中药复方“松友饮”对高转移人肝癌裸鼠原位移植瘤的抑制作用

目的:研究中药松友饮对高转移人肝癌裸鼠原位移植肿瘤生长、转移和生存期的影响。方法:以肝癌细胞(MHCC97H)细胞建立裸鼠移植瘤模型,32只成模裸鼠随机分成对照组C0和松友饮剂量递增的C1、C2和C3组,肝脏接种肿瘤24h内开始1次/d灌胃给药,连续5周,每周测体质量。第35d处死裸鼠,计算肿瘤体积及转移情况。另选12只成瘤裸鼠分成对照组和松友饮组,选择上述结果中最合适的剂量,观察生存期。结果:C0、C1、C2和C3组肿瘤体积分别为(2072.73±801.23)mm3、(1779.48±969.59)mm3、(976.30±608.01)mm3和(959.99±376.47)mm3,C2、C3与C0相比差别有统计学意义;C2组抑瘤率52.90%,肺转移程度明显下降。按C2组剂量给药,裸鼠生存期(75.00±3.86)d,对照组(52.00±2.34)d(P<0.01)。结论:连续5周松友饮灌胃抑制HCC裸鼠模型肿瘤生长、转移,延长荷瘤裸鼠生存期,对HCC病人有潜在的应用价值。     

中药复方“松友饮”体内外药效研究结果的初步总结

目的:分析中药复方"松友饮"体内、外抑癌作用。方法:明确"松友饮"的组方成份,总结前期相关研究结果,提出尚需进一步研究内容。结果:"松友饮"为5味中药提取物,已分析获得高效液相指纹图谱,为"松友饮"提供质控参考。"松友饮"通过抑制MMP2抑制肝癌(HCC)侵袭性;连续7天灌胃给药增强小鼠免疫功能。连续5周灌胃抑制术后残癌组织IL–1β和PCNA表达,抑制裸鼠模型HCC生长、转移,延缓裸鼠体重下降,延长生存期,增强干扰素(抑制HCC。给药7天的含药血清达到稳态血药浓度,对HCC体外抑制作用最强。该复方已开展临床研究,但药效物质基础仍需深入研究。结论:"松友饮"具有体内、外抑制HCC生长、转移作用,具有潜在临床应用价值。     

优化中药复方“松友饮”的基础研究

目的:研究中药复方"松友饮"的体内药效物质基础并重新配伍设计,为其组方优化提供理论基础。方法:应用高转移人肝细胞癌细胞株MHCC97H构建裸鼠原位移植瘤模型,24只成模裸鼠随机平均分成对照组和"松友饮"组,肝脏接种肿瘤1 d开始1次/d灌胃给药("松友饮"3.6 g/kg,对照组予以等量蒸馏水)。灌胃5周,脱颈处死裸鼠收集血样,用于进一步分析"松友饮"体内药效物质基础,采用均匀设计的实验方法重新设计、配伍、优化"松友饮"。结果:裸鼠模型构建过程顺利,灌胃过程中实验组死亡1只裸鼠,有效获取含药血清。结合参考文献及通过比对发现连续给药5周,"松友饮"吸收入血的主峰来自组方药材成分:黄芪甲苷、槲皮素及隐丹参酮、丹参酮IIA(新组复方主要含4种单体,简称HHYD复方),重新配伍为3种新组方。结论:基于5周给药的含药血清药效物质基础新组方的组分更加明确,更易定量和质量控制。     

