芪麝颈康方对兔退变颈椎骨赘形成部位碱性磷酸酶活性的影响

目的；观察芪麝颈康方对退变颈椎骨赘形成部位碱性磷酸酶活性的影响。方法：选用１０月龄新西兰兔，通过切除动态Ｃ２－Ｃ７棘上韧带，棘间韧带和分离椎旁两侧肌肉，建立颈椎退行性改变物动物模型。组织学观察颈椎椎体骨赘形成的部位，采用生物化学法分别检测颈椎间盘中软骨终板，髓核和纤维环中碱性磷酸酶的活性。结果：证实骨赘来源于软骨终板，中药组退变椎间盘软骨终板中磷酸酶的活性明显低于模型组。结论：芪麝颈康方可降低骨赘     

针刀干预对颈椎病兔软骨终板整合素β1-FAK力学信号通路的影响

目的观察针刀干预对颈椎病兔软骨终板整合素β1-FAK力学信号通路相关因子整合素β1、磷酸化黏着斑激酶(p-FAK)mRNA和蛋白表达的影响,探讨针刀在延缓椎间盘退变恢复颈椎力学平衡过程中的可能作用机制。方法将40只新西兰雄性兔随机分为空白组、模型组、电针组及针刀组,每组10只,空白组不做干预处理,其余建立颈椎病动物模型,持续12周。造模成功后电针组于兔颈肌两侧"天柱""颈百劳""大杼"穴处行毫针干预,隔天治疗1次,每周3次,共3周;针刀组于兔颈肌硬结、条索以及棘突等处行针刀干预,每周1次,共3次。干预结束后1周,采用实时荧光定量PCR法检测椎间盘软骨终板整合素β1、p-FAK的mRNA表达水平,采用Western Blot技术检测椎间盘软骨终板整合素β1、p-FAK的蛋白含量。结果与空白组相比,模型组软骨终板整合素β1 mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.01),软骨终板p-FAK蛋白表达水平升高(P<0.05)。与模型组相比,电针组软骨终板整合素β1、p-FAK蛋白表达水平均升高(P<0.05)。针刀组软骨终板整合素β1、p-FAK mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.01)。与电针组相比,针刀组软骨终板p-FAK mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论针刀干预可调节软骨终板整合素β1、p-FAK mRNA和蛋白表达,这可能是针刀减缓椎间盘退变,重建颈椎力学平衡,治疗颈椎病的作用机制之一。     

中西药与基因治疗家兔退变颈椎间盘对软骨终板钙化影响的研究

目的了解家兔颈椎软骨终板钙化与颈椎间盘退变的关系,探讨抗骨增生胶囊与葡立胶囊联合应用及基因治疗退变颈椎间盘对软骨终板钙化有无抑制作用。方法选用35只4月龄新西兰兔,建立家兔颈椎动力平衡失调模型,诱导颈椎间盘退变（正常对照组不作处理）。术后7个月,药物治疗组（浅层、全层）给予抗骨增生胶囊和葡立胶囊（剂量按体重折算）,灌胃2次／日,连用1个月,基因治疗组则将带有转化生长因子β1（TGF-β1）基因的重组质粒DNA注入C2-3、C4—5椎间盘中（每个椎间盘用量为20μl）。1个月后用耳缘静脉气栓法处死各组动物,切取C4-5椎间盘（包括上、下部分椎体）,在形态学上评定颈椎间盘退变程度,测定各组动物颈椎软骨终板钙化层厚度,进行组间比较。结果模型浅层组、模型全层组与正常对照组比较,颈椎软骨终板钙化层明显增厚,有统计学差异,而抗骨增生胶囊与葡立胶囊联合应用、基因治疗退变颈椎间盘对软骨终板钙化有明显抑制作用（P〈0．05）。结论软骨终板钙化是颈椎间盘退变的始动因素,二者呈高度正相关。抗骨增生胶囊与葡立胶囊联合应用及基因治疗退变颈椎间盘对软骨终板钙化有明显的抑制作用。     

