基于“脾主运化”探讨结肠黏膜Glu及NO在肠易激综合征发病机制中的作用

目的:基于"脾主运化"理论,探讨结肠黏膜Glu及NO在肠易激综合征发病机制中的作用。方法:给予大鼠反复直结肠灌注中药大黄造成炎症刺激,炎症恢复后,再给予小量电刺激诱发高敏感性的肠道发生应激反应,制备IBS动物模型,观察疏肝健脾法对大鼠结肠黏膜Glu及NO含量的影响。结果:模型组与正常对照组比较,Glu及NO含量明显升高(P<0.01);疏肝健脾组与模型组比较,Glu及NO含量有一定程度减少(P<0.01)。结论:大黄-电刺激大鼠模型可有效制备IBS动物模型;基于"脾主运化"理论的疏肝健脾法能够改善该模型的缺损症状,对IBS有一定的防治作用。     

疏肝健脾法对肠易激综合征模型大鼠SP及c-fos表达变化的作用机制

目的:探讨肠易激综合征动物的P物质(SP)及c-fos的表达变化,以及它们在IBS中的可能作用和临床意义。方法:将SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、疏肝健脾组,给予大鼠反复直结肠灌注中药大黄造成炎症刺激,炎症恢复后予小量电刺激诱发高敏感性的肠道发生应激反应,制备IBS动物模型,通过免疫组织化学法测定对SP和c-fos表达变化及疏肝健脾法对以上指标的调控作用。结果:模型组与正常对照组比较,SP、c-fos阳性表达明显升高(P<0.01);疏肝健脾组与模型组比较,SP、c-fos阳性表达减少(P<0.01,P<0.05)。结论:大黄-电刺激大鼠模型可有效制备IBS动物模型;基于"脾主运化"理论的疏肝健脾法能够改善该模型的炎症损伤,对IBS有一定的防治作用。     

疏肝健脾法调控肠易激综合征动物模型胃肠激素水平的研究

目的:观察疏肝健脾法对肠易激综合征动物模型胃肠激素水平的影响。方法:将32只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、痛泻要方组、得舒特组。采用束缚应激刺激加灌服番泻叶煎剂的方法造成肠易激综合征(IBS)大鼠模型,观察各组大鼠稀便率,以放射免疫法检测各组大鼠血浆及局部肠组织中生长抑素(SS)、P物质(SP)水平的变化。结果:痛泻要方组经治疗后,稀便率下降,与模型组比较有统计学意义(P&lt;0.05);模型组大鼠血浆和局部肠组织中SS、SP水平较正常对照组明显升高(P&lt;0.05,P&lt;0.01);痛泻要方组血浆及局部肠组织中SS、SP水平较模型对照组明显降低(P&lt;0.05)。结论:疏肝健脾法对IBS动物模型胃肠激素有调控作用,能降低IBS动物模型体内SS、SP的分泌释放水平。     

眼针疗法对IBS模型大鼠结肠组织色氨酸羟化酶1表达的影响

目的:研究肠易激综合征(Irritable bowel syndrome,IBS)模型大鼠远端结肠组织色氨酸羟化酶1(Tryptophan hydroxylase1,TPH1)的表达以及眼针干预的影响。方法:实验动物分成正常对照组、IBS模型组、眼针组,采用束缚刺激与应激刺激相结合的方法建立IBS动物模型并进行眼针干预。各组采用Western-Blot法、RT-PCR法检测远端结肠组织中TPH1的蛋白和mRNA表达。结果:与正常对照组比较,IBS模型组TPH1的蛋白和mRNA表达均上调;与IBS模型组比较,眼针组TPH1表达下调明显。结论:IBS模型大鼠结肠组织TPH1表达上调,提示5-HT合成水平提高,可能是结肠组织5-HT水平升高的重要原因。眼针干预可改善IBS大鼠TPH1表达至正常水平。     

