PM2.5通过上调颗粒酶B促进IL-18表达加重肺部炎症

目的颗粒酶B促进组织炎症的作用日益引起重视,但其在PM_2.5导致的肺部炎症中是否发挥作用还不清楚,本文对在PM_2.5导致的肺部炎症中颗粒酶B的作用进行了研究。 方法第一步构建经气管滴注PM_2.5混悬液诱导大鼠肺部炎症的动物模型,实验分组为PBS组、PM_2.5(2 mg/kg)组、PM_2.5(6 mg/kg)组、PM_2.5(18 mg/kg)组。通过设置PM_2.5滴注剂量梯度,检测不同PM_2.5暴露剂量下大鼠肺组织颗粒酶B表达、病理和炎症评分,以探讨颗粒酶B表达水平与肺部炎症严重程度间有无相关性。第二步通过阻断颗粒酶B,探究在PM_2.5导致的肺部炎症中颗粒酶B是否发挥促进作用。第三步通过阻断IL-18,探究在PM_2.5导致的肺部炎症中颗粒酶B是否通过IL-18发挥作用。 结果随着PM_2.5滴注剂量升高,肺组织颗粒酶B表达增加,肺组织病理切片炎症细胞浸润和肺水肿程度加重,炎症评分增加,PM_2.5促进了肺组织颗粒酶B表达和肺部炎症;阻断颗粒酶B抑制了IL-18表达和NF-κB磷酸化,改善了PM_2.5导致的肺部炎症;阻断IL-18抑制了NF-κB磷酸化,改善了PM_2.5导致的肺部炎症。 结论PM_2.5通过上调颗粒酶B促进IL-18表达加重肺部炎症,其机制可能与激活NF-κB信号通路有关。     

不同浓度PM2.5对小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞MLE-12的损伤作用及SP-B表达影响

目的 探讨不同浓度细颗粒物(PM_2.5)对小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞MLE-12的损伤作用及肺表面活性蛋白-B(SP-B)表达的影响。方法 将肺泡Ⅱ型上皮细胞MLE-12分为实验组和对照组。实验组采用加入12.5、25、50、100、200μg/mL PM_2.5混悬液的DMEM完全培养基培养,对照组采用DMEM完全培养基培养。培养24 h或48 h后,采用光学显微镜观察细胞形态,透射电镜观察细胞超微结构,RTCA仪观察细胞增殖能力;Western blotting法检测细胞中SP-B蛋白;qRT-PCR法检测细胞中SP-B mRNA。结果 随着PM_2.5浓度的升高,实验组细胞形态和超微结构受损程度逐渐加重,可见板层小体受损等细胞器损伤现象,对照组细胞形态和超微结构正常;与对照组相比,PM_2.5呈浓度依赖性抑制实验组细胞的增殖。与对照组相比,实验组细胞SP-B蛋白和mRNA表达呈浓度依赖性下调(P均<0.05)。结论 PM_2.5可呈剂量依赖性损伤小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞MLE-12,...     

PM2.5激活HIF-1α-NF-κB/VEGF通路对肺损伤的影响

目的分析HIF-1α在PM_2.5暴露致肺损伤中的影响。 方法构建经气管滴注PM_2.5悬液诱导大鼠肺损伤的动物模型，通过蛋白质免疫印迹、病理切片、ROS与TUNEL染色和ELISA等方法，分析不同PM_2.5暴露剂量下HIF-1α表达和肺损伤情况；构建抑制HIF-1α表达的动物模型，通过蛋白质免疫印迹、免疫荧光和ELISA等方法探讨HIF-1α在PM_2.5暴露致肺损伤中的作用机制。 结果PM_2.5暴露造成肺组织病理性损伤，提高肺组织ROS水平、细胞凋亡率和湿干比，促进支气管肺泡灌洗液中各类炎症细胞计数和炎症因子IL-6、TNF-α水平增高，激活肺组织HIF-1α的蛋白表达，且以上效应与PM_2.5暴露浓度相关；抑制HIF-1α可降低NF-κB表达，降低支气管肺泡灌洗液中炎症因子水平，改善肺组织炎症；抑制HIF-1α可降低VEGF表达，降低支气管肺泡灌洗液中白蛋白水平和肺组织湿干比，改善肺组织水肿。 结论PM_2.5通过激活"HIF-1α-NF-κB-炎症细胞(AMs、NEUs)/炎症因子(IL-6、TNF-α)-肺组织炎症反应"和"HIF-1α-VEGF-肺血管通透性-肺水肿"两条路径加重肺组织炎症反应、肺血管通透性和肺水肿，导致肺损伤。     

