慢性乙型肝炎血清HBsAg定量及HBsAg/HBV DNA比值与肝组织病理炎症活动度的相关性分析

目的探讨慢性乙型肝炎患者血清HBsAg定量水平及HBsAg/HBV DNA比值与肝组织病理炎症活动度的相关性。方法选取137例慢性乙型肝炎患者为研究对象,荧光定量PCR检测血清HBV DNA载量,化学发光微粒子免疫检测法定量检测血清HBsAg定量。患者均进行肝组织穿刺病理学检查,分析HBsAg、HBsAg/HBV DNA比值与肝组织病理炎症活动度的相关性。结果本研究137例患者中HBeAg抗原阳性102例,阴性35例。HBeAg抗原阳性组患者平均年龄低于HBeAg抗原阴性组,HBsAg定量、HBV DNA载量高于HBeAg抗原阴性组,HBsAg/HBV DNA低于HBeAg抗原阴性组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。HBeAg抗原阳性患者血清HBsAg定量与HBV DNA载量、HBsAg/HBV DNA比值成正相关,与ALT呈负相关,HBV DNA载量、HBsAg/HBV比值与ALT呈负相关,差异均有统计学意义(P均<0.05)。HBeAg抗原阳性患者中,HBsAg定量与病理炎症分级呈负相关(r=-0.412,P<0.05),与病理纤维化分级呈负相关(r=-0.315,P<0.05);HBV DNA与病理炎症分级呈负相关(r=-0.415,P<0.05),与病理纤维化分级呈负相关(r=-0.285,P<0.05)。结论 HBeAg抗原阳性慢性乙肝患者HBsAg与HBV DNA呈正相关,HBsAg与病理炎症分级及病理纤维化分级呈负相关,HBsAg、HBsAg/HBV DNA比值及ALT均可作为肝脏炎症程度的判断指标。     

慢性乙型肝炎患者血清共价闭合环状DNA检测的临床意义

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者血清中共价闭合环状DNA(cccDNA)的临床检测意义。方法随机选取进行肝组织活检的CHB患者57例。用实时荧光定量PCR法分别检测入选病例血清中cccDNA值,同时定量检测血清中HBV DNA水平,对比HBeAg阳性组和HbeAg阴性组cccDNA水平,并分析cccDNA与HBV DNA、病理炎症分级、ALT的关系。结果 HBeAg阳性组血清中cccDNA水平明显高于HBeAg阴性组(P<0.05);HBeAg阳性组血清中cccDNA与HBV DNA存在正相关关系(P<0.01);cccDNA水平和肝组织炎症活动度及ALT水平比较均无显著性差异(P均>0.05)。结论血清中HBV cccDNA定量是评价HBV复制最客观可靠的指标,在CHB诊断及抗病毒治疗中具有重要意义。     

补肾健脾胶囊治疗慢性乙肝病毒携带者的随机双盲实验

目的 :观察补肾健脾胶囊对慢性乙肝病毒携带者的抗病毒作用。 方法 :采用随机、双盲、安慰剂对照的研究方法。90例慢性乙肝病毒携带者均为HBeAg阳性,HBV DNA定量大于10⁷ copies/mL,ALT水平男性在30~40 IU/mL,女性在20~40 U·mL^-1。被随机分成2组,试验组60例,对照组30例。试验组接受补肾健脾胶囊治疗,对照组接受安慰剂治疗,每次4粒,每日3次,疗程48周。观察血清HBV DNA定量、血清乙肝标志物(HBsAg,HBsAb,HbeAg,HBeAb,HbcAb)、肝功能(ALT,AST,GGT,TBil)的变化,以及血常规、大便常规、尿常规、肾功能、心电图等安全性指标的情况,分别于治疗前及第48周各检查1次。 结果 :治疗后,试验组的血清HBV DNA定量下降水平中位数为3.4 log10 copies/mL,而对照组为0.1 log10 copies/mL(P＜0.01)。60例试验组患者中有13例(21.7％)血清HBV DNA水平下降至3 log10 copies/mL以下,而30例安慰剂对照组患者中仅观察到1例(3.3％)(P＜0.01)。试验组的HBeAg阴转率为20％(12/60),对照组为3.3％(1/30)(P＜0.01)。在血清HBeAg/HBeAb转换率方面,试验组为15% (9/60),对照组为0% (0/30),两组比较,差异显著(P＜0.05)。 结论 :补肾健脾胶囊能有效抑制乙肝病毒复制,并增加血清HBeAg转化率,可用于慢性乙肝病毒携带者的治疗。     