疏肝健脾方对腹泻型肠易澉综合征大鼠血浆及结肠组织5-HT、SP、VIP的影响

[目的]观察疏肝健脾方对腹泻型肠易激综合征大鼠血浆及结肠组织5-羟色胺（5-HT）、P物质（SP）和血管活性肠肽（VIP）的影响。[方法]将60只SD大鼠按随机数字表法随机分为正常组、模型组、得舒特组、疏肝健脾方低、中、高剂量组,使用乙酸灌肠加束缚的方法建立腹泻型肠易激综合征（D—IBS）大鼠模型,应用免疫组化法检测5-HT、SP及VIP。[结果]疏肝健脾方可以明显降低大鼠的粪便含水量（P〈0．05）;疏肝健脾方中、高剂量组腹部撤退反射（AWR）评分在不同扩张容量下均较模型组明显降低（P〈0．05）;疏肝健脾方可以降低大鼠血浆中5-HT和结肠组织中sP的含量,而血浆中SP、VIP及结肠组织中VIP含量无显著变化。[结论]疏肝健脾方可以改善大鼠的腹泻及内脏的高敏感性,并对5-HT及SP有调节作用,提示疏肝健脾方可以有效治疗D—IBS,并与调节胃肠激素有关。     

PKA调控TRPV1敏化介导CGRP表达探讨疏肝健脾方防治肠易激综合征研究

目的:通过观察肠易激综合征(irritable bowels syndrome,IBS)大鼠结肠黏膜组织形态、超微结构及蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)、辣椒素受体(transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1)、降钙素基因相关肽(caleitonin gene-relatedpeptide,CGRP)的表达变化,探讨疏肝健脾方治疗IBS可能机制。方法:72只清洁级雄性大鼠按体质量随机分为正常组,模型组,疏肝健脾方组(低、中、高剂量)和对照组;用辣素灌胃结合束缚应激刺激法复制IBS大鼠模型。正常组予同步饲养;疏肝健脾方组分别按低、中、高不同剂量给药;对照组予匹维溴胺;模型组予等剂量生理盐水;连续灌胃2周。末次给药后,处死所有大鼠,取结肠组织并应用HE染色法和醛品红-桔黄G法分别检测病理组织学改变及肥大细胞阳性表达情况;采用Western-blot技术和荧光定剂量PCR检测大鼠结肠PKA、TRPV1、CGRP的表达情况。结果:光镜下见各组黏膜及黏膜上皮绒毛完整,排列规则,可见少许炎症细胞,未见黏膜下血管扩张及弥漫性炎症浸润改变,腺体结构、排列正常;正常组除外,各组大鼠结肠组织黏膜间质或黏膜下层可见类圆形紫红至深紫色染色点。模型组大鼠结肠组织中PKA、TRPV1、CGRP基因和蛋白表达明显高于正常组(P"0.05)。高剂量组PKA、TRPV1、CGRP以及中剂量组CGRP基因表达和高剂量组PKA、CGRP蛋白表达均低于模型组(P"0.05),其余低、中剂量各组PKA、TRPV1及CGRP表达与模型组比较,差异均无统计学意义(P#0.05)。结论:疏肝健脾方可能通过PKA调节IBS大鼠TRPV1、CGRP的变化,是其发挥疗效的作用机制之一。     

眼针疗法对IBS模型大鼠结肠组织嗜铬细胞表达的影响

目的：研究眼针对肠易激综合征（IBS）模型大鼠远端结肠组织嗜铬细胞（EC）表达的影响,探讨眼针治疗IBS的可能机制。方法：实验动物分成对照组、IBS模型组、眼针组,采用束缚刺激与应激刺激相结合的方法建立IBS动物模型并进行眼针干预。各组采用免疫组化方法检测远端结肠组织中EC细胞并进行分析。结果：与对照组比较,IBS模型组EC细胞数量明显增多,细胞免疫组化染色强度显著增强;与IBS模型组比较,眼针组EC细胞数量、免疫组化染色强度显著降低。结论：IBS模型大鼠结肠EC细胞的表达上调,眼针干预可有效降低EC细胞的表达。     

