不同制备工艺的健脑益智胶囊对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用

目的研究不同制备工艺的健脑益智胶囊对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用。方法 150只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、原药液组、醇沉组、壳聚组、膜分离组。然后,建立大脑中动脉缺血(MCAO)再灌注损伤模型,观察不同制备工艺的健脑益智胶囊对脑缺血再灌注损伤大鼠的神经行为学评分和脑梗死体积的影响,并检测脑组织中丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含有量,以及超氧化物歧化酶(SOD)和还原型谷胱甘肽过氧化酶(GSHPX)活性,免疫组化法检测脑组织中TNF-α和NF-κB表达。结果不同制备工艺的健脑益智胶囊均可显著降低脑缺血再灌注大鼠所致的神经行为学评分,减少脑梗死比率和脑组织MDA及NO水平,提高T-SOD和GSH-PX活力,抑制NF-κB信号通路上TNF-α和NF-κB表达。其中,醇沉组的改善作用更为明显。结论健脑益智胶囊对缺血再灌注损伤大鼠具有明显保护作用,其机制可能与改善神经功能、减少自由基损伤和抑制炎症因子表达有关。而且,不同制备工艺的药物对其神经保护作用有所差异,其中醇沉组作用最显著。     

推拿对脑瘫幼鼠海马炎症的拮抗作用及DNA甲基化调控机制

目的观察推拿对脑瘫(Cerebral palsy,CP)幼鼠海马炎症细胞因子TNF-α和IL-10蛋白表达的影响及其DNA甲基化水平,探讨推拿对脑瘫幼鼠海马炎症的拮抗作用及机制。方法 39只SD雄性幼鼠随机分为3组:实验组(n=13)、模型对照组(n=13)和空白对照组(n=13),实验组和模型对照组在出生后第3天(Postnatal 3 days,P3)制备脑瘫模型。在P5天,实验组开始进行推拿干预,1次/日,15 min/次,持续4周,空白对照组和模型对照组不予任何干预。P33天处死所有幼鼠进行取材,取幼鼠脑内海马组织并保存于-80℃,采用蛋白质印迹法检测海马中的TNF-α和IL-10蛋白变化并分别以Sequenam质谱检测法和焦磷酸测序法检测各组海马组织内TNF-α和IL-10 DNA甲基化水平并以先检测蛋白后检测甲基化。结果实验组IL-10蛋白表达水平低于空白对照组,两组间差异无统计学意义(P0.05)。实验组和空白对照组IL-10蛋白表达水平高于模型对照组,差异有统计学意义(P0.05)。实验组TNF-α蛋白表达水平高于空白对照组,差异无统计学意义(P0.05)。与模型对照组相比,实验组和空白对照组TNF-α蛋白表达水平较低,差异有统计学意义(P0.05)。2.三组间IL-10基因启动子区域甲基化水平差异无统计学意义(P0.05),TNF-α基因启动子区域三组间差异有统计学意义(P0.05)。结论推拿后脑瘫幼鼠海马炎症细胞因子TNF-α,表达下降IL-10表达升高,其机制可能是推拿调控了炎症细胞因子TNF-α和IL-10的基因启动子区域甲基化水平,同时IL-10蛋白表达的改变可能也与其他因素的调节有关。     

乌药叶提取物对高脂血症大鼠肝脏组织病理学及TLR-4/NF-κB 信号通路的影响

目的:探讨乌药叶提取物对高脂血症模型大鼠肝脏组织病理学及Toll样受体4(TLR-4)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法:将40只SPF级雄性大鼠随机分为对照组10只和造模组30只。造模组通过高脂饮食建立高脂血症大鼠模型,模型制备成功后,将造模组大鼠随机分为模型组与乌药叶高、低剂量组。乌药叶高、低剂量组分别按1.6 g/kg、0.8 g/kg的剂量灌胃乌药叶提取物,模型组及对照组给予等容积的蒸馏水。连续给药8周后,HE染色后观察大鼠肝脏组织病理学变化,Western blot法检测其肝脏TLR-4、NF-κB、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2 (IL-2)蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组大鼠肝细胞排列紊乱、炎性细胞浸润、并呈现大小不一的脂滴,TLR-4、NF-κB、TNF-α、IL-2蛋白表达均增加(P0.05);与模型组比较,高、低剂量组大鼠肝脏病理形态接近对照组,肝细胞排列较为整齐,炎性细胞浸润明显减轻,肝细胞内小脂滴数量减少,细胞空泡化明显改善,TLR-4、NF-κB、TNF-α、IL-2蛋白表达均降低(P0.05),其中以乌药叶高剂量组效果更显著。结论:乌药叶提取物对高脂血症模型大鼠的肝组织病理改变有明显的改善作用,其作用机制可能是通过阻断TLR-4/NF-κB信号通路,减少TNF-α、IL-2蛋白表达实现的。     

