叶下珠复方Ⅱ号对裸鼠肝癌移植瘤生长的抑制作用及机制

目的观察叶下珠复方Ⅱ号对肝癌HepG_2细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用,并探讨其作用机制。方法建立BALB/C裸鼠肝癌HepG_2细胞皮下移植瘤模型,随机分为模型组,叶下珠复方Ⅱ号高、中、低剂量组(17.28,8.64,4.32 g·kg~(-1))和氟尿嘧啶(5-Fu)组(0.025 g·kg~(-1)),给药6周后处死裸鼠,剥离瘤组织称质量。体外观察叶下株复方Ⅱ号对HepG_2细胞增殖、集落形成、细胞周期和细胞凋亡的影响,观察药物作用后Wnt1和β-catenin基因mRNA表达的改变。结果叶下珠复方Ⅱ高、中、低剂量组对裸鼠HepG_2肝癌细胞移植瘤生长的抑制作用明显,与模型组比较,肿瘤质量均明显减轻(P0.01),但与5-Fu组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。叶下珠复方Ⅱ号体外在10 mg·mL~(-1)以上浓度能明显抑制肝癌Hep G2细胞的增殖,呈明显的量-效关系和时-效关系;叶下珠复方Ⅱ号在2 mg·mL~(-1)以上浓度,对HepG_2细胞集落形成呈明显的抑制作用;叶下珠复方Ⅱ号以15,20 mg·mL~(-1)浓度作用HepG_2细胞48 h后,G0/G1期细胞比例明显降低,S期细胞比例显著增加,与细胞对照组比较,差异均具有统计学意义(P0.01);叶下珠复方Ⅱ号在10,15,20 mg·mL~(-1)浓度,作用于HepG_2细胞48 h,细胞早期凋亡率和总凋亡率明显增加,与细胞对照组比较,差异均具有统计学意义(P0.01)。叶下珠复方Ⅱ号高、低剂量组(20,10 mg·mL~(-1))作用于HepG_2细胞48 h后,Wnt1和β-catenin基因m RNA的表达量均明显低于细胞对照组(P0.01,P0.05)。结论叶下珠复方Ⅱ号对BALB/C裸鼠肝癌HepG_2细胞皮下移植瘤的生长具有明显的抑制作用,作用机制与抑制Wnt1/β-catenin基因表达和信号通路活化,从而阻滞细胞周期、抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡有关。     

鳖甲煎丸对HepG2裸鼠移植瘤Wnt信号通路相关分子及靶基因的影响

目的:通过研究鳖甲煎丸对人肝癌Hep G2裸鼠移植瘤组织中Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路相关信号分子及靶基因表达的影响,探讨鳖甲煎丸抗肝细胞癌的分子机制。方法:建立裸鼠移植瘤肝癌模型,随机分为鳖甲煎丸高、中、低剂量(2.2,1.1,0.55 g·kg-1)组,模型组,正常组,肉眼观察鳖甲煎丸对人肝癌Hep G2裸鼠移植瘤生长的抑制作用,免疫组化检测移植瘤组织中β-catenin和T-框蛋白3(TBX3)的表达水平,免疫印迹法(Western blot)检测其移植瘤组织中p19ARF,双微基因2(MDM2),p53的表达水平。结果:鳖甲煎丸对人肝癌Hep G2裸鼠移植瘤生长具有明显的抑制作用,鳖甲煎丸能够抑制其移植瘤组织中β-catenin和TBX3的表达,和模型组比较,鳖甲煎丸高、中剂量组中β-catenin和TBX3表达均明显降低(P0.05)。同时,鳖甲煎丸能够促进人肝癌Hep G2裸鼠移植瘤组织p19ARF和p53表达,并抑制MDM2表达,鳖甲煎丸高、中剂量组p19ARF,p53,MDM2表达较模型组均有明显差异(P0.05)。结论:鳖甲煎丸能通过影响Wnt/β-catenin通路,调控β-catenin和TBX3的表达,继而通过调控TBX3/p19ARF/MDM2通路激活抑癌基因p53,最终抑制肝癌细胞的增殖并诱导其出现凋亡,从而达到抗肝细胞癌的目的。     

