参芪扶正注射液对小鼠肝转移癌组织基因表达谱的影响

目的 探讨参芪扶正注射液对小鼠肝转移癌组织基因表达谱的影响。方法 20只小鼠采用将结肠癌C26细胞株瘤细胞液0.2 mL注射于脾脏建立肝转移癌模型,随机分为两组,造模后5日,分别给予参芪扶正注射液（参芪组）和生理盐水（模型组）腹腔内注射,隔日1次,共5次;造模后15日处死动物留取检测标本,应用小鼠全基因芯片分析两组肝癌组织基因表达谱。结果 （1）造模成功率100%;（2）基因表达：与模型组比较,参芪组上调基因123个,其中Ensemble数据库登录52个;下调基因1个,其中Ensemble数据库登录0个。结论 参芪扶正注射液主要是通过上调多种基因促进肿瘤细胞凋亡和稳定染色体而发挥抗肿瘤作用。     

白头翁总皂苷调控CXCR4/CXCL12信号通路抑制小鼠结肠癌肝转移的机制研究

目的 观察白头翁总皂苷对小鼠结肠癌肝转移的抑制作用,并探讨其通过调节趋化因子受体4(CXCR4)/趋化因子12(CXCL12)通路发挥作用的机制.方法 将50只BALB/c裸小鼠随机分为假手术组、模型组、阳性对照组、白头翁总皂苷低剂量、高剂量组(100、200 mg/kg),每组10只.以希罗达组(267 mg/kg)作为阳性对照药,采用结肠癌细胞脾脏注射法制备小鼠CT26细胞肝转移模型.白头翁总皂苷低剂量、高剂量组和希罗达组每日灌胃给药,连续治疗3周,假手术组和模型组均给予等量生理盐水灌胃.小鼠处死后取肝、脾组织及瘤组织,比较各组小鼠肝脏、脾脏质量和抑瘤率;ELISA实验检测小鼠血清中白介素-6(IL-6)、转化生长因子-α(TNF-α)水平,免疫组化检测小鼠肝组织中血管内皮生长因子(VEGF)、血小板内皮细胞黏附分子(CD31)的蛋白阳性表达;Western-blot及RT-PCR检测脾脏瘤组织中CXCR4、CXCL12、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的蛋白和mRNA表达.结果 与假手术组相比,模型组小鼠肝、脾质量明显上升(P<0.01),小鼠血清中IL-6、TNF-α 水平及肝组织中VEGF、CD31的阳性表达明显升高(P<0.01),小鼠脾脏瘤组织中CXCR4、CXCL12、MMP-9、MMP-2的蛋白和mRNA表达均显著增多(P<0.01).白头翁总皂苷低、高剂量组小鼠肝、脾质量显著低于模型组,抑瘤率分别为45.8％、52.3％;血清IL-6、TNF-α 水平、肝组织VEGF、CD31阳性表达以及脾脏瘤组织中CXCR4、CXCL12、MMP-9、MMP-2的蛋白和mRNA表达较模型组均明显降低(P<0.05,P<0.01).结论 白头翁总皂苷可显著抑制小鼠CT26细胞结肠癌肝转移,其机制可能与下调瘤组织中CXCR4/CXCL12信号通路的表达相关.     

老鹳草提取物对人结肠癌细胞株裸鼠肝转移的影响

目的:建立人结肠癌细胞株裸鼠肝转移模型,研究老鹳草提取物对裸鼠肝转移模型的影响.方法:采用BALB/C裸鼠,Ls174t人大肠癌细胞株,脾脏切除脾脏种植法建立裸鼠肝转移模型.将36只裸鼠随机分成模型对照组、老鹳草提取物组和羟基喜树碱阳性对照组,给予老鹳草提取物喂养,观察一般情况及肿瘤生长情况;采用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测裸鼠循环血中pS2表达;标本作病理组织学检查.结果:①脾脏切除脾脏种植法建立裸鼠结肠癌肝转移模型的成功率为100%,病理组织学证实肝转移癌细胞呈人结肠癌低分化腺癌特征;②老鹳草提取物组裸鼠肿瘤数目及质量明显低于羟基喜树碱组(P＜0.05);③老鹳草提取物组裸鼠血中pS2表达为7.598±0.046,明显高于羟基喜树碱组3.794±0.020(P＜0.05).结论:老鹳草提取物可显著降低肝转移裸鼠血中pS2表达,抑制裸鼠结肠癌肝转移的发展,且效果优于羟基喜树碱,可作为大肠癌术后预防复发和肝转移的治疗手段之一.     

