散结通脉方对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化主动脉钙库操纵性钙通道信号分子及血清炎症因子的影响

目的研究散结通脉方对ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化模型血清中炎症因子含量及主动脉根部Orai1、STIM1蛋白表达的影响。方法采用高脂饲料(2%胆固醇、0.4%胆酸盐、10%脂肪、69.6%普通饲料)喂养ApoE~(-/-)小鼠12周建立动脉粥样硬化斑块模型,造模同时灌胃给予供试药品混悬液治疗。给药周期结束,检测各组动物血清TC、TG、HDL-cho、LDL-cho含量及TC/HDL-cho比值;血清hs-CRP、E-selectin、IL-6含量;主动脉根部STIM1、Orai1蛋白表达。结果散结通脉方13.5、6.75和3.40 g/kg 3个给药组具有明显降低模型动物血清TC、TG和LDL-cho的作用,与动脉粥样硬化模型组比较,分别为P0.01或P0.05;13.5 g/kg剂量组血清E-selectin、IL-6水平明显低于模型组,具有统计学差异(P0.05);13.5、6.75 g/kg 2个剂量组主动脉根部Orai1、STIM1蛋白表达及血清中hs-CRP水平均明显低于模型组,具有统计学差异(P0.01或P0.05);3.40 g/kg剂量组主动脉根部Orai1蛋白表达明显低于模型组,具有统计学差异(P0.05)。结论散结通脉方可以通过下调钙离子信号蛋白的表达抑制血管平滑肌细胞增殖迁移,并通过发挥调脂、抗炎等多种效应,对动脉粥样硬化发生发展过程中多因素多环节起到调节作用,进而延缓甚或逆转不稳定斑块的病理进程。     

瓜蒌薤白半夏汤调节Apoe~(-/-)小鼠动脉粥样硬化的疗效与机制研究

目的:研究瓜蒌薤白半夏汤(GXBD)对载脂蛋白e基因敲除小鼠(Apoe~(-/-)小鼠)动脉粥样硬化(AS)模型的血脂及血清一氧化氮(NO)、内皮素1(ET-1)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)的影响,并探讨瓜蒌薤白半夏汤防治动脉粥样硬化(AS)可能的机制。方法:健康雄性Apoe~(-/-)小鼠,高脂饲料12周,建立AS模型,随机分为模型对照组(0.3 mL/10 g蒸馏水)、GXBD组(19.2 g·kg~(-1)·d~(-1))、辛伐他汀组(3.03 mg·kg~(-1)·d~(-1));同遗传背景C57BL/6J小鼠作为正常对照组(0.3 mL/10 g蒸馏水),每组10只,持续干预10周,末次给药24 h后检测血清低密度脂蛋白(LDLC)、高密度脂蛋白(HDLC)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG),血清一氧化氮(NO)、内皮素1(ET-1)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)的浓度;分离主动脉进行油红O染色,测量斑块面积与血管腔面积比(PA/LA);主动脉根部石蜡包埋切片,HE染色,观察主动脉组织结构的病理变化。结果:与空白对照组相比模型对照组TC、TG、LDL-C明显升高(P0.01),HDLC明显降低(P0.01),GXBD组TC、LDL-C水平较模型组显著降低(P0.01),TG有降低趋势(P0.05),HDL-C水平较模型组升高,差异有统计学意义(P0.05)。与模型对照组相比,GXBD组PA/LA显著降低(P0.01),且血清NO显著升高(P0.01),AngⅡ、ET-1、ox-LDL显著降低(P0.01)。结论:瓜蒌薤白半夏汤能够有效改善高脂饲料喂养的Apoe~(-/-)小鼠血脂水平,并减少主动脉斑块的面积,其机制可能与改善血脂水平,升高NO的表达,抑制AngⅡ、ET-1、ox-LDL的表达有关。     