电针对IBS内脏高敏感大鼠P2X_3受体调节作用的研究

目的:观察电针天枢和上巨虚穴(合募配穴)对肠易激综合征(IBS)内脏高敏感大鼠结肠与脊髓P2X_3受体表达的影响,探讨电针治疗IBS的相关作用机制,为针刺治疗IBS提供科学依据。方法:采用国际公认的球囊刺激乳鼠结直肠法制备IBS大鼠模型。实验分为正常组、模型组、电针组和西药组。电针组选取双侧天枢和上巨虚穴,针刺后连接韩式经穴刺激仪进行治疗,西药组选用IBS常用药得舒特(水溶液)灌胃。观察各组大鼠组织病理学改变,腹壁撤退反射(AWR)评分,应用免疫组化方法检测大鼠结肠黏膜和脊髓P2X_3受体表达的改变。结果:与正常组比较,在不同直结肠扩张刺激强度下,IBS模型大鼠AWR评分显著增高(P0.01),结肠黏膜和脊髓P2X_3受体表达增强(P0.01)。电针和西药治疗均可明显改善大鼠一般状况,降低AWR评分(P0.01或P0.05)。电针组和西药组均可降低大鼠结肠黏膜组织和脊髓P2X_3受体表达阳性目标积分光密度(P0.01或P0.05),且结肠和脊髓的P2X_3受体表达呈正相关。结论:IBS大鼠内脏敏感性增高,电针可降低其痛阈;IBS内脏高敏感大鼠结肠和脊髓P2X_3受体表达显著增加可能是参与IBS大鼠内脏高敏感形成的重要因子,电针治疗IBS大鼠内脏高敏感的作用可能与降低异常增高的P2X_3受体表达相关。     

逍遥散对内脏高敏感大鼠血清NO及腹壁肌电活动紊乱调节作用的实验研究

目的:观察逍遥散对IBS模型大鼠腹壁肌电活动紊乱的调节作用,并探讨其可能机制。方法:实验动物随机分为6组:正常组,模型组,阳性对照组,逍遥散高、中、低剂量组,采用慢性束缚+夹尾刺激作为心理应激原诱导IBS大鼠模型,通过电生理记录仪记录并分析各组大鼠腹壁肌电活动,同时对各组大鼠血清NO水平进行检测(Griess法)。结果:与正常组比较,IBS模型大鼠腹壁肌电活动增强,血清NO含量明显增高(P0.01),应用逍遥散治疗后,不同扩张容量下腹壁肌电活动明显减弱(P0.05～0.01),血清NO水平亦明显降低(P0.05～0.01)。结论:逍遥散对IBS大鼠腹壁肌电活动紊乱有一定的调节作用,其机制可能与神经递质NO的分布、释放减少有关。     

眼针对肠易激综合征大鼠血清和结肠组织中P物质及血管活性肠肽含量的影响

目的:观察眼针疗法对肠易激综合征(IBS)大鼠血清和结肠组织中P物质(SP)和血管活性肠肽(VIP)含量的影响,探讨眼针疗法对IBS治疗的作用机制。方法:40只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、眼针组和匹维溴胺组,每组10只。采用慢性应激结合束缚方法建立IBS大鼠模型。眼针组取下焦区、大肠区、肝区、脾区进行针刺,治疗7 d。匹维溴胺组给予匹维溴胺灌胃7 d。HE染色检测结肠组织病理学变化;酶联免疫吸附法测定大鼠血清和结肠组织中SP和VIP含量的变化。结果:各组大鼠结肠组织病理学变化没有明显差异。模型组大鼠与正常组比较,血清和结肠组织中SP和VIP含量显著升高(P0.01);眼针治疗组和匹维溴胺组与模型组比较,血清和结肠组织中SP和VIP含量显著降低(P0.01)。结论:眼针疗法能够降低IBS模型大鼠血清和结肠组织中SP和VIP的含量,从而对IBS起到治疗作用。     

