金钗石斛提取物抗白内障的体外实验研究

目的研究金钗石斛总生物碱和粗多糖对白内障的抑制作用。方法采用溶剂提取法分离提取金钗石斛总生物碱和粗多糖;DMEM低糖培养基体外培养Wistar大鼠晶状体,将晶状体分为7个组,分别在培养后6、12、18、24 h四个时段观察并记录晶状体混浊度的改变;最后,检测各组晶状体水溶性蛋白、GSH的含量、及T-SOD和MDA的活性。结果在培养的各个时段,正常对照组晶状体始终保持透明,各药物组晶状体混浊度与模型组相比明显较轻（P〈0.05）,而石斛总生物碱高剂量组和阳性对照组混浊程度最轻;金钗石斛总生物碱组、粗多糖组晶状体水溶性蛋白、GSH含量及T-SOD活性均升高,同时MDA的活性降低;其中总生物碱高剂量组晶状体水溶性蛋白含量显著高于阳性对照组水平（P〈0.05）,其MDA活性则显著低于阳性对照组（P〈0.05）。结论金钗石斛总生物碱和粗多糖在体外均有一定的抗白内障之效,而总生物碱的效果优于粗多糖。     

金钗石斛总生物碱对侧脑室注射链脲佐菌素所致痴呆大鼠脑内胰岛素信号的影响

目的:观察金钗石斛总生物碱对散发型老年痴呆动物脑内胰岛素信号的影响。方法:采用双侧侧脑室注射链脲佐菌素制备大鼠散发型老年痴呆模型,空白对照组大鼠侧脑室注射溶媒。术后动物分为:模型对照组、金钗石斛总生物碱20 mg/kg、40 mg/kg组,另设空白对照组、空白+总生物碱(40 mg/kg)组。治疗组大鼠灌胃相应剂量的总生物碱,空白对照和模型对照组大鼠灌胃等体积蒸馏水,每天1次,连续28 d。灌胃结束前6 d采用Morris水迷宫检测大鼠行为学功能;麻醉处死大鼠并收集大脑,HE染色观察海马神经元形态及数量,Western blot法检测海马胰岛素受体(IR)、胰岛素底物-1(IRS-1)、蛋白激酶B(Akt)的蛋白表达水平及磷酸化程度。结果:水迷宫结果提示,与空白对照组大鼠相比,模型对照组大鼠逃避潜伏期明显延长;与模型对照组相比,给予金钗石斛总生物碱后大鼠逃避潜伏期显著缩短(P<0.01)。HE染色发现模型对照组大鼠海马CA3区神经元层次减少、排列紊乱、细胞深染,且神经元密度下降;给予金钗石斛总生物碱后部分改善了神经元的形态并提高了神经元密度(P<0.01)。模型对照大鼠海马组织IR的磷酸化水平较空白对照组大鼠明显下调,而IRS和Akt的磷酸化水平则显著下调,给予金钗石斛总生物碱40 mg/kg后显著上调了IR磷酸化、下调了IRS和Akt的磷酸化水平(P<0.01)。结论:金钗石斛总生物碱能减轻链脲佐菌素所致痴呆大鼠学习记忆功能的损害,可能与调节脑内异常的IR/IRS-1/Akt通路中关键靶点的作用有关。     

霍山石斛多糖对糖尿病性白内障大鼠眼球晶状体组织抗氧化作用的研究

目的 研究霍山石斛多糖对糖尿病性白内障大鼠眼球晶状体组织的抗氧化作用.方法 采用链脲佐菌素对SD大鼠腹腔注射制造糖尿病性大鼠白内障模型,酶法测定各组大鼠眼球晶状体组织的谷胱甘肽( GSH)、丙二醛(MDA)、蛋白质羰基化产物的含有量以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、谷胱甘肽还原酶(GR)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物岐化酶(SOD)的酶活力.结果 霍山石斛多糖能够显著增加糖尿病性白内障大鼠晶状体组织中GSH水平、降低MDA及羰基的含有量,提高其GSH-PX、GR、GST、SOD、CAT酶活力.结论 霍山石斛多糖可能通过干预氧化应激途径延缓糖尿病性白内障的发展.     