片仔癀对小鼠结肠癌细胞增殖及肝转移的抑制作用

目的观察片仔癀对小鼠结肠癌细胞(CT26)增殖及肝转移的抑制作用。方法用MTT法观察片仔癀对CT26的增殖抑制作用,以BALB/c小鼠为研究对象,用脾脏注射法建立结肠癌CT26小鼠肝脏转移瘤模型,随机分为对照组、片仔癀组,观察各组小鼠的生存状态等一般情况,分析脾脏、肝脏成瘤情况,计算成瘤率。结果片仔癀对CT26增殖有明显的抑制作用,并呈剂量依赖关系;脾脏注射法成功建立CT26肝转移的动物模型,成瘤率100%,1周内对小鼠一般情况没有明显影响;片仔癀能抑制CT26肝转移作用。结论脾脏注射法建立的CT26肝转移小鼠模型可用于结肠癌肝转移的研究,片仔癀对CT26增殖及肝转移有明显的抑制作用。     

肝气郁结对结肠癌模型小鼠肝转移的影响

目的通过构建肝气郁结证模型,观察肝气郁结对结肠癌肝转移的影响并探讨β-AR信号通路在其中的作用机制。方法通过束缚制动法构建肝气郁结证模型,将BALB/C裸小鼠随机分为空白对照组、普萘洛尔对照组、ICI118,551对照组、空白肝郁组、普萘洛尔肝郁组、ICI118,551肝郁组,共六组,每组6只。ELISA法检测血清、脾种植瘤肾上腺素(epinephrine,E)、去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)含量;qRT-PCR和Western blot法检测脾脏种植瘤组织转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotein-9,MMP-9)表达情况;免疫组化法观察肝转移瘤组织VEGF和CD31蛋白表达情况。结果与空白对照组相比,空白肝郁组小鼠肝脏重量明显升高(P0.01),并能升高小鼠血清NE、E水平及脾脏NE水平(P0.01、P0.05、P0.05),差异具有统计学意义;与对照组相比,肝郁组小鼠脾脏肿瘤组织中TGF-β、IL-6、VEGF、MMP-9蛋白以及mRNA的表达显著升高(P0.01),而给予普萘洛尔或ICI118,551后表达降低(P0.01、P0.05),差异具有统计学意义;肝郁组肝转移瘤VEGF、CD31表达明显高于对照组(P0.01),给予普萘洛尔或ICI118,551后,则表达降低(P0.01、P0.05),差异有统计学意义。结论肝气郁结可通过介导β2-AR信号通路促进结肠癌肝转移。     

异功散通过抑制炎症反应促进慢性病贫血小鼠脾组织结构修复研究

目的观察异功散通过抑制炎症反应,对慢性病贫血小鼠脾组织结构修复的影响。方法将60只8周龄雄性C57 BL/6小鼠随机分为空白对照组、模型组、异功散组,每组20只。除空白对照组外,其余各组复制慢性病贫血小鼠模型(第1天腹腔注射脂多糖,第7天腹腔注射酵母糖A)。注射酵母糖A后第5天,异功散组灌胃异功散水煎液(15.413 g·kg~(-1)·d~(-1)),空白对照组、模型组灌胃0.2 ml超纯水。各组分别于连续干预1周和2周后采集全血,自动细胞计数仪检测白细胞计数、中性粒细胞计数及血红蛋白水平;分离脾组织,HE染色观察脾组织结构,电镜观察小鼠脾脏线粒体情况。结果与空白对照组比较,模型组白细胞及中性粒细胞计数升高(P0.01),血红蛋白水平下降(P0.01);脾脏明显增大,脾脏指数增加(P0.01),脾组织线粒体正常结构消失。连续干预1周和2周后,与模型组比较,异功散组小鼠白细胞及中性粒细胞计数明显下降(P0.01),血红蛋白水平明显升高(P0.01);脾脏均明显缩小,脾脏指数降低(P0.01);电镜下观察到小鼠脾脏线粒体结构接近正常,受损线粒体数量减少。结论异功散可通过抑制炎症反应,减少炎症因子对脾组织结构的损伤,进而改善慢性病贫血小鼠的贫血状况。     

苦参碱对结肠癌肝转移小鼠SCAP/SREBP1信号通路的调节作用研究

[目的] 研究苦参碱对结肠癌肝转移小鼠肿瘤抑制作用及对SCAP/SREBP1信号通路的调节作用。[方法] 72只小鼠随机分为空白对照组、肝转移模型组、苦参碱低、中、高剂量组及卡培他滨组,每组12只,采用脾内注射结肠癌HCT116细胞法建立结肠癌肝转移小鼠模型,苦参碱低、中、高剂量组分别灌胃给予12.5、25、50 mg/kg的苦参碱,给药21 d,卡培他滨组按照267 mg/kg灌胃给予卡培他滨,测定小鼠肝脏质量及肝转移结节数,酶联免疫吸附法（ELISA）测定肝组织转化生长因子β1蛋白（TGF-β1）、白介素（IL）-6水平,苏木精-伊红（HE）染色法检查肝组织病理学,实时定量聚合酶链式反应（PCR）测定肿瘤组织SCAP、SREBP1 mRNA水平,免疫印迹（Western blot）法测定肿瘤组织SCAP、SREBP1水平。[结果] 与空白对照组比较,肝转移模型组小鼠肝脏质量、肝转移结节数、肝组织TGF-β1及IL-6水平、肿瘤组织SCAP、SREBP1 mRNA及蛋白水平显著升高（P<0.05）;与肝转移模型组比较,苦参碱各剂量组肝脏质量、肝转移结节数、肝组织TGF-β1及IL-6水平、肿瘤组织SCAP、SREBP1 mRNA及蛋白水平显著降低（P<0.05）,随着苦参碱剂量的增加,各项指标降低更明显。[结论] 苦参碱能够显著抑制结肠癌肝转移,缓解肝组织病理学改变,其机制可能与调节SCAP/SREBP1信号通路有关。     

