益肾达络饮对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠丝裂原和应激激活蛋白酶1表达的影响

目的通过分析丝裂原和应激激活蛋白激酶1(MSK1)在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)中的表达情况探讨中药复方益肾达络饮保护小鼠损伤脑组织的机制。方法利用蛋白印迹技术,检测小鼠脑组织中MSK1、CREB的含量。结果脑组织中MSK1表达显示,正常组和中药组、激素组、抑制剂组均有显著性差异(均P<0.01);模型组和抑制剂组有显著性差异(均P<0.01);中药组和激素组、抑制剂组有显著性差异(P<0.01);中药组和模型组、中药加激素组有差异(均P<0.05)。CREB表达显示:中药组CREB的表达与其余各组相比均显著升高(P<0.01);中药组、中药加激素组和激素组的CREB水平依次降低。结论复方益肾达络饮治疗EAE与MSK1升高有关,p38MAPK信号通路下游因子MSK1表达与其底物CREB表达呈相同态势。     

左归丸与右归丸对EAE大鼠APP及GAP-43表达的影响

目的 观察左归丸和右归丸对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠淀粉样前体蛋白(APP)及生长相关蛋白[GAP-43)表达的影响,探讨滋阴与温阳补肾法治疗EAE的可能机制.方法 应用髓鞘碱性蛋白(MBP)68-86免疫诱导Lewis大鼠建立EAE模型.免疫后第7天、第14天、第28天取大鼠脑白质与脊髓,采用Western-blot和实时荧光定量RT-PCR技术检测APP及GAP-43蛋白及mRNA的表达.结果 免疫后第7天,激素和左归丸均能升高EAE大鼠脊髓中APP和脑白质中APP mRNA的过低表达(P<0.05或P<0.01),且在脊髓中二者对APP的调节优于右归丸(P<0.05);第14天,左归丸显著调节脑白质中APP mRNA的过高表达、脊髓中APP mRNA的过低表达(P<0.05或P<0.01),作用优于右归丸(P<0.05).免疫后第7天,激素与左归丸显著上调EAE大鼠脑白质和脊髓中GAP-43水平(P<0.05或P<0.01),在脊髓中二者作用优于右归丸(P<0.01),右归丸显著下调脑白质中GAP-43 mRNA的表达(P<0.05);第14天,激素与左归丸显著抑制脑白质中GAP-43的过高表达(P<0.05);第28天,激素组与左归丸组脑白质中GAP-43水平低于模型组与右归丸组(P<0.01).结论 左右归丸对EAE大鼠脑白质和脊髓中APP和GAP-43蛋白与基因的表达均具有一定调节作用,且左归丸的作用明显优于右归丸.     

ERK1/2在实验性自身免疫性脑脊髓炎发病过程中的组织特异性作用

目的建立实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型,探讨ERK1/2途径在EAE发生发展中的作用。方法以鼠源的MOG35-55多肽为抗原诱导C57BL/6小鼠,通过病程观察、神经功能评分及病理学分析确定EAE模型。取发病前期及发病高峰期小鼠的脊髓及淋巴结,采用免疫印迹的方法,检测P-ERK1/2、ERK1/2、P-MEK1/2及MEK1/2的表达情况。结果 EAE小鼠均有发病,为单相病程,临床符合典型EAE模型表现。EAE小鼠在免疫后(13.6±2.1)d起病,在免疫后(17.0±2.8)d病情发展到高峰,高峰期临床评分为(2.8±1.1)分。无论是发病前还是在发病高峰期,EAE组小鼠淋巴结中的ERK1/2的磷酸化表达均被明显抑制,但MEK1/2磷酸化表达无明显差异。无论是发病前还是在发病高峰期,EAE组小鼠脊髓中的ERK1/2磷酸化表达无明显差异。结论成功建立了MOG35-55多肽为抗原诱导的EAE小鼠模型。ERK1/2的表达在EAE发病过程中存在组织特异性。     

