雷帕霉素对大鼠内皮祖细胞的影响及恒磁场的拮抗作用

目的 观察恒磁场对雷帕霉素作用下的大鼠内皮祖细胞(EPCs)增殖、凋亡及N0分泌的影响.方法 采 用密度梯度离心法获得雄性SD大鼠的骨髓EPCs,培养6天,随机分为5组:空白对照组、雷帕霉素(1μg/L)组及雷帕霉素 不同强度的恒磁场组(0.1 mT、0.5 mT、1.0 mT恒磁场组).各组按分组条件作用24 h后收集标本,MTT法检测EPCs增殖能力,流式细胞仪检测EPCs凋亡率,硝酸还原酶法检测NO含量.结果 与空白对照组比较,雷帕霉素组抑制EPCs增殖能力0.252±0.006%0.328±0.025,抑制NO分泌(22.8±4.3)μmol/L vs(36.9±5.6)μmol/L,促进EPCs凋亡(11.3±1.2)% vs (4.0±0.5)%,两组比较差异显著(P<0.05); 0.5 mT和1.0 mT恒磁场组EPCs增殖能力分别为0.278±0.008,0.280±0.010、NO(28.0±4.2)μmol/L,(28.7 ±4.4)μmol/L,显著高于雷帕霉素组,EPCs凋亡率(7.5±0.6)%,(7.1±0.6)%),显著低于雷帕霉素组,差 异显著(P<0.05).结论 0.5 mT和1.0 mT恒磁场可拮抗雷帕霉素的作用,促进EPCs的增殖和NO分泌,并抑制EPCs凋亡.     

三角波形低频脉冲磁场对大鼠心肌微血管内皮细胞增殖、迁移和细胞周期的影响

目的: 研究在固定时间和频率下,三角波形的低频脉冲磁场(LF-PMF)对大鼠心肌微血管内皮细胞（CMECs）增殖、迁移以及细胞周期的影响。方法: 实验分为4组（对照组,1.0mT组,1.4mT组,1.8mT组）。对照组不加磁场干预;其余各组分别在频率为15 Hz,磁场强度分别为1.0mT、1.4mT和1.8mT,时间为4 h/d,连续照射3 d的条件下,用三角波形作用离体培养的大鼠CMECs。利用MTT法检测细胞增殖情况,transwell法观察细胞迁移状况,流式细胞仪技术检测细胞周期变化。结果: 1.4mT和1.8mT组磁场促进CMECs增殖的作用差异显著［(0.200±0.043)A值, vs.(0.159±0.037)A值,(0.225±0.042)A值,vs.(0.159±0.037)A值,P<0.05］。迁移能力与对照组相比也有显著提高［(27.20±4.76)个/视野 vs.(22.60±4.77)个/视野,(33.80±3.19)个/视野 vs.(22.60±4.77)个/视野,P<0.05］。CMECs在细胞周期中的分布发生改变,DNA合成期(S期)和合成后期(G2期)细胞的比例增加。1.0mT组LF-PMF胞对细胞增殖、迁移以及细胞周期的影响均不明显。结论: 低频脉冲磁场磁场对CMECs的生物学作用与磁场的强度相关,1.4mT和1.8mT组LF-PMF促进细胞增殖、迁移及使其DNA合成的能力提高。     