景虎通脉方抗ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化的作用机制研究

目的探讨景虎通脉方对ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化(AS)斑块及炎性因子的作用及机制。方法 SPF级ApoE~(-/-)小鼠高脂饲养8周后建立AS模型,随机分为模型组、阳性药物组及景虎通脉方高、中、低剂量组(18.20、9.10、4.55 g/kg),C57BL/6/J小鼠为正常组。给药8周后HE和Masson染色观察主动脉斑块情况;ELISA检测血清TNF-α、IL-1β、IL-6及检测血脂4项;免疫组化和Western blot检测主动脉Toll样受体4(TLR4)和核受体77(Nur77)表达;基因芯片杂交技术筛选差异基因进行KEGG通路富集分析。结果与模型组比较,景虎通脉方各剂量组能不同程度减低血清TC、TG、LDL-C水平,增加HDL-C水平(P0.05,P0.01);HE和Masson染色观察景虎通脉方各剂量组显著减少斑块面积,增加斑块内胶原纤维表达(P0.01);ELISA检测景虎通脉方各剂量组可减低IL-1β、TNF-α、IL-6水平(P0.01);免疫组化和Western blot显示景虎通脉方各剂量组降低TLR4表达,增加Nur77表达;miRNA芯片结果显示49个miRNA差异显著,经KEGG分析显示其作用与包括Axon guidance及TLR4下游在内的多条通路相关。结论景虎通脉方可明显减少AS小鼠主动脉斑块面积,其机制可能与其调节血脂、减低炎症因子、干预Nur77和TLR4蛋白及包括Axon guidance在内的多条通路相关。     

益肾降浊化瘀方及其拆方对肾间质纤维化大鼠TNF-α及IL-8表达的影响

目的:观察益肾降浊化瘀方及其拆方对腺嘌呤致肾间质纤维化模型大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-8(IL-8)表达的影响,探讨益肾降浊化瘀方对肾间质纤维化的作用机制。方法:将SPF级雄性SD大鼠70只分正常组,模型组,尿毒清组,全方组,拆方1组,拆方2组,拆方3组,除正常组比较,用腺嘌呤ig法制作肾间质纤维化模型。正常组,模型组予生理盐水(10 m L·kg~(-1)·d~(-1)),尿毒清组(2.5 g·kg~(-1)·d~(-1)),全方组(20.2 g·kg~(-1)·d~(-1)),拆方1,2,3组(11,8.2,7.9 g·kg~(-1)·d~(-1))。给药4周后,酶联免疫吸附法(Elisa法)检测血清TNF-α,IL-8含量,免疫组织化学法检测肾组织中TNF-α,IL-8蛋白水平。结果:与正常组比较,模型组TNF-α和IL-8在血清和肾组织中含量明显升高(P0.05);与模型组比较,全方组、拆方1组、拆方2组、拆方3组血清和肾组织TNF-α,IL-8含量明显降低(P0.05),其中全方组肾组织TNF-α,IL-8蛋白表达和血清TNF-α,IL-8含量明显低于各拆方组(P0.05)。结论:益肾降浊化瘀方全方组及其拆方1组、拆方2组、拆方3组均能下调TNF-α,IL-8的表达,其中以益肾降浊化瘀方全方组作用最显著。     

散结通脉方对脂质代谢相关蛋白表达及动脉粥样硬化的影响

目的 观察散结通脉方通过调节脂质代谢相关蛋白表达发挥抗动脉粥样硬化的作用机制。方法 将10只C57BL/6Cnc小鼠作为空白组，50只ApoE^-/-小鼠随机分为模型组，阿托伐他汀组，散结通脉方低、中、高剂量组。空白组给予普通饲料喂养，其余各组给予高脂饲料喂养，并建立动脉粥样硬化模型。各组灌胃处理4周后，进行全自动生化分析仪检测血清血脂，HE染色观察小鼠主动脉斑块病理情况，免疫组化法及RT-PCR法检测小鼠主动脉斑块组织中脂质代谢蛋白ABCA1、ABCG1、CD36、SR-A1表达情况。结果 给予不同剂量散结通脉方干预后，各组小鼠血脂水平均有不同程度改善，其中散结通脉方高剂量组中TC、TG、LDL-C的水平明显下降(P <0.05,P <0.01),HDL-C水平明显升高(P <0.01)。HE染色结果显示，散结通脉方可以减少主动脉斑块大小，改善内膜病变，减少巨噬细胞、泡沫细胞等浸润。免疫组化法及RT-PCR法结果显示，散结通脉方高剂量组可以明显上调ABCA1、ABCG1蛋白及m RNA的表达(P <0.05,P <0.01)，下调CD...     