淫羊藿苷抑制小鼠结肠癌肝转移作用及机制研究

目的探讨淫羊藿苷(Icariin,Ica)对CT26小鼠结肠癌肝转移瘤生长的抑制及其机制。方法建立结肠癌肝转移小鼠模型,随机分为模型组,Ica高、中、低剂量组和希罗达组,每组7只,ig给药,3周后比较小鼠体重、肝重、瘤重及肺和腹膜转移情况。HE染色法分析Ica处理后各组转移瘤组织中的细胞生长情况,免疫组化SP法检测肿瘤组织中p53、Bax、Bcl-2的表达。结果 Ica能够抑制结肠癌肝转移瘤鼠的肿瘤生长;HE染色结果显示Ica处理后的肿瘤细胞凋亡明显增多,且呈剂量依赖性。免疫组化结果表明,Ica作用后的转移瘤组织中p53和Bax蛋白上调,Bcl-2蛋白下调,且呈剂量依赖性。结论 Ica可显著抑制小鼠CT26细胞结肠癌肝转移瘤的生长,其机制可能与上调p53和Bax蛋白,下调Bcl-2蛋白有关。     

消痰通腑方对结肠癌肝转移模型小鼠胰岛素生长因子蛋白表达的影响

目的从基因和蛋白水平研究消痰通腑方对结肠癌肝转移模型小鼠肝组织中胰岛素生长因子-I（IGF-Ⅰ）及其受体（IGF-ⅠR）、结合蛋白3（IGFBP-3）表达的影响,并探讨其机制。方法将造模成功的小鼠随机分为模型组、中药组,另设空白组,每组10只,中药组给予消痰通腑方灌胃,每日1次。待模型组小鼠成恶病质状态时,处死小鼠,取瘤组织及肝组织,观察各组荷瘤鼠肿瘤生长情况及抑瘤率、肝转移率及肝转移灶大小,肝质量及肝脏指数。并运用免疫组化法检测各组小鼠肝脏组织IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR、IGFBP-3蛋白表达。结果模型组及中药组肝转移率均为100%,但中药组肝转移灶小于模型组（P〈0.05）;中药组小鼠瘤质量、肝质量、肝脏指数均低于模型组（P〈0.05）,与空白组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;中药组小鼠肝组织中IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR蛋白表达均低于模型组（P〈0.05）,与空白组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。中药组小鼠肝组织中IGFBP-3蛋白表达高于模型组（P〉0.05）,与空白组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论消痰通腑方可以调节结肠癌肝转移组织中IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR、IGFBP-3蛋白表达,这可能是其抗结肠癌肝转移的机制之一。     

消痰通腑方对结肠癌荷瘤小鼠肝组织中IGF-I及其受体(IR)蛋白和基因表达的影响

目的:观察消痰通腑方对小鼠结肠癌CT26盲肠原位移植瘤肝转移的影响及肝组织中胰岛素生长因子IGF-I/IR表达的影响,探讨消痰通腑方干预结肠癌肝转移的作用机制。方法:将造模成功的小鼠随机分为模型组、中药组,另设正常组,每组10只,中药组给予消痰通腑方灌胃,每日2次。待模型组小鼠成恶病质状态时,处死小鼠,取瘤组织及肝组织,观察各组荷瘤鼠肿瘤生长情况及抑瘤率;并运用免疫组化及实时荧光定量聚合酶链式反应(real time PCR)观察各组荷瘤鼠结肠癌组织IGF-I/IGF-IR蛋白及mRNA表达。结果:中药组小鼠瘤重、肝重、肝脏指数均低于模型组(P0.05),与空白组比较,差异无统计学意义(P0.05),中药组小鼠肝组织中IGF-I/IGF-IR蛋白及mRNA的表达均低于模型组(P0.05),与空白组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:消痰通腑方可明显抑制小鼠结肠癌CT26原位移植瘤的生长,且能抑制肝脏转移,下调结肠癌肝转移组织中IGF-I/IGF-IR蛋白及mRNA的表达,可能是其抗结肠癌肝转移的机制之一。