冬凌草甲素对人肝癌SMMC-7721细胞增殖侵袭的抑制作用及细胞Wnt2/β-catenin表达的影响

目的:探讨冬凌草甲素对人肝癌SMMC-7721细胞增殖侵袭的抑制作用及细胞Wnt2/β-catenin表达的影响。方法:培养人肝癌SMMC-7721细胞,实验分为阴性对照组,冬凌草甲素低剂量组(10μmol/L),冬凌草甲素中剂量组(20μmol/L),冬凌草甲素高剂量组(40μmol/L)。MTT检测肝癌细胞存活率;流式细胞仪检测肝癌细胞凋亡;RT-PCR检测肝癌细胞Wnt2、β-catenin mRNA的表达;Western Blot检测肝癌细胞内Wnt2、β-catenin蛋白的表达。结果:冬凌草甲素进行剂量干预后,肝癌细胞存活率显著降低(P0.05)。冬凌草甲素以20μmol/L的浓度进行干预后,人肝癌SMMC-7721细胞凋亡高于阴性对照组(P0.05),冬凌草甲素浓度40μmol/L时,人肝癌SMMC-7721细胞凋亡显著高于阴性对照组(P0.01)。冬凌草甲素干预肝癌细胞后,显著降低肝癌细胞内Wnt2、β-catenin mRNA的表达(P0.05)。同时,冬凌草甲素干预后,肝癌细胞内Wnt2、β-catenin蛋白的表达也得到显著降低(P0.05)。结论:冬凌草甲素对人肝癌SMMC-7721细胞增殖侵袭具有明显的抑制作用,其机制可能与抑制Wnt2/β-catenin经典通路上的Wnt2、β-catenin的表达有关。     

三叶青总黄酮对人肝癌HepG-2细胞及裸鼠异种移植瘤的药效作用研究

目的:三叶青抗肝癌作用具有良好的临床基础,而三叶青总黄酮(Total flavonoids from Radix Tetrastigmae,TF)提取物的抗癌活性尤其显著。本研究从细胞-动物实验明确三叶青总黄酮抗肝癌作用,为三叶青治疗肝癌建立药效物质基础。方法:通过CCK-8法检测三叶青总黄酮对肝癌细胞增殖的抑制作用,并计算药物的IC50,确定TF的高、中、低剂量。采用Annexin V-FITC/PI双染法染色HepG2细胞,采用流式细胞仪检测HepG2细胞凋亡率。通过建立人肝癌细胞系HepG2移植瘤裸鼠模型,观察TF对HepG2移植瘤裸鼠模型的体质量、肿瘤生长体积、抑瘤率的影响。结果:TFIC50为3.247 mg/m L,TF的高、中、低的剂量分别为5、1.25、0.312 5 mg/m L;与对照组比较,TF高、中、低浓度剂量48 h后对肝癌HepG2细胞增殖均有明显的抑制作用,且随浓度的增加而逐渐增强,均具有显著差异(P<0.01);TF高、中、低浓度剂量24 h后均有明显促进肝癌HepG2细胞的凋亡作用,且随浓度的增加而逐渐增强,均具有显著差异(P<0.01)。TF的高、中、低剂量的抑瘤率分别为64.07%、53.64%、46.69%,TF高剂量对肝癌小鼠肿瘤生长的抑制作用优于CTX(环磷酰胺),而TF中、低剂量对肝癌小鼠肿瘤生长的抑制作用弱于CTX。结论:三叶青总黄酮(高、中、低浓度)对肝癌HepG2细胞增殖均有明显的抑制作用,且随浓度的增加而逐渐增强;对肝癌细胞的凋亡均有明显促进的作用,且随浓度的增加而逐渐增强。TF高剂量(15g/kg)对肝癌小鼠肿瘤生长的抑制作用优于CTX,而TF中、低剂量(7.5、3.75 g/kg)对肝癌小鼠肿瘤生长的抑制作用弱于CTX。     

叶下珠复方Ⅱ号对肝癌Hep3B细胞裸鼠移植瘤生长和miR-122及IGF-1R表达的影响

目的：观察叶下珠复方Ⅱ号对Hep3B2.1-7人肝癌细胞(简称Hep3B细胞)裸鼠移植瘤生长的抑制作用并探讨其机制。方法：建立肝癌Hep3B细胞裸鼠移植瘤模型,并随机分为模型组、叶下珠复方Ⅱ号高、低剂量组(57.5、28.75 g·kg^-1)和5-氟尿嘧啶(5-FU)组(0.025 g·kg^-1),每组8只。叶下珠复方Ⅱ号高、低剂量组均灌胃给药,每日1次;模型组予同体积生理盐水灌胃;5-FU组采用腹腔注射,隔日1次。给药28 d后处死取移植瘤,以免疫组化(IHC)法检测瘤体组织细胞核抗原(PCNA)表达,以脱氧核糖核酸断裂原位末端标记(TUNEL)法检测瘤体组织细胞凋亡,以实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测移植瘤组织miR-122和胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)的mRNA表达,以蛋白免疫印迹法(Western blot)检测瘤体组织CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、肝细胞核因子-4α(HNF-4α)和IGF-1R的蛋白表达。结果：叶下珠复方Ⅱ号高、低剂量组和5-FU组的抑瘤率分别为74.90%、6...     

