治疗银屑病提供理论依据。     

中药白秓合剂对HaCaT细胞CXCR2蛋白表达及TNF-α诱导的HaCaT细胞IL-6表达的影响

目的:观察中药白疕合剂对人永生化角质形成细胞(Ha Ca T细胞)CXC趋化因子受体2(CXCR2)蛋白表达及肿瘤坏死因子(TNF)-α诱导的Ha Ca T细胞分泌白细胞介素(IL)-6和IL-6 mRNA表达的影响,并探讨其作用机制。方法:用白疕合剂干预Ha Ca T细胞,Western-blot检测CXCR2蛋白表达;用白疕合剂干预TNF-α诱导的Ha Ca T细胞,ELISA检测IL-6分泌量,RT-PCR检测IL-6 mRNA表达。结果:白疕合剂中、高剂量组对CXCR2蛋白的表达有明显的抑制作用;白疕合剂低、中、高剂量组对IL-6分泌量和IL-6 mRNA表达均有明显的抑制作用且呈浓度依赖性。结论:白疕合剂可能通过抑制IL-6分泌,降低IL-6 mRNA、CXCR2蛋白表达发挥对银屑病的治疗作用。     

甘草酸抑制UVB诱导HaCaT细胞凋亡的机制研究

目的:研究甘草酸抑制中波紫外线(UVB)诱导人皮肤角质形成细胞(Ha Ca T)凋亡的机制。方法:以不同浓度的甘草酸作用于人皮肤角质形成细胞(Ha Ca T细胞),噻唑蓝比色(MTT)法筛选药物的有效安全浓度;用30 mJ/cm~2的UVB照射Ha Ca T细胞,制备光老化模型,MTT法检测细胞增殖率;流式细胞仪检测各组细胞总凋亡率;实时定量PCR(RT-PCR)法检测Bax、Bcl-2 m RNA表达水平变化;Western Blot法检测各组细胞上清中Bax、Bcl-2蛋白表达量。结果:1×10~(-7)、1×10~(-6)、1×10~(-5)mol/L甘草酸为最佳有效安全浓度。与空白组比较,UVB组细胞增殖率显著降低(P0.01);细胞总凋亡率显著显著升高(P0.01);Bax m RNA表达水平显著升高,Bcl-2m RNA表达水平显著降低(P0.01);Bax蛋白表达量升高,Bcl-2蛋白表达量显著降低(P0.01)。与UVB组比较,1×10~(-7)、1×10~(-6)、1×10~(-5)mol/L甘草酸+UVB组细胞增殖率显著升高(P0.01);细胞总凋亡率显著降低(P0.01);Bax m RNA表达水平显著降低,Bcl-2 m RNA表达水平显著升高(P0.01,P0.05);Bax蛋白表达量显著降低,Bcl-2蛋白表达量显著升高(P0.01,P0.05)。结论:甘草酸能抑制UVB诱导的Ha Ca T细胞凋亡,其机制与其下调促凋亡基因Bax m RNA和蛋白的表达,上调抑凋亡基因Bcl-2 m RNA和蛋白的表达有关。     

中药银屑1号对体外培养的银屑病中性粒细胞分泌TNF-α的影响

目的观察中药银屑1号方对寻常型银屑病患者的外周血中性粒细胞分泌肿瘤坏死因子(TNF-α)的影响,探讨其治疗银屑病的机制。方法抽取18例寻常型银屑病患者的外周血,分离培养中性粒细胞,实验组加入3个不同浓度(中药原液、1/2浓度及1/4浓度)的中药银屑1号含药血清,对照组分别加入雷公藤、生理盐水,采用双抗体夹心ELISA法对各组分泌的TNF-α表达水平进行检测。结果中药组TNF-α表达水平明显降低,且随着中药含药血清浓度的降低,TNF-α表达水平逐渐升高,与雷公藤组及生理盐水比较,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论中药银屑1号方可通过下调银屑病患者外周血中性粒细胞中TNF-α的表达,从而改善银屑病炎症反应。     

