响应面法优化铁皮石斛叶闪式提取工艺

目的:优化铁皮石斛叶多糖的提取工艺。方法:使用闪式提取法对铁皮石斛叶中的多糖成分进行提取,苯酚-硫酸法检测多糖含量,在单因素试验基础上,以料液比、提取时间、提取次数为影响因素,得率为响应值,采用Box-Behnken响应面法,优选最佳提取工艺技术参数。结果:最佳提取工艺条件为以25倍量水提取铁皮石斛叶多糖3次,每次90s,得率为11.52%,与理论得率11.77%接近。结论:经Box-Behnken响应面法优选的铁皮石斛叶多糖的提取工艺,得率与理论值较吻合,模型选用合理有效。     

Box-Behnken响应面法优化超声辅助提取忽地笑多糖工艺研究

目的:以忽地笑鳞茎为原料,利用Box-Behnken响应面法优化超声辅助提取忽地笑多糖工艺条件。方法:在单因素试验基础上,选取提取温度、提取时间、液料比为影响因子,以多糖得率为响应值,应用Box-Benhnken中心组合试验设计建立数学模型,进行响应面分析,优选最佳的超声提取工艺。结果:优化的忽地笑多糖提取工艺条件为:提取温度84℃、提取时间6.9 h、液料比22∶1(m L/g),此条件下忽地笑多糖得率为40.95%。结论:采用响应面法优化得到的超声提取忽地笑多糖工艺稳定可行,可用于忽地笑多糖的提取。     

黄芪-女贞子真菌固态发酵工艺的研究

目的采用响应面分析法优选黄芪女贞子菌质固态发酵条件。方法以菌丝体生长的速度及多糖含量为评价指标,考察药材粒径、发酵温度、菌质初始含水量、发酵时间等因素对黄芪女贞子菌质固态发酵的影响,并确定发酵工艺的具体条件参数。结果以菌丝布满发酵瓶为终点。最佳发酵条件为药材粒径10目,发酵温度26℃,初始含水量为110%,发酵时间15d,接种量10%。结论该研究为黄芪-女贞子系列产品的二次开发及中药材资源的充分利用提供理论试验依据。     

半夏多糖提取工艺优化及其抗氧作用研究

目的:通过响应面法优化复合酶提取半夏多糖的工艺,并评价其抗氧化活性。方法:以半夏多糖得率为响应值,以液料比、酶解温度、酶解时间、复合酶(木瓜蛋白酶、纤维素酶、果胶酶的质量比为2∶2∶1)添加量为试验因素,采用响应面法建立数学模型,优化提取条件;体外抗氧化活性考察半夏多糖对DPPH和O_2~-·自由基的清除能力。结果:通过二次回归模型响应面分析,酶解温度、时间、复合酶添加量、液料比4因素对半夏多糖得率的影响依次减弱;酶解温度与时间优化为54℃和57分钟,复合酶添加量为7.2 mg/mL,液料比例为27∶1 mL/g,在此最佳工艺条件下半夏多糖得率为27.98%,模型方程理论预测值为28.32%,两者相对误差小于5%。半夏多糖具有较强的抗氧化活性,对DPPH和O_2~-·自由基的半数抑制浓度分别为0.987 mg/m L、1.309mg/m L,但与维生素C比较,抗氧化活性较弱。结论:采用响应面法优化得到了半夏多糖的最佳复合酶提取条件,且半夏多糖有一定的体外抗氧化作用。     