葛根素降低ApoE-/-小鼠visfatin表达抑制动脉粥样硬化形成的研究

目的观察葛根素对载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠主动脉粥样硬化(AS)病变、血脂水平、内脏脂肪素(visfatin)及炎症因子IL-6及TNF-α表达的影响。方法 50只SPF级8周龄雄性Apo E-/-小鼠予高脂饲料喂养随机分为5组:葛根素低、中、高剂量组分别给予葛根素300,600,1200 mg·kg-1·d-1灌胃;辛伐他汀组灌服辛伐他汀5 mg·kg-1·d-1;模型组灌服等剂量生理盐水。另设10只相同基因背景和周龄的雄性C57BL/6J小鼠为对照组予普通饲料喂养。16周后测小鼠体质量、血清脂质及visfatin、血浆IL-6及TNF-α含量;HE染色观察小鼠主动脉组织AS斑块面积;western blotting测小鼠主动脉visfatin蛋白的表达。结果各给药组小鼠体质量增加值、血清visfatin、TG、TC、LDL-C水平、血浆IL-6及TNF-α含量、主动脉visfatin蛋白表达均显著低于模型组(P0.05),血清HDL-C高于模型组(P0.05);辛伐他汀组、葛根素中、高剂量组小鼠主动脉AS斑块面积百分比显著低于模型组(P0.05)。结论葛根素可通过降血脂、减小AS斑块面积、降低IL-6及TNF-α含量等发挥抗AS效应,其机制可能与降低visfatin表达有关。     

黄连素降低ApoE-/-小鼠内脏脂肪素表达

目的:观察黄连素(Ber)对载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠主动脉粥样硬化(AS)病变、内脏脂肪素(visfatin)及炎症因子表达的影响。方法:50只SPF级8周龄雄性Apo E-/-小鼠予高脂饲料喂养随机分为5组:Ber低、中、高剂量组分别ip给予Ber 2.5,5,7.5 mg·kg-1·d-1;辛伐他汀组ig辛伐他汀5 mg·kg-1·d-1;模型组ig等量生理盐水。另设10只相同基因背景和周龄的雄性C57BL/6J小鼠为对照组予普通饲料喂养。16周后测小鼠体重、血清脂质及visfatin,血浆白介素(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;HE染色观察小鼠主动脉组织AS斑块面积;免疫组化法测AS斑块内visfatin的表达;Western blotting测小鼠主动脉visfatin蛋白的表达。结果:小鼠体重增加值,血清visfatin,总胆固醇(TG),三酰甘油(TC),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,血浆IL-6及TNF-α含量,主动脉visfatin蛋白表达方面,模型组均显著高于对照组(P0.05),各给药组均显著低于模型组(P0.05);辛伐他汀组,Ber中、高剂量组小鼠主动脉AS斑块面积比显著低于模型组(P0.05)。结论:Ber可通过降血脂、减小AS斑块面积、降低IL-6及TNF-α含量等发挥抗AS效应,其机制可能与降低visfatin表达有关。     

化瘀祛痰方对ApoE-/-小鼠主动脉MAPK信号通路相关蛋白表达的影响

目的:探讨载脂蛋白敲除(Apoe-/-)小鼠主动脉丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关mRNA的表达变化及化瘀祛痰方药对其的干预作用,探讨化瘀祛痰方药抗AS作用及可能的机制。方法:50只Apo E-/-小鼠随机分为模型组,丹参酮ⅡA组(30 mg·kg~(-1)·d~(-1)),化瘀祛痰高剂量组(20 g·kg~(-1)·d~(-1)),化瘀祛痰中剂量组(10 g·kg~(-1)·d~(-1)),化瘀祛痰低剂量组(5 g·kg~(-1)·d~(-1)),10只C57BL/6/J小鼠作为正常组。全自动生化仪检测血清甘油三酯(triglyceride,TG),胆固醇(cholesterol,TC),高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C),低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)的含量;苏木素-伊红(HE)检测各组小鼠主动脉斑块情况;油红O检测各组小鼠肝脏脂质沉积情况;酶联免疫吸附测定(ELISA)测定各组小鼠血清中血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion protein 1,VCAM-1),细胞间黏附分子-1(ICAM-1),白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠主动脉c-Jun氨基末端激酶(c-Jun n-terminal kinase,JNK),磷酸化c-Jun氨基末端激酶(phosphorylated c-Jun N-terminal kinase,p-JNK),p38 MAPK,p-p38 MAPK,细胞外调节激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK),磷酸化细胞外调节激酶(extracellular regulated protein kinases,p-ERK)蛋白的表达变化。结果:与正常组比较,模型组小鼠血清TC,TG,LDL-C水平明显升高,HDL-C水平明显降低;主动脉管腔见较大粥样斑块,肝细胞中见大量脂质沉积;血清内相关炎性因子TNF-α,IL-6,VCAM-1,ICAM-1含量增加;血管内相关MAPK信号通路p-p38,p-JNK蛋白表达明显增加(P0.05)。与模型组比较,丹参酮ⅡA组与化瘀祛痰各组小鼠TC,TG,LDL-C明显下降,HDL-C明显升高,主动脉管腔中粥样斑块面积和肝脏脂质沉积量明显减少,血清内相关炎性因子TNF-α,IL-6,VCAM-1,ICAM-1含量降低(P0.05);血管内相关MAPK信号通路p-p38,p-JNK蛋白表达明显降低(P0.05),p-ERK表达趋势不明显。结论:化瘀祛痰方药可抑制Apo E-/-小鼠主动脉斑块形成,其机制可能与调控血管MAPK信号通路基因表达有关。     