2014～2019年中国PM2.5浓度及与老年心脑血管疾病归因死亡的时空分析

目的 结合人口密度分布和老龄化，研究粒径≤2.5μm的细颗粒物(PM_2.5)对城乡老年人心脑血管病归因死亡风险。方法 运用时间序列分析、人口密度加权、地理空间分析、疾病归因方法研究2014～2019年中国PM_2.5浓度长时间序列及变化规律、探讨归因于PM_2.5的城市、农村老年人群心脑血管病死亡率。结果 2015年以来全国PM_2.5浓度不断下降，从空间分布来看，华北地区浓度最高，呈现聚集性。年均PM_2.5浓度具有显著的空间差异性，总体呈现“由北向南先变重再变轻，由东向西先变轻再加重”的空间分布格局。以人口密度分布对PM_2.5加权后的浓度值为44.37μg/m³,增大了5.63%,更加准确地描述了PM_2.5对老年人群的危险程度。农村地区PM_2.5对各年龄段老年人群患心脑血管疾病死亡率的影响比城市严重。结论 人口密度的空间差异影响PM_2.5的危险性，高龄老年人受影响较大。     

大气细颗粒物对慢性阻塞性肺疾病状态影响的随访

目的探讨大气细颗粒物对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者的影响。 方法选择在我院确诊并且病情处于稳定期的COPD患者100例,随访4次,检测研究对象的肺功能、炎症因子水平、氧化应激指标水平以及心率等指标,使用线性混合效应模型分析大气细颗粒物对COPD患者肺功能的影响。 结果累积暴露1～7 d,PM_2.5与COPD患者的第1秒用力肺活量(FEV₁)呈负相关,PM_2.5每升高IQR浓度,患者FEV₁变化为-3.05%(95%CI：-5.11%～-1.05%)～-2.47%(95%CI：-4.26%～-0.78%);PM_2.5与COPD患者的第1秒用力呼气量占所有呼气量的比例(FEV₁/FVC%)之间呈负相关,PM_2.5每升高IQR浓度,患者FEV₁/FVC%变化为-2.57%(95%CI：-4.69%～-1.53%)～-3.39%(95%CI：-4.02%～-0.74%)。根据COPD患者血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)浓度中位数水平进行分层分析,PM_2.5对FEV₁、FEV₁/FVC肺功能指标的降低效应在高hs-CRP 、高SOD、MDA患者中更强。在高hs-CRP患者中,PM2.5每升高IQR浓度,患者FEV₁变化-3.35%(95%CI：-6.47%～-0.28%);在高MDA患者中,PM_2.5每升高IQR浓度,患者FEV₁变化-4.12%(95%CI：-8.43%～-0.23%);在高SOD患者中,PM_2.5每升高IQR浓度,患者FEV₁变化-3.76%(95%CI：-7.32%～-0.22%);在高hs-CRP患者中,PM_2.5每升高IQR浓度,患者FEV₁/FVC变化-3.76%(95%CI：-7.35%～-0.21%);在高MDA患者中,PM_2.5每升高IQR浓度,患者FEV₁/FVC%变化-0.98%(95%CI：-1.89%～-0.11%);在高SOD患者中,PM_2.5每升高IQR浓度,患者FEV₁/FVC%变化1.69%(95%CI：-3.01%～-0.17%)。 结论大气细颗粒物可影响COPD患者的氧化应激反应、炎症反应、心血管系统,影响患者的肺功能。     