腺病毒介导的P53基因对人肝癌细胞抑制作用的实验研究

目的:研究重组腺病毒介导的野生型p53基因对人肝癌细胞系HepG2的抑制作用。方法:用MTT比色法检测重组人p53腺病毒(Ad-p53)在不同感染滴度、不同感染时间对人肝癌细胞HepG2生长的抑制作用,用流式细胞仪检测Ad-p53作用后HepG2细胞的凋亡率;采用瘤内注射的方法观察Ad-p53对裸鼠移植瘤的抑制作用。结果:Ad-p53对HepG2细胞有明显的抑制效应,效靶比(MOI)越高、作用时间越长,抑制作用越强;当rAd-p53在125MOI效靶比时,细胞生长基本达到完全抑制;p53转导显著增加了HepG2细胞的凋亡率;瘤内注射Ad-p53后,荷瘤裸鼠的肿瘤生长受到明显抑制。结论:Ad-p53对人肝癌HepG2细胞有明显的抑制效应,其抑制效应具有时间、剂量依赖关系,Ad-p53转导野生型p53基因可能是一种有效的肝癌基因治疗途径。     

毒痰瘀脾虚方含药血清对HepG2肝癌细胞影响的实验研究

目的:研究毒痰瘀脾虚方含药血清对Hep G2肝癌细胞Wnt/β-catenin信号通路中相关基因及细胞侵袭、迁移、凋亡的影响。方法:采用RT-qPCR实验观察毒痰瘀脾虚方含药血清对Hep G2肝癌细胞Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin mRNA、MMP2 mRNA、Cyclin D1 mRNA表达的影响;Transwell细胞侵袭和迁移实验,观察其对Hep G2肝癌细胞侵袭和迁移的影响;AnnexinV-FITC双染流式细胞法检测其对Hep G2肝癌细胞凋亡的影响。结果:RT-qPCR结果显示,与阴性组比较,毒痰瘀脾虚方含药血清能下调HepG2肝癌细胞Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin mRNA、MMP2 mRNA、Cyclin D1 mRNA的表达,差异有统计学意义(P0.01或P0.05);Transwell细胞侵袭实验和迁移实验结果显示,毒痰瘀脾虚方含药血清能抑制Hep G2细胞的侵袭(P0.01),对细胞的迁移无明显影响(P0.05);细胞凋亡实验结果显示,毒痰瘀脾虚方含药血清能促进Hep G2细胞的凋亡,与阴性组比较,差异有统计学意义(P0.01)。结论:毒痰瘀脾虚方含药血清能抑制Hep G2细胞侵袭,促进细胞凋亡,并能抑制Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin mRNA、MMP2 mRNA、Cyclin D1 mRNA表达。     

复方叶下珠对人HepG 2.2.15 细胞移植裸鼠HBxAg表达的影响

中药复方叶下珠是深圳市中医院肝病中心结合乙型肝炎所致肝癌和癌前病变患者临床特点,通过辨证论治、精心设计并显示有较好临床疗效的经验方。本研究选择Balb/c-nu小鼠人肝癌细胞(HepG2·2·15)移植瘤模型,以复方叶下珠进行处理,研究造模前后裸鼠的形态学、HBxAg表达等相关指标,试图从在体动物角度,为复方叶下珠的肝癌防治作用提供试验依据。1材料1·1接种细胞液氮冻存人肝癌HepG 2·2·15细胞株,购自解放军458医院全军传染病中....     