慢性HBV携带者血清HBV DNA载量与其肝组织炎症活动度的相关性研究

目的探讨慢性HBV携带者是否以1×105拷贝/mL为界进行肝组织活检,并对比血清HBV DNA载量与炎症活动度相关性。方法选取已进行肝组织活检的慢性HBV携带者164例,对肝组织进行HE、M asson三色、网状纤维染色,并进行病理炎症分级(G),PCR方法测定HBV DNA载量。结果以1×105拷贝/mL为界分组,对低载量和高载量2组中0.05)。结论对于慢性HBV携带者均应动员其进行肝组织活检,以进一步了解肝脏损伤情况及指导用药。以1×105拷贝/mL作为临界值可能会漏掉需要抗病毒治疗的患者。     

阿德福韦酯联合免疫调节剂治疗慢性乙型肝炎疗效观察

目的探讨阿德福韦酯联合免疫调节剂治疗慢性乙型肝炎的临床效果。方法将慢性乙型肝炎患者分为观察A组、观察B组与对照组,每组56例,分别给予阿德福韦酯联合胸腺肽α1、阿德福韦酯联合干扰素及单纯阿德福韦酯治疗。观察并比较3组患者谷丙转氨酶(ALT)、HBeAg阴转率、HBeAg/抗-HBe血清转换率、HBV-DNA转阴率及综合疗效情况。结果 3组患者治疗后血清ALT均降至正常水平,与治疗前相比有显著性差异(P均<0.05)。治疗后,观察A组与观察B组患者血清ALT低于对照组(P均<0.05)。观察A组与观察B组患者综合治疗有效率、治疗后HBeAg阴转率、HBeAg/抗HBe转换率及HBV-DNA阴转率高于对照组(P均<0.05),而观察A组与观察B组患者间比较均无显著性差异(P均>0.05)。结论阿德福韦酯联合免疫调节治疗能显著降低慢性乙型肝炎患者血清ALT水平,提高HBeAg阴转率、HBeAg/抗HBe转换率及HBV-DNA阴转率,对治疗慢性乙型肝炎疗效显著。     

解毒救肝汤联合拉米夫定治疗慢性乙型肝炎的临床研究

目的观察自拟中药方解毒救肝汤联合拉米夫定治疗慢性乙型肝炎的效果。方法将140例血清HBeAg阳性患者随机分成2组,治疗组72例予解毒救肝汤联合拉米夫定联合治疗,对照组68例予拉米夫定治疗,2组疗程均为48周。2组均于治疗前及治疗后24,48周分别检测肝功能、HBV标志物及HBV DNA的变化。结果治疗组血清HBeAg阴转率、HBeAg/抗HBe血清转换率均明显高于对照组(P均<0.05)。治疗48周后2组AST、ALT、ALB、TBil水平比较均有显著性差异(P均<0.05)。结论解毒救肝汤联合拉米夫定治疗慢性乙型肝炎疗效确切,可明显提高HBeAg阴转率和HBeAg/抗HBe血清转换率,提高48周后HBV DNA和ALT复常率。     

替比夫定联合阿德福韦酯治疗经肝穿刺活检病理分级慢乙肝的疗效观察

目的:分析替比夫定(LdT)联合阿德福韦酯(ADV)治疗经肝穿刺活检进行病理分级指导下的慢乙肝患者的临床疗效。方法:随机抽取2010年5月-2012年10月本院接诊的82例乙型肝炎e抗原(HBeAg)阳性(50例)或阴性(32例)患者作为研究对象,均为HBV-DNA定量≥1×104 copies/mL,经肝穿刺活检显示中~重度活动性炎症、坏死、和(或)纤维化的慢乙肝患者。给予替比夫定联合阿德福韦酯行抗病毒治疗。每3个月对患者进行HBV-DNA水平、肝功能、"两对半"定量检测,监测患者血常规、肾功能、AFP及心肌酶等指标,观察临床疗效及药物不良反应。结果:本组患者HBV-DNA水平明显下降,与治疗比较差异显著(P0.05);有28例患者HBeAg滴度出现不同程度下降,差异无统计学意义(P0.05);所有患者检查血常规、肾功能、AFP无异常改变。结论:LdT+ADV联合抗病毒治疗,对经肝活检证实病理组织学分级≥G2和(或)S1~2慢乙肝患者,有明显抑制HBV-DNA复制水平的作用。有预期的提高HBeAg-抗-HBe血清学转换率、减少抗病毒治疗疗程,达到缩短口服药物抗病毒治疗疗程的可能。     

