黄酮苷元的三维构动关系研究Ⅰ:CaCO2细胞渗透性的预测

目的 探索应用计算机虚似筛选技术进行中药与天然药物早期药动学研究的方法 ,阐明黄酮苷元的结构与其Caco-2细胞渗透性的关系.方法 以Sybyl 7.3软件包的CombiLibMaker模块构建基于黄酮(flavone)骨架的虚拟组合化学库,以Volsurf模块定性预测黄酮苷元的Caco-2细胞渗透性.结果 构建的虚拟组合化学库中包含26 244个黄酮苷元.黄酮苷元的Caco-2细胞渗透性与其取代基的种类和数量有关;羟基取代的增多不利于其透过Caco-2细胞,羟基的甲基化则可增加其透过Caco-2细胞的能力.结论 研究结果 与报道的试验数据具有良好的相关性.     

仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷在Caco-2细胞模型中吸收的机制

目的研究仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷在人结肠癌细胞Caco-2细胞模型中的吸收机制。方法利用Caco-2细胞模型研究仙茅苷(curculigoside)、苔黑酚葡萄糖苷(orcinol glucoside)的双向跨膜转运特征,通过高效液相色谱法测定二者的质量浓度,计算其表观渗透系数(P_(app)),考察时间、药物质量浓度对二者吸收和转运的影响。结果仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷在Caco-2细胞模型中,各自在细胞绒毛面Apical(AP)和基底面Basolateral(BL)的双向转运基本相同,随着药物浓度的增加转运速率在减小,随着转运时间的延长转运速率略有减小。结论仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷具有良好的肠吸收特性,在Caco-2细胞模型中的吸收为被动转运。     

芍药苷在Caco-2细胞模型中吸收机制的研究

目的 研究芍药苷在Caco-2细胞模型中的吸收机制.方法 用Caco-2细胞单层模型研究芍药苷的双向转运,考察时间、药物质量浓度对芍药苷吸收的影响.采用高效液相色谱法检测芍药苷质量浓度,计算其表观渗透系数(Papp).结果 芍药苷在Caco-2细胞模型中,从单层细胞层顶端到基底端的转运与基底端到顶端的转运大致相同;随着芍药苷质量浓度的增加,顶端到基底端方向的吸收量近似线性增加,基底端到顶端方向的分泌量近似线性增加.结论 芍药苷在Caco-2细胞模型中吸收主要是被动转运.     

马钱子碱体外吸收机制及其与甘草苷的转运相互作用研究

目的:研究马钱子碱在Caco-2单层细胞模型中的吸收与转运情况,以及与甘草苷合用对马钱子碱吸收与转运的影响。方法:以Caco-2单层细胞为体外研究模型,考察转运时间、药物作用浓度、P-糖蛋白抑制剂维拉帕米、介质pH值对马钱子碱单用及与甘草苷合用时,马钱子碱的累积吸收浓度(TRcum)和表观渗透系数(Papp)的影响。结果:马钱子碱单用时,其Papp值均>10-6cm/s,PappB→A/PappA→B均<1.5。马钱子碱与甘草苷合用,明显升高了PappB→A/PappA→B值;马钱子碱与维拉帕米合用,显著降低了PappB→A/PappA→B值。介质pH6.0时的PappA→B值显著<介质pH7.4时PappA→B值。结论:马钱子碱以被动转运为主,P-gp及甘草苷对其吸收有明显抑制作用,介质pH值对其吸收也有重要影响。     

树枝状聚合物生物相容性研究进展

聚酰胺胺型(PAMAM)树枝状聚合物是新近发展起来的一种新型聚合物,PAMAM具有三维球型对称结构、表面众多官能团、高度的单分散性、纳米尺寸、分子量精确可控等结构特点,作为载体在给药系统中得到了广泛而深入的研究,但对其生物相容性的研究相对还比较零散,旨在对PAMAM生物相容性的国内外研究进行综述,以便对PAMAM在生物医药中的应用提供相关信息。     