舒筋健脑颗粒对痉挛性脑瘫大鼠模型作用机制的探索

目的：通过观察舒筋健脑颗粒对痉挛型脑瘫大鼠模型的相关指标的影响,初步探讨舒筋健脑颗粒治疗小儿脑瘫的可能机制,为其广泛运用于临床提供可靠依据。方法：选用健康5日龄Wistar新生乳鼠,清洁级,共40只,雌雄各半。复制双侧颈总动脉结扎法制作新生大鼠痉挛型脑瘫模型。随机分为舒筋健脑颗粒高剂量组（20g/kg/d灌胃,相当于成人用量10倍）,舒筋健脑颗粒低剂量组（10g/kg/d灌胃,相当于成人用量5倍）,模型对照组（生理盐水灌胃）,空白组（生理盐水灌胃）共4组,每组10只,连续灌胃14天。采用硝酸还原酶法及分光光度法测血清一氧化氮合酶（NOS）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量。结果：舒筋健脑颗粒高、低剂量组在降低痉挛性脑瘫大鼠血清中NO、NOS和TNF-α含量方面与模型组比较差异有显著意义,高剂量组降低更为明显。结论：舒筋健脑颗粒可抑制脑损伤后的一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的释放,减轻脑组织损伤。     

调气息风法对脑缺血大鼠ICAM-1、IL-1β及TNF-α表达的影响

目的观察调气息风合剂对脑缺血大鼠血清及脑组织内IL-β、TNF-α及ICAM-1表达的影响。方法将40只Wistar雄性大鼠随机分为空白组、模型组、对照组和治疗组,后三组采用线栓法制成大脑中动脉阻塞模型;用药7d后测定各组血清和脑组织IL-β、TNF-α水平及血清、脑组织ICAM-1活性。结果调气息风合剂在脑缺血损伤后显著抑制ICAM-1、TL-1β、TNF-α的表达,与对照组相比有明显优势。结论调气息风合剂通过抑制脑缺血损伤后ICAM-1介导的一系列炎症,从而在一定程度上减轻脑组织的损伤。     

腹腔注射脂多糖联合缺氧方法建立大鼠脑瘫模型

目的:探讨孕鼠腹腔注射脂多糖(LPS)联合缺氧方法建立幼鼠脑瘫模型的可行性。方法:将24只SD孕鼠随机分为空白对照组(A组)、LPS+缺氧组(B组)和单纯缺氧组(C组),每组8只。受孕第16～17天,B组孕鼠予LPS腹腔注射后置于缺氧环境中3 h,C组孕鼠腹腔注射等剂量的生理盐水,置于缺氧环境3 h,A组孕鼠腹腔注射等剂量生理盐水,未置于缺氧环境,隔24 h一次,直至分娩。于乳鼠出生4周后进行神经行为学分析;断头取脑,光镜下观察组织病理学变化。结果:B组、C组乳鼠平衡木通过时间高于A组,差异均有统计学意义(P0.01);B组、C组乳鼠双侧前后肢足印重复间距大于A组,差异有统计学意义(P0.01或P0.05);与A组比较,B组乳鼠脑室旁组织结构破坏,细胞排列紊乱,炎性细胞浸润,局灶软化形成,C组病变程度低于B组。结论:应用孕鼠腹腔注射LPS联合缺氧的方法能够成功建立幼鼠脑瘫模型,为进一步实验研究奠定了基础。     