中药复方松友饮抑制姑息性肝切除术后残癌生长和转移的实验研究

目的:研究中药复方松友饮对姑息性肝切除裸鼠模型中残癌生长及转移的影响。方法:以人肝癌细胞(MHCC97H)建立裸鼠移植瘤姑息性肝切除模型,36只裸鼠随机分成对照组和松友饮组,每天1次灌胃给药连续5周,每周测体质量。给药结束后第2d每组处死6只裸鼠观察肿瘤大小、肺转移等;并检测残癌中白细胞介素-1β(IL-1β)和增殖细胞核抗原(PCNA)表达情况。剩余裸鼠用于观察生存期。结果:松友饮组与对照组残癌体积为(724.9±337.6)mm3和(1205.2±581.3)mm3(P<0.05),抑瘤率为39.9%;肺转移分级下降(P<0.05)。前者体质量大于对照组(P<0.001),生存期延长率为22.7%;IL-1βmRNA表达水平显著下调(P<0.001),蛋白水平为(18.0±5.1)pg/mL和(27.9±4.5)pg/mL(P<0.01);PCNA指数为(75.2±8.5)%和(86.1±4.8)%(P<0.001)。结论:松友饮灌胃给药下调残癌表达IL-1β和PCNA,抑制残癌生长、转移,对肝癌病人有潜在的应用价值。     

大黄素抑制胰腺癌裸鼠原位移植瘤的实验研究

目的:观察大黄素(Emodin)对胰腺癌裸鼠原位移植瘤生长、转移的抑制作用并探讨其机制。方法:建立胰腺癌裸鼠原位移植瘤模型(SOI),随机分为对照组、实验Ⅰ组、实验Ⅱ组等3组(n=10),第3周开始分别经灌胃给予溶媒(0.1%二甲基亚砜)0.2mL/只、大黄素20mg/kg、大黄素40mg/kg,每周3次,共两周。术后第8周处死裸鼠,测量原位肿瘤瘤重并计算抑瘤率;观察荷瘤裸鼠肿瘤转移情况;免疫组织化学法检测肿瘤组织的增殖指数(PI)、微血管密度(MVD)以及金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达。结果:与对照组相比,实验Ⅰ组肿瘤生长未受明显抑制,但转移明显被抑制;实验Ⅱ组肿瘤生长和转移均受显著抑制;实验Ⅰ、Ⅱ组肿瘤组织中PI、MVD及MMP-9的表达均明显降低。结论:大黄素具有抑制胰腺癌裸鼠原位移植瘤生长和转移的作用,这可能是通过抑制胰腺肿瘤MMP-9的表达而实现。     

中药复方“松友饮”含药血清体外抑制高转移人肝癌MHCC97H细胞的实验研究

目的：研究中药复方＂松友饮＂含药血清对体外培养的人肝癌MHCC97H细胞增殖、侵袭潜能的影响。方法：以MHCC97H细胞构建裸鼠原位移植瘤模型,84只成模裸鼠随机平均分成对照组和＂松友饮＂组,肝脏接种肿瘤24 h内开始1次/天灌胃给药。在第1、4、7、14、21、28、35次灌胃结束后2h,每组分别处死6只裸鼠收集血样。应用含药血清体外干预MHCC97H细胞,检测细胞增殖、侵袭潜能变化。结果：＂松友饮＂灌胃给药1、4、7天的荷HCC裸鼠含药血清体外抑制HCC作用逐渐增强,给药7、14、21、28、35天的含药血清抑制作用无统计学差异。灌胃7天的＂松友饮＂含药血清抑制HCC增殖的作用与中剂量卡培他滨作用近似,抑瘤率分别为37.4%、41.1%。给药7天的含药血清抑制HCC侵袭潜能达到最强,＂松友饮＂组穿膜细胞数明显少于对照组,为26.0±3.6和37.3±2.8。结论：给药7天的含药血清达到稳态血药浓度,对MHCC97H细胞的体外抑制作用达到最强。     

藤梨根对实验性大鼠胃癌抑制作用的实验研究

目的:观察藤梨根提取物对实验性大鼠胃癌的抑制作用。方法:首先将实验动物随机分组,瘤体种植后1周,将存活的裸鼠随机分为组(阴性对照组)、组(5-FU组)、组(藤梨根组),每组12只,分别注射生理盐水、5-FU(每周1次)、梨藤根提取物,连续注射3周。结果:藤梨根提取物组原位肿瘤体积、瘤重较于5-FU组明显降低,具有统计学意义。结论:藤梨根提取物确有抑制实验性大鼠胃癌生长和转移的作用。     