高脂膳食与运动对小鼠脑内cAMP反应元件结合蛋白基因表达的影响

目的通过观察c AMP反应元件结合蛋白(CREB)基因表达探讨高脂膳食与运动对脑老化的影响。方法 70只ICR小鼠按体重随机分为普通对照组、高脂对照组、运动对照组、普通脑老化组、脑老化+高脂组、脑老化+运动组及脑老化+高脂+运动组。造模10 w后,以Morris水迷宫实验检测小鼠的学习记忆能力,RT-PCR检测小鼠大脑CREB基因的表达水平。结果与普通对照组相比,普通脑老化组、脑老化+高脂组、脑老化+高脂+运动组及高脂对照组小鼠脑CREB基因表达水平明显降低(P0.05),运动对照组CREB基因表达水平无明显变化。脑老化+运动组小鼠脑CREB基因表达水平明显高于脑老化组(P0.05)。结论脑老化小鼠CREB基因表达水平降低。高脂膳食下调CREB基因的表达,具有促脑老化效应。运动可以防止脑老化小鼠CREB基因的表达下降,具有抗脑老化效应。     

甲强龙对实验性变态反应性脑脊髓炎小鼠的协同刺激分子CD80和CD86的影响

目的探讨甲强龙对实验性变态反应性脑脊髓炎小鼠的协同刺激分子CD80和CD86的影响。方法实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)模型通过以髓鞘少突胶质细胞糖蛋白多肽35-55(MOG35-55)为抗原诱导。将30只雌性C57BL/6J小鼠随机分为甲强龙组、EAE组和正常组,每组10只。采用蛋白质印迹法检测大脑的CD80和CD86表达水平。结果甲强龙组神经功能缺损症状轻于EAE组,大脑CD80表达水平明显低于EAE组(P0.05),而CD86表达明显高于EAE组(P0.05)。结论甲强龙能改善EAE小鼠的症状,其作用机制之一是抑制CD80表达并上调CD86的表达。     

柴胡对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠炎症的干预作用

目的探讨柴胡对自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠干预作用,为临床应用柴胡治疗多发性硬化(MS)提供依据。方法C57雌性小鼠40只,随机分为空白对照组、EAE模型组、泼尼松组[7.8mg/(kg·d)]和柴胡组[1.95g/(kg·d)],每组10只。EAE模型组、泼尼松组和柴胡组6周龄时用MOG35-55多肽免疫建立EAE模型,造模后第3天灌胃给予蒸馏水或药物至实验结束。自造模当天观察各组小鼠体重、行为学;造模后第16天(发病高峰期)取脊髓组织行HE染色,观察炎性细胞浸润情况;采取尾静脉血,检测与多发性硬化主要相关炎症因子白细胞介素(IL)-17E、γ-干扰素(IFN-γ)、IL-4、IL-21、IL-10、IL-23、IL-12(p70)、IL-17A、IL-17F和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。结果与空白对照组比较,EAE模型组小鼠发病高峰外周血中IL-17E、IFN-γ、IL-17F水平升高(P0.05),IL-4水平降低(P0.05);与EAE模型组比较,发病高峰期泼尼松组外周血中IL-17E、IFN-γ、IL-17F水平降低(P0.05或P0.01),柴胡组IL-17E和IFN-γ水平降低(P0.05或P0.01)。结论柴胡通过抗炎机制减轻EAE小鼠的病情,可作为MS治疗的参考。     

甲强龙对实验性变态反应性脑脊髓炎小鼠的肿瘤坏死因子α和白介素17的影响

目的探讨甲强龙对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)小鼠的肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素17(IL-17)的影响。方法将30只雌性C57BL/6J小鼠随机分为甲强龙组、EAE组和正常组,每组10只。EAE模型通过以髓鞘少突胶质细胞糖蛋白多肽35-55(MOG35-55)为抗原诱导。采用蛋白质印迹法(Western Blot)检测小鼠大脑的TNF-α和IL-17表达水平。结果甲强龙组的临床症状较EAE组改善(P0.05),大脑的TNF-α和IL-17表达水平明显低于EAE组(P0.05)。结论甲强龙能改善EAE小鼠的症状,其作用机制之一是抑制促炎性因子TNF-α和IL-17的表达。     