改善葛根素肠道吸收的体外研究

目的研究葛根素肠道吸收的机制,探讨提高其肠道吸收的方法。方法改变实验时间、温度及药物质量浓度,考察葛根素在Caco-2细胞中的转运特性,并考察不同的吸收促进剂对其跨膜转运的影响。结果葛根素的膜渗透性低,被动扩散是其跨膜转运的主要机制;十二烷基磺酸钠(SDS)破坏Caco-2单细胞层的完整性,提高葛根素转运;聚氧乙烯月桂基醚(Brij 35)、牛血清白蛋白(BSA)和分离乳清蛋白对葛根素转运有促进作用,但不影响Caco-2细胞的跨膜电阻(TEER);相对分子质量较高的壳聚糖通过可逆性地降低TEER,促进细胞间转运,提高葛根素的膜渗透性。结论葛根素的膜渗透性低是口服生物利用度低的主要原因,不同吸收促进剂可通过不同机制改善其膜渗透性。     

Caco-2细胞模型及其在中药吸收转运研究中的应用

Caco-2细胞模型是一种筛选药物离体口服吸收特性的模型,现已广泛应用于评价药物在小肠的吸收特性和转运机理的研究。作者描述了Caco-2细胞的培养及其细胞单层模型如何建立和验证;探讨了Caco-2细胞用于药物吸收转运研究的机制;对其在中药被动转运、载体介导的主动转运、中药外排机制和吸收过程中药物相互作用等方面的应用进行了详细的阐述;并评价了该细胞用于中药吸收转运机制研究中的作用;最后对该细胞模型可能的应用发展前景提出了展望。     

基于PBPK模型的在体单向肠灌流技术对苷元成分的适用性分析评价

在体单向肠灌流技术(single-pass intestinal perfusion,SPIP)是生物药剂学分类系统(biopharmaceutics classification system,BCS)研究化合物渗透性的常用载体。随着BCS在中药领域的应用与深入,采用SPIP模型研究中药成分的肠吸收也愈来愈普遍。该研究基于SPIP模型在某些中药渗透性研究的局限性问题上,推测苷元可能比苷更适合采用SPIP模型研究肠吸收问题,并对其在苷元成分的适用性方面进行了分析和评价。以槲皮素、大豆苷元、芒柄花素、染料木素和甘草次酸为研究对象,通过SPIP的定量研究评估这几种苷元成分的肠道通透性并做人体有效渗透系数(Peff)和吸收分数(Fa)的预测。结合多种渗透性研究方法的文献对比分析及基于生理的药代动力学(physiologically based pharmacokinetic models,PBPK)模型对苷元成分的人体吸收预测,以进一步说明SPIP模型是研究中药苷元渗透性及预测人体吸收的良好工具,为单向肠灌流技术和BCS在中药成分的肠吸收研究方面提供数据基础及理论参考。     

安石榴苷在Caco-2细胞模型的肠吸收机制

目的:以Caco-2模型研究石榴皮中安石榴苷的肠吸收特征及机制。方法:通过细胞培养技术建立Caco-2细胞模型,并通过细胞形态学特征、细胞跨膜电阻值等指标验证筛选可用模型。考察不同浓度的安石榴苷对Caco-2细胞的毒性以确定实验给药浓度。建立HPLC测定安石榴苷累积转运量,进而通过Caco-2细胞转运实验研究时间、温度、pH值、P-糖蛋白抑制剂维拉帕米与环孢菌素对安石榴苷吸收转运的影响。结果:安石榴苷在Caco-2细胞模型中吸收良好且安石榴苷的吸收不具有浓度依赖性,150～350μmol·L~(-1)安石榴苷的外排率(ER)值均大于1.5,4℃条件下安石榴苷的双向转运均减少。同时,P-糖蛋白抑制剂存在的条件下,安石榴苷的表观渗透系数P_(app(AP-BL))值增大、P_(app(BL-AP))值减小。结论:安石榴苷在Caco-2细胞的吸收以主动转运方式为主,P-糖蛋白参与了安石榴苷的转运。     