清热疏肝法对慢性乙型肝炎患者抗病毒及免疫调节作用

目的:清热疏肝法对慢性乙肝肝炎患者的抗病毒作用及对机体免疫功能的影响。方法:采用随机、双盲、对照、安慰剂研究方法,80例辨证为肝胆湿热的慢性乙肝患者均为HBeAg阳性,2U/L≤ALT≤10U/L,HBV-DNA定量大于105copies/mL,被随机分成两组,治疗组40例,对照组40例。治疗组接受清热疏肝颗粒和五酯片治疗,对照组接受中药安慰颗粒和五酯片治疗,观察24周。研究HBV-DNA定量、血清的乙肝标志物(HBsAg、HBsAb、HbeAg、HBeAb、HbcAb)定量、肝脏功能(ALT、AST、GGT、TBil)、外周血T淋巴细胞亚群的变化(CD4+、CD8+)。结果:治疗后,治疗组的血清HBV-DNA定量下降1log10,2log10同对照组比较差异有统计学意义(P0.05),HBV-DNA阴转率同对照组相比,无显著差异(P0.05);治疗组的HBeAg阴转率和转换率同对照组相比较,差异显著(P0.05);治疗组治疗后CD4+细胞数量上升,CD8+细胞数量下降,CD4+/CD8+百分比率上升,同对照组相比,差异有统计学意义(P0.05)。结论:清热疏肝颗粒能有效抑制乙肝病毒复制,并增加血清HBeAg转化率,调节机体的免疫功能。     

HBeAg阳性和阴性慢性乙型肝炎患者病理与细胞因子对比研究

目的探讨HBeAg阳性和HBeAg阴性慢性乙型肝炎(CHB)患者病理分级和分期频数分布情况及与肝纤维化有密切关系的细胞因子α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)与转化生长因子β1(TGF-β1)的半定量评分之间的关系。方法随机选取进行肝组织活检的CHB患者118例,HBeAg阳性组57例,HBeAg阴性组61例。所有病例进行肝穿刺活组织检查,并进行炎症分级(G)和纤维化分期(S)诊断,免疫组化标记肝组织中α-SMA及TGF-β1表达,并进行半定量评分。对比2组α-SMA与TGF-β1表达情况。结果 HBeAg阴性组炎症分级G3～4级、纤维化分期S3～4期患者明显多于HBeAg阳性组;TGF-β1表达在1分组HBeAg阳性组频数分布明显高于HBeAg阴性组,而在3分组及4分组中HBeAg阴性组频数分布明显多于HBeAg阳性组;α-SMA在3分组及4分组中HBeAg阴性组频数分布明显高于HBeAg阳性组。结论 HBeAg阴性CHB患者更需要进行早期及时有效的抗病毒治疗,TGF-β1及α-SMA的阳性表达情况可评估对乙型肝炎患者肝纤维化程度。     