基因治疗兔颈椎间盘软骨终板钙化的实验研究

目的探讨基因治疗退变颈椎间盘软骨终板钙化的效果。方法选用25只4个月龄新西兰免,分为正常对照组、模型浅层组、模型深层组、基因浅层组、基因深层组,每组5只。除正常对照组外,余建立家兔颈椎动力平衡失调模型组,诱导颈椎间盘退变。术后7个月。基因组将带有转化生长因子β1(TGF-β1)基因的重组质粒DNA注入C2-3、C3-4、C4-5椎间盘中,每个椎间盘用量为20μL。1个月后用耳缘静脉气栓法处死各组动物,切取C4-5椎间盘(包括上、下部分椎体),在形态学上评定颈椎间盘退变程度,测定各组动物颈椎软骨终板钙化层厚度,进行组间比较。结果模型浅层组、模型全层组与正常对照组比较,颈椎软骨终板钙化层明显增厚(P<0.01),而基因组软骨终板钙化明显抑制(P<0.05)。结论软骨终板钙化是颈椎间盘退变的始动因素,二者呈高度正相关。基因治疗退变颈椎间盘对软骨终板钙化有明显的抑制作用。     

异常应力干预对兔颈软骨终板超微结构影响的实验研究

目的:观察异常应力干预对兔颈软骨终板超微结构的影响。方法:采用屈颈固定的方法,建立实验性兔颈椎间盘退变模型,20只成年新西兰大白兔随机分为正常对照组与模型组,于3个月后处死动物,应用透射电镜观察异常应力对兔颈软骨终板超微结构的影响。结果:正常对照组中软骨终板显示大量呈椭圆形的正常软骨细胞结构,空泡变性细胞少见,胶原纤维排列紧密整齐;模型组中软骨终板显示空泡变性软骨细胞数目增多,出现大量固缩软骨细胞,甚至溶解消失,胶原纤维排列极不规整,甚为松散,出现大量胶原溶解。结论:通过影响软骨终板营养途径,可能是异常应力干预引起或加剧椎间盘退变的主要机制之一。     

颈复康冲剂对异常应力环境兔颈椎软骨终板蛋白聚糖变化的影响

软骨终板退变是颈椎间盘退变的启动和促进因素。终板基质蛋白聚糖 (Proteoglycan,PG)含量和成分改变是其退变过程中最早出现的生化改变之一 ,并可极大地影响颈椎的生物力学性能 ,促进椎间盘的退变 [1 ,2 ] 。有研究发现 ,颈椎长时间处于低头屈曲位异常应力环境能促进颈椎局部骨和软组织的退变 ,导致颈椎病的发生 [3]。本实验模拟该方法 ,动态观察了长时间低头屈曲位异常力学环境下颈椎间盘软骨终板 PG含量及组分的变化 ,及不同时期颈复康冲剂防治的影响 ,为中医药防治颈椎病的研究提供实验依据和临床指导。1　材料与方法1.1　主要试剂与仪…     

手法对实验性退变兔颈软骨终板超微结构的影响

为观察手法干预对实验性退变兔颈软骨终板中软骨细胞和胶原的影响。选25只成年新西兰家兔建立颈椎间盘退变模型并随机分为正常对照组、模型组、手法预防组、手法治疗组,应用透射电镜观察手法干预对实验性退变兔颈软骨终板中软骨细胞和胶原的影响。结果模型组软骨终板中出现大量的空泡变性软骨细胞及固缩软骨细胞,甚至溶解消失;胶原纤维排列极不规整,甚为松散,出现大量胶原溶解等病变。手法干预(手法预防组、手法治疗组)能不同程度地延缓软骨终板中软骨细胞和胶原的上述病变,并且手法早期干预的效果优于晚期干预。提示改善软骨终板营养可能是手法防治椎间盘退变的主要途径之一。     