葛根芩连汤有效成分对黄芩苷在Caco-2细胞模型中吸收转运的影响

目的采用LC-MS/MS法研究葛根芩连汤(葛根、黄芩、黄连、甘草)有效成分对黄芩苷在Caco-2细胞模型中吸收转运的影响。方法建立Caco-2细胞模型,采用细胞摄取实验和细胞转运实验评价多药耐药相关蛋白(MRP2)的功能。结果摄取实验中,黄芩苷的摄取量在60 min基本达到饱和[(0.68±0.07)ng/μg],加入MRP2抑制剂MK-571之后,黄芩苷的摄取量显著升高[(1.10±0.02)ng/μg,P<0.01],而P-gp转运蛋白抑制剂维拉帕米无此效果。配伍葛根素能提高黄芩苷的摄取量(P<0.05),而小檗碱、甘草苷的作用有统计学意义。细胞转运实验的结果表明,加入MRP2转运蛋白抑制剂后能增加黄芩苷从肠腔侧(AP)到基底侧(BL)侧的转运。配伍葛根素、甘草苷后能促进黄芩苷从AP到BL侧的转运,小檗碱无明显影响。结论 MRP2转运蛋白调控Caco-2细胞摄取吸收黄芩苷,推测其可能为MRP2转运蛋白的底物。葛根素可使在Caco-2细胞中黄芩苷被外排的量减少,从而增加黄芩苷的吸收量。     

盐酸巴马汀在Caco-2细胞中的吸收机制

目的:研究盐酸巴马汀在Caco-2细胞模型中的吸收机制。方法:用Caco-2细胞单层模型研究盐酸巴马汀的双向转运,并考察时间、药物浓度、抑制剂、pH及温度对盐酸巴马汀吸收的影响。用高效液相色谱法检测药物浓度,计算其表观渗透系数。结果:盐酸巴马汀在Caco-2细胞模型中,从单层细胞层顶端到基底端的转运大于基底端到顶端的转运,随时间和浓度的增加,药物吸收呈饱和趋势,且P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)抑制剂维拉帕米、pH和温度对它的转运有影响。结论:盐酸巴马汀在Caco-2细胞模型中的吸收主要是由载体介导的主动转运,且该主动转运的载体位于Caco-2细胞单层的顶端。     

Caco-2细胞单层模型中熊果酸摄取转运机制的研究

目的 研究熊果酸在Caco-2细胞单层模型中的吸收转运机制.方法 利用人源结肠腺癌细胞系Caco-2细胞单层模型研究熊果酸在有或无P-糖蛋白专属性抑制维拉帕米存在时,评价其双向转运特征,并考察时间、药物浓度、体系温度以及培养介质pH值对Caco-2细胞摄取熊果酸的影响.采用高效液相色谱-紫外检测法对熊果酸进行定量分析,计算其表现渗透系数(P_(app)).结果 浓度在10～40 μmol/L内,Caco-2细胞对熊果酸摄取量呈线性增加.双向转运研究发现加入P-糖蛋白专属性抑制剂维拉帕米后.其P_(app)发生显著改变,表观渗透率由3.445下降至1.386.结论 熊果酸在Caco-2细胞模型的吸收转运机制以被动转运为主,P-糖蛋白参与主动转运的过程.     

穿心莲内酯在Caco-2细胞单层模型中的吸收机制

目的 研究穿心莲内酯在Caco-2细胞单层模型中的吸收机制.方法 观察穿心莲内酯在Caco-2细胞模型中的双向转运,考察时间、药物浓度、温度和抑制剂对穿心莲内酯吸收的影响.用LC/MS/MS检测药物浓度,计算其表观渗透系数(Papp).结果 穿心莲内酯在Caco-2细胞模型中,随时间和浓度的增加,药物吸收呈饱和趋势,且受温度和碘乙酰胺影响,但不受外排抑制剂维拉帕米和MK-571的影响.结论 穿心莲内酯在Caco-2细胞中的吸收主要是由载体介导的主动转运.     

Permeability of the flavonoids liquiritigenin and its glycosides in licorice roots and davidigenin, a hydrogenated metabolite of liquiritigenin, using human intestinal cell line Caco-2

The present investigation focused on the transepithelial flux of liquiritigenin (LG), davidigenin (DG), liquiritin (LQ), and liquiritin apioside (LA) using the human colonic cell line Caco-2 as a model of human intestinal absorption. Apparent permeability coefficients (Papp) for the apical to basolateral flux of LG and DG were (16.0 +/- 0.727) x 10(-6) cm/s and (18.2 +/- 1.67) x 10(-6) cm/s, respectively. These Papp were higher than that of the transcellular transport marker propranolol (13.5 +/- 0.34) x 10(-6) cm/s (P < 0.01). Papp for the apical to basolateral flux of LQ and LA were (0.26 +/- 0.12) x 10(-6) cm/s and (0.075 +/- 0.005) x 10(-6) cm/s, respectively. These Papp were lower than that of the paracellular transport marker mannitol (0.64 +/- 0.04) x 10(-6) cm/s (LG, P < 0.01; LA, P < 0.001). These data suggested excellent absorption of LG and DG through the human intestinal epithelial cell line. On the contrary, poor absorption of LQ and LA was expected due to the little transepithelial flux of these compounds in the human colonic cell line Caco-2.     