复方甘草酸苷对阿德福韦酯联合拉米夫定治疗乙肝肝硬化患者肝功能及抗病毒疗效的影响

目的探究复方甘草酸苷联合阿德福韦酯和拉米夫定治疗乙肝肝硬化对患者肝功能及抗病毒疗效的影响。方法选取湖南医药学院第一附属医院2016年9月—2017年12月收治的93例乙肝肝硬化患者并随机分为对照组46例与研究组47例,对照组患者给予阿德福韦酯联合拉米夫定治疗,研究组患者在对照组治疗的基础上联合复方甘草酸苷治疗,2组均连续治疗6个月。治疗6个月后统计2组临床疗效,检测并比较治疗前及治疗3,6个月后2组肝功能指标及血清病毒学指标变化情况,记录2组治疗期间不良反应发生情况。结果治疗6个月后研究组临床总有效率高达91.49%(43/47),较对照组的73.91%(34/46)显著升高(P<0.05);与治疗前比较,治疗3~6个月2组血清ALT、AST、TBil水平,HBV DNA、HBeAg含量及研究组Child-Pugh评分逐渐降低(P均<0.05),治疗3,6个月2组血清ALT、AST、TBil水平及研究组Child-Pugh评分显著低于治疗前(P均<0.05),且治疗3,6个月研究组均显著低于对照组(P均<0.05);研究组治疗3,6个月血清HBV DNA、HBeAg含量及对照组治疗6个月血清HBeAg含量低于治疗前(P均<0.05),且治疗3,6个月研究组均低于对照组(P均<0.05);与治疗前比较,治疗3~6个月研究组血清ALB水平,2组HBV DNA<500 copies/mL患者比例、HBeAg阴转率逐渐升高(P均<0.05),且治疗3,6个月研究组血清ALB水平显著高于治疗前及对照组(P均<0.01),研究组治疗3,6个月及对照组治疗6个月HBV DNA<500 copies/mL患者比例、HBeAg阴转率高于治疗前,且治疗3,6个月研究组HBV DNA<500 copies/mL患者比例及治疗6个月研究组HBeAg阴转率均显著高于对照组(P均<0.05);研究组不良反应发生率为6.52%(3/46),较对照组的21.74%(10/46)显著降低(P<0.05)。结论复方甘草酸苷联合阿德福韦酯和拉米夫定对乙肝肝硬化患者具有显著的肝功能改善效果及抗病毒疗效,且安全性良好,总体疗效显著优于常规西医抗病毒治疗。     

拉米夫定联合苦参素治疗慢性乙型肝炎临床对比观察

目的:探讨拉米夫定联合苦参素治疗慢性乙型肝炎(CHB)的疗效。方法:选取确诊为慢性乙型肝炎的患者82例,均显示ALT升高、HBeAg、HBV-DNA阳性、肝纤维化血清指标呈不同程度升高。随机分为拉米夫定联合苦参素组(Ⅰ组)50例及单用拉米夫定组(Ⅱ组)32例,拉米夫定100mg,1次/d,总疗程为1年;苦参素600mg加入10%GS250mL静脉滴注,1次/d,连用2个月,2个月后改为口服苦参素胶囊200mg,3次/d,总疗程为1年。最初3个月每4周检查肝功能、HBV标志物、HBV定性定量及肝纤维化血清指标HA、PCⅢ、Ⅳ·C、LN各1次,后改为每3个月检查上述项目1次。治疗结束后随访观察0.5～2年。结果:治疗26周时,ALT复常率、HBeAg阴转率、转换率、HBV-DNA阴转率、肝纤维化血清指标HA、PCⅢ、Ⅳ·C、LN下降,Ⅰ组明显优于Ⅱ组(P﹤0.05);治疗结束时,HBeAg、HBV-DNA阴转率、肝纤维化血清指标HA、PCⅢ、Ⅳ·C、LN下降,Ⅰ组明显优于Ⅱ组(P﹤0.05);ALT和HBeAg/抗-HBe转换率两组无显著性差异;随访观察Ⅰ组有2例复发,Ⅱ组有6例复发,两组有显著性差异。结论:拉米夫定联合苦参素治疗慢性乙型肝炎有协同作用,疗效优于单用拉米夫定。     

龙柴方对慢性乙型肝炎患者肝损伤的保护作用机制分析

目的:观察龙柴方治疗慢性乙型肝炎(Chronic Hepatitis B,CHB)患者疗效并初步分析其保护肝组织的作用机制。方法:选取我院2014年3月~2016年7月CHB患者114例,根据随机数字表法分为观察组和对照组。对照组(57例)采用苦参素胶囊治疗,观察组在对照组基础上加服龙柴方免煎颗粒。连续治疗3个月,观察两组治疗中医证候疗效,以及治疗前后血清HBV-DNA、HBsAg、HBeAg水平、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平。结果:治疗后,观察组总有效率(94.74%)显著高于对照组(71.93%)(P0.05);治疗前,两组HBV-DNA、HBsAg和HBeAg水平没有明显差异(P0.05),治疗后均显著下降(P0.05),且观察组治疗后各病毒标志物水平显著低于对照组(P0.05);两组治疗前后血清ALT、AST、SOD、MDA水平没有明显差异(P0.05),治疗后,ALT、AST、MDA水平显著降低(P0.05),SOD水平显著上升(P0.05),且观察组上升或下降幅度显著大于对照组(P0.05)。结论:龙柴方治疗CHB患者疗效显著,可有效降低血清HBV-DNA、HBsAg、HBeAg水平,抑制病毒复制,并通过升高SOD水平、降低MDA水平保护肝组织,降低肝损伤指标水平。     