低频脉冲磁场对大鼠骨髓源内皮祖细胞增殖和体外血管化的影响

目的观察不同强度低频脉冲磁场对体外培养大鼠骨髓源肉皮祖细胞增殖、细胞周期、迁移和成血管能力的影响方法密度梯度离心法获得大鼠骨髓源内皮祖细胞,随机分为4组：对照组,1．0mT组,1．4mT组和1．8mT组除对照组外．其余各组用顿率为15Hz不同强度的厅波脉冲磁场刺激大鼠骨髓源内皮租细胞,2h／d,持续刺激5d,曝磁5d后,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色（MTT）法俭测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期,划痕试验检测细胞迁移能力,管状结构形成试验和3维培养检测细胞成血管能力。结果1．0mT组和1．4mT组磁场促进内皮祖细胞增殖,使其细胞周期分布发牛改变,DNA合成期（S期）和合成后期（G2期）细胞比例增加,1．8mT组磁场也能促进内皮祖细胞增殖．但对细胞周期分布影响不明显。体外培养内皮租细胞迁移能力差,各强度磁场对其迁移能力也无明显影响。不同强度磁场均能够提高内皮祖细胞成血管能力,与对照组相比差异均有统计学意义[（14．0±1．6）比（11．0±1．6）;（19．2±1．9）比（11．0±1．6）：（15．4±1．1）比（11．0±1．6）,P均〈0．05]1．0mT和1．4mT磁场作用强于1．8mT磁场：结论磁场的生物学作用和磁场强度相关,1．0mT和1．4mT低频脉冲磁场促进大鼠骨髓源内皮祖细胞增殖和DNA合成并提高其成血管能力。     

银杏黄酮甙对人巨细胞病毒转染血管内皮细胞的影响

目的观察银杏黄酮甙对人巨细胞病毒（HCMV）感染后血管内皮细胞（VEC）增殖、凋亡及NO分泌量的影响,探讨银杏黄酮对VEC的保护作用。方法应用MTT比色法检测细胞的增殖、流式细胞技术观察细胞凋亡以及硝酸还原酶法检测细胞的NO分泌量。实验分为4组,分别为正常对照组,HCMV感染组,银杏黄酮甙组,HCMV感染＋银杏黄酮甙组。结果①HCMV促进人脐静脉内皮细胞（HUVEC304）的增殖（P〈0.05）、抑制HUVEC304的凋亡（P〈0.01）和降低HUVEC304的NO分泌水平（P〈0.01）。②银杏黄酮甙可以促进HUVEC304的增殖并呈剂量依赖性（P〈0.05）,增加了其凋亡水平（P〈0.01）,并升高其NO分泌水平（P〈0.01）。③银杏黄酮甙可以抑制HCMV感染的HUVEC304的增殖作用（P〉0.05）,促进其凋亡（P〈0.05）并增加其NO的分泌水平（P〈0.01）。结论银杏黄酮甙对HCMV感染的HUVEC304具有明显的保护作用,其作用机制可能是抑制HUVEC304增殖并促进NO分泌。     

内皮素-1对大鼠骨髓内皮前体细胞增殖、细胞周期及NO分泌功能的影响

目的探讨内皮素-1（ET-1）对大鼠骨髓内皮前体细胞（EPC）增殖、细胞周期及一氧化氮（NO）分泌功能的影响。方法采用密度梯度离心法获取大鼠骨髓单核细胞,在M199培养液中培养扩增EPC并进行鉴定。不同浓度ET-1（A组:0mol/L、B组:10-9mol/L、C组:10-8mol/L、D组:10-7mol/L、E组:10-6mol/L）作用于EPC,MTT法检测ET-1对EPC增殖能力的影响,流式细胞仪检测ET-1对EPC细胞周期的影响,硝酸还原酶法检测细胞培养液中NO含量的变化,观察ET-1对EPC的NO分泌功能的影响。结果与对照组（A组,0.405±0.017）相比,ET-1浓度C组（0.434±0.016）、D组（0.463±0.016）、E组（0.473±0.015）EPC增殖能力显著增高（n=8,P<0.01）。EPC的G0/G1期细胞百分数C组（57.28±3.65）%、D组（44.99±3.19）%、E组（40.29±3.74）%较对照组（70.55±1.37）%明显降低（n=5,P<0.01）,EPC的S期细胞百分数C组（26.75±2.87）%、D组（32.79±2.41）%、E组（35.74±2.94）%较对照组（20.04±1.64）%明显升高（n=5,P<0.01）,EPC的G2/M期细胞百分数C组（15.96±1.71）%、D组（22.22±2.22）%、E组（23.64±2.86）%较对照组（9.41±0.81）%明显升高（n=5,P<0.01）。EPC培养液中NO含量（μmol/L）ET-1浓度C组（11.70±1.80）、D组（15.69±1.86）、E组（16.89±1.55）较对照组（7.45±2.41）明显增加（n=8,P<0.01）。B组检测结果与对照组相比,各项指标均无统计学差异。结论ET-1能够促进EPC的增殖,促进细胞向S期和G2期的转化,并提高细胞NO分泌功能,可能参与缺血性疾病的血管再生过程。     

