内毒素／肿瘤坏死因子在肝细胞损害中的作用

对Ｗｉｓｔａｒ大鼠体外肝细胞进行了内毒素（ＬＰＳ）及其介质肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）等的肝细胞损害机理研究，主要发现是：ＬＰＳ，ＴＮＦα，白细胞介素－１（ＩＬ－１），ＩＬ－６等加入后肝细胞ＬＤＨ漏出及噻唑蓝染色（ＭＴＴ）均无显著变化，仅在肝细胞－Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞混合培养组用于加ＬｐＳ，ＬＰＳ／ＴＮＦα后有所变化，经半乳糖胺（ＧａｌＮ）／ＬＰＳ体内作用后分离的Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞与正常肝细胞进行混合培养     

重视肝细胞生长因子的研究

肝细胞生长因子的研究是近年研究的热点。现将国际上有关研究近况简介如下，希望能引起国内学者的重视。一、ＨＧＦ与其他因子　目前将能促进肝细胞生长的因于分成两类，一类是非特异性肝细胞生长刺激因子，包括表皮生长因子（ＨＧＦ）、胰高糖素－胰岛素（Ｇ－Ｉ）、类胰岛素生长因子（ＩＧＦ－Ⅰ、Ⅱ）、血小板源性生长因子，（ＰＤＧＦ）、前列腺素（ＰＧＥ）、雌激素及纤维连接蛋白（Ｆｎ）等；另一类是特异性肝细胞生长刺激物质（ＨＳＳ）及新近发现的肝再生增强因子（ＡＬＲ）。然而，最近研究表明，ＨＧＦ并非特异性因子；其他两种因…     

内毒素／肿瘤坏死因子所致肝细胞损害机制的体外研究

为了解内毒素（ＬＰＳ）／肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）所致肝细胞损害的机制，以乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）及噻唑蓝染色（ＭＴＴ）为细胞毒性指标，利用Ｗｉｓｔａｒ大鼠肝细胞进行了ＬＰＳ及其介质ＴＮＦ等的肝细胞损害机制研究。结果发现：ＬＰＳ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－１、ＩＬ－６等对肝细胞ＬＤＨ漏出及ＭＴＴ无显著影响（Ｐ＞０．０５），仅在ＬＰＳ、ＬＰＳ／ＴＮＦ－α加入肝细胞－Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞混合培养组后有所变化；经ＧａｌＮ／ＬＰＳ体内作用后分离的Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞与正常肝细胞混合培养，加入ＬＰＳ、ＴＮＦ及ＬＰＳ／ＴＮＦ－α均可致ＬＤＨ漏出显著增高（Ｐ＜０．０ｌ），多粘菌素Ｂ及抗－ＴＮＦ能分别完全和部分阻断此效应；经ＬＰＳ或ＴＮＦ－α体内作用后抽取的大鼠血清，加入培养肝细胞可致ＬＤＨ漏出显著增高（Ｐ＜０．０１）与ＭＴＴ显著降低（Ｐ＜０．０５），经５６℃灭活后此细胞毒性作用完全消失。上述结果提示，ＬＰＳ及其介质ＴＮＦ无肝细胞直接毒性作用，而经其活化的Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞可能引起一系列瀑布效应，导致肝细胞损害。     

肝细胞生长因子与肝纤维化

肝细胞生长因子（ＨＧＦ）是肝细胞的强有力的增殖因子，１９８９年两个研究小组几乎同时克隆出了ＨＧＦｃＤＮＡ。以后发现ＨＧＦ的作用并不限于促进肝细胞的再生，还可以抑制肝细胞的损害，改善脂肪肝，甚至还有阻止肝纤维化的作用。因此，ＨＧＦ有望作为难治性慢性肝炎和肝硬化的治疗药物。本文介绍近年来迅速开展的有关ＨＧＦ抑制肝纤维化的分子细胞学方面的研究，并以此推测ＨＧＦ的作用机制。一、ＥＣＭ与星状细胞１９６０年在研究肝纤维化的病理组织学时，发现胶原是细胞外基质（ＥＣＭ）的主要成分，主要沉积于肝细胞与肝窦的间隙即…     

肿瘤坏死因子-α诱导肝细胞凋亡在暴发性肝衰竭中的作用

目的 研究肿瘤坏死因子－α（ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ－α,ＴＮＦ－α）诱导肝细胞凋亡细胞凋亡在暴发性肝衰竭中的作用机制。方法 分别注射脂多糖（ｌｉｐｏｐ ｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ,ＬＰＳ）和ＴＮＦ－α于Ｄ－氨基半乳糖（Ｄ－ｇａｌａｃｔｏｓａｍｉｎｅ,ＧａｌＮ）致敏的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠造成暴发性肝衰竭模型,用脱氧核糖核酸转移酶介导的缺口原位末端标记（ｉｎ ｓｉｔｅ ｅｎｄ ｌａｂｅ     