健脾安肠丸对腹泻型肠易激综合征结肠组织SP、VIP、CGRP的影响

目的:研究健脾安肠丸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)结肠组织SP、VIP的影响。方法:采用大黄灌胃与束缚配合的方法制备IBS-D大鼠。将60只成年SD大鼠随机分为4组:正常组、模型组、健脾安肠丸大剂量组、健脾安肠丸小剂量组和匹维溴铵组。采用ELISA法检测大鼠结肠组织中P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)和降钙素基因相关肽(CGRP)的含量。结果:模型组大鼠大便形状的评分值较正常组明显增高(P0.01),而健脾安肠丸大剂量组和匹维溴铵组较模型组分值显著下降(P0.01,P0.05);大剂量、小剂量健脾安肠丸和匹维溴铵均能减少模型大鼠结肠SP、VIP含量,提高CGRP含量。结论:健脾安肠丸能有效地缓解腹泻型肠易激综合征,其疗效可能与减少SP、VIP和增加CGRP的释放有关。     

溃结灵对溃疡性结肠炎大鼠结肠粘膜超微结构的影响

目的：观察溃结灵对UC大鼠模型结肠粘膜超微结构的影响。方法：UC大鼠模型采用TNBS法,透射电镜观察结肠超微结构改变,生化法检测MPO活性。结果：模型组大鼠一般状况较差,电镜下结肠粘膜上皮表面的微绒毛变短,扭曲,甚至脱落,细胞器减少,细胞质液化溶解,腺上皮细胞间连接稍松散,杯状细胞,胞内颗粒呈排空状态;结肠粘膜MPO含量显著升高。溃结灵组和SASP组一般状况有所改善,结肠粘膜上皮表面的微绒毛基本完整,腺上皮间相互连接紧密,肠腺杯状细胞,胞浆内粘液颗粒较丰富;结肠粘膜MPO含量显著降低。结论：溃结灵对UC大鼠模型结肠粘膜超微结构有改善作用。     

眼针疗法对肠易激综合征模型大鼠结肠组织5-羟色胺4受体表达的影响

目的研究肠易激综合征(IBS)模型大鼠远端结肠组织5-羟色胺4受体(5-HT4R)的表达以及眼针干预的影响。方法实验动物分成正常对照组、IBS模型组、眼针组,采用束缚刺激与应激刺激相结合的方法建立IBS动物模型并进行眼针干预。采用Western-Blot法、RT-PCR法检测各组大鼠远端结肠组织中5-HT4R的蛋白和mRNA表达。结果与正常对照组比较,IBS模型组5-HT4R的蛋白和mRNA表达均下调;而与IBS模型组比较,眼针组5-HT4R表达明显上调。结论 IBS模型大鼠结肠组织5-HT4R水平下调,提示5-HT4R可能是IBS分子生物学基础之一,为IBS的治疗提供了分子靶点。眼针干预可有效改善IBS大鼠5-HT4R表达水平。     

疏肝健脾方对腹泻型肠易激综合征大鼠血浆及结肠组织5-HT、SP、VIP的影响

[目的]观察疏肝健脾方对腹泻型肠易激综合征大鼠血浆及结肠组织5-羟色胺(5-HT)、P物质(SP)和血管活性肠肽(VIP)的影响。[方法]将60只SD大鼠按随机数字表法随机分为正常组、模型组、得舒特组、疏肝健脾方低、中、高剂量组,使用乙酸灌肠加束缚的方法建立腹泻型肠易激综合征(D-IBS)大鼠模型,应用免疫组化法检测5-HT、SP及VIP。[结果]疏肝健脾方可以明显降低大鼠的粪便含水量(P<0.05);疏肝健脾方中、高剂量组腹部撤退反射(AWR)评分在不同扩张容量下均较模型组明显降低(P<0.05);疏肝健脾方可以降低大鼠血浆中5-HT和结肠组织中SP的含量,而血浆中SP、VIP及结肠组织中VIP含量无显著变化。[结论]疏肝健脾方可以改善大鼠的腹泻及内脏的高敏感性,并对5-HT及SP有调节作用,提示疏肝健脾方可以有效治疗D-IBS,并与调节胃肠激素有关。     