"胃肠安"对胃癌模型裸鼠肿瘤的抑制作用及其机理的初步研究

目的:研究中药"胃肠安"对胃癌模型裸鼠肿瘤生长、转移的抑制作用及其对瘤体VEGF和MVD表达的影响.方法:建立裸鼠原位移植人胃癌模型,将模型裸鼠随机分为中药组、西药组、对照组各8只,观察和比较各组裸鼠平均胃重和肿瘤转移情况,用免疫组化法比较各组裸鼠瘤体VEGF和MVD的表达.结果:所有荷瘤鼠胃壁上均有肿瘤生长,中药组、西药组和对照组的平均胃重分别为(1.77±0.78)g、(1.11±0.73)g、(2.57±0.53)g;中药组和西药组的脏器转移和远处淋巴结转移率均为28.57%,低于对照组的100%,有显著性差异.各组裸鼠瘤体VEGF表达的阳性率没有显著性差异;中药组裸鼠瘤体MVD表达低于对照组,有显著性差异.结论:胃肠安方可抑制胃癌生长、转移,其作用机制之一可能与其对胃癌血管生成的抑制有关.     

温郁金对人胃癌裸鼠原位移植瘤中MVD表达的影响

目的：通过建立人胃癌裸鼠原位称植瘤模型,研究温郁金对人胃癌裸鼠原位移植瘤生长转移的抑制作用及对MVD表达的影响。方法：BALB/c裸小鼠12只,以荷SGC-7901人胃癌细胞株裸鼠皮下移植瘤为材料,通过手术将癌组织转移到裸小鼠胃壁建立胃癌原位称植模型;原位移植24h后开始灌胃。当动物出现明显消瘦、弓背、神萎等衰竭征象（约9周）时处死动物,观察和比较两组肿瘤抑制率和肿瘤转移情况。用免疫组织化法检测两组移植瘤瘤体中MVD的表达。结果：所有荷瘤鼠胃壁均有肿瘤生长,治疗组瘤重明显低于对照组,P〈0.01,抑瘤率为42%;模型组腹膜转移6/6、肝脏转移5/6、腹水1/6,治疗组腹膜转移2/6、肝脏转移1/6、腹水0/6,其中腹膜及肝脏转移情况差异具有统计学意义（P〈0.05）。温郁金治疗组瘤体中MVD的表达明显下调。结论：温郁金可能通过减少瘤体内MVD抑制人胃癌裸鼠原位移植瘤生长和转移。     

温郁金对人胃癌裸鼠原位移植瘤生长转移的抑制作用及对COX-2和VEGF表达的影响

目的:通过建立人胃癌裸鼠原位移植瘤模型,研究移植瘤生长及其转移的抑制作用。方法:BALB/c裸小鼠12只,以荷SGC-7901人胃癌胞株裸鼠皮下移植瘤为材料,通过手术将癌组织转移到裸小鼠胃壁建立胃癌原位移植模型;造模后,12只荷瘤裸鼠随机分为两组(对照组、治疗组),每组6只;原位移植24h后开始灌胃,治疗组给予温郁金水蒸气蒸馏液(2.5g/mL),0.4mL灌胃,每日1次,对照组予等量生理盐水。当动物出现明显消瘦、弓背、神萎等衰竭征象(约9周)时处死动物,观察和比较两组肿瘤抑制率和肿瘤转移情况。用免疫组化法检测两组移植瘤瘤体中COX-2和VEGF的表达。结果:所有荷瘤鼠胃壁均有肿瘤生长,荷瘤率100%,治疗组与对照组瘤重分别为(0.4189±0.1086)g、(0.7296±0.210)g,P<0.01,抑瘤率为42%;模型组腹膜转移6/6、肝脏转移5/6、腹水1/6,治疗组腹膜转移2/6、肝脏转移1/6、腹水0/6,其中腹膜及肝脏转移情况差异具有统计学意义(P<0.05)。温郁金治疗组瘤体中COX-2和VEGF的表达明显下调。结论:温郁金具有抑制人胃癌裸鼠原位移植瘤生长和转移的作用,其作用机制可能与下调COX-2和VEGF的表达有关。     

