脑心通对实验性动脉硬化兔血管MCP-1基因影响的研究

目的探讨脑心通对动脉粥样硬化(AS)的防治作用及其可能机制。方法通过高脂饮食建立兔AS模型，采用反转录一聚合酶链反应(RT—PCR)检测腹主动脉单核细胞趋化因子(MCP-1)mRNA的表达。结果脑心通可降低主动脉MCP-1mRNA的表达，降低MCP-1的表达水平，减少泡沫细胞的形成。结论脑心通对AS的发生发展可起预防和治疗作用。     

脑心通对动脉硬化兔血管内皮功能的保护作用探讨

目的探讨脑心通对动脉粥样硬化(AS)的防治作用及其可能机制.方法建立高脂饮食兔AS模型,采用RT-PCR检测腹主动脉LOX-1 mRNA及蛋白的表达.结果脑心通可降低主动脉LOX-1 mRNA的表达,提示脑心通可降低LOX-1的表达水平.结论脑心通具有保护内皮的功能,对AS发生发展起到预防和治疗作用.     

脑心通对兔动脉粥样硬化及MCP-1表达的影响

将32只雄性新西兰大白兔随机分为4组,对照组、单纯高脂组、氟伐他汀组、脑心通组.分别进行胸主动脉的HE染色观察胸主动脉的动脉粥样硬化(AS)程度,并应用RT-PCR检测单核细胞趋化因子(MCP-1)基因表达情况,同时测定血脂水平.发现与单纯高脂组比较,氟伐他汀组和脑心通组TC、LDL-C水平以及MCP-1 mRNA表达均明显降低.提示脑心通通过降脂及抑制MCP-1的表达达到抗AS的作用.     

养心氏片对动脉粥样硬化模型小鼠的作用机制研究

目的探讨养心氏片治疗动脉粥样硬化(AS)的可能作用机制。方法以高脂饲料喂养雄性载脂蛋白E基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠12周,复制AS模型。将AS小鼠随机分成模型组,养心氏片高剂量组、中剂量组、低剂量组及阳性对照组,每组8只。另设雄性C57BL/6J小鼠8只作为正常对照组。养心氏片高剂量组、中剂量组、低剂量组及阳性对照组给药量分别相当于70 kg成人临床剂量的2倍、1倍、0.5倍及1倍。养心氏片高剂量组、中剂量组、低剂量组给予养心氏片,剂量分别为1.40 g/(kg·d)、0.70 g/(kg·d)、0.35 g/(kg·d)灌胃,阳性对照组给予阿托伐他汀剂量为2.57 mg/(kg·d)灌胃,共给药12周。采用苏木素-伊红(HE)染色法观察小鼠升主动脉病理学变化,Image J软件测定小鼠升主动脉斑块校正后斑块面积。采用实时定量PCR(qPCR)法检测各组小鼠主动脉组织核转录因子-κB(NF-κB)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、血管内皮细胞黏附分子-1(VCAM-1)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA的表达。结果与模型组比较,养心氏片高剂量组、中剂量组、低剂量组及阳性对照组升主动脉斑块校正后斑块面积呈现不同程度的降低(P0.05),以养心氏片高剂量组小鼠升主动脉斑块校正后斑块面积最低,而养心氏片高剂量组小鼠升主动脉斑块校正后斑块面积与阳性对照组相比差异无统计学意义(P0.05)。与正常对照组比较,模型组小鼠主动脉组织NF-κB、MCP-1、VCAM-1、IL-6、TNF-αmRNA的表达水平明显升高(P0.05),各药物干预组小鼠主动脉组织NF-κB、MCP-1、VCAM-1、IL-6、TNF-αmRNA表达水平较模型组均显著降低(P0.05),与养心氏片高剂量组相比,养心氏片中剂量组及低剂量组小鼠主动脉NF-κB、MCP-1、VCAM-1、IL-6、TNF-αmRNA表达升高(P0.05),而养心氏片高剂量组小鼠主动脉NF-κB、MCP-1、VCAM-1、IL-6、TNF-αmRNA表达与阳性对照组相比差异无统计学意义(P0.05)。结论养心氏片可抗动脉粥样硬化,并具有剂量依赖性,养心氏片给药组以养心氏片高剂量组抗AS效果最佳,其机制可能与降低AS小鼠升主动脉斑块校正后斑块面积及下调主动脉NF-κB信号通路相关因子mRNA表达有关。     

国产红葡萄酒对食饵性动脉粥样硬化病变的消退作用及其机制的研究

目的通过复制8周兔的早、中期动脉粥样硬化(AS)模型,探讨红葡萄酒(RW)对8周AS兔病变的逆转作用及其可能的机制。方法采用HE染色、电泳流动漂移技术(EMSA)、免疫组织化学和原位杂交技术检测食饵性动脉粥样硬化8周时血管壁病理形态学改变和核转录因子(NF-κB)活化及单核细胞趋化蛋白(MCP-1)表达情况及RW再干预8周后对AS血管壁病理形态学及对NF-κB活化和MCP-1表达的影响。结果RW治疗AS 8周后,其主动脉硬化斑块面积、内膜增生厚度、泡沫细胞数及平滑肌增生程度均有明显减轻;在AS斑块明显缩小的前提下,其MCP-1的蛋白及其mRNA水平的表达均有所下降,且NF-κB活性受到明显抑制。结论RW对AS病变具有一定的消退作用,其机制可能系通过抑制NF-κB活化,及下调MCP-1的表达而实现的。     