肝细胞生长因子与肝脏胆道疾病

肝细胞生长因子（Ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ，ＨＧＦ）是近年研究的热点，目前认为ＨＧＦ可广泛用于呼吸系统、泌尿系统、消化系统。骨骼系统及神经系统疾病，本文就ＨＧＦ在肝脏胆道疾病方面的研究最新进展作一综述。１ＨＧＦ的简介 肝细胞生长因子最先是由１９８４年日本Ｎａｋａ－ｍｕｒａ和１９８５年美国Ｍｉｃｈａｌｏｐｏｕｌｏｓ分别报道的，其分子量为 ８２ ０００，是由 ７２８个氨基酸组成的多肽，为一异二聚体，由轻链和重链组成，ＨＧＦ受体由原癌基因ｃ－Ｍｅｔ编码，血清ＨＧＦ来源是多源性的，主要是…     

肝细胞生长因子的生理活性

肝细胞生长因子（ＨＧ）具有刺激肝细胞ＤＮＡ台成,促进肝细胞再生的作用,近年对此研究又有新的进展。一、ＨＧＦ的活性（一）ＨＧＦ活性种类１．促进细胞增殖：对多种脏器的多种类型细胞具有促进增殖的作用。对肝脏而言,能促进肝细胞、胆管上皮细胞及贮脂细胞的增殖。２．促进细胞游走和分散：推测这与肿瘤细胞的转移及非肿瘤细胞的器官形成有关。３．器官形成：这种作用是通过Ｆ肌动蛋白丝、微管而起作用的。４．细胞浸润：在体外能促进肿瘤细胞向胶原凝胶浸润。５．血管新生：能促进小鼠皮下组织和大鼠角膜血管新生。６．促进细胞分化…     

病毒性肝炎患者血清HGF和TGF—β1水平的临床意义

目的：探讨血清肝细胞生长因子（ｓＨＧＦ）和转化生长因子－β＿１（ＴＧＦ－β１）水平在病毒性肝炎患者中的临床意义。方法：选１３９例病毒性肝炎患者，以双抗体夹心ＥＬＩＳＡ检测ｓＨＧＦ，以改良ＭＶ１ＬＵ细胞生长抑制ＭＴＴ法检测ＴＧＦ－β＿１活性，同时检测其肝功能、肝纤维化、甲胎蛋白等指标。结果：各型病毒性肝炎患者ｓＨＧＦ水平及ＴＧＦ－β＿１活性均明显高于正常人水平（Ｐ值均＜０．０１）。ＴＧＦ－β１活性增高以肝硬化和重症肝炎最为显著（分别为９．４４±２．１７ｎｇ／ｍｌ和８．４２±２．５４ｎｇ／ｍｌ）。ｓＨＧＦ水平与ＴＧＦ－β＿１活性相关（Ｐ值＜０．０１）。结论：ｓＨＧＦ水平能反映患者肝细胞损伤及肝功能障碍程度，并与肝纤维化程度也可能有关。     

重型乙型肝炎肝组织Fas/Fas配体表达与肝细胞凋亡的研究

近年证明，肝细胞凋亡参与乙型和丙型肝炎的发病机制，介导肝细胞凋亡的效应细胞主要是细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ），引发凋亡的途径主要是穿孔素／颗粒酶Ｂ、Ｆａｓ／Ｆａｓ配体（ＦａｓＬ）和肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）受体／ＴＮＦα系统［１］；但肝细胞凋亡在重型肝炎病变中的状况研究较少。本研究旨在探讨Ｆａｓ／ＦａｓＬ介导肝细胞凋亡在重型乙型肝炎发病机制中的作用。一、资料与方法研究对象为我科近年收治的病人，试验组为重型乙型肝炎病人２４例，男２１例，女３例，年龄２１～５５岁；对照组为慢性乙型肝炎病人５５例，男４…     

影响人类Leptin的因素

综述了影响人类Ｌｅｐｔｉｎ浓度的因素，包括细胞因子如白介素（ＩＬ）－１α、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）α、胰岛素样生长因子（ＩＧＦ）－１，激素如糖皮质激素、胰岛素、性激素以及体脂等     