注射用消障素对家兔实验性萘性白内障的防治作用

目的研究注射用消障素对家兔实验性萘性白内障的防治作用.方法以30%萘混悬液2.65 mL/(kg·d)给家兔ig,连续8 d,制作成萘性白内障模型.注射用消障素预防治疗起始于造模前4 d,高、低剂量组为0.1及0.05mL原液/眼,隔日球结膜下注射1次,共6次.每日以裂隙灯显微镜追踪检查家兔晶状体混浊度的变化.于实验结束之日进行裂隙灯显微镜摄影;并对其晶体状SOD活性及GSH的含量进行测定.结果注射用消障素高剂量组能显著抑制家兔萘性白内障晶状体混浊度的进展(P＜0.05);并有增加晶状体GSH含量(23.3%)及阻止SOD活性下降的趋势.低剂量组未见显效.结论注射用消障素球结膜下注射,对家兔萘性白内障的发生发展有明显的延缓作用.     

决明退障丸对亚硒酸钠性白内障大鼠脂质过氧化的影响

目的:观察决明退障丸对硒性白内障大鼠的防治作用并探讨其作用机制.方法:参照张家萍等人亚硒酸钠性白内障大鼠模型制作方法造模,并于不同时段进行晶状体混浊程度裂隙灯显微镜分级记分,以及化学比色法测定晶状体丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量.结果:注射亚硒酸钠后,大鼠晶状体混浊程度分级记分和MDA含量不断增高,SOD活性逐渐降低,与正常晶状体比较有显著性差异(P＜0.001).决明退障丸高、中、低剂量均能降低白内障大鼠晶状体混浊程度分级记分和MDA含量,提高SOD活性,以高剂量作用为优(P＜0.05,P＜0.001).中药预防组和中药治疗组晶状体混浊程度分级记分和MDA含量明显低于模型对照组,而SOD含量则明显高于模型对照组(P＜0.05,P＜0.001),其中以中药预防组作用优于治疗组(P＜0.05),其造模40d的SOD含量接近正常对照组水平(P＞0.05).结论:决明退障丸具有明显的阻抑大鼠晶状体混浊发生发展作用,其作用机制与其良好的抗氧化作用有关.     

注射用消障素结膜下注射对豚鼠d-半乳糖性白内障的防治作用

目的 :探讨注射用消障素对豚鼠实验性d 半乳糖性白内障的防治作用。方法 :用 0 4 %d 半乳糖 0 2mL 眼给豚鼠球后注射 ,连续 19d ,造成d 半乳糖性白内障模型。注射用消障素治疗起始于诱发模型当日 ,高、低剂量实验组分别结膜下注射0 0 4mL(原液及 1∶1稀释液 ) 眼 ,隔日 1次 ,共 10次。于实验结束之日进行裂隙灯显微镜摄影 ,对各组实验动物晶状体混浊度进行分析比较 ,并测定其MDA含量及SOD活性。结果 :注射用消障素高、低 2个剂量组均能显著抑制豚鼠d 半乳糖性白内障晶状体混浊度的进展 ,作用与阳性对照药白内停组相仿 ;并可显著降低其晶状体MDA的含量 ;对SOD活性则无明显影响。结论 :注射用消障素结膜下注射 ,可明显抑制豚鼠d 半乳糖性白内障的发生发展 ,并对其晶状体脂质过氧化损伤具有一定的保护作用。     

当归多糖硫酸酯的抗氧化作用研究

目的:观察当归多糖硫酸酯(APS)的抗氧化损伤作用。方法:常规方法体外培养Hela细胞,加入不同浓度的APS孵育24h后,用H2O2或紫外线照射诱导细胞氧化损伤。APS抗氧化损伤作用检测如下:MTT法测定细胞活力;比色法测定胞浆内SOD活力(黄嘌呤氧化酶法)、GSH和MDA。结果:H2O2或紫外线照射损伤的Hela细胞活性明显下降,胞浆中的GSH、SOD活性显著降低,MDA含量升高,与对照组比有显著性差异(P<0.05或P<0.01),表现出明显的氧化损伤特点。APS在0.3~100μg/m1浓度范围内,剂量依赖性地增加细胞活力,升高GSH、SOD的活性,降低MDA的含量,与模型组比有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结论:APS具有抗细胞氧化损伤的作用,这可能是其抗AIDS作用的机理之一。     

