“瘤苗”细胞因子基因转导人肝癌和胃癌细胞的研究

国际上获准进行临床实验的人类疾病基因治疗方案已达596个,我国通过国家批准的基因治疗方案仅5项,3项是肿瘤治疗方案,绝大部分临床试验方案只处在Ⅰ期试验和Ⅱ期试验阶段,其中处在工期试验占66.3％,处在Ⅰ/Ⅱ期阶段的有21％,处在Ⅱ阶段11.4％,进入Ⅱ/Ⅲ期和Ⅳ期的试验方     

IL-2基因转导小鼠肝癌细胞的实验研究

用重组人白细胞介素-2(IL-2)含信号肽cDNA的缺陷型逆转录病毒,将IL-2基因转导入小鼠H_(22)肝癌细胞株,经PCR和RT-PCR检测证实了转导后的细胞DNA内确有NeoR和IL-2基因的存在的表达。分别用光镜和电镜观察了经IL-2基因转录的H_(22)细胞体外形态,MTT法检测细胞体外增殖能力以及皮下接种H_(22)-IL-2细胞后观察肿瘤生长能力。结果表明经IL-2基因转导的鼠肝癌细胞体外增殖能力没有明显变化,但体内致瘤性却显著下降,丝裂霉素处理后作为瘤苗接种能抑制其后野生型H_(22)细胞的再次攻击。本研究为制备新型瘤苗打下了基础。     

联合免疫基因与自杀基因治疗肿瘤研究进展

恶性肿瘤已成为威胁人类生命的主要疾病之一。近年来，虽然对于恶性肿瘤的治疗如手术。化疗、放疗和免疫疗法均取得了很大的进展，但对于中晚期、复发性及转移性肿瘤的疗效仍然不尽理想。随着分子生物学及其相关技术的发展，基因治疗已成为当前令人关注的研究领域。美国国立卫生院（NIH）及食品药物管理局（rpA）于1990年9月首次批准严重联合免疫缺陷症（SCI）病孩进行临床治疗至今，国际上约有30O多项临床方案，3000多病人接受临床基因治疗，其中主要为恶性肿瘤。但目前尚无肯定临床疗效的报道。因此科学家们便理性地认识到基因治疗尚…     

原发性胃癌患者HLAⅡ类抗原DNA多态性的初步研究

有关胃癌与宿主的关系,特别是与机体免疫系统中主要组织相容性复合物(MHC)多态性的关系,至今未见有报道。担负机体特异免疫功能的淋巴细胞在识别异己抗原和引起免疫反应的过程均需要MHC基因产物的参加。因此分析胃癌患者MHC基因的多态性是研究胃癌与宿主关系的一个重要内容,有助于了解胃癌的发病机制和分子流行病学。八     

人原发胃癌、裸鼠人胃癌移植瘤及人胃癌细胞株中β-葡萄糖醛酸酶及神经氨酸苷酸活力比较

β-葡萄糖醛酸酶(β-G)主要存在于溶酶体,细胞癌变时溶酶体增生肥大,β-G合成增加,水解蛋白多糖破坏间质,促进癌细胞浸润生长和转移。神经氨酸苷酶(NANase)是糖蛋白、糖脂代谢的重要酶,细胞癌变时,细胞膜糖蛋白、糖脂所结合的寡糖链结构和成份发生改变,NANase活力亦相应发生变化。胃癌患者体液和红细胞膜上β-G及NANase活力变化情况已有报道结果表明上述酶活力与胃癌癌变关系密切,本文对人胃癌组织、人胃癌移植瘤及人胃癌细胞株中酶活力的变化进行探讨。     

实验性肿瘤的联合基因治疗研究

恶性肿瘤基因治疗的临床研究已有10余年,但疗效尚未确定。治疗策略也不下12种,但何种策略为佳尚无定论。目前采用的策略多数为单一基因治疗,鉴于肿瘤的发生可能涉及多种基因及多种因素,发病过程也是多步骤的,该研究探索多种基因及因素的配合进行实验性肿瘤的联合基因治疗研究。首先克隆一系列的治疗基因,构建不同载体及调控原件,然后进行不同基因的联合治疗作用,并与放射治疗相结合,最后还筛选新的肿瘤治疗侯选基因,旨在为临床提供更有效的肿瘤基因治疗策略和方案。     

基因修饰人肝癌和胃癌"瘤苗"及实验性肿瘤联合基因治疗

恶性肿瘤基因治疗的临床研究已有10余年,但疗效尚未确定。治疗策略也不下十余种,但何种策略为佳尚无定论。目前采用的策略多数为单一基因治疗,而肿瘤的发生可能涉及多种基因及多种因素,发病过程也是多步骤的。本研究建立一种细胞因子基因工程人肝癌和胃癌细胞“瘤苗”,用于经手术切除的肝癌或胃癌患者,消灭微小残存癌细胞,     

改进TRAP-PCR检测端粒酶活性对早期胃癌的诊断

目的探索端粒酶活性早期诊断恶性实体瘤的新方法．方法通过胃癌组织的分离和肿瘤细胞系的培养，用改良ＴＲＡＰＰＣＲ方法，来检测其端粒酶的活性．结果胃癌组织及肿瘤细胞系的端粒酶总表达率９３％（２５／２７），其中细胞系ＭＫＮ２８，ＭＫＮ４５，ＨＨＣＬ，ＳＧＣ７９０１及Ｔｃａ８１１３均为阳性表达；胃癌远隔的正常粘膜标本表达率为０％（０／２０）；其中有２００个肿瘤细胞存在便可测得其端粒酶的活性．结论胃癌组织及肿瘤细胞系的端粒酶表达，具有很强的肿瘤特异性和较高的表达率；改进ＴＲＡＰＰＣＲ方法具有提高恶性实体瘤早期诊断的潜在价值     

含I-A~dα和β链cDNA的三顺反子逆转录病毒载体构建及真核表达

为了协同表达MHCII类分子的两个链α和 β ,利用脑心肌炎病毒和脊髓灰质炎病毒的内核糖体进入位点 ,构建了含MHCII类分子α和 β链及选择标记新霉素磷酸转移酶基因的三顺反子逆转录病毒载体。经包装细胞包装成重组逆转录病毒后 ,感染NIH3T3、MM45T Li、COS7细胞 ,经PCR、RT PCR、Southern印迹、Northern印迹及流式细胞术在多水平上证实了α链和 β链的基因表达和MHCII类分子的正确组装。     

含Ⅰ-Adα和β链cDNA的三顺反子逆转录病毒载体构建及真核表达

为了协同表达MHCⅡ类分子的两个链α和β,利用脑心肌炎病毒和脊髓灰质炎病毒的内核糖体进入位点,构建了含MHCⅡ类分子α和β链及选择标记新霉素磷酸转移酶基因的三顺反子逆转录病毒载体.经包装细胞包装成重组逆转录病毒后,感染NIH3T3、MM45T.Li、COS7细胞,经PCR、BT-PCR、Southern印迹、Northern印迹及流式细胞术在多水平上证实了α链和β链的基因表达和MHCⅡ类分子的正确组装.