定心方降低脂质运载蛋白-2表达抑制ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化形成的研究

目的探讨定心方对动脉粥样硬化(AS)小鼠的防治作用及其机制。方法 50只载脂蛋白E基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠喂食高脂饲料并随机分为5组:定心方低、中、高剂量组分别给予定心方(DXR)9.375,18.75,37.5 g/(kg·d)灌胃;辛伐他汀组予辛伐他汀5 mg/(kg·d)灌胃;模型组予等剂量生理盐水。另设10只C57BL/6J小鼠喂食普通饲料为对照组。14周后测小鼠血清脂质运载蛋白-2(LCN-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及白细胞介素-6(IL-6)水平;HE染色观察主动脉组织病理形态学改变;Western blot检测主动脉LCN-2蛋白表达。结果DXR中、高剂量组及辛伐他汀组小鼠血清LCN-2、TNF-α、MCP-1及IL-6水平、主动脉LCN-2蛋白表达及主动脉AS斑块面积均显著低于模型组(P0.05或P0.01)。结论 DXR可能通过降低LCN-2表达,抑制炎症反应,显著减轻ApoE~(-/-)小鼠AS病变。     

定心方通过上调CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞表达对PM2.5所致动脉粥样硬化的影响

目的:观察定心方(DXR)在小鼠吸入PM2.5所致动脉粥样硬化(AS)过程中对CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞(CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs)表达调控的影响。方法:50只载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠喂食高脂饲料并吸入严重污染的自然空气,随机分为5组,DXR低、中、高剂量组分别灌胃DXR 9.29,18.59,37.18 g·kg~(-1)·d~(-1);辛伐他汀组灌胃辛伐他汀5 mg·kg~(-1)·d~(-1);模型组灌胃等剂量生理盐水;10只C57BL/6J小鼠喂食普通饲料吸入过滤空气设为正常组。16周后检测小鼠血清脂质、酶联免疫吸附测定测定(ELISA)检测白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素~(-1)0(IL~(-1)0)及转化生长因子-β(TGF-β)水平;流式细胞法检测脾脏CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs数量;苏木素-伊红(HE)染色观察主动脉AS斑块形态学变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测主动脉AS斑块Foxp3蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠主动脉AS斑块形成,血清脂质,IL-6及TNF-α水平明显升高,IL~(-1)0及TGF-β水平明显降低,CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs数量明显减少,Foxp3蛋白表达明显降低(P0.05);与模型组比较,辛伐他汀组,DXR中、高剂量组小鼠AS斑块面积明显减小,血清脂质,IL-6及TNF-α水平明显降低,IL~(-1)0及TGF-β水平明显升高,CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs数量明显增加,Foxp3蛋白表达明显增加(P0.05)。结论:DXR可通过上调CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs表达发挥抗PM2.5所致AS功效。     

