一测多评法测定心脑健胶囊(片)中6种儿茶素

目的建立一测多评法测定心脑健胶囊(片)(茶叶提取物)中6种儿茶素的含有量。方法该药物50%甲醇提取液的分析采用Shimadzu Wonda Cract ODS-2色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相0.5%乙酸(A)-乙腈(B),梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;检测波长280 nm;柱温35℃。以表没食子儿茶素没食子酸酯为内标,计算表没食子儿茶素、儿茶素、表儿茶素、没食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素没食子酸酯的相对校正因子,测定其含有量。结果 6种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 8),加样回收率96.00%~98.47%,RSD 2.09%~2.91%,一测多评法所得结果接近于外标法。结论该方法简便可靠,可用于心脑健胶囊(片)的质量控制。     

HPLC法测定茶多酚缓释胶囊中表没食子儿茶素没食子酸酯的含量

目的:建立测定茶多酚缓释胶囊中表没食子儿茶素没食子酸酯含量的高效液相色谱法。方法:采用Kromasil C18(250 mm×4.6 mm5,μm)的色谱柱;以甲醇-0.1%甲酸水溶液(70∶30)为流动相;流速:1.0 mL/min;检测波长:280 nm;柱温为30℃。结果:表没食子儿茶素没食子酸酯在1.5175～9.105μg范围内与峰面积分别呈良好的线性关系(r=0.9997,n=6),平均回收率是100.2%(RSD=0.5%)。结论:该方法简便、准确、专属性强,可用于该制剂的质量控制。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对H22肝癌荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用

研究表没食子儿茶素没食子酸酯对H₂₂肝癌荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用。方法小鼠按体质量随机分为正常组、模型组、5-氟尿嘧啶组(20 mg/kg)、表没食子儿茶素没食子酸酯高剂量(80 mg/kg)及低剂量组(40 mg/kg),每组10只。常规方法建立H₂₂肝癌荷瘤小鼠模型,次日给药,持续给药7 d;5-氟尿嘧啶组腹腔注射给药,表没食子儿茶素没食子酸酯组灌胃给药。检测荷瘤小鼠瘤重、脾脏指数、胸腺指数、血常规、血清白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及瘤组织血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9等指标。结果与模型组比较,表没食子儿茶素没食子酸酯高、低剂量组小鼠瘤重降低(P<0.01),而脾脏指数、胸腺指数及白细胞数增加(P<0.05,P<0.01),表没食子儿茶素没食子酸酯高、低剂量组小鼠血清IL-2、TNF-α水平增加(P<0.05,P<0.01),而瘤组织VEGF、MMP2及MMP9表达降低(P<0.01)。结论表没食子儿茶素没食子酸酯可以明显抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长,该作用与提高免疫力及抑制VEGF、MMP2、MMP9表达有关。     

三勒浆口服液HPLC指纹图谱的建立及多成分定量测定

目的建立三勒浆口服液(SOL)的HPLC指纹图谱,测定其中主要成分量,为SOL的质量控制提供参考。方法采用Welchrom C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.1%磷酸水溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱,体积流量为1.0 m L/min,检测波长270 nm,柱温25℃,建立SOL的HPLC指纹图谱,并对没食子酸、没食子儿茶素、表儿茶素、柯里拉京和鞣花酸指标成分的定量测定进行方法学考察。结果在SOL特征指纹图谱研究中,共确定22个共有峰,同时利用相似度软件对10批SOL指纹图谱进行分析,各批次样品相似度在0.95以上;通过对比特征峰的保留时间,指认出5种主要成分,分别为没食子酸(3号峰)、没食子儿茶素(8号峰)、表儿茶素(15号峰)、柯里拉京(16号峰)和鞣花酸(21号峰);并且10批样品中没食子酸的量在5.743 2~7.538 0 mg/m L,没食子儿茶素的量在0.492 9~0.847 1 mg/m L,表儿茶素的量在0.529 7~0.8048 mg/m L,柯里拉京的量在0.937 5~1.756 5 mg/m L,鞣花酸的量在0.352 7~0.554 5 mg/m L。结论所建立的SOL HPLC指纹图谱和定量测定方法简单,分离效果较好,重复性好,实现了对SOL定性和定量的双重研究,可为其质量控制提供参考。     