正交实验设计优化参芪复方提取工艺研究

目的:优选参芪复方的最佳水提工艺条件。方法:采用L_9(3~4)正交试验设计,以浸膏得率、总多糖含量、总皂苷含量为综合评价指标,对加水量、煎煮时间、煎煮次数等因素进行优选。以葡萄糖标准品为对照,采用苯酚-浓硫酸法测定多糖的含量;以黄芪甲苷为对照,采用香草醛-高氯酸法测定总皂苷含量。结果:优选出的参芪复方的最佳水提工艺条件为A_3B_1C_3,即加12倍水,煎煮3次,每次1h。验证试验结果显示,干膏得率为30.49%(n=5,RSD=2.67%);多糖含量为15.13%(n=5,RSD=2.16%),总皂苷含量为0.34%(n=5,RSD=2.33%)。结论:优选出的参芪复方的水提工艺稳定、合理、可行,为参芪复方制剂开发工艺提供了科学依据。     

响应面法优化松花粉总酚的超声提取工艺

目的:优选松花粉中总酚的超声提取工艺.方法:以总酚得率为指标,采用单因素试验考察乙醇体积分数、超声时间、超声温度、料液比等因素对总酚得率的影响,在此基础上,运用响应面法优选总酚超声提取工艺.结果:松花粉总酚的最佳超声提取工艺条件为30倍量39％乙醇于51℃下超声提取24 min,在此条件下,总酚得率3.85 mg·g-1,实测值与模型预测值相符.结论:响应面分析法可较好地用于优化松花粉总酚超声提取工艺,且该优选工艺方便、快捷、高效.     

黄芪建中颗粒的提取工艺优选

目的:优化黄芪建中颗粒的提取工艺.方法:采用正交试验及响应面分析法,以芍药苷提取量和干膏得率为指标,考察中加水量、提取时间及提取次数等因素对黄芪建中颗粒提取工艺的影响.结果:最佳提取工艺条件为加8倍量水提取3次,每次1h,芍药苷转移率达87.4％.结论:优选的提取工艺简单、经济、实用,适合于黄芪建中颗粒有效成分提取.     

牛大力多糖酶法提取工艺优化及其抗氧化活性

目的:研究纤维素酶提取牛大力多糖成分的最佳工艺条件,并探讨其体外抗氧化活性。方法:以牛大力多糖得率为响应值,在单因素试验基础上,以酶解时间、液料比、酶解pH值、酶添加量为影响因素,采用响应面法建立数学模型,筛选最佳提取工艺条件;使用DPPH和·OH自由基清除能力试剂盒检测其抗氧化活性。结果:纤维素酶酶解法提取牛大力多糖最佳条件为:酶解时间:76.0 min,液料比:14∶1(mL/g),酶解pH值:5.4,酶添加量:9.5 mg/mL,酶解温度:45℃,在此条件下牛大力多糖得率为(4.43±0.67)%,与预测值4.48%的相对误差小于5%。液料比对多糖得率影响最显著,酶添加量、酶解时间次之,酶解pH值影响最小。牛大力多糖具有较强的抗氧化活性,对DPPH和·OH自由基清除的半数抑制浓度IC_(50)分别为0.974、1.894 mg/mL,但与维生素C比较,其抗氧化活性较弱。结论:优化的工艺条件方便可行,提取到的多糖具有一定的自由基清除能力。     

响应面法优化金果榄多糖提取工艺及抗氧化活性研究

目的研究复合酶提取金果榄多糖的最佳条件,并探讨其体外抗氧化活性。方法复合酶种类及配比为纤维素酶∶果胶酶∶木瓜蛋白酶=1∶1∶1,液料比固定为20 mL/g,以金果榄多糖得率为响应值,在单因素试验基础上,以酶解pH值、酶解时间、复合酶添加量、酶解温度为自变量,采用响应面法建立数学模型,筛选最佳提取工艺;采用DPPH自由基、羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O_2~-·)清除能力体系评价金果榄多糖体外抗氧化活性。结果金果榄多糖最佳提取条件为:酶解pH值5.1,酶解时间56 min,复合酶添加量2.0%,酶解温度52℃。在此条件下多糖得率为14.03%,与理论值14.12%的相对误差5%。酶解温度对多糖得率影响最显著,酶解时间、酶解pH值次之,酶添加量影响最小。金果榄多糖对DPPH、·OH、O2_~-·清除的半数抑制浓度分别为1.358、0.927、1.096 mg/mL,与维生素C比较,抗氧化活性较弱。结论本研究优选的金果榄多糖复合酶法提取工艺方便可行,酶解得到的多糖具有较强的体外抗氧化活性。     