生姜粗多糖的提取及对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用

目的:探讨生姜粗多糖的超声提取的最佳条件,及其对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法:以生姜为原料选择最佳提取条件通过超声方法提取生姜粗多糖,并测定其含量;采用线栓法建立大鼠大脑动脉脑缺血再灌注损伤模型,通过生姜粗多糖对大鼠行为障碍评分的影响,对大鼠血清SOD和MDA的影响,对大鼠脑组织中SOD、MDA及NO含量的影响以及对大鼠脑含水量的影响来研究生姜多糖对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。结果:经提取后得生姜粗多糖5.56 g,通过计算得多糖含量为28.25%,与模型组比较,生姜粗多糖高、低剂量组及舒血宁组能明显改善大鼠的行为障碍(P<0.01,P<0.05),生姜粗多糖高、低剂量组及舒血宁组能明显升高大鼠血清中SOD活性(P<0.01)和明显降低大鼠血清中MDA含量(P<0.01,P<0.05),生姜粗多糖高、低剂量组及舒血宁组可升高大鼠脑组织中SOD活性(P<0.05),降低MDA和NO(P<0.01)的含量,生姜粗多糖高、低剂量组及舒血宁组可显著降低脑含水量(P<0.01)。结论:生姜粗多糖对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用。     

亚血红素六肽滴眼液对大鼠半乳糖性白内障的预防作用

 目的 观察亚血红素六肽滴眼液 (DhHP-6 滴眼液 ) 对大鼠半乳糖性白内障的预防作用。 方法 采用大鼠半乳糖性白内障模型和裂隙灯显微镜摄影分级法 , DhHP-6 滴眼给药，检测大鼠血清超氧化物歧化酶（ SOD ）活性、丙二醛（ MDA ）含量 , 晶状体中 SOD 、谷胱甘肽过氧化物酶（ GSH-Px ）活性、谷胱甘肽 (GSH) 、 MDA 含量，同时观察大鼠白内障发生时间，以及晶状体混浊程度。 结果 DhHP-6 滴眼液能明显延缓大鼠半乳糖性白内障的发生，抑制晶状体混浊程度的发展，降低血清和晶状体 MDA 含量，增强血清和晶状体 SOD 活性 , 提高晶状体 GSH-Px 活性及谷胱甘肽的含量。 结论 DhHP-6 滴眼液对大鼠半乳糖性白内障具有预防作用。     

启明丸对白内障模型大鼠MDA、SOD、GSH-Px、G-6-PD水平及晶状体蛋白含量变化的影响

目的:观察启明丸对白内障模型大鼠MDA、SOD、GSH-Px、G-6-PD水平及晶状体蛋白含量变化的影响。方法:将50只SD大鼠按照随机数字表分为5组,对照组,模型组及启明丸低、中、高剂量组;采用亚硒酸钠造模,造模成功后予相应药物灌胃,灌胃28 d后,摘取大鼠双侧眼球晶状体,匀浆,离心,分离上清液,测定MAD、SOD、GSH-Px和G-6-PD水平及晶状体匀浆蛋白含量。结果:启明丸中、高剂量组MDA及晶状体匀浆蛋白含量均低于模型组,SOD、GSH-Px、G-6-PD水平均高于模型组(P0.05);启明丸中、高剂量组与低剂量组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。启明丸中、高剂量均能够调整MDA、SOD、GSH-Px、G-6-PD水平,降低晶状体中蛋白含量。结论:启明丸能调整白内障模型大鼠晶状体MDA、SOD、GSH-Px、G-6-PD水平,降低晶状体中蛋白含量,从而改善晶状体混浊程度。     