低频脉冲磁场对大鼠骨髓源内皮祖细胞增殖和体外血管化的影响

目的 观察不同强度低频脉冲磁场对体外培养大鼠骨髓源内皮祖细胞增殖、细胞周期、迁移和成血管能力的影响.方法 密度梯度离心法获得大鼠骨髓源内皮祖细胞,随机分为4组:对照组,1.0mT组,1.4mT组和1.8 mT组.除时照组外.其余各组用频率为15 Hz不同强度的方波脉冲磁场刺激大鼠骨髓源内皮祖细胞,2 h/d,持续刺激5 d.曝磁5 d后,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期,划痕试验检测细胞迁移能力,管状结构形成试验和3维培养检测细胞成血管能力.结果 1.0mT组和1.4mT组磁场促进内皮祖细胞增殖,使其细胞周期分布发生改变,DNA合成期(S期)和合成后期(G2期)细胞比例增加,1.8 mT组磁场也能促进内皮祖细胞增殖,但对细胞周期分布影响不明显.体外培养内皮祖细胞迁移能力差,各强度磁场对其迁移能力也无明显影响.不同强度磁场均能够提高内皮祖细胞成血管能力,与对照组相比差异均有统计学意义[(14.0±1.6)比(11.0±1.6); (19.2±1.9)比(11.0±1.6); (15.4±1.1)比(11.0±1.6),P均<0.05].1.0mT和1.4 mT磁场作用强于1.8mT磁场.结论 磁场的生物学作用和磁场强度相关,1.0 mT和1.4 mT低频脉冲磁场促进大鼠骨髓源内皮祖细胞增殖和DNA合成并提高其成血管能力.     

内皮祖细胞分泌SDF-1及其抗内皮祖细胞凋亡作用

目的探讨内皮祖细胞（EPC）能否分泌基质细胞衍生因子-1（SDF-1）,及SDF-1能否抑制紫杉醇、AMD3100（特异性阻断SDF-1与其受体CXCR4结合）等诱导的EPC凋亡。方法取不同时间段的EPC培养液上清,采用ELISA检测上清中SDF-1a浓度。用不同浓度的紫杉醇、AMD3100及无血清培养诱导EPC凋亡;或在上述基础上加不同浓度的SDF-1a处理;48 h后采用TUNEL法和流式细胞仪检测各组EPC凋亡率。结果EPC培养液上清中SDF-1a浓度显著高于对照组（P<0.01）。紫杉醇、AMD3100和无血清培养一样,均可显著增高EPC凋亡率（P<0.01）;加入外源性SDF-1a可显著降低紫杉醇组、无血清培养组EPC凋亡率（P<0.01）,却不能降低AMD3100组EPC凋亡率。结论体外培养的EPC可分泌SDF-1a,采用AMD3100阻断其作用可诱导EPC凋亡;SDF-1a可对抗紫杉醇和无血清培养诱导的EPC凋亡,但对AMD3100诱导的凋亡无效。     

脉冲电磁场对脂肪干细胞成骨分化的影响

目的 观察脉冲电磁场对大鼠脂肪干细胞（ADSCs）成骨能力的影响.方法 获取大鼠脂肪干细胞,分为两组,一组接受频率12 Hz、场强1.1 mT的脉冲电磁场刺激,8 h/d,共2周,另一组为空白对照组,不接受任何脉冲电磁场处理.检测骨钙素、Ⅰ型胶原表达量、碱性磷酸酶（ALP）活性,通过上述实验评价成骨情况.通过MTr实验检测细胞增殖情况.结果 脉冲电磁场作用后骨钙素、Ⅰ型胶原表达量及ALP活性较对照组明显增高（P＜0.01）.细胞增殖能力在第2周时降低,与分化功能增强相符.结论 ADSCs经脉冲电磁场体外刺激后,细胞向成骨方向分化,在骨组织工程中具有良好的应用前景.     