复方北冬虫夏草咀嚼片的制备

目的优选西洋参总皂苷、枸杞黄芪多糖的提取工艺,并对咀嚼片的处方设计进行筛选,为工业化生产提供参考。方法以多糖得率为指标,采用L9(34)正交试验,通过考察料液比、提取时间、提取温度、提取次数确定枸杞黄芪多糖最佳提取工艺;以总皂苷得率为指标,采用L9(34)正交试验,通过考察乙醇浓度、提取液体积、提取时间、提取次数确定西洋参总皂苷提取最佳工艺;以咀嚼片外观、硬度、口感为指标优选咀嚼片的处方。结果枸杞黄芪多糖的最佳提取工艺为1:10料液比、100℃提取3次、每次3 h;西洋参总皂苷的最佳提取工艺为60%乙醇、10倍用量、提取3次、每次1 h;咀嚼片的最佳处方为:北冬虫夏草超微粉20%、西洋参总皂苷4.8%、枸杞黄芪多糖15%、β-环糊精10%、微晶纤维素14.2%、甘露醇20%、聚维酮k30 5%、果糖5%、硬脂酸镁4%、滑石粉2%。结论复方北冬虫夏草咀嚼片的提取工艺和处方设计合理,制备方法简单易行,适合工业化生产。     

正交试验法优选加味四君子汤提取工艺

目的： 优选加味四君子汤的提取工艺。 方法： 以人参皂苷总提取量为指标,采用L₉（3⁴）正交试验考察乙醇体积分数及用量、提取次数、提取时间对醇提工艺的影响;以总多糖得率为指标,通过正交试验考察料液比、提取次数、提取时间对水提工艺的影响。采用HPLC测定人参皂苷含量,流动相乙腈-水（13：87）,检测波长203 nm;利用UV测定总多糖含量,检测波长489 nm。 结果： 最佳醇提工艺为加6倍量70%乙醇提取2次,每次1.5 h;人参皂苷提取量达7.69 mg·g^-1。最佳水提工艺为加8倍量水提取3次,每次2 h;总多糖得率达2.18%。 结论： 优选的提取工艺稳定可行,可充分提取加味四君子汤中醇溶性和水溶性有效成分。     

甘草对液体发酵中槐耳菌丝体生长及多糖影响初探

[目的]以槐耳菌丝体生物量及多糖为主要指标,探究槐耳-甘草液体共发酵中最佳甘草的添加量和发酵时长。[方法]采用液体发酵技术,在液体发酵培养基中加入甘草提取液,共发酵获得槐耳-甘草共发酵产物,苯酚-硫酸法及DNS法结合测定多糖含量。[结果]槐耳-甘草液体共发酵实验中,添加甘草8 g/L、发酵终点设为192 h时,槐耳生物量和胞内多糖产量达到最大值。[结论]运用槐耳-甘草液体共发酵可以提高槐耳生物量及多糖的含量,为深入研究槐耳-甘草液体共发酵机制提供了理论依据。     

正交试验法优选治郁颗粒提取工艺

目的: 优选治郁颗粒的醇提工艺和水提工艺,为该制剂的工业化生产提供参考. 方法: 采用HPLC测定栀子苷含量,流动相乙腈-水(10:90),检测波长238 nm;以栀子苷提取率为指标,通过正交试验考察乙醇体积分数、加醇量、提取时间及提取次数对醇提工艺的影响.采用UV测定总多糖含量,检测波长490 nm;以总多糖提取率为指标,通过正交试验考察加水量、提取时间及提取次数对水提工艺的影响. 结果: 最佳提取工艺为加6倍量70%乙醇提取2次,每次1.0 h,药渣加10倍量水煎煮3次,每次2.0 h;栀子苷、总多糖提取率分别为0.013 29,0.030 39 g·g^-1. 结论: 该优选工艺合理可行,有效成分提取率高.     