复方半枝莲抑制人结肠癌COLO205细胞增殖

目的:探讨复方半枝莲对人结肠癌细胞COLO205体内外生长的抑制作用及机制。方法:体外培养COLO205细胞,分为空白组,顺铂(0.15 g·L~(-1))组,复方半枝莲高、中、低剂量(0.60,0.30,0.15 g·L~(-1))组。利用噻唑蓝(MTT)法检测复方半枝莲对COLO205细胞增殖抑制率的影响。采用免疫印迹法(Western blot)分别检测细胞内凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),细胞凋亡调控因子(PUMA)的表达情况。选用SPF级裸鼠,于背部接种结肠癌COLO205细胞,待瘤体长到肉眼可见时,测量瘤体大小,根据瘤体大小区间随机分为复方半枝莲高、低浓度组,紫杉醇组和空白组,应用结肠癌移植瘤裸鼠模型体内实验检测复方半枝莲对COLO205细胞体内生长的影响。结果:体外细胞实验表明,经复方半枝莲作用后的人结肠癌细胞COLO205细胞出现了变形,并有细胞膜破损,细胞数逐渐减少,脱落而死亡的现象。48 h时复方半枝莲对COLO205细胞的抑制作用最强。其高、中、低剂量组抑制率分别为68.46%,63.11%,54.91%;且经复方半枝莲干预,COLO205细胞内的Bax,PUMA表达上调,Bcl-2表达下调;体内移植瘤实验显示,与空白组肿瘤体积比较,给药组的肿瘤体积明显减小。结论:复方半枝莲在体外内对人结肠癌细胞COLO205的生长均具有抑制作用,其机制可能与诱导细胞凋亡有关。     

消瘤汤抗肿瘤作用的实验研究

目的:探讨中药复方消瘤汤对小鼠肝癌模型的抗肿瘤作用。方法:用腋下注射Hep G2细胞造成小鼠腋下皮下肿瘤移植模型,给予小鼠消瘤汤灌胃后查看对肿瘤组织的抑制作用;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测消瘤汤含药血清对HepG2细胞的生长抑制作用;用PCR ELISA法测定HepG2细胞端粒酶的活性。结果:药物组瘤重明显比生理盐水组小,以大剂量组最为明显,抑制率达41.88%;MTT法显示肿瘤细胞抑制率与药物剂量呈直线关系;消瘤汤大剂量组对肝癌组织端粒酶活性有明显的抑制作用(P<0.01)。结论:消瘤汤有明显的抗实验性小鼠肝癌的作用,有可能与抑制肿瘤细胞端粒酶活性有关。     

复方天仙胶囊体内诱导鼻咽癌细胞凋亡的作用研究

目的:本研究旨在评价复方天仙胶囊诱导鼻咽癌裸鼠移植瘤细胞凋亡作用的能力。方法:将移植人鼻咽癌CNE1细胞的裸鼠随机分为3组:复方天仙胶囊组、空白对照组、环磷酰胺(CTX)组,定期检测裸鼠的体重及肿瘤体积,给药一个疗程(30d)后解剖获取肿瘤组织,称量瘤体重量,计算抑瘤率。运用TUNEL法检测细胞凋亡;免疫组化法检测瘤组凋亡相关基因Bcl-2、Bax的表达改变。结果:动物实验表明,复方天仙胶囊对CNE1移植瘤有明显的抑瘤作用,TUNEL法检测复方天仙胶囊组凋亡指数明显高于对照组(P<0.01);且Bcl-2蛋白的表达在移植瘤中明显低于对照组(P<0.05),而Bax蛋白的表达明显升高(P<0.05)。结论:复方天仙胶囊在体内具有抑制鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的作用,其抑瘤作用机制与诱导细胞凋亡有关。     