核转录因子-κB圈套寡核苷酸对环格列酮诱导肺癌细胞分化作用的影响

目的 探讨核转录因子-κB(NF-κB)圈套寡核苷酸在环格列酮对肺癌细胞A549增殖抑制和分化调控过程中的影响。方法 运用基因转染技术将NF-κB圈套寡核苷酸转入人肺癌细胞A549中,凝胶阻滞分析实验(EMSA)检测转染前后NF-κB活性的变化,免疫印迹观察转染前后多药耐药蛋白(mdrl)的变化。进而以。100μmol/L环格列酮处理转染和未转染的细胞1-4d,生长曲线观察A549细胞生长,流式细胞仪进行细胞周期分析,免疫印迹观察处理前后细胞周期素D1的变化。结果 (1)EMSA显示转染后NF-κB活性明显下降,mdrl蛋白表达水平降低。(2)环格列酮能抑制A549细胞增殖。(3)转染NF-κB圈套寡核苷酸增强环格列酮对A549细胞增殖的抑制作用,更多的细胞被阻滞于G1／G0期,细胞中细胞周期素D1的水平更低。结论NF-κB圈套寡核苷酸能增加肺癌细胞A549对环格列酮的敏感性,即NF-κB圈套寡核苷酸能协同环格列酮抑制肺癌细胞A549的恶性增殖及诱导其分化。     

姜黄素对肺癌A549细胞迁移和侵袭的影响

目的探讨姜黄素对肺癌A549细胞侵袭迁移力的影响及其机制。 方法利用不同浓度姜黄素处理正常肺上皮细胞,台盼蓝法检测药物细胞毒性;不同浓度的姜黄素作用于A549细胞,MTT法测定A549细胞增殖水平;细胞划痕实验和Transwell实验分别测定药物处理后A549细胞的迁移和侵袭能力变化情况;Werstern blot测定A549细胞中于侵袭迁移有关的表皮生长因子受本(EGFR)、E-型钙黏蛋白(E-cadherin)、N-型钙黏蛋白(N-cadherin)蛋白的表达。 结果姜黄素浓度在0～40 μg/ml时正常肺上皮病死率低,差异无明显统计学差异(P>0.05),表明姜黄素对正常肺上皮细胞的不良反应小;MTT实验结果显示姜黄素以浓度依赖的方式抑制A549细胞的增殖,各组与对照组相比均具有统计学意义(P<0.01);细胞划痕实验显示姜黄素以浓度依赖的方式抑制A549细胞的迁移能力,各组与对照组相比均具有统计学意义(P<0.01);Transwell实验显示姜黄素以浓度依赖的方式抑制A549细胞的侵袭能力,各组与对照组相比均具有统计学意义(P<0.01);Western blot显示姜黄素处理A549细胞后EGFR蛋白(P<0.01)和N-cadherin蛋白表达降低(P<0.01),E-cadherin蛋白表达升高(P<0.01)。 结论一定浓度内姜黄素细胞毒性低,姜黄素能够抑制A549的增殖、迁移和侵袭,可能是通过调节EGFR、N-cadherin、E-cadherin蛋白从而逆转上皮间质转化过程。     

细颗粒物暴露对急性冠脉综合征作用机制的研究进展

空气污染对公众健康的影响已成为全球关注的焦点，是全球性的健康问题，细颗粒物(PM_2.5)是环境空气污染物的重要组成部分，已被世界卫生组织确定为对人群健康构成最大威胁的污染物之一。PM_2.5暴露效应及其与急性冠脉综合征(ACS)之间的关联日益受到关注。PM_2.5可通过多种细胞及分子生物学机制而诱导ACS,其中包括全身性炎症反应、氧化应激、内质网应激、线粒体损伤、内皮细胞损伤、自主神经功能障碍等。现对以上几方面进行简要综述，强调空气污染对全球健康问题的相关性，需制定更加严格的标准来减少空气污染所造成的心血管疾病负担，并为进一步研究PM_2.5对健康的影响提供帮助。     

阿奇霉素对烟曲霉刺激A549细胞分泌IL-6和IL-8的影响

目的 观察阿奇霉素对烟曲霉孢子刺激A549细胞、支气管上皮细胞分泌IL-6和IL-8的影响.方法 制备烟曲霉孢子侵袭A549细胞、支气管上皮细胞体外模型,分别加入不同浓度(o.5 mg/2.5 mg)阿奇霉素和地塞米松培养24 h,以酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测离心液中IL-6和IL-8的水平,比较不同药物浓度对两种细胞因子水平的影响.结果 孢子组释放IL-6/IL-8浓度明显高于对照组;在阿奇霉素组、地塞米松组,支气管上皮细胞、A549细胞释放IL-6/IL-8浓度明显低于孢子组.结论 阿奇霉素和地塞米松可以抑制烟曲霉孢子所致的A549细胞、支气管上皮释放IL-6和IL-8,减轻机体炎症反应.     