健脾化瘀法含药血清对肝癌细胞Smad3蛋白及EMT的影响

目的:探讨健脾化瘀法含药血清对肝癌细胞Smad3蛋白磷酸化及上皮间质转移标志蛋白E-cadherin/Ncadherin表达水平及侵袭转移能力的影响。方法:分别以不同浓度(10%和20%)健脾化瘀法中药含药血清及10%小牛血清对照组培养肝癌细胞MHCC97-H,实时定量PCR检测细胞Smad3和Snail mRNA水平,Western blot检测Smad3、p-Smad3、Snail、E-cadherin和N-cadherin蛋白表达水平。划痕法和Transwell小室检测肝癌细胞侵袭/迁移能力。结果:实时定量PCR结果显示高浓度组(20%含药血清组)、低浓度组(10%含药血清组)和对照组(10%小牛血清对照)Smad3的mRNA水平分别为0.87±0.24、0.97±0.28和1.18±0.34(P0.05);高浓度组Snail的mRNA水平低于对照组(0.49±0.05 vs.1.10±0.21,P=0.034)。与对照组相比,高浓度含药血清组48h的p-Smad3、Snail和N-cadherin明显降低,E-cadherin明显升高(P0.05)。与对照组相比,低浓度含药血清组48h的E-cadherin升高,N-cadherin降低(P0.05);而Smad3、p-Smad3及snail的结果与对照组无明显差异(P0.05)。划痕法结果显示,与对照组比较,20%含药血清组及10%含药血清组肝癌细胞的划痕愈合较慢,差异均有统计学意义(P0.05)。Transwell显示与对照组相比,20%含药血清组及10%含药血清组MHCC97-H细胞的迁移受抑制,差异有统计学意义(P0.05)。结论:健脾化瘀法中药能抑制肝癌细胞侵袭转移,可能与抑制Smad3蛋白磷酸化及上皮间质转化有关。     

海藻多糖对类风湿关节炎外周血单个核细胞中IL-37表达的影响及其抗炎机制

目的探讨海藻多糖对体外培养的类风湿关节炎患者外周血单个核细胞(PBMC)中白细胞介素-37(IL-37)表达的影响及其抗炎机制。方法分别收集类风湿关节炎患者和健康体检者外周血各30份,分离PBMC。①取健康体检者外周血PBMC作为对照组,给予正常培养;取类风湿关节炎患者外周血PBMC,随机分为10 mg/mL、20 mg/mL、30 mg/mL、40 mg/mL海藻多糖组,实时荧光定量PCR检测各组PBMC中IL-37 mRNA表达水平。②取健康体检者外周血PBMC作为对照组,给予正常培养;取类风湿关节炎患者外周血PBMC,随机分为10 mg/mL、20 mg/mL、30 mg/mL、40 mg/mL、50 mg/mL海藻多糖组,实时荧光定量PCR检测各组PBMC中诱导型一氧化氮酶(iNOS)mRNA表达水平。③取健康体检者外周血PBMC作为对照组;取类风湿关节炎患者外周血PBMC,随机分为患者组及10 mg/mL、20 mg/mL、30 mg/mL、40 mg/mL海藻多糖组,Griess法检测各组PBMC中一氧化氮(NO)水平。④实验分为3组,健康体检者外周血PBMC作为对照组,类风湿关节炎患者外周血PBMC作为患者组,类风湿关节炎患者外周血PBMC给予10 mg/mL、20 mg/mL、30 mg/mL、40 mg/mL海藻多糖培养作为海藻多糖组,酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组上清中IL-37、IL-10、IL-4水平,并分析IL-37与IL-10、IL-4相关性。结果 20 mg/mL、30 mg/mL、40 mg/mL海藻多糖组PBMC中IL-37 mRNA表达水平均明显高于对照组(P均0.05),30 mg/mL、40 mg/mL海藻多糖组均明显高于20 mg/mL海藻多糖组(P均0.05),30 mg/mL海藻多糖组和40 mg/mL海藻多糖组比较差异无统计学意义(P0.05)。20 mg/mL、30 mg/mL、40 mg/mL、50 mg/mL海藻多糖组PBMC中iNOS mRNA表达水平均明显高于对照组(P均0.05),且50 mg/mL海藻多糖组明显高于其他组(P均0.05)。患者组PBMC中NO水平明显高于对照组(P0.05),海藻多糖各组均明显高于患者组(P均0.05)。患者组PBMC中IL-4与IL-10水平显著低于对照组(P均0.05),IL-37水平明显高于对照组(P0.05);海藻多糖组IL-37水平明显高于患者组(P0.05), IL-10及IL-4水平均明显低于患者组(P均0.05),且IL-37的升高与IL-10、IL-4的降低呈负相关关系(r=0.889,0.572,P0.05)。结论海藻多糖对类风湿关节炎患者具有免疫调节作用,可能与上调PBMC中IL-37 mRNA、iNOS mRNA及NO表达水平,进而抑制IL-10、IL-4分泌有关。     