HPLC同时测定黔产红禾麻中4种儿茶素类成分含量

目的:建立HPLC同时测定红禾麻中4种儿茶素类成分含量的方法。方法:采用Diamonsil C18色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长210 nm,柱温35℃。结果:(-)-没食子儿茶素、(±)-表没食子儿茶素、(+)-儿茶素、(-)-表儿茶素线性范围分别为0.050 50~1.010μg(r=0.999 9),0.050 05~1.001μg(r=0.999 9),0.025 75~0.515 0μg(r=0.999 9),0.016 65~0.333 0μg(r=0.999 9);平均加样回收率分别为97.39%,98.45%,99.17%,97.87%。结论:该方法简便、准确、重复性好,可用于红禾麻药材的质量控制。     

表没食子儿茶素没食子酸酯通过Hedgehog信号诱导结肠癌HCT-116细胞凋亡的机制研究

目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人结肠癌HCT-116细胞的抑制作用和机制。方法:MTT实验检测细胞活力,并计算表没食子儿茶素没食子酸酯的IC_(50)值,确定有效给药剂量。采用5-氟尿嘧啶(5-FU)为阳性对照药;EdU掺入法测定细胞增殖情况;JC-1染色测定线粒体膜电位;流式细胞术测定肿瘤细胞凋亡;RT-PCR法测定凋亡相关基因B细胞淋巴瘤因子-2(Bcl-2)、Bcl-2相关x蛋白(Bax)mRNA表达;Western blot测定Smo、Gli-1、半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和核凋亡诱导因子(AIF)蛋白表达情况。结果:与模型对照组比较,32μmol/L和64μmol/L的表没食子儿茶素没食子酸酯显著抑制结肠癌HCT-116细胞的增殖(P<0.01),诱导线粒体膜电位显著降低(P<0.01),显著诱导细胞凋亡(P<0.01)。与模型对照组比较,表没食子儿茶素没食子酸酯的应用在mRNA水平下调Bcl-2表达,上调Bax表达(P<0.01),在蛋白水平上调Caspase-3和AIF表达(P<0.01),下调Smo和Gli-1表达(P<0.01)。结论:表没食子儿茶素没食子酸酯抑制结肠癌HCT-116细胞增殖,诱导其凋亡,其机制可能通过抑制Smo/Gli-1信号通路的表达实现。     

HPLC同时测定没食子中没食子酸与没食子酸甲酯的含量

目的:建立同时测定没食子中没食子酸与没食子酸甲酯含量的高效液相色谱法.方法:色谱柱为YMC-Pack ODS-A S-5 μm.12 nm(250 mm x4.6 mm),流动相:乙腈-0.5%磷酸溶液(21:79);流速:0.5 mL/min;检测波长:273 nm,柱温:室温;进样量:10μL.结果:没食子酸在0.050 6～0.406 0μg范围内,没食子酸甲酯在0.116～1.044μg范围内与峰面积值呈良好的线性关系;没食子酸和没食子酸甲酯的平均回收率分别为99.8%(RSD=1.5%,n=9),98.5%(RSD=1.26%,n=9).结论:本方法简便町靠,结果稳定,重复性好,可作为没食子质量控制方法之一.     