黄芩苷对A549肺腺癌细胞增殖的抑制作用及机制

目的探讨黄芩苷对A549肺腺癌细胞株增殖的抑制作用及其相关机制。方法将浓度为0、25、50、100、200、400μmol/L的黄芩苷作用于经体外培养的A549人肺腺癌细胞株24、48、72 h,采用噻唑蓝(MTT)法检测黄芩苷对A549肺腺癌细胞的抑制率;收集30μmol/L黄芩苷孵育24 h后的A549肺腺癌细胞,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定细胞周期蛋白(Cyclin)D1、增殖细胞核抗原(PCNA)及p21 mRNA的表达水平,采用Western印迹法检测Cyclin D1、PCNA及p21蛋白的表达水平。结果不同浓度的黄芩苷对A549肺腺癌细胞的增殖均具有不同程度的抑制作用,并且呈剂量效应、时间效应关系。30μmol/L黄芩苷(实验组)作用于A459肺腺癌细胞24 h后,Cyclin D1、PCNA及其蛋白表达水平低于对照组,p21及其蛋白表达水平高于对照组(P<0.05)。结论通过抑制Cyclin D1、PCNA的表达以及促进p21的表达,黄芩苷抑制A549肺腺癌细胞增殖。     

2017—2021年玉林市气象因素与空气污染物对肺结核发病的影响

目的: 分析玉林市空气污染物与气象因素对肺结核发病的影响及交互作用。方法: 收集2017年1月1日至2021年12月31日广西壮族自治区玉林市11251例新发肺结核患者的病例资料;同时,收集同期玉林市空气污染物及气象因素资料。采用Spearman相关性分析方法分析同期空气污染物和气象因素与肺结核发病的相关性;采用双变量响应面模型、单污染物-气温交互模型分析空气污染物与气温对肺结核发病风险的交互作用。结果: 2017—2021年玉林市肺结核的发病具有明显的季节波动性,高峰集中在春季(27.57%,3102/11251)和夏季(27.89%,3138/11251);男性和农民发病占比较高,分别为74.70%(8405/11251)和87.74%(9872/11252)。2017—2021年玉林市每日空气污染物PM_2.5、PM₁₀、SO₂、NO₂、CO、O₃浓度[中位数(四分位数)]分别为27.00(19.00,41.00)μg/m³、44.00(32.00,64.00)μg/m³、13.00(8.00,21.00)μg/m³、15.00(12.00,21.00)μg/m³、0.82(0.69,0.99)mg/m³、53.00(39.00,69.00)μg/m³;每日气温[中位数(四分位数)]为24.50(19.00,29.00)℃;肺结核日均发病6例(11251/1825)。高温(37.00℃)在滞后0~4d时可使玉林市人群肺结核发病数增高,相比于每日气温的中位数(24.50℃,RR值为1.00),37.00℃累计0~4d的RR值为1.20;低温(3.00℃)在滞后0~2d时也可使玉林市人群肺结核发病数增高,相比于每日气温的中位数(24.50℃,RR值为1.00),3.00℃累计0~2d的RR值为1.22。低温(3.00℃)时PM_2.5、PM₁₀、NO₂、CO对肺结核发病数影响的效应较强,高温(37.00℃)时PM_2.5、PM₁₀、SO₂、NO₂、CO、O₃对肺结核发病数影响的效应较弱。结论: 高温暴露或低温暴露可引起玉林市肺结核发病风险升高,尚未发现气象因素与空气污染物对玉林市肺结核发病风险存在协同作用。     

白芍总苷通过miR-23b-3p/FoxA1对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞凋亡的影响

目的 探讨白芍总苷及对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞凋亡的影响分子机制.方法 肺泡上皮细胞A549随机分为对照(Con)组、模型(Model)组(1×108 CFU/mL的肺炎链球菌感染)、Model+白芍总苷低、中、高剂量组(17.5 mg/mL、35 mg/mL、70 mg/mL的白芍总苷+1×108 CFU/mL的...     