甘草次酸对UVB诱导HaCaT细胞光老化的保护作用及相关细胞因子的影响

目的:研究甘草次酸对中波紫外线(UVB)诱导人皮肤角质形成细胞(Ha Ca T)细胞光老化的保护作用及相关炎症因子影响。方法:用不同浓度的甘草次酸作用于Ha Ca T细胞,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖率,筛选出药物最佳有效浓度;用30 m J·cm-2的UVB照射Ha Ca T细胞,建立光老化模型,用3个不同浓度的甘草次酸作用于光老化细胞,MTT比色法检测光老化Ha Ca T细胞增殖率;谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),过氧化氢酶(CAT)和乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒分别检测甘草次酸对光老化Ha Ca T细胞中GSH-Px,CAT和LDH活性的影响;蛋白免疫印记法(Western blot)检测甘草次酸对光老化Ha Ca T细胞中白细胞介素-1β(IL-1β),IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达量的影响。结果:筛选出1×10-7,1×10-6,1×10-5mol·L-1甘草次酸为最佳有效浓度。与空白组比较,UVB组细胞增殖率显著降低(P0.01),GSH-Px,CAT活性显著降低,LDH活性显著升高(P0.01),IL-1β,IL-6,TNF-α蛋白表达量显著升高(P0.05,P0.01)。与UVB组比较,1×10-7,1×10-6,1×10-5mol·L-1甘草次酸+UVB组细胞增殖率显著上升(P0.01),GSH-Px,CAT活性显著上升,LDH活性显著降低(P0.01),IL-1β,IL-6,TNF-α蛋白表达量显著降低(P0.05,P0.01)。结论:甘草次酸可通过提高GSH-Px,CAT活性,降低LDH活性,减少炎症因子IL-1β,IL-6和TNF-α的表达,从而抑制UVB诱导Ha Ca T细胞光老化。     

基于LXRs/NF-κB信号通路对A型滑膜细胞的调控探讨壮骨健膝方的作用机制北大核心CSCD

目的观察壮骨健膝方含药血清对脂多糖(LPS)诱导的兔A型滑膜细胞肝X受体(LXRs)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响,探讨壮骨健膝方治疗膝骨关节炎(KOA)滑膜炎症的机制。方法制备壮骨健膝方含药血清并采用超高效液相色谱质谱联用技术(UPLC-MS/MS)进行质量控制(龙胆苦苷885 ng/mL、阿魏酸185 ng/mL)。将兔A型滑膜细胞随机分为空白组和LPS组,LPS组经LPS诱导后建立炎症细胞模型,模型鉴定成功后随机分为模型组、壮骨健膝方组、LXRα抑制剂组、核受体辅助抑制因子(N-CoR)抑制剂组,分别予以10%空白血清、10%含药血清、10%含药血清+LXRα抑制剂、10%含药血清+N-CoR抑制剂,空白组予10%空白血清干预。干预24 h后,收集各组细胞及上清液,Western Blot、RT-qPCR检测各组细胞中LXRα、N-CoR、P50、P65蛋白及m RNA的表达,ELISA检测各组上清液中IL-1β、TNF-α、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)及MMP-13含量。结果与空白组比较,模型组P50、P65蛋白与mRNA表达及IL-1β、TNF-α、MMP-3、MMP-13含量均升高(P<0.01),LXRα、N-CoR蛋白与mRNA表达下降(P<0.01)。与模型组比较,壮骨健膝方组P50和P65蛋白与mRNA表达及IL-1β、TNF-α、MMP-3、MMP-13含量均降低(P<0.01),LXRα、N-CoR蛋白与mRNA表达升高(P<0.01);LXRα抑制剂组及N-CoR抑制剂组P50、P65蛋白与mRNA表达及IL-1β、TNF-α、MMP-3、MMP-13含量均降低(P<0.01,P<0.05)。与壮骨健膝方组比较,LXRα抑制剂组及N-CoR抑制剂组LXRα、N-CoR蛋白及mRNA表达下降(P<0.01),P50、P65蛋白及mRNA表达升高(P<0.01,P<0.05),两组IL-1β、TNF-α、MMP-3及MMP-13含量升高(P<0.01,P<0.05)。结论壮骨健膝方可通过上调LXRα和N-CoR蛋白及mRNA表达,下调P50、P65蛋白及mRNA表达,从而抑制LXRs/NF-κB信号通路的传导,减少下游炎症相关指标IL-1β、TNF-α、MMP-3及MMP-13的分泌,最终达到控制膝骨关节炎滑膜炎症反应的作用。     