疏肝健脾方对腹泻型肠易激综合征大鼠血浆胆囊收缩素及生长抑素含量的影响

目的观察疏肝健脾方对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠血浆中胆囊收缩素(CCK)及生长抑素(SS)含量的影响。方法将60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、得舒特组、疏肝健脾低、中及高剂量组,使用乙酸灌肠加束缚应激的方法建立IBS-D大鼠模型,应用免疫组织化学方法检测大鼠血浆CCK及SS含量。结果疏肝健脾方可以明显降低模型大鼠的排便次数(P0.01);不同扩张容量下,疏肝健脾方明显降低模型大鼠的内脏敏感性(P0.01);模型组大鼠血浆CCK及SS含量与正常组比较明显升高(P0.05);中、高剂量疏肝健脾方可以降低大鼠血浆中CCK和SS的含量(P0.05),与得舒特组比较无显著性差异(P0.05)。结论疏肝健脾方可以改善大鼠的腹泻及内脏高敏感性,并对CCK及SS有调节作用,提示疏肝健脾方可以有效治疗IBS-D,并与调节胃肠激素有关。     

疏肝健脾方对腹泻型肠易激综合征大鼠5-羟色胺相关的结肠黏膜上皮分泌功能的影响

目的:探讨5-羟色胺(5-HT)对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠及疏肝健脾方干预后IBS-D大鼠结肠黏膜上皮分泌功能的影响。方法:将SD大鼠随机分成正常组、模型组、疏肝健脾组,模型组及疏肝健脾组采用乙酸灌肠加束缚应激进行造模,造模成功后,正常组和模型组予0.9%氯化钠溶液灌胃,疏肝健脾组予疏肝健脾方灌胃。采用恒温灌流装置体外测量跨上皮电流为短路电流。观察5-HT、去甲肾上腺素(NE)对各组大鼠结肠上皮短路电流的影响。结果:模型组大鼠基础电流较正常组及疏肝健脾组高,但是差异无统计学意义;5-HT引起的模型组大鼠结肠黏膜上皮产生的短路电流较正常组及疏肝健脾组大鼠降低(P0.05);去甲肾上腺素引起的模型组大鼠结肠黏膜上皮产生的短路电流降低幅度较正常组及疏肝健脾组低。结论:5-HT引起的IBS-D大鼠结肠黏膜上皮的分泌活动较正常大鼠弱,疏肝健脾方通过改善IBS-D大鼠对5-HT的反应性达到治疗目的。     

疏肝、健脾、疏肝健脾方药对肠易激综合征模型大鼠的治疗作用及机理探讨

目的:观察疏肝、健脾、疏肝健脾方药对肠易激综合症(IBS)模型大鼠的治疗效果,并探讨其作用机理.方法:采用新生鼠母子分离复合避水应激大鼠模型,测定用药前后大鼠腹部收缩反射痛阈值、应激诱导的排便粒数及结肠中五羟色胺与P物质的含量变化.结果:柴胡疏肝散、痛泻要方均能明显提高大鼠痛阈值,显著减少应激诱导的排便粒数,降低结肠中五羟色胺与P物质的含量,其中痛泻要方的作用优于柴胡疏肝散.结论:疏肝健脾的代表方痛泻要方对IBS模型大鼠具有显著的治疗作用,其疗效优于单纯疏肝方药柴胡疏肝散;其作用机理可能与降低结肠中5-HT、SP含量有关.     