YAP调控肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药性的机制分析

目的探讨Yse相关蛋白(Yes-associated protein, YAP)对A549/DDP细胞顺铂耐药性的影响及其机制。 方法采用MTS检测顺铂对肺腺癌A549细胞以及肺腺癌耐顺铂A549/DDP细胞的50%抑制浓度(IC₅₀)。使用qPCR以及Western blot检测A549和A549/DDP细胞中YAP mRNA以及蛋白的表达。Western blot检测维替泊芬(Verteporfin, VP)处理A549/DDP后YAP蛋白表达变化。将A549/DDP细胞设置为DMSO对照组、顺铂组(DDP组)、维替泊芬组(VP组)、顺铂联合维替泊芬组(DDP+VP组),采用MTS检测0、24和48 h各处理组细胞活力的变化。采用qPCR检测VP处理A549/DDP后干细胞标志物ALDHA1、CD133、OCT4、NANOG、SOX2的mRNA表达变化。 结果顺铂对A549和A549/DDP细胞的IC50分别为(4.07±0.03)μg/ml、(23.44±0.98)μg/ml,耐药指数为5.76。A549/DDP细胞中YAP显著高于A549细胞(P<0.05)。VP处理A549/DDP细胞后YAP蛋白表达水平较DMSO组明显降低。DDP+VP组较单独DDP组,其细胞活力在24 h和48 h均明显降低(P<0.05)。qPCR检测发现A549/DDP细胞经VP处理后,干细胞标志物ALDHA1、CD133、OCT4、NANOG、SOX2的mRNA均较DMSO组明显降低(P<0.05)。 结论YAP可能参与了肺癌细胞的顺铂耐药。抑制YAP可通过抑制肿瘤干细胞特性,进而发挥逆转耐药的作用。     

Role of Burkholderia pseudomallei in the invasion, replication and induction of apoptosis in human epithelial cell lines

Burkholderia pseudomallei is a bacterial pathogen causing melioidosis. In the present study, we demonstrated the effects of B. pseudomallei capsular polysaccharide on the invasion, intracellular replication, induction of cytotoxicity and apoptosis of human epithelial HeLa and A549 cells. The B. pseudomallei capsule mutant had a significantly greater ability to invade both cell lines (p < 0.05). The B. pseudomallei capsule mutant had a greater ability to induce apoptosis in A549 cells than wild type B. pseudomallei. These results indicate the capsular polysaccharide of B. pseudomallei plays an important role in inhibiting invasion by the bacteria but has no effect on intracellular multiplication, induction of cytotoxicity or apoptosis in epithelial cells.     

The intensity of internalization and cytotoxicity of superparamagnetic iron oxide nanoparticles with different surface modifications in human tumor and diploid lung cells

The human lung adenocarcinoma epithelial (A549) cells and the human embryo lung (HEL 12469) cells were used to investigate the uptake and cytotoxicity of magnetite nanoparticles (MNPs) with different chemically modified surfaces. MNPs uptake was an energy-dependent process substantially affected by the serum concentration in the culture medium. Internalized MNPs localized in vesicle-bound aggregates were observed in the cytoplasm, none in the nucleus or in mitochondria. All MNPs induced a dose- and time-dependent increase in cytotoxicity in both human lung cell lines. The cytotoxicity of MNPs increased proportionally with the particle size. Since the cytotoxicity of MNPs was nearly identical when the doses were equalized based on particle surface area, we suppose that the particle surface area rather than the surface modifications per se underlay the cytotoxicity of MNPs. In general, higher internalized amount of MNPs was found in HEL 12469 cells compared with A549 cells. Accordingly, the viability of the human embryo lung cells was reduced more substantially than that of the adenocarcinoma lung cells. The weak MNPs uptake into A549 cells might be of biomedical relevance in cases where MNPs should be used as nanocarriers for targeted drug delivery in tumor tissue derived from alveolar epithelial cells.