茵陈蒿汤对酒精性肝纤维化模型大鼠内质网应激介导肝细胞凋亡相关分子的影响

目的观察茵陈蒿汤对酒精性肝纤维化大鼠肝组织内质网应激凋亡通路的影响,探讨茵陈蒿汤抗酒精性肝纤维化的作用机制。方法将40只SD大鼠采用白酒-玉米油-吡唑混合液灌胃联合小剂量CCl_4腹腔注射复制大鼠酒精性肝纤维化模型,8周后随机分为对照组、模型组和茵陈蒿汤低剂量组、茵陈蒿汤高剂量组,每组10只。模型组以白酒混合物低剂量(6 mL/kg)持续灌胃,茵陈蒿汤低剂量组、高剂量组分别给予茵陈蒿汤1.75 g/kg(5 mL/kg)、3.5 g/kg(10 mL/kg),对照组灌胃给予等量的0.9%NaCl溶液。4周后检测大鼠肝指数及血清AST、ALT水平;采用流式细胞学技术检测各组大鼠肝细胞悬液凋亡率的比例;采用Western blot法检测各组大鼠肝脏GRP78、Cleaved-Caspase-12和Cleaved-Caspase-3蛋白表达情况。结果①与对照组比较,模型组大鼠肝指数水平显著升高(P0.05);与模型组比较,茵陈蒿汤各剂量组大鼠肝指数水平显著降低(P0.05);与茵陈蒿汤低剂量组比较,茵陈蒿汤高剂量组大鼠肝指数水平显著降低(P0.05)。②与对照组比较,模型组大鼠血清中ALT、AST水平显著升高(P0.05);与模型组比较,茵陈蒿汤各剂量组ALT、AST水平显著降低(P0.05);与茵陈蒿汤低剂量组比较,茵陈蒿汤高剂量组大鼠血清中ALT、AST水平显著降低(P0.05)。③与对照组比较,模型组大鼠肝细胞晚期凋亡率及总凋亡率显著升高(P0.05);与模型组比较,茵陈蒿汤各剂量组晚期凋亡率及总凋亡率显著降低(P0.05);与茵陈蒿汤低剂量组比较,茵陈蒿汤高剂量组大鼠肝细胞早期、晚期及总凋亡率均明显降低(P0.05)。④与对照组比较,模型组大鼠肝组织Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平显著上调(P0.05);与模型组比较,茵陈蒿汤各剂量组大鼠肝组织GRP78、Cleaved-Caspase-12和Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平显著下调(P0.05);与茵陈蒿汤低剂量组比较,茵陈蒿汤高剂量组大鼠肝组织GRP78和Cleaved-Caspase-12蛋白表达水平显著下调(P0.05)。结论茵陈蒿汤可明显改善酒精性肝纤维化大鼠的肝组织损伤,抑制内质网应激介导的肝细胞凋亡。     