健脑益智散联合康复训练对脑瘫患儿血清IGF-1及炎性细胞因子影响研究

目的探讨健脑益智散联合康复训练对脑瘫患儿血清胰岛素样生长因子(IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP-2)及炎性细胞因子的影响。方法选取脑性瘫痪患儿94例按随机数字表法分为2组,对照组47例予以综合康复训练治疗,研究组47例予以健脑益智散口服联合综合康复训练治疗,观察并记录2组间发育和运动改善状况、炎症指标、血清IGF-1及IGFBP-2水平,对比临床疗效。结果对照组临床有效率为76.60%,研究组为91.49%,2组比较差异具有统计学意义(P<0.05);2组治疗后MDI、PDI及GMFM评分、IL-10水平显著升高,血清IGFBP-2、TNF-α、IL-6水平显著降低,且研究组上述指标改善情况明显优于对照组,差异均具有统计学意义(P均<0.05)。结论健脑益智散联合康复训练可以提高脑瘫患儿血清IGF-1水平,改善炎性指标,疗效显著。     

消痈溃得康抑制局部炎性反应促进胃溃疡愈合的研究

目的:探讨消痈溃得康对乙酸诱导大鼠胃溃疡模型治疗作用及其机制。方法:将大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、溃得康组和奥美拉唑组。采取胃黏膜局部投予乙酸方法制备胃溃疡模型,溃得康组、奥美拉唑组术后第2天开始给药,假手术组、模型组给纯水。术后第12天取材测量胃溃疡面积,取胃组织进行病理切片,HE染色,观察黏膜炎性反应情况;酶联免疫法检测胃组织匀浆白介素(IL)-6、IL-8及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果:假手术组与正常组均无溃疡形成,病理未见炎性细胞浸润。模型组大鼠胃黏膜局部溃疡,溃疡底部附苔,溃疡周边红肿;溃疡部位组织切片病理染色可见黏膜上皮脱落,黏膜下层大量的炎性细胞浸润;溃得康组、奥美拉唑组与模型组比较,溃疡面积明显减小(P<0.05),黏膜下层的炎性细胞浸润明显减轻(P<0.01)。模型组与假手术组比较,胃组织匀浆IL-6、IL-8及TNF-α含量明显升高(P<0.01);溃得康组、奥美拉唑组与模型组比较,胃组织IL-6、IL-8及TNF-α含量明显降低(P<0.01)。结论:消痈溃得康促进乙酸诱导大鼠胃溃疡模型溃疡愈合,减轻局部炎性细胞浸润,降低胃组织匀浆IL-6、IL-8及TNF-α的水平。     

马铃薯外敷药膏对兔膝关节创伤性滑膜炎IL-1β和TNF-α的影响

目的观察马铃薯外敷药膏对兔膝关节创伤性滑膜炎关节液中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。方法将40只新西兰大白兔随机分为正常组、模型组、马铃薯外敷药膏组和扶他林乳胶剂组,每组10只。除正常组外其余三组采用电针造模法建立膝关节创伤性滑膜炎兔模型,马铃薯外敷药膏组和扶他林乳胶剂组给予相应的药物,每天2次,连续5d。模型组、正常组不给予处理。实验结束后,苏木精—伊红染色法(HE染色)观察滑膜的变化,酶联免疫吸附法(Elisa法)检测关节液中IL-1β和TNF-α的表达。结果与正常组相比,模型组IL-1β和TNF-α的表达明显升高;与模型组相比,马铃薯外敷药膏组和扶他林乳胶剂组IL-1β和TNF-α的表达明显降低。HE染色可见模型组细胞肥大,排列混乱,大量炎性细胞浸润,马铃薯外敷药膏组和扶他林乳胶剂组不明显。结论马铃薯外敷药膏可能通过抑制IL-1β和TNF-α的表达来减轻滑膜组织的增生和炎性细胞的浸润。     