清热活血解毒复方(QHJD)对TNF-α诱导的HaCat细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究中药清热活血解毒复方(QHJD)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人永生化角质形成细胞株(Ha Cat)增殖和凋亡的影响,为治疗银屑病的可能作用机制提供依据。方法:体外培养Ha Cat细胞,将高、中、低(30,25,20 g·L~(-1))质量浓度的QHJD水提物分别作用于TNF-α诱导的Ha Cat细胞24 h,采用倒置显微镜观察QHJD水提物处理后的Ha Cat细胞形态学改变;采用CCK-8技术检测QHJD对TNF-α诱导的Ha Cat细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测QHJD对TNF-α诱导的Ha Cat细胞凋亡的影响;采用Western blot技术检测QHJD对TNF-α诱导的Ha Cat细胞B细胞淋巴瘤/白血病-xl(Bclxl),Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达的影响;采用Real-Time PCR技术检测清热活血解毒复方对TNF-α诱导的Ha Cat细胞Bcl-xl,Bax mRNA表达的影响。结果:与空白组比较,QHJD各组细胞镜下单位面积的细胞均呈现数量减少,细胞体积缩小,细胞间连接变少或是消失,细胞间隙变大;QHJD各组均可抑制Ha Cat细胞的增殖,差异有统计学意义(P0.05),其中QHJD中、高剂量组极显著(P0.01);QHJD中、高剂量组可以促进Ha Cat细胞的凋亡,差异有统计学意义(P0.05),其中高剂量组促进Ha Cat细胞凋亡更明显(P0.01);QHJD各组Bax蛋白表达均有上升,差异有统计学意义(P0.05);QHJD各组Bax mRNA表达均有上升,差异有统计学意义(P0.05)。结论:QHJD可能通过上调Bax蛋白和mRNA的表达,来诱导角质形成细胞的凋亡,进而抑制TNF-α诱导的Ha Cat细胞的增殖,以发挥治疗银屑病的作用。     

银屑Ⅰ号抑制TNF-α诱导Hacat细胞炎症反应的机制研究

目的:观察银屑I号对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的人永生化角质形成细胞(Hacat)炎症反应的影响并探讨其机制。方法:采用低、中、高浓度的银屑I号含药血清干预Hacat细胞,ELISA法检测细胞上清液25HVD3、IL-1、IL-17、IL-22浓度,Western-blot法检测维生素D受体(vitamine D receptor,VDR)蛋白表达量,RT-PCR检测VDRmRNA相对表达量。结果:与空白组比较,模型组VDR蛋白、VDRmRNA、25HVD3表达量明显降低,IL-1、IL-17、IL-22明显升高(P0.01);与模型组比较,银屑I号各组VDR蛋白、VDRmRNA、25HVD3表达量明显升高,IL-1、IL-17、IL-22明显降低(P0.05),且呈剂量依赖性。讨论:银屑I号可能通过促进VDR蛋白、VDRmRNA及25HVD3因子信号表达发挥对银屑病的治疗作用。     

中药银屑1号对银屑病中性粒细胞分泌IFN-γ、IL-4的影响

目的:观察中药银屑1号对寻常型银屑病患者外周血中性粒细胞分泌IFN-γ、IL-4的影响,探讨其治疗银屑病的机制。方法:分离培养18例寻常型银屑病患者外周血中性粒细胞,分别给予4个浓度(原液、1/2浓度、1/4浓度及1/8浓度)中药银屑1号,对照组加雷公藤多苷片、生理盐水,采用ELISA法检测各组IFN-γ、IL-4表达水平。结果:IL-4:1/4中药组可明显升高IL-4水平,与对照组比有统计学差异(P0.05)。IFN-γ:中药组IFN-γ表达水平明显降低,且与药物浓度呈依赖关系,原液中药组与对照组比有统计学差异(P0.05)。结论:银屑1号方治疗银屑病的机理之一可能是通过降低寻常型银屑病患者外周血中性粒细胞IFN-γ的表达,上调IL-4的表达,从而纠正Th1/Th2漂移。     