补阳还五汤对兔退变椎间盘软骨终板Fas/FasL表达的影响

目的：观察补阳还五汤对兔退变椎间盘软骨终板凋亡基因Fas/FasL表达的影响,探讨其对椎间盘退变的防治作用。方法：参照文献＂异常应力负荷及椎间失稳法＂建立兔腰椎间盘退变模型,并用病理切片确认造模是否成功。将造模后兔随机分成模型组和治疗组,分别予生理盐水和补阳还五汤治疗;治疗后1、2月各处死4只兔取腰4/5椎间盘下位软骨终板,RT-PCR测定其中Fas/FasL的表达水平。结果：造模后2个月,椎间盘病理切片见纤维环结构破坏、髓核突出,证明造模成功。模型组软骨终板内Fas/FasL的表达逐渐增强,治疗组软骨终板内Fas/FasL的表达逐渐减少;与模型的比较具有显著差异（P〈0.05）。结论：补阳还五汤具有防治椎间盘退变的作用,抑制Fas/FasL基因在退变椎间盘软骨终板中的过度表达,抑制软骨终板内细胞凋亡是部分作用机制。     

颈椎定位旋转扳法对不同曲度颈椎内部结构应力的影响

目的:观察颈椎定位旋转扳法对不同曲度颈椎内部结构应力的影响。方法:基于可靠的正常颈椎有限元模型(正常模型),结合1例颈椎曲度变直患者和1例颈椎反弓患者的颈椎CT图像,建立曲度变直颈椎有限元模型(变直模型)和反弓颈椎有限元模型(反弓模型)。模拟右侧颈椎定位旋转扳法,分别加载于正常模型、变直模型和反弓模型,观察3种模型椎间盘、韧带、关节软骨和终板的应力特征。结果:(1)颈椎椎间盘应力分布。正常模型椎间盘应力主要集中于C_(6~7)和C_7T_1椎间盘右侧纤维环,变直模型椎间盘应力主要集中于C_(2~3)椎间盘左侧纤维环,反弓模型椎间盘应力主要集中于C_(2~3)、C_(3~4)、C_(4~5)椎间盘右侧纤维环;3种模型椎间盘最高应力均集中于下段颈椎椎间盘纤维环,其中正常模型最高应力集中于C_6~C_7右侧钩椎关节处,变直模型和反弓模型最高应力集中区域分别为C_7~T_1左侧钩椎关节处和C_5~C_6左侧钩椎关节处;反弓模型椎间盘最高应力值最大,变直模型次之,正常模型最小。(2)颈椎主要韧带应力分布。正常模型韧带应力主要集中于C_2~C_3、C_3~C_4、C_4~C_5双侧关节囊韧带及横韧带,最高应力集中于C_3~C_4右侧关节囊韧带;变直模型韧带应力主要集中于寰枕后韧带、前纵韧带(寰枕节段)、横韧带,最高应力集中于齿突尖韧带;反弓模型韧带应力主要集中于下颈段右侧关节囊韧带、上颈段左侧关节囊韧带、横韧带,最高应力集中于寰枕后韧带。(3)颈椎关节软骨应力分布。3种模型关节软骨应力均主要集中于寰枕关节两侧,最高应力均集中于寰枢关节软骨,正常模型和反弓模型应力主要集中区域、最高应力集中区域位于右侧,变直模型应力主要集中区域、最高应力集中区域位于左侧;反弓模型关节软骨最高应力值最大,变直模型次之,正常模型最小。(4)颈椎终板应力分布。正常模型、变直模型、反弓模型终板应力主要集中部位分别为C_2下终板、C_3下终板和C_4上终板;正常模型终板最高应力集中于C_3上终板左前部,变直模型和反弓模型终板最高应力均集中于C_3上终板后部。结论:在颈椎定位旋转扳法作用下,不同曲度颈椎内部结构应力集中部位及大小均不同。     