夜香树甾体皂苷抗人肝癌裸鼠移植瘤的研究

目的: 观察夜香树甾体皂苷(SSCN)对肝癌HepG2移植瘤的抑制作用,并探讨其抑瘤的可能机制。方法: 从夜香树叶中提取并鉴定SSCN;建立BALB/c裸鼠HepG2肝癌模型,建模成功后将荷人肝癌裸鼠随机分为5组:生理盐水组(NS)、沙利度胺组(TLD 200 mg·kg^-1),SSCN低,中,高组(4,6,8 mg·kg^-1,ip, 隔日1次,连续30 d),观察SSCN的肿瘤抑制作用。治疗期间测量皮下移植瘤的长径和短径;30 d后处死裸鼠,剖取肿瘤,行常规制片,HE染色,镜下观察肿瘤病变;免疫组化染色,观察并检测移植瘤中增殖细胞核抗原PCNA和Ki-67蛋白的表达。结果: TLD组裸鼠ip对肝癌HepG2 BALB/c裸鼠相对肿瘤增殖率为42.19%,SSCN 4,6,8 mg·kg^-1的增殖率分别为48.26%,42.94%,41.57%,随着剂量的增高其相对肿瘤增殖率逐渐下降,SSCN抑制肿瘤生长的作用存在剂量依赖性。镜下观察,SSCN高剂量组见到大量坏死细胞外,部分肿瘤细胞体积较小,细胞核浓染。NS组荷瘤小鼠的肿瘤细胞中PCNA和Ki-67蛋白的表达率明显增高;而与NS组比较,TLD组和SSCN高剂量组PCNA和Ki-67蛋白的表达显著下降(P<0.05)。结论: 夜香树甾体皂苷体内对BALB/c小鼠肝癌移植瘤有一定的抑制作用,其作用机制可能是通过下调PCNA和Ki-67基因蛋白的表达,从而抑制肿瘤细胞的增殖。     

人参皂苷Rh_2通过激活GSK-3β降解β-catenin发挥抗肝癌作用研究

目的探讨人参皂苷Rh2抗肝癌作用机制。方法 HE染色观察HepG2和HepG2-β-catenin荷瘤裸鼠肿瘤组织的细胞形态;免疫组化检测GSK-3β、β-catenin和MMP-3表达;ELISA法检测肿瘤细胞GSK-3β活性;PCR检测GSK-3β、β-catenin、Bcl-2、Cyclin D1、Bax和MMP-3基因的表达;Western blotting蛋白印迹法检测GSK-3β和β-catenin的表达。结果 HepG2组和HepG2-β-catenin组荷瘤裸鼠肿瘤细胞核成异型性,占整个细胞比例大,但HepG2-β-catenin组更明显。HepG2-β-catenin+人参皂苷Rh2组和HepG2+人参皂苷Rh2组肿瘤细胞胞核固缩,出现大量破碎细胞,而HepG2+人参皂苷Rh2组肿瘤细胞核固缩及破碎细胞更明显。免疫组化结果显示人参皂苷Rh2诱导HepG2及HepG2-β-catenin荷瘤裸鼠后,GSK-3β表达增强,β-catenin、MMP-3表达降低;HepG2+人参皂苷Rh2组中β-catenin、MMP-3表达弱于HepG2-β-catenin+人参皂苷Rh2组,而GSK-3β表达则无明显差异。ELISA结果显示,人参皂苷Rh2诱导HepG2及HepG2-β-catenin荷瘤裸鼠后,GSK-3β的活性均升高。PCR结果显示,HepG2+人参皂苷Rh2组中β-catenin、Cyclin D1、Bcl-2基因表达弱于HepG2-β-catenin+人参皂苷Rh2组,Bax基因表达增强更明显,而GSK-3β基因表达无明显差异。Western blotting结果显示,HepG2+人参皂苷Rh2组中β-catenin蛋白表达弱于HepG2-β-catenin+人参皂苷Rh2组,而GSK-3β蛋白表达无明显差异。结论人参皂苷Rh2对肝癌的抑制作用是通过激活GSK-3β降解β-catenin而实现的,且能抑制肿瘤的转移。     

刺五加皂苷脂质体的制备及对肝癌移植瘤的抑制作用

目的:制备刺五加皂苷脂质体并研究其对肝癌移植瘤的抑制作用。方法:采用薄膜分散-超声法制备刺五加皂苷脂质体并检测其理化性质,用流式细胞仪检测此载药脂质体对HepG2肝癌细胞周期和凋亡的影响,并观察刺五加皂苷脂质体荷瘤小鼠的抑瘤作用。结果:所制备的脂质体封率为63.43%,刺五加皂苷脂质体组与游离刺五加皂苷组均使肝癌细胞G0/G1期和S期比例明显下降,并观察到细胞凋亡,高剂量刺五加皂苷脂质体组荷瘤小鼠的抑瘤率(62.21%)显著高于低剂量组(45.23%)和游离刺五加皂苷组(46.16%,P均<0.05),而低剂量刺五加皂苷脂质体组与游离刺五加皂苷组无明显差异(P>0.05)。结论:刺五加皂苷脂质体能抑制肝癌细胞Hep G2增殖和诱导细胞凋亡,对小鼠肝癌移植瘤的生长有明显抑制作用。     