中药复方“松友饮”诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

目的：研究中药复方“松友饮”对人肝癌细胞凋亡的影响及可能的分子机制,为临床应用提供理论依据。方法：采用流式细胞术、Caspase-3活性实验及RealTimePCR技术,观察2、4、8、10、20、30及40me,／mL“松友饮”（c1、c2、c3、c4、c5、c6及c7组）对体外培养的人肝癌细胞MHCC97H凋亡的影响,并探索可能的分子机制。结果：流式细胞仪检测结果显示,同对照组相比,干预组细胞凋亡率呈时间依赖性增加,“松友饮”（c4,10mg／mL）干预72h后MHCC97H细胞凋亡率增加超过3倍。干预48h后Caspase-3显著激活,Caspase-3活化呈时间依赖性。“松友饮”浓度增加,转移抑制基因1（Metastasissuppressor1,MTSS1）抑制效果越明显,“松友饮”（c4,10mg／mL）干预48h,MTSS1基因表达抑制率为39．0％。结论：“松友饮”诱导肝癌细胞凋亡可能与MTSS1基因表达抑制、Casoase-3活化相关。     

益气化瘀解毒方联合索拉非尼对人肝癌索拉非尼耐药细胞移植瘤及缺氧诱导因子1α与血管拟态表达的影响

目的:探讨益气化瘀解毒方对人肝癌Sorafenib(索拉非尼)耐药细胞裸鼠移植瘤大小及瘤组织HIF-1α与VM表达的影响。方法:培养Sorafenib获得性耐药人肝癌QGY7702细胞株(QGY7702/Sora),通过皮下种植的方法建立人肝癌Sorafenib耐药细胞裸鼠移植瘤模型,药物干预21d后取瘤组织,测瘤净重,免疫组化方法检测缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达,CD31/PAS双重染色观察血管拟态(VM)的表达。结果:成功建立耐药细胞裸鼠移植瘤模型,药物干预耐药细胞裸鼠模型提示,益气化瘀解毒方联合Sorafenib对瘤体具有明显的抑制作用(P<0.05),Sorafenib可促进VM的表达(P<0.05),益气化瘀解毒方联合Sorafenib可显著降低HIF-1α及VM的表达(P<0.05)。结论:益气化瘀解毒方联合Sorafenib不仅可以抑制耐药细胞裸鼠移植瘤生长,亦可抑制其瘤组织HIF-1α与VM的表达,改善瘤组织乏氧微环境状态,拮抗机体Sorafenib耐药。     

Effectiveness of Scutellaria barbata water extract on inhibiting colon tumor growth and metastasis in tumor‐bearing mice

The plant Scutellaria barbata (SB) is commonly used as herbal medicines for treating cancer. The present pre‐clinical study aimed to validate the Chinese Pharmacopoeia (CP) recommended dosages of SB water extract (SBW) in treating colon tumors. The content of chemical marker scutellarin in SBW was quantified using UPLC. Mice bearing human HCT116 xenografts or murine colon26 tumors received oral administration of SBW or scutellarin for 4 weeks. Results showed that SBW (615 and 1,230 mg/kg) and scutellarin (7 mg/kg) treatments significantly reduced human xenograft weights by 28.7, 36.9 and 28.8%, respectively. Lung metastasis area could be ameliorated after SBW (615 mg/kg) and scutellarin (7 mg/kg) treatments by 23.4 and 29.5%, respectively. Expressions of colon cancer metastasis‐related proteins E‐cadherin, Tspan 8 and CXCR4, as well as Src kinase in tumors were first shown to be regulated by SBW. Furthermore, in murine colon26 tumor‐bearing mice, SBW (615 mg/kg) and scutellarin (7 mg/kg) treatments reduced the orthotopic tumor burden by 94.7% and lung metastatic tumor burden by 94.1%, respectively. Our findings provided evidences that SBW (at the mouse equivalent dosages to clinical dosages recommended by CP) could exert anti‐tumor and anti‐metastatic effects in colon cancer animal models.     