针刺联合药物治疗对肠易激综合征疗效的探索性研究＊

目的 探讨针刺联合药物治疗对肠易激综合征（Irritable bowel syndrome，IBS）的疗效。方法 将42只健康雄性SD大鼠随机分为对照组、IBS模型组、药物治疗A组、针刺组、药物治疗A+针刺组、药物治疗A+B组、药物治疗A+B+针刺组，除对照组外，其余组别大鼠均用三硝基苯磺酸进行结肠灌注，制备IBS模型，进行2周建模。对照组和IBS模型组灌胃生理盐水，药物治疗A组采用蒙脱石散灌胃，针刺组用电针内关、天枢和太冲穴，药物治疗A+B组用蒙脱石散和氟哌噻吨美利曲辛片灌胃，药物治疗A+B+针刺组使用蒙脱石散和氟哌噻吨美利曲辛片灌胃，同时，使用电针辅助治疗，每组都连续治疗2周。建模以及治疗过程中记录各组大鼠的一般行为学特征；治疗结束后，采集各组大鼠的结肠组织，进行结肠溃疡和炎症肉眼评分、腹部回撤反射评分（Abdominal withdrawal reflex，AWR），生化检测结肠组织中的5-羟色胺（5-Hydroxytryptamine，5-HT）和大鼠髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）的含量，采用苏木精—伊红染色法（Hematoxylin-eosinstaining，HE）和马松染色法对结肠组织进行病理切片观察。结果 在建模后，与空白对照组相比，其他模型组均出现了体重的降低（P < 0.05）。而治疗后，与空白对照组相比，IBS模型组体重增长率低（P < 0.05）；药物治疗A组、针刺组、药物治疗A+针刺组、药物治疗A+B组体重增长率与对照组相比较低，但比IBS模型组要高（P < 0.05）；药物治疗A+B+针刺组体重增长率显著高于空白对照组（P < 0.05）。IBS模型组的结肠溃疡和炎症肉眼评分、AWR评分、结肠组织中的5-HT和MPO含量均显著高于空白对照组（P < 0.05）；药物治疗A组、针刺组、药物治疗A+针刺组、药物治疗A+B组高于空白对照组，但显著低于IBS模型组；药物治疗A+B+针刺组的结肠溃疡和炎症肉眼评分、AWR评分和结肠组织中的5-HT与MPO含量则显著低于IBS模型组（P < 0.05）。HE与Masson染色结果显示，与空白对照组相比，IBS模型组的结肠组织中有明显的致密炎性细胞浸润，各治疗组在治疗后炎性细胞明显减少，IBS模型组及其余各组的结肠组织粘膜下层和平滑肌中有大量胶原蛋白。结论 针刺联合药物治疗对肠易激综合征的相关症状有较好的效果，提示针刺可能对肠易激综合征有一定的疗效，启发针刺联合药物治疗对肠易激综合征的临床应用。     

健脾解毒化浊方对肠易激综合征作用机制的实验研究

目的探讨健脾解毒化浊方对内脏高敏性肠易激综合征(IBS)大鼠模型的疗效和作用机制。方法采用结肠慢性刺激法制作内脏高敏感性的IBS大鼠模型。将实验动物分为正常对照组(A组)、模型对照组(B组)、西药对照组(C组)、中药低剂量组(D组)、中药高剂量组(E组)。观察各组大鼠肠道内扩张引起腹部隆起和背部拱起的容量阈值和大鼠肠道内不同容量下扩张期间腹壁收缩次数,检测5-羟色胺(5-HT)、P物质(SP)、降钙素基因相关肽(CGRP)含量。结果与对照组相比,各治疗组大鼠行为学和电生理指标均有明显改善;各治疗组大鼠5-HT、SP含量明显下降,CGRP含量增加,且有一定的量效关系。结论健脾解毒化浊方能降低内脏高敏感性IBS模型大鼠血清5-HT、血浆SP含量,增加CGRP含量,大剂量痛泻药方疗效优于得舒特。健脾解毒化浊方的作用机制可能是通过降低模型大鼠血清5-HT、血浆SP含量,减弱背角神经元兴奋性,从而达到提高内脏痛阈、消除肠道过敏的治疗目的。