针刺对颈椎间盘退变大鼠颈椎软骨终板结构及交界面血管芽的影响

目的观察针刺对颈椎间盘退变大鼠颈椎软骨终板结构及交界面血管芽的影响。方法将60只SD雄性大鼠随机分为3组,空白组、模型组及针刺组,每组各20只。除空白组外,模型组及针刺组均建立颈椎间盘退变模型。针刺组采用电针治疗,其余2组不做处理。治疗3个疗程后,处死全部大鼠,对大鼠进行组织学观察,并观察软骨终板钙化层、非钙化层厚度,以及交界面血管芽数量。结果模型组软骨终板交界面血管芽数量较空白组减少(P0.01),说明造模成功;针刺组软骨终板交界面血管芽数量较模型组增加(P0.05)。模型组大鼠软骨终板钙化层厚度高于空白组(P0.05),非钙化层厚度低于空白组(P0.05),说明造模成功。针刺组大鼠软骨终板钙化层厚度低于模型组(P0.05),非钙化层厚度高于模型组(P0.01)。结论针刺可延缓颈椎间盘退变大鼠颈椎软骨终板钙化,减轻软骨终板钙化程度,增加血管芽数量,提高髓核营养供应,起到缓解疼痛、延缓椎间盘退变的作用。     

慢性神经根型颈椎病动物模型的建立

[目的]通过模拟慢性颈椎间盘退变及关节突关节双重退变,建立慢性神经根型颈椎病的动物模型。[方法]将48只SD大鼠分层随机分为两组:模型组、假手术组。观察大鼠行为学变化,并分别于术前1 d、术后29 d拍颈椎X线片侧位片,观察椎间盘退变的情况;术前1 h、术后29 d后分别测定右侧臂丛神经的感觉神经传导速度和运动神经传导速度;记录神经电生理变化。[结果]该模型可以出现明显椎间盘变化及神经功能传导损伤的变化。[结论]模拟慢性颈椎间盘退变及关节突关节双重退变的动物模型可以对神经根型颈椎病(慢性期)加以反映。     

颈复康颗粒对颈椎动静力失衡大鼠颈椎间盘形态学改变的影响

目的 观察颈复康颗粒对颈椎动静力失衡大鼠颈椎间盘形态学改变的影响.方法 将SD雄性大鼠随机分成对照组、模型组、颈复康颗粒组、莫比可组各12只,建立动静力失衡性大鼠颈椎间盘退变模型,给药4周后每组取4个标本2张连续切片,观察组织病理学改变,测量软骨终板非钙化层与钙化层厚度比值、软骨终板内血管芽数量,检测各组退变椎间盘血管内皮细胞生长因子(VEGF)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)、转化生长因子β(TGF-β)表达.结果与对照组比较,模型组大鼠颈椎间盘出现退行性改变,软骨与椎体交界面血管芽数量减少,软骨终板非钙化层与钙化层比值下降,大鼠颈椎间盘中VEGF表达增加、IGF-1和TGF-β表达下降(P＜0.01);与模型组比较,颈复康颗粒组血管芽数量增加(P＜0.01),颈复康颗粒组及莫比可组椎间盘组织形态学改善(P＜0.01或P%0.05),软骨终板非钙化与钙化层厚度比值增加(P＜0.01),大鼠颈椎间盘中VEGF表达下降、IGF-1和TGF-β表达增加(P＜0.01).结论 颈复康颗粒通过调节细胞因子VEGF、IGF-1、TGF-β的表达,改善大鼠颈椎间盘退变模型形态学的表现,从而减少椎间盘细胞外基质降解,延缓椎间盘退变.     

无创兔颈椎间盘退变动物模型的实验研究

目的:设计一种无创颈椎间盘退变动物模型的制备方法并验证其可行性,为防治颈椎病研究提供动物模型和实验依据。方法:20只日本大耳白兔随机分为模型组和对照组,每组10只。模型组采用特制的固定布套将兔颈部固定于屈曲60°位,4h/d;对照组兔戴上布套,允许其颈椎自由活动。在造模后3月,每组10只大耳白兔,麻醉及处死后行:①X线观察放射影像学变化;②光镜、电镜下观察组织形态学变化。比较组间的差异性。结果:模型组颈椎间盘间隙稍狭窄、椎体边缘有骨质增生,出现软骨细胞变性、坏死,髓核皱缩,纤维环胶原纤维变性、排列紊乱等组织形态学改变;对照组颈椎间盘组织形态无明显变化。结论:本造模法符合人椎间盘退变的客观规律,操作简便易行,造模效果确切(较长时间处于异常应力环境下能使兔颈椎间盘组织形态、基质生化成分发生明显退行性改变),且对所观察椎间盘无直接干扰,有利于对椎间盘退变的防治进行深入研究。     