肝脏病中CD95介导的细胞凋亡

一、ＣＤ９５业已证明,ＣＤ９５（Ｆａｓ／ＡＰＯ－１,ＣＤ９５受体）通过与其自然配体ＣＤ９５Ｌ或可溶性ＣＤ９５Ｌ或特异性活性抗体结合而激发细胞凋亡。与肿瘤坏死因子受体（ＴＮＦ－Ｒ１）、ＴＮＦ－Ｒ２、低亲和性神经生长因子（ＮＧＦ）受体、ＣＤ４０和ＣＤ３０等细胞外结构域中存在２～５个半胱氨酸而统归于ＴＮＦ／ＮＧＦ受体超家族。ＣＤ９５还与ＴＮＦ－Ｒ１,肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（ＴＲＡＩＬ）－Ｒ１,ＴＲＡＩＬ－Ｒ２和死亡受体３（ＤＲ３）在胞内有一段同源区域而被命名为“死亡区域”。ＣＤ９５凋亡路径是通过…     

肿瘤坏死因子—α诱导体外培养大鼠肝细胞凋亡的作用

目的 了解肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）对体外培养大鼠肝细胞凋亡的作用。方法 在半乳糖胺（ＧａＩＮ）或放线菌素Ｄ（ＡｃｔＤ）致敏情况下，加入ＴＮＦ－α，通过光镜、电镜及ＤＮＡ电泳等方法，观察ＴＮＦ－α对体外培养肝细胞凋亡的作用。结果 在大鼠注射ＧａｌＮ后分离肝细胞加入ＴＮＦ－α，ＡＬＴ上升，电镜下可见细胞坏死及凋亡；给正常鼠肝细胞ＡｃｔＤ加入ＴＮＦ－α，光镜下出现典型凋亡细胞，ＤＮＡ电泳出现凋亡的     

肝细胞生长因子及其受体c-met原癌基因在人肝细胞癌中的表达及意义

近年，随着对肿瘤转移机制的深入研究，发现一些细胞因子参与并调控了肿瘤细胞的运动［１］。我们采用半定量逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）技术研究肝细胞生长因子（ＨＧＦ）及其受体ｃｍｅｔ原癌基因在肝细胞癌中的表达变化规律，以探讨ＨＧＦ及其受体系统与肝...     

促肝细胞生长素,IFN及IL—2对成纤维细胞增殖和分泌作用

本文探讨了促肝细胞生长素（ＰＨＧＦ）、重组干扰素ａ－２ｂ（ＩＦＮ）及白细胞介素２（ＩＬ－２）对体外培养成纤维细胞增殖的作用。结果表明，ＩＦＮ和ＩＬ－２可促进细胞的增殖和核分裂，发挥丝裂原作用。ＰＨＧＦ则抑制细胞增殖和核分型，线粒体和粗面内质网变性，其培养上清羟脯氨酸（ＨＹＰ）水平降低。提示ＰＨ ＧＦ通过抑制成纤维细胞增殖和细胞产生ＨＹＰ的分泌作用，而发挥抗纤维化作用。     

人参皂甙通过GATA转录因子刺激巨核系祖细胞增殖

目的：了解人参皂甙（ＧＳ）对巨核系祖细胞（ＣＦＵ－Ｍｅｇ）的刺激增殖作用，比较ＧＳ与生长因子ＴＰＯ、ＩＬ－３对ＧＡＴＡ转录调控蛋白的诱导作用。方法：正常人和ＩＴＰ患者骨髓ＣＦＵ－Ｍｅｇ培养和ＧＳ刺激试验、电泳带移动阻滞试验（ＥＭＳＡ）、抗体胶移动试验（Ｓｕｐｅｒｓｈｉｆｔ ａｓｓａｙ）和蛋白免疫印迹法（Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ）。结果：ＧＳ刺激正常ＣＦＵ－Ｍｅｇ增殖，呈剂量依赖的方式，血小板减少性紫癜（ＩＴＰ）患者的ＣＦＵ－Ｍｅｇ也对ＧＳ敏感。ＧＳ、ＴＰＯ和ＩＬ－３均能诱导生长因子依赖ＭＯ７ｅ细胞核内ＧＡＴＡ蛋白与ＤＮＡ结合的活性及使ＧＡＴＡ－２蛋白含量增加。ＧＳ＋ＴＰＯ或ＧＳ＋ＩＬ－３可协同地诱导ＧＡＴＡ蛋白活性进一步增高。结论：ＧＳ能够通过类生长因子和增强生长因子作用而刺激ＣＦＵ－Ｍｅｇ增殖，ＧＡＴＡ族转录因子，主要是ＧＡＴＡ－２参与造血细胞对ＧＳ反应的信号传递途径。     

影响人类Leptin的因素

综述了影响人类Ｌｅｐｔｉｎ浓度的因素,包括细胞因子如白介素（ＩＬ）－１α、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）α、胰岛素样生长因子（ＩＧＦ）－Ⅰ,激素如糖皮质激素、胰岛素、性激素以及体脂等。     