不同纯化工艺健脑益智胶囊对大鼠脑缺血-再灌注后神经细胞凋亡的影响

目的:研究不同纯化工艺制备的健脑益智胶囊对大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护作用,探讨其作用机制。方法:120只SD大鼠随机分为假手术组、模型组及健脑益智胶囊原药液组、醇沉组、壳聚组、膜分离组,建立大脑中动脉缺血(MCAO)-再灌注损伤模型,HE染色后观察大鼠缺血侧大脑皮质神经元形态变化,检测血清中丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH-Px)的含量,免疫组化法检测脑组织中凋亡相关蛋白BCL-2、BAX的表达。结果:不同纯化工艺制备的健脑益智胶囊均能保护神经元结构,减轻神经元损伤,显著降低血清中MDA、NO水平,提高T-SOD、GSH-Px活性,上调BCL-2蛋白和下调BAX蛋白的表达,其中醇沉组作用更为明显。结论:健脑益智胶囊通过调控BCL-2/BAX相关蛋白的表达,对抗自由基引起的脑组织过氧化损伤,发挥抗凋亡作用。采用醇沉法纯化的健脑益智胶囊对神经保护作用更为显著。     

解毒通络注射液对MCAO大鼠脑组织炎性细胞因子的影响

目的：研究解毒通络注射液(JDTL)对局灶性脑缺血大鼠脑组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)以及单核细胞趋化蛋白(MCP-1)含量的影响，探讨解毒通络注射液减轻脑缺血性损伤的作用机制。方法：成年雄性SD大鼠，线栓法复制大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO),随机分成假手术对照组、模型组、解毒通络注射液高、中、低剂量组(83.2，41.6，20.8 mg·kg-1)和尼莫地平组。应用放射免疫法(RIA)检测脑组织匀浆TNF-α和IL-1β含量，酶联免疫吸附法(ELISA)检测脑组织匀浆ICAM-1和MCP-1含量。结果：脑缺血6，24 h，大鼠脑组织TNF-α,IL-1β，ICAM-1以及MCP-1含量均有不同程度的升高。解毒通络注射液高、中剂量组可以明显阻抑缺血脑组织上述细胞因子含量的增加。结论：解毒通络注射液对抑制脑缺血后炎症因子和黏附分子的表达具有良好的作用，能够减轻炎性损伤，阻抑脑缺血损伤级联反应，减轻缺血对神经元的损害。     

基于JAK/STAT通路探讨温阳通络针灸法干预缺氧脑瘫幼鼠的作用机制研究

目的:基于Janus激酶/信号转导与转录激活子(JAK/STAT)通路探讨温阳通络针灸法干预缺氧脑瘫幼鼠的作用机制研究。方法:将40只幼鼠随机分为对照组、模型组、温阳通络针灸组和JAK/STAT通路抑制剂WP1066组各10只。HE染色检测大脑皮质损伤、TUNEL染色检测大脑皮质细胞凋亡、ELISA法检测幼鼠氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、半胱氨酸天冬氡酸蛋白酶3(Caspase-3)和内源性激活素A(ACT A)水平;Western Blot检测大鼠大脑皮质中JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3的表达。结果:与模型组相比,温阳通络针灸组和WP1066组幼鼠平均潜伏时间明显缩短,穿越原平台次数明显增多(P0.05);HE染色结果显示对照组新生大鼠大脑皮质层未见明显病变、模型组大鼠大脑皮质层损伤最明显、温阳通络针灸组和WP1066组幼鼠大脑皮质层病理损伤减轻;TUNEL检测结果显示,温阳通络针灸组和WP1066组幼鼠模鼠大脑皮质层细胞凋亡率明显低于模型组(P0.05); ELISA检测结果显示,与模型组相比,温阳通络针灸组和WP1066组幼鼠SOD、ACT A表达明显上升,Caspase-3、MDA水平明显下降(P0.05); Western blot检测结果显示,与模型组相比,温阳通络针灸组和WP1066组幼鼠脑组织p-JAK2、p-STAT3表达水平明显降低(P0.05)。结论:温阳通络针灸法可以通过抑制JAK2/STAT3信号,恢复缺氧脑瘫幼鼠神经功能和大脑损伤。     