丹参酮ⅡA对动脉粥样硬化小鼠脂质运载蛋白-2表达的干预研究

目的:探讨丹参酮ⅡA对动脉粥样硬化(AS)小鼠脂质运载蛋白-2(LCN-2)表达的干预作用。方法:将50只载脂蛋白E基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠喂食高脂饲料并随机分为5组:丹参酮ⅡA低、中、高剂量组分别给予丹参酮ⅡA灌胃(7.5,15,30 mg·kg~(-1)·d~(-1));辛伐他汀组予辛伐他汀5 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃;模型组予等剂量生理盐水。另设10只C57BL/6J小鼠喂食普通饲料为对照组。14周后测小鼠血清LCN-2、白细胞介素-6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;HE染色观察主动脉组织病理形态学改变;Western blot检测主动脉LCN-2蛋白表达。结果:各给药组小鼠血清LCN-2、IL-6、MCP-1及TNF-α水平、主动脉LCN-2蛋白表达均显著低于模型组(P<0.05),辛伐他汀组、丹参酮ⅡA中、高剂量组小鼠主动脉AS斑块面积显著低于模型组(P<0.05)。结论:丹参酮ⅡA可通过降低LCN-2表达,抑制炎症反应,显著减轻ApoE~(-/-)小鼠AS病变。     

铁皮石斛对ApoE-/-小鼠血脂及TNF-α,IL-6的影响

目的:考察铁皮石斛对ApoE-/-小鼠血脂、炎症相关蛋白的影响,探讨其抗动脉粥样硬化的作用机制.方法:将ApoE-/-小鼠以高脂饲喂养4w构建AS小鼠模型,分别用辛伐他汀(3 mg·kg-1)、铁皮石斛(1.5,3 g·kg-1)对小鼠灌胃给药,8w后处死,酶法检测血清血脂;ELISA检测血清中TNF-α,IL-6表达;苏丹Ⅳ染色观察主动脉瓣处斑块形成情况;HE和油红0染色观察小鼠主动脉管腔内粥样斑块;免疫组化法检测TNF-α和IL-6在主动脉壁的表达.结果:铁皮石斛可显著降低小鼠血清中TG,TCHOL,LDL-C水平,下调血清中TNF-α,IL-6表达;可明显减少ApoE-/-小鼠主动瓣处粥样斑块的面积和ApoE-/-小鼠主动脉管腔内粥样斑块的面积,可明显降低TNF-α,IL-6在主动脉内表达.结论:铁皮石斛能有效降低ApoE-/-小鼠血清中有关脂质含量,降低血清和主动脉内TNF-α,iL-6的表达,降低炎症反应的发生,缓解动脉粥样硬化损伤.     

养阴活血解毒方对载脂蛋白E基因敲除动脉粥样硬化小鼠调节性T细胞的影响

目的探讨养阴活血解毒方(YHF)对Apo E基因敲除(Apo E~(-/-))小鼠动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)病变及其外周血调节性T细胞(regulatory T-cell,Treg)的影响。方法 Apo E~(-/-)小鼠随机分为正常组、模型组、YHF高、低剂量组(36,18 mg·kg~(-1))和辛伐他汀组(33 mg·kg~(-1)),除正常组喂食普通饲料之外,其余各组均高脂饮食造模并灌胃给药20周后收集血清及抗凝血,试剂盒检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C);油红O法染色法观察主动脉血管内膜脂质聚积情况;Elisa检测血清IL-10、TGF-β、IL-6、IL-12p70含量;流式细胞术检测外周血中Treg细胞比例变化;用蛋白免疫印迹(Western blot)法分析主动脉组织叉头状螺旋转录因子3(forkhead box protein3,Foxp3)蛋白的表达。结果与模型组相比,YHF低剂量组TG水平降低、HDL-C水平升高,主动脉斑块面积减少,血清IL-10含量升高,IL-6、IL-12p70含量降低,Treg细胞比例升高(P0.05),Foxp3蛋白表达水平显著上调(P0.01);YHF高剂量组TC、TG、LDL-C水平较模型组均显著降低(P0.05,P0.01),HDL-C水平提高,主动脉斑块面积减少,血清IL-10、TGF-β含量升高,IL-6、IL-12p70含量降低,Treg细胞比例升高(P0.05),Foxp3蛋白表达水平显著上调(P0.01)。结论 YHF可以改善高脂饮食诱导的Apo E~(-/-)小鼠脂质代谢异常、减少主动脉粥样斑块面积的同时能够上调Treg细胞的比例以及相关细胞因子(IL-10、TGF-β)的分泌。     