反相高效液相色谱法测定鸡血藤中儿茶素类成分的含量

目的:建立鸡血藤中儿茶素类化合物的含量测定方法。方法:以没食子儿茶素(gallocatechin),儿茶素(catechin),表儿茶素(epicatechin)为对照品,反相C₁₈柱,流动相甲醇-冰醋酸-水系统,梯度洗脱,流速0.8mL.min^-1,检测波长270nm。结果:3种对照品分别在0.397~1.986,0.404~2.019,0.405~2.024μg有良好的线性关系,平均加样回收率分别为97.2%,100.8%,98.8%;RSD分别为1.7%,2.4%,2.4%(n=5)。结论:本法操作简便、快捷,适用于鸡血藤中儿茶素类化合物含量的测定。     

表没食子儿茶素没食子酸酯药理作用研究进展

表没食子儿茶素没食子酸酯是从绿茶中提取分离的一种多酚类单体化合物,是绿茶中儿茶素类化合物的主要组成部分。近年研究发现,其在体内外具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎、降血脂、防辐射等多种重要的生物活性。综述了近5年来对表没食子儿茶素没食子酸酯药理作用及作用机制的研究进展。     

基于HPLC指纹图谱和多成分定量结合化学模式识别法评价不同产地抹茶质量

目的 建立不同产地抹茶的HPLC指纹图谱及多成分含量测定,结合化学模式识别法评价不同产地抹茶的质量,为其进一步研究和开发提供依据。方法 Agilent Eclipse Plus C₁₈色谱柱,流动相为乙腈（A）-0.1%磷酸（B）进行梯度洗脱,体积流量为1.0 mL/min,检测波长278 nm,柱温35 ℃,进样量10 μL。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版》（国家药典委员会2004版）软件建立27批不同产地抹茶的HPLC指纹图谱并分析相似度。使用IBM SPSS statistics 20和Origin 2023b软件进行聚类分析、主成分分析和偏最小二乘法-判别分析（partial least squares-discriminant analysis,PLS-DA）。通过对照品对比指认化学成分并进行定量测定。结果 27批抹茶HPLC指纹图谱共匹配出23个共有峰,分别指认出,峰4是没食子酸,峰6是表没食子儿茶素（epigallocatechin,EGC）,峰8是儿茶素,峰9是咖啡碱,峰12是表儿茶素,峰13是表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin-3-gallate,EGCG）,峰14是没食子儿茶素没食子酸酯（gallocatechin gallate,GCG）,峰16是芦丁,峰17是表儿茶素没食子酸酯（epicatechin gallate,ECG）,峰21是槲皮素,峰22是山柰酚,指纹图谱相似度范围为0.983～1.000。聚类分析将27批抹茶分为4类。主成分分析得出江口和瓮安产地的抹茶质量较好;经PLS-DA分析筛选出了咖啡碱、EGCG、儿茶素、山柰酚、GCG、没食子酸等8个差异成分。样品中没食子酸、EGC、儿茶素、咖啡碱、表儿茶素、EGCG、GCG、芦丁、ECG、槲皮素、山柰酚11种成分含量分别为0.10～0.85、8.27～4.36、4.21～3.84、42.23～72.37、10.41～16.49、48.52～72.89、0.12～0.73、0.53～1.76、21.43～28.60、0.01～0.04、0.03～0.38 mg/g。结论 建立的抹茶HPLC指纹图谱操作简便、结果可靠,咖啡碱、EGCG、儿茶素、山柰酚、GCG、没食子酸可以作为抹茶质量评价的指标性成分。     

双波长高效液相色谱法同时测定双黄连口服液中黄芩苷、绿原酸、连翘苷、连翘酯苷A的含量

目的:建立同时测定双黄连口服液中黄芩苷、绿原酸、连翘苷、连翘酯苷A 4种成分含量的高效液相色谱法。方法:采用Hedera ODS-2色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),柱温30℃,甲醇-0.2%磷酸溶液为流动相梯度洗脱,流速为1.0mL/min,检测波长为324、280nm。结果:黄芩苷、绿原酸、连翘苷、连翘酯苷A分别在28.53-285.25、4.86-48.60、2.05-20.50、2.01-20.10μg/mL范围内线性关系良好,相关系数分别为0.9998、0.9993、0.9993、0.9997,4种成分平均回收率均符合含量测定要求。结论:本法简单易行,可用于双黄连口服液的质量控制。     