三氧化二砷对胰腺癌 BXPC-3 细胞移植瘤的体内抑制作用

目的探讨三氧化二砷在体内对胰腺癌BXPC-3细胞移植瘤的抑制作用,并探讨其初步机制。方法建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型,随机分为4组:模型组,低剂量、高剂量(2.5、5.0 mg/kg)三氧化二砷组和吉西他滨组,各组ip给药,作用2周后,检测实验前后裸鼠体质量变化,观察药物对肿瘤生长的影响,免疫组化检测肿瘤细胞增殖因子ki-67的表达,TUNEL法检测移植瘤组织的细胞凋亡。结果给药2周后,各组裸鼠体质量变化差异不显著,三氧化二砷和吉西他滨均可抑制裸鼠移植瘤的体积和质量,且三氧化二砷(5 mg/kg)组作用较强;免疫组化结果显示三氧化二砷可明显降低细胞增殖因子ki-67的阳性表达;TUNEL检测表明三氧化二砷可明显诱导移植瘤肿瘤细胞凋亡。结论三氧化二砷可抑制胰腺癌BXPC-3细胞在裸鼠体内的生长;作用机制可能为抑制肿瘤细胞增殖及促进肿瘤细胞凋亡。     

叶下珠复方Ⅱ号对肝癌Huh7细胞miR-122表达及IGF-1R信号通路的调控作用

目的观察叶下珠复方Ⅱ号对肝癌Huh7细胞miR-122表达及胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)信号通路的影响,探讨其抗肝癌作用机制。方法采用反义寡核苷酸技术(siRNA)建立miR-122表达抑制肝癌Huh7细胞株(anti-miR-122-Huh7细胞)。体外培养Huh7、anti-miR-122-Huh7细胞,分别设置对照组、叶下珠复方Ⅱ号高剂量组(3.0 mg·mL^-1)和低剂量组(1.5 mg·mL^-1)。采用噻唑蓝(MTT)比色法检测2种细胞增殖;流式细胞术检测anti-miR-122-Huh7细胞调亡;采用qRT-PCR法和Western Blot法分别检测miR-122及其转录因子C/EBPα、靶基因IGF-1R及下游AKT3、KRAS、ERK1和CyclinG1基因表达。结果与肝癌Huh7细胞比较,anti-miR-122-Huh7细胞miR-122的表达显著下降、靶基因IGF-1R蛋白表达明显升高(P<0.05),miR-122表达抑制肝癌Huh7细胞构建成功。与对照组比较,叶下珠复方Ⅱ号高、低剂量组作用于肝癌Huh7细胞后,可以显著上调miR-122的表达(P<0.05),并下调IGF-1R mRNA的表达(P<0.05);叶下珠复方Ⅱ号高、低剂量组均可显著抑制Huh7、anti-miR-122-Huh7细胞的增殖(P<0.05),且对anti-miR-122-Huh7细胞抑制作用更为明显(与Huh7细胞比较,P<0.05)。与对照组比较,叶下珠复方Ⅱ号高、低剂量组作用于anti-miR-122-Huh7细胞后,细胞晚期凋亡率及总凋亡率均显著升高(P<0.05);高剂量组的miR-122表达及miR-122的上游转录因子C/EBPα的mRNA和蛋白表达明显上调(P<0.05);高、低剂量组的IGF-1R及下游AKT3、KRAS、CyclinG1基因的mRNA、蛋白表达均显著下调(P<0.05),且ERK1蛋白表达亦明显下调(P<0.05)。结论叶下珠复方Ⅱ号可能通过提高miR-122的表达,抑制IGF-1R信号通路活化,从而抑制肝癌Huh7细胞增殖和促进其凋亡。     

优化治疗神经胶质瘤复方抗瘤丸的实验研究

目的:通过实验研究,优化治疗神经胶质瘤中药复方抗瘤丸(KLW)的组成,得出最佳处方配伍。方法:采用大鼠神经胶质瘤C6细胞BALB/c裸鼠移植瘤模型,将模型裸鼠按瘤块体积随机分为10组(模型组,阳性药对照组(替莫唑胺TMZ组),KLW-1、KLW-2、KLW-3、KLW-4高、低剂量组,每组7只裸鼠。)连续给药15 d,检测各组裸鼠体重、瘤块体积、瘤块重量、微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子(VEGF)、凋亡细胞、Bcl-2,Bax蛋白表达水平。结果:与模型组比较,KLW-1高、低剂量组,KLW-2、KLW-4高剂量组,TMZ组瘤体积显著减小(P<0.05);KLW-4高剂量组,TMZ组移植瘤的MVD值明显降低(P<0.05);KLW-2、KLW-4高剂量组,TMZ组移植瘤VEGF灰度值明显增高(P<0.05);KLW-1、KLW-2、KLW-4高剂量组,TMZ组细胞凋亡率显著增高(P<0.05);各给药组Bcl-2/Bax的比例增加。结论:处方KLW-1高、低剂量组,KLW-2、KLW-4高剂量组对C6移植瘤的生长具有较好的抑制作用。     