肝细胞移植临床前研究：大鼠肝细胞分离,培养和逆转录病毒转导

目的建立完善的肝细胞培养系统，研究逆转录病毒载体转移并表达于大鼠原代肝细胞。方法采用表皮生长因子（ＥＧＦ）刺激大鼠原代肝细胞增殖，以表达β－半乳糖苷酶的双顺反子逆转录病毒载体（ｐＧＣＥＮ／β－ｇａｌ）感染肝细胞。Ｘ－ｇａｌ原位染色方法检测肝细胞内ＬａｃＺ的表达，采用ＰＣＲ方法扩增ＮｅｏＲ基因，从ＤＮＡ水平证实逆转录病毒载体整合入肝细胞。结果ＥＧＦ在体外可刺激肝细胞增殖并维持肝细胞功能，肝细胞表达β－半乳糖苷酶基因，肝细胞中可扩增出ＮｅｏＲ基因片断。结论双顺反子逆转录病毒载体可有效介导β－ｇａｌ和ＮｅｏＲ基因表达于大鼠肝细胞，提示可用于标记原代大鼠肝细胞，有利于研究肝细胞移植后移植之肝细胞在体内的寿命、分布及功能。     

肝细胞生长因子基因及其表达

肝细胞生长因子（ＨＧＦ）不仅对肝细胞有生长刺激作用，是最强的促肝实质细胞增殖的生长因子，而且还具有其它各种生理功能，因而引起了众多学者的关注，把ＨＧＦ作为肝病学分支中的生长因子进行研究。本文就ＨＧＦ的基因及其表达作一介绍。一、ＨＧＦ基因结构及分布ＨＧＦ基因全长约７０ｋｂ，有１８个外显子和１７个内含子，位于人第７染色体长臂７ｑ２１．１位置。从人类ＨＧＦ基因转录的ｍＲＮＡ有４种：６．３ｋｂ、３．１ｋｂ、２、３ｋｂ和１．５ｋｂ。６．３ｋｂ和３．１ｋｂ的基因序列是一样的，只是３＇非编码区的ＤＮＡ长短不一…     

肝癌癌前病变相关癌基因及抑癌基因研究进展

原发性肝癌的早期诊断与治疗,仍是亟待解决的难题之一,肝癌癌前病变的深入研究在肝癌的早期防治方面有重要意义。一般认为在慢性肝病中出现的肝细胞不典型增生、腺瘤样增生、肝细胞再生结节、肝小多角细胞增生、肝细胞小管状化生、卵圆细胞增生和旱獭中的变异肝细胞灶,与肝细胞癌变的演化过程关系密切,因此,被认为属于肝癌癌前病变的范畴。肝癌的发生发展涉及多个癌基因和抑癌基因的参与,目前发现至少有９种癌基因及相关基因（Ｎ－ｒａｓ、Ｃ－ｍｙｃ、Ｃ－ｅｔｓ－２、Ｐ５３、Ｃ－ｆｍｓ、ＩＧＦ－Ⅱ、ＩＧＦ－ⅡＲ、ＴＧＦ－α、Ｒ…     

IL-1β对离体培养的醋氨酚损伤的小鼠肝细胞的保护作用及其机制的初步探讨

ＩＬ－１β对醋氨酚（ＡＡＰ）引起小鼠在体肝脏的损伤具有保护作用,本工作旨在观察ＩＬ－１β抗肝损伤效应是直接作用于肝细胞发挥的还是通过其它途径间接发挥的,探讨ＩＬ－１β抗肝损伤作用的传递机制。方法向无血清培养２４小时的原代肝细胞加人２０ｍＭｏｌ／Ｌ的ＡＡＰ,在加醋氨酚前６０ｍｉｎ和ｓｏｗｉｎ,向不同组分别加人ＩＬ－１β和／或Ｌ－ＮＡＭＥ（Ｎ－ｎｉｔｒｏ－Ｌ－ａｒｇｉｎｉｎｅｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒ）。加ＡＡＰ后继续培养一段时间,测培养液中ＡＬＴ和ＡＳＴ的活性及肝细胞内ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ的含量。结果ＩＬ－１β可完全抑制醋氨酚引起的肝细胞培养液中ＡＬＴ、ＡＳＴ的升高,不能逆转醋氨酚引起的肝细胞内ｃＡＭＰ含量的降低,但与正常组相比,ＩＬ－１β可提高正常肝细胞内ＣＧＭＰ的含量（Ｐ＜０．０５）和醋氨酚损伤组的肝细胞内ｃＧＭＰ的含量（Ｐ＜０．０１）。加人ＮＯ合酶抑制剂Ｌ－ＮＡＭＥ可抑制ＩＬ－１肝细胞保护作用。结论ＩＬ－１β对肝细胞有直接的保护作用,其可能是一种有效的肝保护剂。这种保护可能与ＩＬ－１β引起的肝细胞内ＮＯ、ｃＧＭＰ改变有关。