肝必康胶囊体外抗乙肝病毒的实验研究

目的:观察肝必康胶囊对乙肝病毒的抑制作用.方法:采用HepG 2.2.15细胞的培养,MTT比色法检测药物对细胞的毒性,定量PCR检测HBV-DNA,ELISA法检测HBsAg、HBeAg的含量,研究肝必康胶囊对HepG 2.2.15细胞的毒性,HBsAg与HBeAg表达及HBV-DNA含量的影响.结果:肝必康半数细胞毒浓度(TC50)为4.677 mg/mL,最大无毒浓度(TC0)为0.118 mg/mL.各组在用药后72、144 h细胞上清中HBV DNA拷贝数降低,肝必康在0.1 mg/mL时抑制率最高.各组用药后细胞培养上清液中的HBsAg和HBeAg浓度显著降低.肝必康在0.1 mg/mL时抑制率最高.肝必康各组含药血清在用药后72、144 h细胞上清中HBsAg和HBeAg浓度显著降低,高剂量组抑制率最高.显示明显抗HBV的作用,TI均大于2.结论:肝必康胶囊体外培养细胞实验证实其有较强的抗乙肝病毒作用,且毒性较低.     

化脂复肝颗粒通过抑制TLR4/NF-κB/NLRP3减轻Kupffer细胞炎症改善非酒精性脂肪性肝病机制研究

目的:探讨化脂复肝颗粒在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)中对Kupffer细胞(KCs)TLR4/MyD88/NF-κB/NLRP3信号通路的影响。方法:将分离培养的KCs随机分为空白组、LPS干预组、LPS+空白血清组、LPS+化脂复肝组、高糖+对照组、高糖+LPS干预组、高糖+LPS+空白血清组、高糖+LPS+化脂复肝组,LPS干预浓度为100 ng/ml,高糖干预为于KCs培养基中另加入葡萄糖30 mmol/L。用CCK-8法检测各组KCs增殖情况; 酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组KCs培养基上清液中促炎因子TNF-α、IL-1β的含量; 反转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组KCs中TLR4、MyD88、NLRP3、Caspase-1、NF-κB p65、TNF-α、IL-1β的基因表达情况。结果:CCK-8检测显示,空白及高糖培养对照组KCs细胞不断增殖,长势良好; LPS+化脂复肝组与高糖+LPS+化脂复肝组KCs缓慢增殖,非高糖组KCs均较含高糖组KCs增殖速率更快; 而LPS或高糖+LPS诱导模型组及各加空白血清组KCs于第6小时开始出现凋亡,含高糖组KCs均较非高糖组KCs凋亡速率更快。非高糖各组与含高糖各组中促炎因子TNF-α、IL-1β含量以及炎症相关基因(TLR4、MyD88、NLRP3、Caspase-1、NF-κB/p-65、TNF-α、IL-1β、IL-18)表达水平均呈相同变化趋势,且含高糖各组上述促炎因子及炎症相关基因表达水平均较非高糖组高。以非高糖组为例,LPS诱导模型组和LPS+空白血清组的促炎因子TNF-α与IL-1β含量均显著高于对照组(P<0.05),炎症相关基因TLR4、MyD88等的mRNA表达水平也均显著高于对照组(P<0.05),而LPS诱导模型组与LPS+空白血清组间上述各指标比较差异均无统计学意义(P>0.05); 与LPS诱导模型组或LPS+空白血清组比较,LPS+化脂复肝组促炎因子TNF-α与IL-1β含量均显著降低(P<0.05),炎症相关基因TLR4、MyD88等的mRNA表达水平也均显著降低(P<0.05)。结论:化脂复肝颗粒含药血清可改善KCs活力,有效减轻KCs炎症反应,减少KCs细胞焦亡的发生,具有显著的抗炎、抗氧化损伤及保肝作用,其作用机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB p65/NLRP3信号通路的激活相关。     

阿德福韦酯联合双虎清肝颗粒抗肝纤维化30例临床观察

目的:观察阿德福韦酯联合双虎清肝颗粒抗肝纤维化的临床疗效。方法:将60例慢性乙型肝炎患者随机分为治疗组与对照组各30例。治疗组予阿德福韦酯片联合双虎清肝颗粒治疗,对照组单予阿德福韦酯片治疗,疗程均为18个月。观察两组治疗前后症状与体征改善情况以及肝功能、肝纤维化4项等指标的变化情况。结果:总有效率治疗组为86.67%,对照组为53.33%,两组比较,差异有统计学意义(P0.01);症状消失率治疗组为83.33%,对照组为63.33%、体征改善率治疗组为74.07%(20/27),对照组为46.15%(12/26),两组比较,差异均有统计学意义(P0.05);治疗组肝功能和肝纤维化4项水平治疗前后组内比较,差异均有统计学意义(P0.01),治疗组肝纤维化4项水平改善优于对照组,差异均有统计学意义(P0.05);两组HBV-DNA水平均显著下降,治疗组下降幅度为(3.75±1.67)log10Copies/m L,对照组下降幅度为(3.23±1.89)log10Copies/m L,两组比较,差异无统计学意义(P0.05);e抗原血清学转换率治疗组为36.67%,对照组为13.33%,两组比较,差异有统计学意义(P0.01);两组肝脏炎症和纤维化程度较治疗前均有明显改善(P0.01)。结论:阿德福韦酯联合双虎清肝颗粒能改善慢性乙型肝炎患者肝纤维化,值得临床推广。     