基于红芪总多糖保留率建立纤维性根茎药材的超滤预测模型

目的:建立人工神经网络用于预测纤维性根茎药材的超滤总多糖保留率。方法:以无机陶瓷膜的膜孔径、滤过压力、药液温度为输入变量,不同超滤条件下红芪酶解提取液中总多糖保留率为输出变量,采用Levenberg-Marquardt算法优化网络参数,建立BP神经网络预测模型,并对模型的性能及适用性进行考察。结果:BP神经网络的拓扑结构为3-6-1,对红芪总多糖保留率预测的平均预测误差、平均绝对误差和平均误差率分别为0.10%,0.98%,1.55%;对黄芪总多糖保留率预测的平均误差率2.77%。结论:建立的模型预测精度较高,适用性较好,可用于预测纤维性根茎药材超滤的总多糖保留率。     

桑黄总多糖的提取及其单糖组成分析

目的:优化桑黄子实体总多糖的提取工艺并初步分析其单糖组成。方法:采用苯酚-硫酸法测定总多糖含量。以总多糖提取率为指标,通过单因素试验和正交试验考察提取时间、提取次数、料液比对桑黄子实体总多糖微波提取工艺的影响,利用TLC初步确定不同产地和树种桑黄总多糖的单糖组成。结果:最佳提取条件为加50倍量水提取5次,每次15 min。东北桑树、东北白桦树、甘肃桑树及湖南桑树桑黄中总多糖提取率分别为5.37%,2.21%,3.04%,3.35%,均含有半乳糖和葡萄糖;山东桑树桑黄总多糖提取率2.77%,含有木糖、半乳糖、葡萄糖和乳糖;未知来源桑树桑黄中总多糖提取率3.58%,含有葡萄糖。结论:微波提取法稳定性好、提取率高。东北桑树桑黄中总多糖含量较高,可初步确定桑黄子实体总多糖中均含有葡萄糖。     

两面针的超声-酶法辅助半仿生提取工艺优选

目的:优选两面针的超声-酶法辅助半仿生提取工艺条件。方法:以氯化两面针碱、总生物碱得率和干膏收率为评价指标,通过正交试验考察超声功率、提取时间及溶剂用量对两面针半仿生超声提取工艺的影响,利用动态过程优选提取时间。运用HPLC测定氯化两面针碱含量,流动相乙腈-水-磷酸-三乙胺(30∶70∶0.15∶0.15),检测波长271 nm;采用UV测定总生物碱含量,检测波长328 nm。结果:最佳提取工艺为复合酶预处理后于250 W超声提取,第1次加5倍量pH2.0磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液提取18 min,第2次加5倍量pH 7.5缓冲液提取15 min,第3次加5倍量pH 8.3缓冲液提取12 min;氯化两面针碱得率0.135%(RSD 1.86%),总生物碱得率1.20%(RSD 1.75%),干膏收率14.65%(RSD1.23%)。结论:本法的氯化两面针碱和总生物碱得率与乙醇回流法接近或稍低,而干膏收率显著提高,可为两面针的大生产提供参考。     

正交试验优选平唐复方的醇提工艺和水提工艺

目的:优选平唐复方醇提工艺和水提工艺。方法:选择提取时间、乙醇体积分数和乙醇用量为考察因素,以藁本内酯、桂皮醛、甲基丁香酚转移率及干膏得率的综合评分为指标,采用正交试验优选醇提工艺。选择浸泡时间、加水量和提取时间为考察因素,葛根素、阿魏酸转移率及干膏得率的综合评分为指标,通过正交试验优选水提工艺。结果:最佳醇提工艺为当归、桂枝和细辛药材加8,6倍量50%乙醇提取2次,每次0.5 h;藁本内酯、桂皮醛及甲基丁香酚转移率分别为72.8%,70.5%,82.3%,干膏得率27.8%。最佳水提工艺为醇提后的药渣与葛根药材浸泡30 min,加12倍量水提取3次,每次0.5 h;葛根素和阿魏酸转移率分别为60.28%和21.89%,干膏得率18.43%。结论:优选的提取工艺稳定可行,醇溶性和水溶性有效成分提取率高,为平唐复方的药效评价提供了实验依据。     