外科原位移植人前列腺癌自发转移模型的建立

目的 建立人前列腺癌裸鼠自发转移模型，观察其生长和转移的生物学特性。方法 利用外科原位移植的，取材于人前列腺癌细胞系ＰＣ－３Ｍ裸鼠皮下移植瘤，保持肿瘤组织结构的完整性，通过显微外科手术植于裸鼠前列腺两腹侧叶之间，濒死时处死。结果 动物平均３０ｄ衰竭，处死，原位移植成功率１００％，主动脉地转移发生率１００％，较ＰＣ－３Ｍ肿瘤细胞原位注及ＰＣ－３外科原位移植主动脉旁淋巴结转移发生率更高。结论 肿瘤细胞     

消积抑癌方对Lewis肺癌荷瘤小鼠MMP-2的影响

目的:探讨消积抑癌方对Lewis肺癌荷瘤小鼠MMP-2的影响。方法:建立Lewis肺癌荷瘤小鼠模型,随机分为空白组、荷瘤组、消积抑癌方内服组、消积抑癌方外敷组、消积抑癌方内服联合外敷组。观察各组Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤体积、癌重、抑癌率,对比各组免疫器官重量及血清基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、干扰素(IFN)-γ、IL-10、TNF-α、IL-2水平。结果:第7天、第14天、第21天及第30天,联合组Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤体积、癌重、抑癌率均明显低于荷瘤组、内服组、外敷组; 内服组、外敷组Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤体积、癌重、抑癌率均明显低于荷瘤组,差异具有统计学意义(P<0.05); 空白组、联合组脾脏指数、胸腺指数与荷瘤组、内服组、外敷组比较,差异有统计学意义(P<0.05); 空白组、联合组MMP-2、VEGF、HIF-1α、IFN-γ、IL-10、TNF-α、IL-2水平比较,差异有统计学意义(P<0.05); 内服组、外敷组MMP-2、VEGF、HIF-1α、IFN-γ、IL-10、TNF-α、IL-2水平与荷瘤组、空白组比较,差异有统计学意义(P<0.05); 荷瘤组MMP-2、VEGF、HIF-1α、IFN-γ、IL-10、TNF-α、IL-2水平与空白组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:消积抑癌方内服联合外敷能够有效抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠体内肿瘤,降低MMP-2水平,调节机体免疫功能。     

复方胃肠安对人大肠癌裸鼠原位移植瘤生长和肝转移的影响

目的观察以健脾类中药为基础的复方胃肠安对人大肠癌裸鼠原位肿瘤生长和肝转移的抑制作用。方法采用人大肠癌HCT116细胞制作原位移植瘤模型,将造模后的裸鼠随机分为对照组、胃肠安组、5-Fu组和胃肠安＋5-Fu组。各组采取相应的干预措施。观察各组原位肿瘤的质量、体积、抑瘤率,各组的肿瘤转移特别是肝转移情况,各组原位肿瘤和肝转移瘤的病理形态,以及血清癌胚抗原（CEA）、甲胎蛋白（AFP）浓度。结果各组裸鼠原位移植成瘤率为100％。5-Fu组和胃肠安＋5-Fu组的原位肿瘤平均质量均显著低于对照组（P〈0．01）,胃肠安＋5．Fu组的原位肿瘤平均体积显著小于对照组（P〈0．05）,胃肠安组、5-Fu组和胃肠安＋5-Fu组的抑瘤率分别为19．087％、33．298％、36．802％。胃肠安组和胃肠安＋5-Fu组的肝、腹壁、肠系膜等的转移明显少于对照组（P〈0．05,P〈0．01）,对照组、胃肠安组、5-Fu组和胃肠安＋5-Fu组的总转移率分别为100．00％、50．00％、72．72％、40．00％。胃肠安＋5-Fu组的血清CEA水平显著低于对照组（P〈0．05）。结论复方胃肠安对人大肠癌裸鼠原位肿瘤生长和肝转移具有-定的抑制作用,在配合化疗使用后效果较为显著。