恩替卡韦联合强肝丸与复方鳖甲软肝片治疗HBeAg阳性的HBV感染失代偿期肝硬化疗效比较

目的比较核苷类抗病毒药物联合强肝丸与联合复方鳖甲软肝片治疗HBeAg阳性的HBV感染失代偿期肝硬化的疗效。方法选取肝硬化患者114例,随机分为3组,每组38例。A组给予恩替卡韦治疗,B组给予恩替卡韦+复方鳖甲软肝片治疗;C组给予恩替卡韦+强肝丸治疗。观察3组治疗前后肝功能、肝纤维化指标及HBV DNA载量的变化,比较3组HBV DNA转阴率及HBeAg转阴率。结果 3组治疗后肝功能、肝纤维化指标均较治疗前显著改善(P均0.05);B组、C组治疗后丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBil)、透明质酸、层黏连蛋白、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原水平均明显低于A组(P均0.05),白蛋白(ALB)水平明显高于A组(P均0.05),门静脉内径、脾静脉内径、脾脏厚度较A组明显减少(P均0.05),HBV DNA载量下降幅度、HBV DNA转阴率及HBeAg转阴率均显著高于A组(P均0.05);B组、C组间上述指标比较差异均无统计学意义(P均0.05)。结论核苷类抗病毒药恩替卡韦联合强肝丸或复方鳖甲软肝片治疗HBeAg阳性的HBV感染失代偿期肝硬化患者均能明显改善肝功能,减轻肝纤维化程度,并有效抑制HBV复制,2组效果相当。     

扶正祛毒方对慢性乙肝病毒携带小鼠肝组织γ-干扰素和白介素-10表达影响的研究

目的观察扶正祛毒方对慢性乙肝病毒携带小鼠γ-干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)和白介素10(Interleukin-10,IL-10)表达影响,探讨扶正祛毒方对免疫的调节作用。方法选择雄性HBV转基因C57BL/6J小鼠30只随机分为模型组、西药组、中药组,同系雄性正常小鼠10只作为空白组,西药组、中药组分别予以阿德福韦酯药液和扶正祛毒方药液灌胃,模型组、空白组均予以等量生理盐水灌胃。24周后处死取材,检测血清乙型肝炎核心相关抗原(hepatitis B e antigen,HBeAg)、乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)水平,丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase, ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)含量,尾尖乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(hepatitis B virus deoxyribonucleic acid,HBV DNA)相对表达量,肝组织γ-干扰素、白介素-10含量。结果 (1)ALT、AST:模型组较空白组显著升高(P0.05),西药组和中药组较模型组显著降低(P0.05)。(2)HBeAg、HBsAg:模型组HBeAg、HBsAg阳性率均为100%,空白组均为0%,西药组、中药组HBeAg阴转率分别为28.6%、42.9%。(3)HBV DNA:模型组较空白组显著升高(P0.05),中药组较模型组显著降低(P0.05)。(4)γ-干扰素:模型组较空白组显著降低(P0.05),中药组显著高于模型组(P0.05)。(5)白介素-10:模型组较空白组显著升高(P0.05),中药组显著低于模型组和西药组(P0.05)。结论 (1)用药24周后,扶正祛毒方对慢乙肝病毒携带小鼠肝脏炎症反应无加剧,并能降低血清转氨酶水平;(2)用药24周后,扶正祛毒方对慢性乙肝病毒携带小鼠病毒复制有抑制作用;(3)用药24周后,扶正祛毒方可以提高慢性乙肝病毒携带小鼠肝组织γ-干扰素表达,并抑制白介素-10表达,这可能是其抑制病毒复制的重要机制之一。