正交试验法优选熄风通脑胶囊提取工艺

目的:优选熄风通脑胶囊的提取工艺.方法:以芍药苷提取量和浸膏得率为指标,选取加水量、浸泡时间、提取时间和提取次数为考察因素,采用正交试验法优选熄风通脑胶囊中赤芍等10味饮片的水提取工艺;以浸膏得率为指标,选取乙醇体积分数、乙醇用量、浸泡时间、回流时间为考察因素,采用正交试验法优选熄风通脑胶囊中三七的醇提取工艺.结果:最佳水提工艺为加10倍量水浸泡0.5h煎煮2次,每次1.Sh;最佳醇提工艺为加6倍量70％乙醇浸泡0.5h,回流提取3次,提取时间分别为1.5,1,1h.结论:优选的提取工艺稳定可行,可推广于大生产应用.     

虎杖总鞣质的提取工艺优选及吸湿性考察

目的:优选虎杖总鞣质的提取工艺并考察其吸湿性。方法:采用络合滴定法测定总鞣质含量。以总鞣质提取量为指标,通过单因素试验确定提取温度,利用正交试验考察丙酮体积分数、提取次数、料液比对总鞣质提取工艺的影响。将总鞣质粉末置于恒温恒压恒湿环境中,通过每隔一段时间检测的质量变化以考察该成分的吸湿特性。结果:最佳提取工艺为加5倍量30%丙酮超声提取3次,每次30 min;总鞣质平均提取量102.8 mg·g-1,RSD 1.25%。虎杖总鞣质的临界相对湿度约50%,在恒温恒压恒湿环境中24 h后基本达吸湿平衡。结论:优选的提取工艺稳定可行,虎杖总鞣质的吸湿性较强。     

黄芪多糖对结肠癌SW620细胞增殖及凋亡作用的影响

目的:研究黄芪多糖对结肠癌细胞SW620增殖的影响,探讨其抗肿瘤机制。方法:体外培养的SW620细胞,分别给予黄芪多糖(0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0 g·L~(-1)),培养48 h后,用噻唑蓝(MTT)比色法检测黄芪多糖对人结肠癌细胞SW620增殖的影响;用1.0 g·L~(-1)黄芪多糖,体外培养SW620细胞48 h后,碘化丙啶(PI)单染检测药物处理后的肿瘤细胞周期,Annexin V/PI双染检测药物处理后的肿瘤细胞凋亡率;分别加入0.25,0.5,1.0 g·L~(-1)黄芪多糖,体外培养SW620细胞48 h后,通过蛋白免疫印记法(Western blot)检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3,Caspase-9和细胞色素C的表达。结果:黄芪多糖能够抑制人结肠癌细胞SW620的增殖(P0.05,P0.01),且呈浓度依赖效应;与空白组比较,黄芪多糖1.0 g·L~(-1)处理组G2/M期比例增加,早期凋亡率增加,并且晚期凋亡率和总凋亡率均增加(P0.05,P0.01);与空白组比较,黄芪多糖0.25,0.5,1.0 g·L~(-1)组Caspase-3,Caspase-9,细胞色素C和促凋亡基因Bax表达量增加,Caspase-9前体和抗凋亡基因Bcl-2表达降低(P0.05,P0.01)。结论:黄芪多糖对结肠癌细胞SW620具有显著的抑制增殖和诱导凋亡作用,其诱导凋亡机制可能是通过线粒体凋亡通路实现的。