金钗石斛水溶性多糖与碱溶性多糖对Hela细胞增殖的影响

目的比较金钗石斛的水溶性多糖和碱溶性多糖成分对Hela细胞增殖的抑制作用。方法应用总SOD活性检测试剂盒(WST法)对纯化金钗石斛水溶性多糖和碱溶性多糖进行测定。结果金钗石斛水溶性多糖在质量浓度较高(≥0.40mg·mL-1)时,对Hela细胞的生长有抑制作用,此作用随着质量浓度的增高而增强。而碱溶性多糖在质量浓度较低(≤0.70mg·mL-1)时,对Hela细胞的生长有抑制作用,此作用在质量浓度为0.10mg·mL-1时达到最大。结论金钗石斛水溶性多糖和碱溶性多糖在体外对Hela细胞有一定的抑制作用,而两种多糖的最强抑制质量浓度不同。     

软脉灵对大鼠糖尿病性白内障晶状体抗氧化的影响

目的:探讨软脉灵对大鼠糖尿病性白内障(diabetic catara,DC)的作用及其机理。方法:采用链脲佐菌素(STZ)诱发糖尿病性白内障大鼠模型,将SD大鼠随机分成正常组、模型组、软脉灵高、中、低剂量组。造模后治疗组给于软脉灵治疗,连续灌胃12周,观察不同时段晶状体的变化,测定干预后各组大鼠晶状体的超氧化物化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量的影响。结果:正常组晶状体一直保持透明,STZ诱发的糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠随着造模后病程的延长,晶状体混浊程度进一步加重,而软脉灵组随着剂量的增加晶状体混浊进一步减轻。与模型组比较,软脉灵可降低晶状体的MDA含量,提高SOD活性(P<0.05～0.01)。结论:软脉灵能提高DM大鼠抗氧化能力,减轻晶状体的氧化损伤,从而延缓糖尿病性白内障发生发展。     

枸杞子中AA-2βG防护晶状体氧化损伤的实验研究

目的研究枸杞子中2-O-β-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸(AA-2βG)对晶状体氧化损伤的保护作用。方法体外培养正常兔晶状体,采用H2O2氧化损伤法诱导建立晶状体混浊模型,分别于24,48,72 h培养结束后观察各组晶状体(空白对照组、H2O2氧化损伤组、维生素C组、AA-2βG组)的混浊情况,检测各组晶状体组织的总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)及丙二醛(MDA)的含量变化。结果随时间延长,空白对照组晶状体混浊不明显,H2O2组混浊程度逐渐加重,Vc组和AA-2βG组晶状体混浊明显延迟;和H2O2组相比,Vc组和AA-2βG组SOD、GSH及T-AOC水平都有提高,MDA的含量降低。结论 AA-2βG可以延缓H2 O2诱导的兔晶状体混浊,对晶状体的氧化损伤具有保护作用。     

明目地黄丸对白内障大鼠晶状体内SOD、MDA影响的实验研究

[目的] 研究明目地黄丸对白内障大鼠晶状体中超氧化物歧化酶(SOD) 活性和丙二醛(MDA)含量的影响。[方法] 建立大鼠白内障模型, 采用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸(TBA)法对模型组、治疗组及对照组大鼠晶状体中SOD活性和MDA含量进行检测。[结果] 明目地黄丸高、中剂量组大鼠晶状体中MDA含量明显低于模型组, 高、中剂量组大鼠晶状体中SOD活性明显高于模型组, 差异具有显着性(P<0.05).[结论] 明目地黄丸能明显降低白内障大鼠晶状体中MDA含量, 且能明显升高白内障大鼠晶状体中SOD活性。     