UPLC-MS/MS法同时测定双丹胶囊、双丹颗粒、双丹口服液中7种成分

目的建立UPLC-MS/MS法同时测定双丹胶囊、双丹颗粒、双丹口服液(丹参、牡丹皮)中丹参酮ⅡA、丹参素、丹酚酸B、丹皮酚、迷迭香酸、没食子酸、原儿茶酸的含量。方法3种制剂50%乙腈提取液的分析采用XBridge BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.5μm);流动相乙腈-水(含0.1%甲酸),梯度洗脱;体积流量0.5 mL/min。采用电喷雾离子源,正负离子全扫描模式。结果7种成分在各自范围内线性关系良好(r>0.9990),平均加样回收率96.7%~102.6%,RSD 1.1%~4.5%。结论该方法简便、快速、灵敏,可用于双丹胶囊、双丹颗粒、双丹口服液的质量控制。     

RP-HPLC法测定润肠口服液中大黄酚含量

目的测定润肠口服液与决明子药材中游离、结合大黄酚的含量。方法采用RP-HPLC法。色谱条件为:展开剂甲醇-水-高氯酸(80∶20∶0.1);检测波长:257 nm。结果润肠口服液与决明子药材中游离、结合大黄酚的含量分别为口服液:0.043 4 mg/mL、0.487 6 mg/mL;决明子:0.241 1 mg/g、2.872 3 mg/g。结论所建立的方法简单、灵敏、重现性好。     

HPLC/MS同时测定双黄连口服液中的4种有效成分

目的 建立双黄连口服液(金银花、黄芩、连翘等)中4种有效成分(绿原酸、咖啡酸、黄芩苷和木犀草素)的HPLC/MS同时测定方法.方法 采用Zorbax SB C18色谱柱,以含0.2％甲酸0.4 mmol/L醋酸钠的水(A)-甲醇(B)为流动相进行梯度洗脱,0～10 min,35％B;11～ 25 min,65％ B;26 ～30 min,35％B.体积流量为0.35 mL/min,柱温25℃;在ESI正离子模式下,采用分时段SIM模式:0～7.0 min,m/z 377.4;7.0 ～ 12 min,m/z 181.0;12～18 min,m/z 447.1;18 ～25 min,m/z 287.1.结果 绿原酸、咖啡酸、黄芩苷和木犀草素的线性范围分别为0.050 ～50.0 μg/mL(r =0.999 0)、0.030 ～25.0μg/mL(r =0.998 9)、0.040 ～300 μg/mL(r =0.999 7)和0.010 ～25.0 μg/mL(r =0.999 3);进样精密度RSD值分别为2.0％、2.5％、2.1％和2.4％;加标回收率及其RSD分别为98.5％( RSD 2.7％)、98.8％( RSD 3.7％)、98.5％( RSD 1.3％)和99.2％( RSD 2.2％).结论 此方法准确,快速,重复性好,有望为双黄连口服液的质量控制提供依据.     

孕康口服液3种成分测定及HPLC指纹图谱建立

目的测定孕康口服液(山药、续断、黄芪等)中3种成分的含有量,并建立其HPLC指纹图谱。方法该药物50%甲醇提取液的分析采用Eclipse XDB C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长212、230、316 nm。结果芍药苷、黄芩苷、川续断皂苷Ⅵ分别在8.4~84、9.8~98、6.4~64μg/mL范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率分别为100.1%、101.6%、99.3%,RSD分别为0.92%、1.33%、2.85%。16批样品指纹图谱中有13个共有峰,相似度均大于0.944。结论该方法简便灵敏,专属性强,可用于孕康口服液的质量控制。     

HPLC法测定清热解毒口服液中连翘苷的含量

目的：建立清热解毒口服液中连翘苷的含量测定方法。方法：选择高效液相色谱法进行测定。色谱柱：Kromasil C18（250mm×4．6mm,5μm）,流动相：乙腈水（25：75）检测波长：278nm,流速：1．0mL／min。结果：连翘苷的回归方程为：Y=385734．2X-736018,r=0．9996（n=6）线性范围为：20．02—120．14μg／mL,平均回收率为99．58％,RSD为1．29％（n=5）。结论：方法简便,结果准确,专属性强,重现性好,可将其作为清热解毒口服液的质控指标之一。     