387例颈椎病的中医临床证型与X线表现对照

颈椎病的分型有六种,即落枕型、痹痛型、眩晕型、五官型、痿证型和其它型。本文通过对387例颈椎病患者颈椎的X线表现进行研究,从颈椎生理弧度的改变、椎体边缘的骨质增生、椎间隙和椎孔的变窄及颈部韧带的钙化五个方面进行观察,发现颈椎病六种中医证型的X线表现分别和西医的颈椎病六种证型的X线表现基本上是一致的,这个结论表明颈椎病的X线检查可为颈椎病的中医临床证型的分型及治疗,提供重要客观依据。     

益气化瘀方调控颈椎间盘细胞基因表达谱的研究

目的：分析正常、退变SD大鼠颈椎间盘基因表达水平的变化，研究益气化瘀方对大鼠退变颈椎间盘基因表达谱的调节作用。方法：建立动、静力失衡性大鼠颈椎间盘退变模型，分别从正常、退变和益气化瘀方组大鼠颈椎间盘中抽提mRNA，经反转录后分别用Cy3、Cy5荧光标记，获得动物椎间盘cDNA的探针，再与512点cDNA基因表达谱芯片杂交，激光扫描仪扫描并进行图像分析、标准化处理、ratio值分析、聚类分析。结果：模型组与对照组比较，共筛选出18条表达有差异的基因，11条基因表达量明显下降(ratio＜0．4)，7条基因表达量明显上升(ratio＞2．5)。益气化瘀方与模型组比较，共筛选出22条表达有差异的基因，益气化瘀方上调18条基因(ratio＞2．5)，下调4条基因(ratio＜0．4)。其中在上述检测中表达最明显的是信号传导类基因，益气化瘀方能够上调多数细胞信号传导类基因(如PTK等)。结论：初步筛选出大鼠迟变椎间盘中相关基因，与已报道基因在颈椎间盘退变的表达模式类似，说明大鼠椎间盘退变受到各种基因的调控，初步阐明了颈椎病在基因水平上的发病机理。益气化瘀方参与了椎间盘细胞内相关基因的调控，参与椎间盘细胞内外的信号传导过程，从基因表达角度解释了中药治疗颈椎病的药效机理，丰富了中医气血理论。     

针刀治疗颈椎椎间盘退变引起神经根型颈椎病的临床研究

神经根型颈椎病是由于颈椎间盘退变，引起单侧或双侧脊神经根受刺激或压迫所致。近年来对颈椎病的大规模流行病学调查和颈椎的生物力学研究显示：异常生物力学因素是促进颈椎间盘退变的主要因素之一，颈椎病的发生与人类颈椎长时间处于异常应力环境有关。其中力学因素在椎间盘退变过程中起关健作用。针对神经根型颈椎病这一主要发病机制，结合人体解剖学特点、生物力学理论以及针刀这一新型医疗工具优势，本文提出了针刀治疗该病的新思路与新方法。并对辅助方法及治疗注意事项作了相关说明。     

人工麝香对退变颈椎间盘中免疫球蛋白的含量影响

方法：实验选用15只新西兰兔,分为3组,每组5只,分别为颈椎间盘退变组、颈椎间盘退变加人工麝香饲养组和正常对照组。通过切除动物颈棘上及棘间韧带和分离颈椎旁两侧肌肉,造成颈椎力学上的失衡而诱导了兔的颈椎间盘退行性变化。在术后8月时,杀死动物．取动物颈椎间盘组织,用单向环状免疫扩散技术测定其中IgG及IgM含量。结果：退变颈椎间盘中IgG含量明显升高;人工麝香具有显著降低退变颈椎间盘中IgG的作用,IgM与颈椎间盘退变无关。