丹蒌片与血府逐瘀颗粒对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块影响的比较研究

目的比较丹蒌片与血府逐瘀颗粒对ApoE基因敲除（ApoE-/-）小鼠动脉粥样硬化（AS）斑块的影响。方法40只雄性ApoE-/-小鼠随机分为正常组、模型组、他汀组、丹蒌组和血府组，每组8只。正常组ApoE-/-小鼠喂食基础饲料12周，余各组均采用高糖高脂饮食制备AS模型。模型组、他汀组、丹蒌组、血府组分别给予生理盐水、阿托伐他汀片混悬液（1.5mg/mL）、丹蒌片混悬液（0.34g/mL）、血府逐瘀颗粒混悬液（0.64g/mL）灌胃干预8周。干预结束后，ELISA检测各组血脂、ox-LDL、内皮素（ET-1）、IL-6及TNF-α含量；油红“O”染色观察主动脉内膜斑块；HE染色观察主动脉病理形态学改变，并计算内膜厚度及斑块面积；透射电镜观察主动脉血管平滑肌细胞（VSMC）超微结构改变。结果与正常组比较，模型组血清TC、TG、LDL-C、ox-LDL、ET-1、IL-6和TNF-α水平升高（P<0.01，P<0.05），HDL-C水平下降（P<0.05），油红“O”染色AS区域脂肪呈鲜红色，形成广泛而典型的AS成熟斑块，HE染色内膜增厚，斑块面积增大，透射电镜下可见VSMC胞浆内肌丝减少，粗面内质网、线粒体等细胞器增多，有较多脂滴形成，呈典型合成型改变；与模型组比较，他汀组和丹蒌组血清TC、TG、LDL-C、ox-LDL、ET-1和IL-6水平下降（P<0.05，P<0.01），HDL-C水平升高（P<0.05），TNF-α有下降趋势，但差异无统计学意义（P>0.05），血府组TC、TG、ox-LDL、ET-1和IL-6水平下降（P<0.05，P<0.01），LDL-C、TNF-α下降及HDL-C升高差异无统计学意义（P>0.05）。油红“O”染色可见各给药组主动脉亦有呈鲜红色的AS斑块，但AS脂肪区域面积明显减小，HE染色可见内膜增厚及斑块面积明显减小，透射电镜下可见各给药组中膜合成型VSMC较模型组明显减少。结论丹蒌片和血府逐瘀颗粒均可降低AS模型ApoE-/-小鼠炎症因子的表达及稳定AS斑块，但丹蒌片调节血脂代谢异常的作用优于血府逐瘀颗粒。     

四妙勇安汤对动脉粥样硬化小鼠动脉血管斑块外膜滋养血管通透性的影响

目的:观察四妙勇安汤对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)易损斑块病理形态及外膜滋养血管(vasa vasorum,VV)通透性的影响,并以VV为靶点探讨其干预机制。方法:采用健康雄性Apo E~(-/-)小鼠,随机分为模型组、四妙勇安汤组(11.7 mg·kg~(-1)·d~(-1))和辛伐他汀组(2.6 mg·kg~(-1)·d~(-1)),给予添加1.1%L-蛋氨酸的高脂饲料喂养;以C57BL/6小鼠作为正常组,喂养8周后进行模型评价,在模型成功基础上,持续药物干预8周,采用油红O染色观察小鼠主动脉的病理形态变化;通过免疫组化染色观察主动脉根部斑块外膜基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9),基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)蛋白的表达情况。结果:油红O染色结果显示,与正常组比较,模型组主动脉血管内壁斑块面积显著增加(P0.01);与模型组比较,辛伐他汀组主动脉内壁斑块面积显著减少(P0.01);四妙勇安汤组主动脉内壁斑块面积明显减少(P0.05)。免疫组化染色结果显示,与正常组比较,模型组小鼠主动脉外膜MMP-9阳性表达面积明显增大(P0.01);与模型组比较,辛伐他汀组与四妙勇安汤组MMP-9阳性表达明显减小(P0.01);与辛伐他汀组比较,四妙勇安汤组MMP-9阳性表达明显减小(P0.01)。结论:四妙勇安汤能减轻小鼠主动脉斑块面积,通过调节MMP-9,TIMP-1的表达,降低斑块外膜VV通透性,稳定易损斑块。     