HPLC—ELSD法测定芪芍通络口服液黄芪甲苷含量研究

目的：建立芪芍通络口服液中黄芪甲苷的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱一蒸发光散射检测（HPLC—ELSD）法定量分析芪芍通络口服液中黄芪甲苷的含量,色谱柱：Aglient Eclipse×DBC18（150mm×4．6mm,5μm）,以乙腈一水（35：65）为流动相,流速1．0mL／min,柱温：25℃;蒸发光散射（ELSD）检测器,漂移管温度55℃,载气流速1．6L／min。进样量：10μL。结果：黄芪甲苷在0．274～5．48μg范围内呈良好的线性关系,r＝0．9997;平均回收率为98．8％,相对标准偏差（RSD）=1．2％,在常温下10h内稳定性较好。结论：HPLC—ELSD法简便快速、准确,重现性好,结果可靠;测得的该芪芍通络口服液每mL含黄芪以黄芪甲苷（C41H68O14）计为63．9μg;该黄芪甲苷含量测定法可作为控制芪芍通络口服液质量的方法。     

HPLC法测定健脾口服液中芍药苷的含量

目的　建立健脾口服液中芍药苷含量测定方法。方法　采用HPLC法测定健脾口服液中芍药苷的含量 ,色谱柱为AlltimaC18柱 ,流动相为乙腈 水 (13∶87) ,流速为 1mL/min ,检测波长为 2 30nm ;柱温 :35℃。结果　进样量在 0 .16 5～ 6 .6 0 0 μg范围内芍药苷量与峰面积响应值呈良好的线性关系 ,r =0 .9997;平均回收率为 99.4 % ,RSD为 0 .7% (n =5 )。结论　本方法简便、准确 ,可作为该制剂的质控方法     

反相高效液相色谱法同时测定文冠木中6个活性成分的含量

目的建立反相高效液相色谱(RP-HPLC)法同时测定文冠木中表没食子儿茶素、儿茶素、表儿茶素、二氢杨梅素、二氢槲皮素、杨梅素6个成分含量的方法。方法采用岛津Inertsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5.0μm);乙腈(A)-0.4%乙酸水(B)为流动相,梯度洗脱;流速:1.0 mL·min-1;柱温:20℃;检测波长为280 nm。结果表没食子儿茶素、儿茶素、表儿茶素、二氢杨梅素、二氢槲皮素、杨梅素的进样量分别在0.170~4.080μg(r=0.9992)、0.070~0.840μg(r=0.9996)、0.200~2.400μg(r=0.9997)、0.270~3.240μg(r=1.0000)、0.032~0.384μg(r=1.0000)、0.073~0.876μg(r=1.0000)范围内线性关系良好;平均回收率(n=3)为96.62%~101.28%,RSD为1.1%~2.5%。9批文冠木药材中表没食子儿茶素、儿茶素、表儿茶素、二氢杨梅素、二氢槲皮素、杨梅素的含量分别为1.78~7.26 mg·g^-1、0.11~1.31 mg·g^-1、1.34~4.52 mg·g^-1、1.07~5.33 mg·g^-1、0.02~0.85 mg·g^-1、0.05~1.45 mg·g^-1。结论所建立的HPLC方法专属性强、准确,重复性良好,可为文冠木药材的质量控制提供科学依据。     

RP—HPLC法测定雪莲口服液中去氢木香内酯的含量

目的：采用高效液相色谱法测定雪莲口服液中去氢木香内酯的含量。方法：采用高效液相色谱法,色谱柱为Symmetry ShieldTM C18色谱柱（250×4．6mm,5μm）流动相：甲醇-水（65：35）,流速1mL·min^-1,检测波长为225nm。结果：去氢木香内酯在0．10～2．08μg范围内呈良好的线性关系,平均回收率98．6％,RSD为0．9％。结论：该方法准确可靠,适合于雪莲口服液中去氢木香内酯的含量测定。