槲皮素对病毒性脑炎幼鼠症状的缓解及对TLR9通路的调节作用研究

目的观察槲皮素对病毒性脑炎(VE)幼鼠症状的缓解作用,并探讨可能机制。方法取全部BALB/c幼鼠随机抽取10只设为对照组,其余幼鼠建立病毒性脑炎模型。建模完成后随机分为模型组、槲皮素组、槲皮素加激动剂组,各12只。槲皮素组灌胃槲皮素(含药量100 mg/kg),槲皮素加激动剂组灌胃槲皮素(含药量100 mg/kg)后腹腔注射CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN)0.6μg/g,对照组、模型组灌胃等体积生理盐水。每天1次,持续7 d。检测脑组织炎症指标;检测神经功能指标;Western blot法检测Toll样受体(TLR)9、髓样分化因子88(MyD88)、核转录因子-κB(NF-κB)p65、p-NF-κB p65蛋白表达。结果与对照组比较,模型组脑组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β),血清干扰素γ(IFN-γ)、钙结合蛋白(S-100B)水平升高(P<0.05);与模型组比较,槲皮素组脑组织TNF-α、IL-1β,血清IFN-γ、S-100B水平降低(P<0.05);与槲皮素组比较,槲皮素加激动剂组脑组织TNF-α、IL-1β,血清IFN-γ、S-100B水平升高(P<0.05);与对照组比较,模型组脑组织TLR9、MyD88蛋白表达量、p-NF-κB p65/NF-κB p65升高(P<0.05);与模型组比较,槲皮素组脑组织TLR9、MyD88蛋白表达量、p-NF-κB p65/NF-κB p65降低(P<0.05);与槲皮素组比较,槲皮素加激动剂组脑组织TLR9、MyD88蛋白表达量、p-NF-κB p65/NF-κB p65升高(P<0.05)。结论槲皮素可缓解病毒性脑炎幼鼠症状,减轻炎症反应及神经功能损伤,推测其作用机制与抑制TLR9/MyD88信号通路有关。     

针刺联合鼠神经生长因子对脑瘫幼鼠神经行为和脑组织生长代谢相关蛋白表达的影响

目的:探讨针刺联合鼠神经生长因子(NGF)对脑瘫幼鼠的疗效及对其脑组织神经凋亡、修复生长及能量代谢相关蛋白表达的影响。方法:选取70只SD幼鼠,其中50只采用结扎单侧颈动脉使脑组织缺血+密闭缺氧法建立脑瘫幼鼠模型,20只设立空白对照组和假手术组,每组10只。30只造模成功的幼鼠随机分为模型组、NGF组和联合治疗组。空白对照组不予处理;假手术组:切开颈部皮肤分离出左侧颈动脉而后缝合并消毒创口;NGF组:腹腔注射NGF 2000 U·kg~(~(-1))·d~(-1);联合治疗组腹腔注射给药NGF 2000 U·kg~(-1)·d~(-1)的基础上进行针刺治疗,穴取"百会"、左侧"颞Ⅰ针""大椎""脊中""曲池""涌泉""合谷""肘节""膝前穴",每天1次;模型组腹腔注射同体积的0.9%NaCl溶液,均连续干预14d。治疗完成后进行神经行为能力评分,而后取各组幼鼠脑组织TUNEL法检测细胞凋亡率、PCR检测凋亡相关基因Bax、Bcl-2及Casp3的表达;Western blot检测各组幼鼠脑组织中神经生长相关蛋白(GAP-43)和单羧酸转运蛋白1(MCT1)的表达量。结果:干预后,空白对照组和假手术组幼鼠各项神经行为能力均无异常,而模型组、NGF组及联合治疗组均有不同程度的神经行为异常情况,其中联合治疗组和NGF组神经行为能力评分低于模型组(均P0.05),且联合治疗组低于NGF组(均P0.05)。联合治疗组及NGF组左侧脑细胞凋亡率、Bax及Casp3表达水平均低于模型组(均P0.05),且两组Bcl-2均高于模型组(均P0.05),联合治疗组较NGF组Bax及Casp3降低更明显(均P0.05);联合治疗组和NGF组GAP-43及MCT 1蛋白表达量高于模型组(均P0.05),且联合治疗组高于NGF组(均P0.05)。结论:针刺联合NGF治疗脑瘫幼鼠可有效改善神经行为能力,抑制神经细胞凋亡,并通过上调GAP-43和MCT 1表达促进脑组织损伤修复和能量代谢。     