西兰花中葡萄糖异硫氰酸盐诱导HepG2细胞凋亡

目的:研究西兰花中葡萄糖异硫氰酸盐(glucosinolates,GS)诱导肝癌HepG2细胞凋亡作用及其机制。方法:不同浓度GS处理肝癌HepG2细胞,通过SRB法、细胞形态学观察、流式细胞仪和激光共聚焦显微镜观察GS对HepG2细胞的生长抑制作用及其对细胞凋亡的影响。结果:GS可抑制HepG2细胞的增殖,其GI50为318.4μg·mL-1;300μg·mL-1的GS作用HepG2细胞24h后,细胞出现早期凋亡的形态;300、600μg·mL-1的GS对HepG2细胞凋亡率分别为(17.22±3.45)%和(25.50±5.72)%;100、200、300μg·mL-1的GS作用于HepG2细胞24h后,细胞内的Ca2 浓度显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论:GS能够诱导人肝癌细胞系HepG2细胞凋亡,其机制与GS升高细胞内Ca2 浓度有关。     

夜香树甾体皂苷抑制人肝癌裸鼠移植瘤的研究

目的: 观察夜香树甾体皂苷(SSCN)对HepG2肝癌移植瘤的抑制作用,并探讨其抑瘤的可能机制。方法: 从夜香树叶和嫩枝用有机溶剂提取、分离并鉴定SSCN。应用人肝癌细胞株HepG2皮下接种法建立移植瘤模型,建模成功后将荷人肝癌裸鼠随机分为5组:生理盐水组0.2 mL·次^-1、沙利度胺(TLD)组200 mg·kg^-1和SSCN低,中,高剂量组4,6,8 mg·kg^-1。隔天ip给药,在治疗期间测量皮下移植瘤的长径和短径;30 d后处死裸鼠,免疫组化法检测移植瘤中微血管密度(MVD)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达,用酶联免疫法(ELISA)法检测裸鼠血清中白细胞介素-8(IL-8)的表达。结果: SSCN低,中,高剂量ip给药对肝癌裸鼠移植瘤相对肿瘤细胞增殖率分别为对照组(100%)的48.26%,42.94%,41.57%,TLD组的相对肿瘤增殖率为42.19%。SSCN各组及TLD组的MVD,VEGF和IL-8的水平都明显低于模型组(P<0.01)。结论: 夜香树叶甾体皂苷体内对BALB/c裸鼠肝癌移植瘤有一定的抑制作用,其作用机制可能通过抑制VEGF,MVD的表达以及IL-8的转录,导致肿瘤血管生成受到抑制。     

三氧化二砷对胰腺癌BXPC-细胞移植瘤的体内抑制作用

目的探讨三氧化二砷在体内对胰腺癌BXPC-3细胞移植瘤的抑制作用, 并探讨其初步机制。方法建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型, 随机分为4组:模型组, 低剂量、高剂量(2.5、5.0 mg/kg)三氧化二砷组和吉西他滨组, 各组ip给药, 作用2周后, 检测实验前后裸鼠体质量变化, 观察药物对肿瘤生长的影响, 免疫组化检测肿瘤细胞增殖因子ki-67的表达, TUNEL法检测移植瘤组织的细胞凋亡。结果给药2周后, 各组裸鼠体质量变化差异不显著, 三氧化二砷和吉西他滨均可抑制裸鼠移植瘤的体积和质量, 且三氧化二砷(5 mg/kg)组作用较强;免疫组化结果显示三氧化二砷可明显降低细胞增殖因子ki-67的阳性表达;TUNEL检测表明三氧化二砷可明显诱导移植瘤肿瘤细胞凋亡。结论三氧化二砷可抑制胰腺癌BXPC-3细胞在裸鼠体内的生长;作用机制可能为抑制肿瘤细胞增殖及促进肿瘤细胞凋亡。