4种内生真菌对金钗石斛无菌苗生长及其多糖和总生物碱含量的影响

目的 :研究离体培养时 4种菌根真菌对金钗石斛生长及化学成分含量的影响。方法 :利用纯培养的菌根真菌分别与金钗石斛无菌苗共生培养 ,观测它们对金钗石斛生长及其多糖和总生物碱含量的影响。结果 :与对照相比 ,Mycena sp. (MF2 3 )极显著降低了金钗石斛鲜重的 2 4.9% (P<0 .0 1) ;所有实验菌株对金钗石斛干重均无显著性影响 ;Epulorhiza sp. (MF18)和MF2 3显著提高了金钗石斛的折干率 (P<0.0 5) ,Mycena sp. (MF2 4)极显著提高了金钗石斛的折干率 (P<0. 0 1) ,分别最多提高了 51.3 % ,43 8%和 63. 3 % ;Epulorhizasp (MF15)和MF2 4比对照极显著增加了金钗石斛气生根数量的 4.25倍和 4.13倍 (P<0 .0 1) ;MF2 3极显著减少了金钗石斛基生根数量的46.5% (P<0. 0 1) ;MF15,MF18,MF2 3和MF2 4分别可使金钗石斛多糖含量提高 153 .4% ,52. 1% ,18.5% ,76.7% ;MF2 3使金钗石斛总生物碱含量提高 18.3 %。结论 :在离体培养条件下 ,内生真菌与金钗石斛共生培养能影响金钗石斛的生长和总生物碱的含量 ,提高多糖的含量。     

正交法提取木耳多糖及对大鼠血清超氧化物歧化酶和体外肝脏脂质过氧化的影响

目的 用正交法优选木耳粗多糖的提取工艺及其对血清超氧化物歧化酶(SOD)及肝脏体外脂质过氧化的影响.方法 选取料水比、温度、提取次数以及提取时间为考察因素,采用正交法L9(34)为方案,确定木耳粗多糖提取的最佳工艺.按15mg·kg-1·d-1(为人类摄取木耳中木耳多糖的10倍)给Wistar大鼠灌胃,血清中SOD活性和肝脏中的丙二醛(MDA)含量分别采用邻苯三酚自氧化和TBA法测定.结果 木耳多糖的最佳提取条件是:料水比为1∶45,提取温度为80℃,水提时间1 h,提取次数3次,得率4.37%;灌胃大鼠较空白组肝脏的MDA含量明显下降(P<0.05);血清SOD活性对邻苯三酚自氧化抑制率明显提高(P<0.05).结论 优化条件可提高木耳粗多糖产率,并保证较高多糖的含量和安全性;木耳多糖应用于抗衰老和保肝作用前景良好.     

三七总皂苷对过氧化氢所致内皮细胞损伤的保护作用

目的:探讨三七总皂苷(PNS)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)过氧化氢(H2O2)所致损伤的保护作用。方法:采用体外培养HUVECs,建立过氧化氢(500μmol/L作用24h)内皮细胞损伤模型。分为4组:空白组、过氧化氢组、PNS低剂量(L)组(浓度为30μmol/L)、PNS高剂量(H)组(浓度为60μmol/L)。正常培养6h,用噻唑蓝(MTT)比色法测定HUVECs增殖及细胞活性,荧光素双醋酸酯(FDA)染色检测HUVECs生命力强度,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测各组细胞损伤相关蛋白超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽(GSH)的表达。用荧光定量(PCR)法检测各组细胞损伤相关基因SOD、MDA、LDH、GSH的表达。结果:PNS在一定浓度范围内可显著提高受损HUVECs活力,Western Blot结果表明SOD和GSH的蛋白表达升高,MDA和LDH的蛋白表达降低,差异具有统计学意义(P0.01)。PCR结果与Western Blot结果相同。结论:PNS在一定浓度时可避免HUVECs不受H_2O_2的损伤。其分子作用机制可能是通过下调LDH、GSH蛋白表达,上调SOD、MDA蛋白表达而发挥作用。     