玉屏风散加味方对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道炎症微环境的影响

目的探究玉屏风散加味方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道炎症微环境相关因子分泌型免疫球蛋白A(SIgA)、多聚免疫球蛋白受体分泌片(SC)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)的影响。方法将36只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、罗红霉素组、玉屏风散加味方低剂量组、玉屏风散加味方中剂量组、玉屏风散加味方高剂量组,每组6只。除正常组外,其余组均采用气管内注入脂多糖(LPS)和持续被动烟熏刺激的方法复制大鼠COPD模型,模型成功后给予大鼠继续隔天烟熏刺激8周,于实验第17周开始各给药组给予相应剂量药物灌胃,模型组给予生理盐水灌胃,共灌胃28 d。末次灌胃24 h后,取各组大鼠肺组织做病理切片,苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理学变化,并用酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠肺组织匀浆中SIgA、SC,TNF-α、IL-8的表达水平。结果模型组大鼠气管上皮脱落、充血,可见肺大泡,肺内细支气管上皮增生、管腔变窄、管壁增厚,管壁及肺间质周围可见炎性细胞浸润;玉屏风散加味方各组大鼠肺内细支气管上皮增生不明显,管壁及肺间质周围炎性细胞浸润不明显,可见肺大泡,细支气管管腔狭窄及间质炎性细胞浸润等情况较模型组有明显改善,且高剂量组改善效果更明显。模型组大鼠肺组织匀浆中SIgA、IL-8、SC表达水平与正常组比较差异均无统计学意义(P均0.05),TNF-α表达水平明显高于正常组(P0.05)。玉屏风散加味方低剂量组SIgA表达水平和玉屏风散加味方中、低剂量组SC表达水平均明显高于模型组(P均0.05),玉屏风散加味方高、低剂量组TNF-α表达水平明显低于模型组(P均0.05);玉屏风散加味方高、中剂量组SIgA表达水平和玉屏风散加味方高剂量组SC表达水平、玉屏风散加味方中剂量组TNF-α表达水平、玉屏风散加味各剂量组IL-8表达水平与模型组比较差异均无统计学意义(P均0.05)。结论玉屏风散加味方可改善COPD模型大鼠肺组织病理形态,增强SIgA和SC的表达,降低TNF-α和IL-8的表达,提示该方药可干预COPD气道炎症微环境,增强机体局部黏膜免疫功能,减轻炎症反应。     

定喘汤对哮喘模型小鼠肺组织炎性病变及Th2细胞相关炎性因子的影响

目的:研究定喘汤对哮喘模型小鼠气道炎症及气道阻力的干预作用及其可能的作用机制。方法:104只雄性C56BL/6小鼠随机均分为生理盐水对照组、定喘汤对照组、哮喘模型组、定喘汤治疗组,每组26只。哮喘模型组与定喘汤治疗组小鼠予卵蛋白(OVA)致敏和激发建立哮喘模型。末次激发24h后,每组取10只小鼠测定气道阻力;每组取8只小鼠右下肺组织行HE染色及肿瘤坏死因子α(TNF-α)免疫组化观察肺组织炎性病变,同时取左上肺组织提取蛋白,行蛋白印迹试验(westernblot)检测肺组织中GATA-3蛋白表达;每组取8只小鼠采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中白介素(IL)-4、IL-5、IL-13和TNF-α含量,计数BALF及外周血中炎性细胞。结果:与生理盐水对照组比较,哮喘模型组小鼠气道阻力显著升高,肺组织出现炎性病变,TNF-α表达升高,BALF及外周血的炎性细胞比例上升,BALF中IL-4、IL-5、IL-13和TNF-α含量升高,肺组织中GATA-3蛋白表达水平上升。与哮喘模型组比较,定喘汤治疗组小鼠气道阻力显著降低,肺组织炎性病变缓解,TNF-α表达降低,BALF及外周血的炎性细胞比例下降,BALF中IL-4、IL-5、IL-13和TNF-α含量降低,肺组织中GATA-3蛋白表达水平下降。上述指标在生理盐水对照组与定喘汤对照组间无显著性差异。结论:定喘汤可减轻哮喘小鼠的气道炎性病变,降低气道高反应性,可能与经GATA-3介导抑制Th2细胞相关炎性因子有关。     