罗格列酮对高糖环境下内皮祖细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察高糖环境对内皮祖细胞(EPC)的损伤作用及罗格列酮对其的保护作用.方法 将健康志愿者骨髓单个核细胞接种于包被有人纤维黏连蛋白的培养板中,培养7天后获得正分化的EPC.贴壁细胞随机分为对照组、高糖组和高糖加罗格列酮组,分别于24h、96h后MTT测定3组细胞增殖功能,PI单染法检测其凋亡率.结果 高糖作用24h促进EPC的增殖能力,与对照组比,其OD值更大(P<0.05),且凋亡率没有明显增加(P>0.05).96h后,高糖明显抑制其增殖能力,OD值低于对照组(P<0.05),且凋亡率明显增加(P<0.01).罗格列酮干预后OD值比高糖组明显增加(P<0.05),且凋亡率明显降低(P<0.01).结论 长期高糖作用可抑制EPC增殖功能,使凋亡率增加;罗格列酮可能保护高糖环境下EPC的增殖能力并降低凋亡率.     

高血压亚急症患者血管功能异常及与循环内皮祖细胞功能变化的关系

目的探讨高血压亚急症患者循环内皮祖细胞(EPC)功能的改变以及一氧化氮(NO)、肱动脉血流介导的内皮依赖性舒张功能(FMD)与EPC功能的关系。方法招募高血压亚急症患者13例,血压正常者20例(对照组),取外周血提取原代EPC培养后以Transwell小室和CCK-8法评估EPC的迁移、黏附和增殖能力,通过检测FMD、血浆和EPC分泌的NO、粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素6(IL-6)水平评估血管内皮功能。结果高血压亚急症组与对照组相比,EPC细胞功能(包括迁移、增殖和黏附能力)明显下降(P0.05);血浆及EPC分泌的NO水平有明显差异(P0.05);血浆及EPC分泌NO水平均与EPC迁移、黏附和增殖能力呈明显的线性关系(P0.05);FMD与EPC迁移、黏附和增殖能力具有明显相关性(P0.05)。两组血浆和EPC分泌的GM-CSF、VEGF、IL-6水平均无明显差异(P0.05)。结论相对血压正常者,高血压亚急症人群的EPC功能(迁移、黏附和增殖)明显下降,且NO水平和FMD均与EPC功能正相关。     

高血压降压治疗目标的再认识

根据传统的高血压水平的定义,1993年WHO高血压治疗指南提出血压控制目标为<140/90mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),但是并非所有患者都必须将血压降至同一水平,而应根据患者情况进行个体化治疗。Framingham进行的一项长达10～12年的心血管事件研究发现,第5年后,正常上限血压[收缩压(SBP     

Inhibition of intimal thickening of the carotid artery of rabbits and of outgrowth of explants of aorta by probucol.

The effect of administration of probucol in preventing intimal thickening of rabbit carotid artery after balloon catheter injury and the mechanism of action of the drug were studied. Groups of 6 male New Zealand-White rabbits were given normal diet (Group I), high cholesterol diet (Group II) or high cholesterol diet plus probucol (Group III) for 4 weeks. Balloon catheter injury was made in week 2 and animals were killed in week 4. No significant differences in the total cholesterol levels in Groups II and III were found in week 4. The medians of areas of the intimal layer in cross-sections of the carotid arteries of Groups I, II and III were 0.237, 0.475 and 0.309 mm2, respectively. Thus high-cholesterol diet increased the thickness of the intimal layer and probucol reduced its effect. There were no significant differences in the areas of the medial layers in these 3 groups. For the examination of the mechanism of the effect of probucol, rabbits were given chow containing 0.5% cholesterol with and without 0.5% probucol (7 rabbits each) and then the numbers of explants from their aortas showing outgrowth were compared. The plasma total cholesterol levels of these two groups were the same. The probucol concentrations in the plasma and aorta of the former group were 18.6 +/- 13.2 micrograms/ml and 7.3 +/- 5.4 micrograms/g wet tissue, respectively. The number of explants showing outgrowth on day 14 was suppressed by 34% in the probucol-treated group.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)