十一种归肝经明目中药对Fenton反应所致晶状体氧化损伤防护作用的研究

目的 :研究十一种归肝经明目中药对Fenton反应所致晶状体氧化损伤的防护作用。方法 :将十一种归肝经明目中药枸杞子、车前子、青葙子、女贞子、沙苑子、桑椹子、楮实子、菊花、熟地、蒺藜、何首乌的水提液和白内停分别与Fenton反应所致的兔晶状体氧化损伤模型共同孵育 ,手术显微镜观察晶状体混浊情况并分级、摄影、记录 ;检测晶状体超氧化物歧化酶、谷胱甘肽、谷胱甘肽过氧化物酶、总蛋白和可溶性蛋白含量并探讨中药的防护作用。结果 :车前子、女贞子、桑椹子、菊花、熟地、何首乌组晶状体混浊均处于Ⅰ、Ⅱ级 ,明显轻于Fenton组Ⅳ级混浊 ;车前子、青葙子、菊花、熟地组的SOD、GSH以及GSH -PX含量均高于Fenton组 ;桑椹、菊花、熟地组的SOD活性高于白内停组 ;车前子、菊花、熟地组的GSH含量均高于白内停组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。结论 :十一种归肝经明目中药均对Fenton反应所致的晶状体氧化损伤有不同程度的防护作用 ,其中菊花、熟地、青葙子、车前子的防护作用更佳 ,且优于临床常用白内障药物白内停。     

金钗石斛多糖减轻大鼠脑缺血再灌注损伤

目的探讨金钗石斛Dendrobium nobile Lindl.多糖减轻大鼠脑缺血再灌注引起氧化应激和炎症反应的损伤和可能的保护机制。方法 105只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,尼莫地平组(10 mg/kg),金钗石斛多糖低、中、高剂量组(50、100、200 mg/kg)。采用线栓法栓塞大鼠右侧大脑中动脉建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型。术前7 d开始灌胃,每天1次。缺血2 h再灌注24 h进行神经功能评分,测定大鼠脑梗死面积、脑指数以及脑含水量;用化学比色法分别测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、髓过氧化物酶(MPO)活性及丙二醛(MDA)水平;用免疫荧光染色法检测缺血区中性粒细胞的浸润情况。结果假手术组无神经功能缺损,模型组大鼠神经功能缺失症状明显,大脑指数及脑含水量升高,模型组大鼠脑组织及血清SOD、GSH-Px活性明显降低,MPO活性及MDA含有量显著升高;与模型组比较,金钗石斛多糖各剂量组大鼠神经功能缺失症状改善,大脑指数及脑含水量明显下降,脑组织及血清SOD、GSH-Px活性明显升高,MPO活性及MDA含有量显著下降;与模型组比较,金钗石斛多糖高剂量组大鼠右侧缺血区中性粒细胞浸润减少。结论金钗石斛多糖对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有一定保护作用,其作用机制可能与抑制氧化应激和减轻炎症反应有关。     

黑木耳多糖对高强度微波辐射大鼠血清超氧化物歧化酶和肝脏脂质过氧化的影响

目的 研究木耳多糖对高强度微波辐射大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)和肝脏自氧化作用的影响.方法 60只清洁级Wistar大鼠随机分为6组,即:正常对照组、辐射模型组、药物对照组、治疗组、预防组、新模型组,每组10只.正常对照组、辐射模型组、新模型组每天给予1.5 ml的蒸馏水灌胃;药物对照组、治疗组、预防组每天灌胃1.5 ml浓度为1%的木耳多糖溶液.按体质量进行乌拉坦麻醉,腹主动脉取血和肝脏.血清中SOD活性和肝脏中的MDA含量分别采用邻苯三酚自氧化和TBA法测定.结果 木耳多糖提高动物血清中SOD活性(P<0.05)而且表现为时间越长活性越高(P<0.01);200 mW/ cm~2的高功率微波辐射明显降低了血清中SOD活性(P<0.05),呈现出距离辐射时间越短,SOD活性越低的现象(P<0.01);通过给予木耳多糖发现其预防功能要优于治疗(P<0.05).同样,木耳多糖能够降低肝脏内MDA的的含量(P<0.01).200 mW/ cm~2高功率辐射显示出辐射初期对MDA含量的明显提高(P<0.01).结论 高功率微波辐射可以明显降低血清中的SOD活性,升高肝脏中的MDA含量.木耳多糖对高功率微波辐射具有良好的防护作用,尤其是在微波辐射中,作为防护微波辐射的保健品和药物具有良好的前景.