雷公藤多苷对BALB/c裸小鼠诱发性狼疮的干预机制研究

目的探讨雷公藤多苷对BALB/c裸小鼠诱发性狼疮的干预机制。方法将40只BALB/c雌性裸小鼠随机均分为空白组、模型组、激素组和雷公藤多苷组,每组10只。除空白组外,其余组均单次腹腔注射Pristane(0.5 mL/鼠)建立BALB/c裸小鼠诱发性狼疮模型。成模后,空白组和模型组均给予生理盐水灌胃,激素组给予1%醋酸泼尼松灌胃,雷公藤多苷组给予1%雷公藤多苷灌胃,均1mL/只,1次/d,连续4周。采用Western blot法检测各组小鼠外周血单核细胞糖皮质激素受体(GR)蛋白表达水平,采用ELISA法检测外周血狼疮特异性自身抗体(Sm)蛋白表达水平及免疫球蛋白G(IgG)水平,采用直接免疫荧光方法检测脾脏T细胞亚群分类和B细胞计数,采用SP法和RT-PCR法分别检测腹腔内脂肪肉芽肿结节组织匀浆液中血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体1(VEGFR1)蛋白和mRNA表达水平。结果模型组GR蛋白表达水平明显低于空白组(P0.05),Sm蛋白表达水平和IgG水平均明显高于空白组(P均0.05);激素组和雷公藤多苷组GR蛋白表达水平均明显高于模型组(P均0.05),Sm蛋白表达水平和IgG水平均明显低于模型组(P均0.05)。模型组裸小鼠脾脏组织中CD4~+、CD8~+百分率和B细胞总数均明显高于空白组(P均0.05),激素组和雷公藤多苷组CD4~+、CD8~+百分率和B细胞总数均明显低于模型组(P均0.05)。模型组和激素组VEGF、VEGFR1蛋白及mRNA表达水平均明显高于空白组(P均0.05),雷公藤多苷组VEGF、VEGFR1蛋白及mRNA表达水平均明显低于模型组和激素组(P均0.05)。结论雷公藤多苷通过提高GR蛋白表达水平,抑制T、B细胞功能调控免疫反应及减少血管新生而发挥对红斑狼疮的治疗作用。     

银屑平丸对小鼠银屑病样模型血清中TGF-β、IL-10表达的影响

目的:观察银屑平丸对BALB/c小鼠银屑病样模型血清中转化生长因子-β(TGF-β)和白细胞介素10(IL-10)表达的影响,探讨银屑平丸治疗银屑病的可能作用机制。方法:将48只BALB/c雄性小鼠随机分为空白组、模型对照组、银屑平丸高、中、低剂量组、雷公藤组,每组8只。所有小鼠背部脱毛后,空白组小鼠外涂凡士林,其余5组小鼠外涂咪喹莫特乳膏,诱发小鼠银屑病样模型;同时予以相应药物进行灌胃干预,连续8 d。观察并记录小鼠背部皮肤皮损面积和严重程度指数(psoriasis area and serenty index,PASI)评分;ELISA法检测小鼠外周血清中TGF-β、IL-10水平;取小鼠背部皮肤组织做病理切片进行组织病理观察。结果:银屑平丸高、中、低剂量组、雷公藤组小鼠背部皮损PASI评分及外周血TGF-β、IL-10含量均明显低于模型对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:银屑平丸能降低银屑病样模型小鼠外周血TGF-β、IL-10的表达,这可能是银屑平丸治疗银屑病的作用机制之一。     

雷公藤多甙对银屑病患者NF-кB及细胞因子的影响

目的：探讨雷公藤多甙对核因子的影响并为药物治疗银屑病提供理论依据。方法：密度梯度离心法获得外周血单一核细胞(PBMC),体外培养角质形成细胞(KC)。 PBMC与KC混合培养,流式细胞仪检测核转录因子κB(NF-κB)表达,ELISA法测上清液白介素-8(IL-8)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)含量。结果：银屑病组NF-κB表达及ICAM-1、IL-8含量与正常对照组间差异有显著性(P＜0.01);雷公藤可下调NF-κB表达及IL-8、ICAM-1含量(P＜0.01)。结论：雷公藤可能通过影响NF-κB的表达而发挥对银屑病的治疗作用,抑制NF-κB的药物可能有助于银屑病的治疗。     