舒郁颗粒对抑郁模型大鼠海马神经元的保护作用

目的:探讨舒郁颗粒对抑郁模型大鼠海马神经元细胞凋亡的保护作用.方法:将雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、中药组三组.采用慢性不可预见性应激刺激(CUMS)结合孤养方式复制抑郁大鼠模型,通过称重、敞箱实验与糖水偏爱度等检测大鼠行为学改变.应用免疫组化与RT-PCR检测大鼠海马区转录因子环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)及基因的表达水平.结果:与模型组相比,中药组在给药后体质量增加快(P＜0.05 ); 与模型组相比,中药组的水平运动与垂直运动得分和糖水偏爱度均明显升高 (P＜0.05).与正常组相比,模型组大鼠海马区CREB蛋白和mR-NA表达明显下调 (P＜0.01); 与模型组相比,中药组海马区CREB蛋白和mRNA表达明显上调 (P＜0.05).结论:舒郁颗粒抗抑郁的作用机制可能与其促进海马区 CREB蛋白与mRNA的活性和表达,进而减少神经细胞凋亡有关.     

BDNF对哮喘小鼠C7～T5节段脊髓后角p-CREB、CREB表达的上调作用

目的 探讨哮喘发病中脑源性神经营养因子(BDNF)对哮喘小鼠C7～T5节段脊髓后角内cAMP反应元件结合蛋白(p-CREB、CREB)表达的调节作用.方法 BALB/c小鼠30只,按随机数字表法均分为正常对照组、哮喘组、Anti-BDNF抗体组,利用AniRes2005肺功能仪测小鼠气道阻力、免疫荧光方法检测各组小鼠C7 ～T5节段脊髓后角内p-CREB、CREB的表达.结果哮喘组小鼠吸气阻力和呼气阻力明显高于正常组(P＜0.01);与哮喘组相比,Anti-BDNF抗体组吸气阻力和呼气阻力则明显降低;免疫荧光结果显示哮喘组C7～T5节段脊髓后角内p-CREB、CREB阳性产物的平均光密度值(MOD)显著低于正常对照组(P＜0.01);而anfi-BDNF抗体组与哮喘组相比,p-CREB、CREB阳性反应产物的MOD值明显升高(P＜0.01).结论 BDNF能上调哮喘小鼠C7～ T5节段脊髓后角内p-CREB、CREB的表达.     

环磷腺苷效应元件结合蛋白磷酸化在胰岛素样生长因子-1抑制耳蜗毛细胞凋亡中的作用

目的探讨磷酸化环磷腺苷效应元件结合蛋白(P-CREB)对胰岛素样生长因子(IGF)-1抑制小鼠毛细胞凋亡的作用。方法体外培养新生小鼠耳蜗基底膜。实验分为A组:正常对照培养液;B组:庆大霉素(GM)(0.5 mmol/L);C组:GM(0.5 mmol/L)+IGF-1(1 ng/ml);D组:GM(0.5 mmol/L)+IGF-1(10 ng/ml);E组GM(0.5 mmol/L)+IGF-1(50 ng/ml);F组:GM(0.5 mmol/L)+IGF-1(100 ng/ml)。培养24 h后收集细胞及固定。应用TUNEL法观察各组耳蜗毛细胞的凋亡情况。应用Western印迹及RT-PCR法观察P-CREB的表达情况。结果 A组无凋亡细胞。B组检测到凋亡细胞。C组细胞凋亡较B组明显减少。D组凋亡细胞减少最明显(与B组相比,P0.05)。E组及F组凋亡细胞较D组有所增加。P-CREB:Western印迹结果及RT-PCR结果表明:A组及B组P-CREB蛋白及m RNA表达较低。与B组相比,C、D、E及F组P-CREB蛋白及m RNA明显增加,以D组增加最明显。结论 IGF可能通过激活CREB磷酸化抑制毛细胞凋亡。     

高血压降压治疗目标的再认识

根据传统的高血压水平的定义,1993年WHO高血压治疗指南提出血压控制目标为<140/90mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),但是并非所有患者都必须将血压降至同一水平,而应根据患者情况进行个体化治疗。Framingham进行的一项长达10～12年的心血管事件研究发现,第5年后,正常上限血压[收缩压(SBP     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.