脱水穿心莲内酯在Caco-2细胞单层模型中的吸收机制

目的研究脱水穿心莲内酯(DAL)在Caco-2细胞单层模型中的吸收机制。方法观察DAL在Caco-2细胞单层模型中的双向转运,考察时间、DAL浓度、温度和P-糖蛋白(P-gp)抑制剂维拉帕米对DAL吸收的影响。采用LC/MS/MS方法检测DAL浓度,计算其表观渗透系数(Papp)。结果 DAL在Caco-2细胞模型中的双向转运,随时间和浓度的增加,DAL的吸收具有时间、浓度依赖性,未出现饱和趋势;不受温度和P-gp抑制剂维拉帕米的影响。结论 DAL在Caco-2细胞模型中的吸收主要是靠浓度扩散的被动转运。     

药理实验中Caco-2细胞模型建立的评价指标

目的:建立Caco-2细胞模型并对该模型进行评价。方法:通过显微镜观察细胞形态学特点,测定跨上皮细胞膜电阻,碱性磷酸酶活性和标志物普萘洛尔的转运特性等指标对Caco-2细胞模型进行评价。结果:各项指标的测定值与文献相符。本实验建立的Caco-2细胞模型的完整性、紧密性、通透性以及碱性磷酸酶活性较好。结论:建立的Caco-2细胞模型符合各项指标的要求,可用于研究口服药物转运的吸收机制。     

补骨脂素在Caco-2细胞模型中的吸收特性研究

 目的 研究补骨脂素在Caco-2细胞模型中的吸收特性,为设计合理的给药方式提供依据。方法 利用MTT实验筛选出 补骨脂素在Caco-2细胞中的安全浓度,然后用Caco-2细胞单层模型研究补骨脂素的双向转运,采用高效液相色谱法检测药物 浓度,计算其表观渗透系数,考察时间、药物浓度对补骨脂素吸收的影响。结果 补骨脂素在Caco-2细胞模型中的转运中对 应时间点表观渗透系数值(P_app)A→B约等于B→A,随时间增加P_app逐渐下降,而在所测浓度范围内P_app值基本保持恒定。 结论 补骨脂素在Caco-2细胞模型中的吸收机制主要是被动转运。     

Caco-2细胞模型的建立及其在中药吸收研究中的应用探讨

目的建立Caco-2细胞模型并探讨其在中药吸收研究中的应用。方法通过显微镜观察细胞形态学特点、测定跨细胞膜电阻和荧光黄通透量等指标,对Caco-2细胞模型进行评价。结果各项指标的测定值符合要求,本实验建立的Caco-2细胞模型的完整性、紧密性和通透性良好。结论建立的Caco-2细胞模型可用于研究中药化学成分转运的吸收机制;高灵敏度分析仪器可以促进Caco-2细胞模型在中药化学成分吸收研究中最大限度的应用;通过两个或多个中药化学成分相互作用的研究,可以阐明中药配伍和中药复方应用的科学性。     

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??OBJECTIVE To investigate the intestinal absorption characters of mosapride citrate(MC) and its tablets. METHODS The Caco-2 cell monolayer was cultured and the in situ single-pass intestinal perfusion(SPIP) in rat model was created for studying the drug absorption properties, using phenol red method to revise the perfusate volume, a HPLC method was developed to simultaneously detect the phenol red and MC, the absorptive coefficient of P_app and P_eff was calculated. RESULTS MC was absorbed by the whole intestine segments in rats, mainly at upper small intestine. The tablets showed high permeability and good intestinal absorption in Caco-2 cells and SPIP in rats. CONCLUSION In the Caco-2 cells and rats SPIP models, the tablets are prepared showed good consistency with the branded drug.