柴贝止痫汤及其主要入血成分柴胡皂苷a对癫痫模型大鼠卡马西平脑内分布的影响

目的观察柴贝止痫汤及柴胡皂苷a治疗难治性癫痫的可能作用机制。方法 88只大鼠随机分为空白组12只及模型组、卡马西平组、柴贝止痫汤+卡马西平组、柴胡皂苷a+卡马西平组19只。除空白组外,其余各组采用侧脑室注射海人酸制备癫痫大鼠模型。卡马西平组给予卡马西平混悬液0.75 ml/(100 g·d),柴贝止痫汤+卡马西平组给予柴贝止痫汤0.5 ml/(100 g·d)和卡马西平混悬液0.75 ml/(100 g·d),柴胡皂苷a+卡马西平组给予柴胡皂苷a混悬液0.25 ml/100 g和卡马西平混悬液0.75 ml/100 g,模型组及空白组给予等量羧甲基纤维素钠混悬液。给药60天后比较各组海马P糖蛋白、Mdr1a mRNA表达及全脑卡马西平(CBZ)、1011-环氧化卡马西平(CBZE)含量。结果与空白组比较,模型组海马P糖蛋白表达升高(P0.05);与模型组比较,卡马西平组、柴胡皂苷a+卡马西平组海马P糖蛋白表达差异无统计学意义(P0.05),柴贝止痫汤+卡马西平组海马P糖蛋白表达降低(P0.05);与卡马西平组比较,柴贝止痫汤+卡马西平组和柴胡皂苷a+卡马西平组海马P糖蛋白表达均降低(P0.05),柴贝止痫汤+卡马西平组和柴胡皂苷a+卡马西平组海马P糖蛋白表达差异无统计学意义(P0.05)。模型组Mdr1a mRNA表达较空白组升高。卡马西平组的Mdr1a mRNA表达高于空白组(P0.05),空白组、模型组MDR1a mRNA表达分别为卡马西平组的0.36倍、0.87倍。柴贝止痫汤+卡马西平组较卡马西平组Mdr1a含量降低(P0.01),为卡马西平组的0.14倍。与卡马西平组比较,柴贝止痫汤+卡马西平组CBZE含量升高(P0.01),柴胡皂苷a+卡马西平组CBZE含量降低(P0.01),且柴贝止痫汤+卡马西平组和柴胡皂苷a+卡马西平组CBZ差异无统计学意义(P0.05);与柴贝止痫汤+卡马西平组比较,柴胡皂苷a+卡马西平组CBZ、CBZE含量均降低(P0.01)。结论柴贝止痫汤联合卡马西平可降低癫痫模型大鼠海马Mdr1a/P糖蛋白表达,促进CBZ、CBZE入脑,对CBZE作用突出,柴胡皂苷a在其中不发挥主要作用。     

麻黄-桂枝药对对白介素-22诱导的HaCaT细胞分泌CCL20的影响

目的:观察麻黄-桂枝药对对白介素-22(IL-22)诱导的人永生化角质形成细胞株(Ha Ca T细胞株)分泌CCL20的影响,探讨麻黄-桂枝药对治疗银屑病的可能作用机制,从而为汗法治疗银屑病提供科学的理论依据。方法:用IL-22刺激Ha Ca T细胞,并加入不同浓度的麻黄-桂枝药对水煎液共培养适当时间,运用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测Ha Ca T细胞分泌的CCL20;运用实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定Ha Ca T细胞CCL20mRNA的表达。结果:IL-22能明显促进Ha Ca T细胞分泌CCL20并使CCL20mRNA的表达增加。麻黄-桂枝药对能够抑制IL-22诱导的Ha Ca T细胞分泌CCL20及表达CCL20mRNA,并与其药物浓度成依赖性关系。结论:麻黄-桂枝药对可能是通过抑制角质形成细胞分泌CCL20从而治疗银屑病。     

逍遥散对应激大鼠海马神经元内Ca~(2+)浓度及NR_1 mRNA表达的影响

目的:研究逍遥散对慢性应激大鼠海马神经元内Ca2+浓度及NR1 mRNA表达的影响,探讨逍遥散对应激损伤学习记忆保护的作用机制。方法:采用慢性多相性应激大鼠模型,以Fura-2负载及荧光分光光度计检测大鼠海马突触体内Ca2+浓度,RT-PCR法检测海马神经元内NR1 mRNA表达的变化。结果:模型组大鼠海马突触体内Ca2+浓度及NR1 mRNA表达均明显上升(P0.01),而与模型组比较,逍遥散组大鼠突触体内Ca2+浓度及NR1 mRNA表达明显回落(P0.05,P0.01)。结论:抑制慢性应激所导致的大鼠海马神经元内NR1 mRNA的过度表达,减少神经细胞膜上NR的数量,从而减轻慢性应激状态下海马神经元内Ca2+超载所致的细胞毒性损伤。这可能是逍遥散抗应激损伤的关键机制。