荷丹片对APOE~(-/-)小鼠氧化应激的影响及对动脉粥样硬化的干预

目的观察荷丹片对APOE~(-/-)小鼠血清中氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)、一氧化氮(NO)、白介素-6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及主动脉ICAM-1表达的影响。方法将50只APOE~(-/-)小鼠随机分为5组,分别为对照组、模型组、荷丹片低剂量组、荷丹片高剂量组、辛伐他汀组。给药12周后全部处死,检测5组血清ox-LDL、NO、IL-6、MCP-1、ICAM-1水平及主动脉ICAM-1表达。结果与对照组相比,模型组血清ox-LDL、IL-6、MCP-1、ICAM-1水平明显升高,NO水平明显降低,主动脉ICAM-1表达上调(P0.01);与模型组相比,荷丹片低剂量组、荷丹片高剂量组、辛伐他汀组血清ox-LDL、IL-6、MCP-1、ICAM-1水平明显降低,NO水平明显升高,主动脉ICAM-1表达下调(P0.01,P0.05)。结论荷丹片可降低APOE~(-/-)小鼠血清ox-LDL、IL-6、MCP-1、ICAM-1水平,升高血清NO水平,下调主动脉ICAM-1表达,从而干预动脉粥样硬化的发生、发展。     

野蔷薇根总黄酮含药血清对ox-LDL诱导HUVEC损伤的保护作用研究

研究野蔷薇根总黄酮(total flavonoids from Rosa multiflora, TF-RM)对氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein, ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞株(human umbilical vein endothelial cells, HUVEC)损伤的影响。SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组、辛伐他汀组(1.8 mg·kg~(-1)·d~(-1))、TF-RM组(2.5 g·kg~(-1)·d~(-1)),每组10只。灌胃给药7 d,腹主动脉取血,分离制备含药血清。采用ox-LDL诱导建立HUVEC损伤模型,分别加入15%辛伐他汀、5%TF-RM、10%TF-RM、15%TF-RM含药血清及空白血清。采用流式细胞术检测细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS),硝酸还原酶法检测上清液一氧化氮(nitric oxide, NO)含量,ELISA法检测上清液内皮素(endothelin, ET-1)、P-选择素、E-选择素、细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1, ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1, VCAM-1)、白细胞介素1β(interleukin-1β, IL-1β)、白细胞介素6(interleukin-6, IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α, TNF-α)含量,Western blot法检测凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1(lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1, Lox-1)蛋白表达。与空白组比较,模型组HUVEC内ROS浓度及上清液ET-1、P-选择素、E-选择素、ICAM-1、VCAM-1、IL-1β含量显著升高(P0.05),上清液NO含量显著降低(P0.01),Lox-1蛋白表达显著增加(P0.05),TNF-α和IL-6有增加趋势。与模型组比较,TF-RM显著降低HUVEC内ROS浓度及上清液ET-1、P-选择素、E-选择素、ICAM-1、TNF-α、IL-1β含量(P0.05),显著升高上清液NO含量(P0.01),明显抑制Lox-1蛋白表达(P0.05),对上清液VCAM-1和IL-6含量有降低趋势。野蔷薇根总黄酮含药血清作用于凝集素样氧化低密度脂蛋白受体,通过减少细胞氧化损伤、调节血管活性物质、降低黏附分子及炎症级联反应发挥对血管内皮细胞的保护作用。     

连豆清脉颗粒对日本大耳白兔AS斑块的干预作用及对PARP-1的影响

目的:研究连豆清脉颗粒对日本大耳白兔动脉粥样硬化(AS)斑块的干预作用及多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1(poly adenosine diphosphate ribose polymerase-1,PARP-1)的影响。方法:取健康清洁级雄性日本大耳白兔40只,随机抽取8只日本大耳白兔为空白组,以标准饲料喂养。其余32只日本大耳白兔采用高脂饲料喂养及牛血清白蛋白静脉注射建立AS斑块模型,成功建模的兔按照随机数字表,随机分成高脂组11只(实验过程中死亡2只)、连豆清脉方组8只,辛伐他汀组8只,分别予以高脂、连豆清脉方药物、辛伐他汀药物饲料喂养,给药剂量为辛伐他汀1 mg·kg~(-1)·d~(-1),连豆清脉方3.7 g·kg~(-1)·d~(-1),8周后,检测兔AS斑块面积,PARP-1阳性表达及Toll样受体-4(Toll like receptor-4,TLR-4)mRNA,核转录因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB),血清白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平。结果:空白组没有出现AS斑块,连豆清脉方组AS斑块明显,但是明显低于高脂组;与空白组比较,连豆清脉方组主动脉AS斑块面积比例,组织PARP-1阳性细胞表达率,TLR-4 mRNA表达,NF-κB及IL-6水平均显著升高(P0.01)。与高脂组比较,连豆清脉方组主动脉AS斑块面积比例,组织PARP-1阳性细胞表达率,TLR-4 mRNA表达,NF-κB及IL-6水平显著下降(P0.01)。结论:连豆清脉方可抑制AS斑块的增生;其机制可能与抑制PARP-1表达等炎症反应有关。     