局灶性脑缺血再灌注大鼠血浆、脑组织TNF-α动态观察

目的观察局灶性脑缺血再灌注大鼠血浆、脑组织TNF-α的动态变化。方法采用线栓法大脑中动脉阻塞复制局部脑缺血再灌注模型,缺血2h分别再灌注1、3、7d,随机分为假手术组、模型组。采用放射免疫方法测定血浆与脑组织匀浆TNF-α浓度,应用免疫组化SC法观察脑缺血半暗带TNF-α蛋白表达。结果局灶性脑缺血再灌注后,血浆与脑组织匀浆TNF-α浓度升高,脑缺血半暗带TNF-α表达的平均吸收光密度值与阳性细胞数显著增加,以再灌注3d最为显著。结论TNF-α是参与局灶性脑缺血再灌注损伤重要细胞因子,其血浆含量与脑组织表达的高峰基本一致。     

天芪益智颗粒对阿尔茨海默病模型大鼠炎性反应的保护作用

目的研究中药治疗AD相关机制,探究以益气活血法为组方原则的天芪益智颗粒对AD大鼠脑组织炎性反应的保护作用。方法 90只雄性SD大鼠随机分成6组,每组15只,模型组和治疗组予Aβ1-42在大鼠侧脑室注射建立AD动物模型,造模成功后,治疗组分别灌服浓度为高、中、低剂量的天芪益智颗粒每天一次,对照组灌服石杉碱甲每天一次,空白组和模型组予等量生理盐水每天一次,给药体积均为20 m L/kg体重,分别连续给药30天。喂养30天以后取大鼠脑组织进行蛋白提取,用western blot方法观察各组大鼠脑组织相关蛋白的表达。结果 (1)模型组较空白组GFAP和Iba-1的表达显著增高(P0.05);(2)天芪益智颗粒和石杉碱甲可使大鼠脑组织GFAP和Iba-1的表达量显著降低(P0.05);(3)天芪益智颗粒和石杉碱甲使phospho-p38/t-p38的表达量明显降低(P0.05);(4)天芪益智颗粒使AD大鼠脑i NOS、COX-2表达量显著降低(P0.05)。结论(1)Aβ1-42侧脑室注射可以模拟AD炎性反应机制;(2)天芪益智颗粒通过抑制脑组织胶质细胞的激活、降低phospho-p38/t-p38表达及p38-NF-κB信号通路激活、抑制促炎因子COX-2、i NOS的表达对AD大鼠炎性反应具有保护作用。     

健脑益智汤对阿尔茨海默病大鼠P53的影响

目的研究健脑益智汤对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马P53蛋白表达的影响,探讨其对AD细胞凋亡的防治作用机制。方法正常老年大鼠60只,分为对照组、模型组、安理申组、健脑益智汤小、中和大剂量组,采用侧脑室注射聚集态Aβ_(25~35)建立AD模型,药物灌胃4周,Western-blot法检测海马P53蛋白及磷酸化P53(Ser15)蛋白(pP53-Ser15)表达水平。结果与对照组比,模型组P53及p P53-Ser15的表达增多(P0.01);与模型组比,安理申组P53蛋白降低(P0.01),pP53-Ser15降低无统计学意义,健脑益智汤随剂量增加,P53蛋白及pP53-Ser15呈下降趋势(P0.05,P0.01);健脑益智汤大剂量组pP53-Ser15下降较安理申组明显(P0.05)。结论健脑益智汤降低AD大鼠细胞凋亡的可能机制是通过降低P53及pP53-Ser15蛋白的表达来实现的。     

通心络对大鼠心肌梗死后心肌炎症反应及肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的 研究通心络对大鼠心肌梗死后心肌炎症反应及肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）表达的影响.方法 应用结扎冠脉前降支的方法制备大鼠心梗模型,将SD大鼠随机分为3组：假手术组、心梗组、通心络干预组[2.0g/（kg·d）],应用组织病理学的方法观察术后1、2及4周梗死区与非梗死区炎性细胞浸润的情况;以半定量RT-PCR及蛋白免疫印迹（Western blot）的方法检测炎性因子TNF-α的表达情况.结果 心肌梗死后1周及2周,在心梗组及通心络干预组,梗死区与非梗死区炎性细胞浸润明显,至心肌梗死后4周,炎症反应消退,但TNF-α表达持续增加.通心络干预后炎性细胞浸润减轻,TNF-α表达降低.结论 通心络能减轻心梗后心肌炎症反应,降低炎性因子TNF-α的表达,发挥抗炎作用.