四妙勇安汤对ApoE~(-/-)动脉粥样硬化小鼠IL-6和MCP-1的影响

目的:研究四妙勇安汤对高脂饲料喂养的ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化炎症反应的干预作用。方法:采用高脂饲料喂养ApoE~(-/-)小鼠14周制备动脉粥样硬化模型,成模后随机分为5组:模型组,阳性药组(阿托伐他汀,2.57 mg·kg~(-1)),四妙勇安汤高剂量组(34.9 g·kg~(-1))、四妙勇安汤中剂量组(23.14 g·kg~(-1))和四妙勇安汤低剂量组(11.61 g·kg~(-1)),分别灌胃给药12周,同时以C57BL/6小鼠为正常对照组,给予去离子水灌胃12周。采用生化仪检测三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量;HE染色观察主动脉血管形态,并测量主动脉内膜厚度(IT)、中膜厚度(MT)、血管管腔面积(LA)、粥样斑块面积(PA)、内中膜厚度比(IT/MT)、管腔狭窄率(PA/LA);采用流式高通量多因子检测技术检测血清中白介素-6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)炎症细胞因子表达。结果:与对照组相比,模型组小鼠血清TC、TG、LDL-C明显提高,HDL-C明显降低,PA、IT及IT/MT明显升高(P0.01)。与模型组比较,四妙勇安汤能够明显降低ApoE~(-/-)小鼠主动脉PA、IT及IT/MT(P0.01),并明显降低IL-6及MCP-1表达(P0.01、P0.05),但对血脂水平无明显的影响。结论:四妙勇安汤可以通过抑制炎症反应防治动脉粥样硬化,而不依赖血脂水平的变化。     

生姜外用对大、小鼠痔疮模型的影响

目的:探讨生姜外用对大、小鼠痔疮模型的疗效。方法:SPF级SD大鼠60只,分为空白组,模型组,马应龙麝香痔疮膏组(7.5 g·kg~(-1)),生姜糊大、小剂量组(10,5 g·kg~(-1)),采用生姜糊外敷涌泉穴方法,观察对由75%乙酸溶液0.05 mL注射于大鼠肛门外周皮下所致大鼠痔疮模型的影响,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),一氧化氮(NO)水平,苏木素-伊红(HE)染色评价直肠组织病理形态的改变; SPF级KM小鼠60只,分为空白组,模型组,马应龙麝香痔疮膏组(7.5 g·kg~(-1)),生姜精油大、小剂量组(0.06,0.03 mL,每天3次),采用生姜精油外涂肛周方法,观察对由20%乙酸溶液0.05 mL内推入小鼠肛门(保持1 min)所致小鼠痔疮模型的影响,观察肛周局部肿胀溃疡程度并进行评分,ELISA检测血清IL-1β,TNF-α水平,HE染色观察直肠局部组织形态的影响。结果:生姜精油外敷大鼠涌泉穴治疗痔疮实验,与正常组比较,模型组血清IL-1β,TNF-α,IL-6,NO水平显著升高(P0.01),直肠组织病理损伤严重;与模型组比较,各给药组可降低血清IL-6,NO,IL-1β,TNF-α水平(P0.05,P0.01),减轻直肠组织损伤程度(P0.01);生姜精油外涂肛周治疗痔疮实验,与正常组比较,模型组肛周肿胀、溃疡程度损伤严重(P0.01),血清IL-1β,TNF-α水平显著升高(P0.01),直肠组织病理损伤严重;与模型组比较,各给药组可改善肛周的病理状况(P0.01),降低血清IL-1β,TNF-α水平(P0.01),减轻直肠组织损伤程度(P0.01)。结论:生姜外用可有效抑制肛周肿胀和溃疡程度,对大、小鼠痔疮模型有很好的治疗作用。