脑心通调节基质金属蛋白酶及其抑制剂表达的研究

目的观察脑心通胶囊稳定实验性动脉粥样硬化（AS）易损斑块的作用，探讨基质金属蛋白酶9（MMP9）及其抑制剂（TIMP1）对AS斑块发展及稳定性的影响。方法45只兔腹主动脉球囊拉伤后高脂喂养，12周末随机分为脑心通组、辛伐他汀组及对照组。24周末处死分离腹主动脉进行免疫组化和实时定量RT—PCR分析。结果免疫组化显示，MMP9和TIMP1在对照组斑块内阳性细胞数多于脑心通组；实时定量RT—PCR分析结果显示对照组mRNA表达量高于脑心通组及辛伐他汀组，且脑心通组与辛伐他汀组组间比较无统计学意义。结论MMP9和TIMP-1是测定动脉粥样硬化斑块稳定性的重要指标，脑心通胶囊能下调其在斑块内的表达，从而降低斑块的易损性。     

P38信号通路对人脐静脉内皮细胞单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的 探讨P38信号通路(P38MAPK)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的关系，以及P38MAPK在糖尿病(DM)动脉粥样硬化(AS)中的作用。方法 分别以高葡萄糖(HG)、糖基化终产物(AGEs)、高胰岛素(HIns)和过氧化氢(H2O2)孵育人脐静脉内皮细胞(HUVECs)，观察HUVECs P38MAPK的蛋白表达和MCP-1 mRNA表达；以P38MAPK特异抑制剂SB203580预处理，再用以上4种刺激因素孵育HUVECs，观察MCP-1 mRNA在HUVECs的表达。结果 HG、AGEs、HIns和H2O2均可独立激活P38MAPK，使磷酸化P38MAPK蛋白表达量及MCP-1 mRNA表达量增加；SB203580预处理后，MCP-1 mRNA表达被明显抑制。结论 P38MAPK调控MCP-1的表达，表明P38MAPK可能是DM致AS发生的始动信号之一。     

大鼠动脉粥样硬化COX-2 mRNA表达及白黎芦醇干预的实验研究

目的 观察白黎芦醇对动脉粥样硬化(AS)模型大鼠主动脉粥样硬化段COX-2 mRNA表达的影响.方法 雄性SD大鼠高脂饲料喂养,复制食饵性AS早期模型,用药组灌胃白藜芦醇.造模给药4 w后,用RT-PCR方法观察对照组、模型组和用药组主动脉壁粥样硬化段COX-2 mRNA的表达.结果 用药组降低AS早期主动脉硬化段COX-2表达,阻止AS的进程.结论 白藜芦醇对大鼠AS具有保护作用,并能提高AS斑块稳定性.     

白藜芦醇对兔动脉粥样硬化及PPARγ相关炎症因子表达的影响

目的 探讨白藜芦醇抗动脉粥样硬化的效应及其可能机制.方法 成熟雄性新西兰大白兔42只,分为三组:空白组(n=10)普通饲料喂养;模型组(n=18)高脂饲料喂养;白藜芦醇组(n=14)高脂饲料加白藜芦醇[16 mg/(kg·d)]干预.TUNEL法检测细胞凋亡,RT-PCR检测主动脉过氧化体增殖物激活型受体γ(PPARγ)、Fas、FasL及Caspase-3 mRNA表达水平,ELISA测定血清中单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及组织型基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)的蛋白表达水平.结果 成功建立动脉粥样硬化模型.白藜芦醇组动脉粥样硬化病变明显减轻,可抑制斑块内细胞凋亡;PPARγ mRNA转录增高,Fas、FasL和Caspase-3 mRNA转录显著下降;MCP-1和MMP-9蛋白表达水平显著降低,TIMP-1蛋白表达增高.结论 白藜芦醇具有抗动脉粥样硬化作用,这一作用类似PPARγ激动剂,可通过上调斑块内PPARγ的基因转录,降低Fas、FasL和Caspase-3 mRNA转录,以及降低MCP-1、MMP-9的表达同时促进TIMP-1的表达来实现.     

荷叶碱对小鼠动脉粥样硬化血管炎症及基质金属蛋白酶的影响

目的:通过研究荷叶碱对小鼠动脉粥样硬化(AS)血管炎症及基质金属蛋白酶(MMPs)的影响来阐明其抗AS机制。方法:实验采用高脂饮食诱导构建AS小鼠模型,根据不同饮食分为对照组、AS组、低剂量荷叶碱组和高剂量荷叶碱组。12周后分析荷叶碱对血脂、血清炎性因子(TNF-α、MCP-1)、血管壁炎性因子(IL-1β、TNF-α、MCP-1、NF-κB)的影响,并检测血管壁中MMP-2、9及其抑制物(TIMP-2)的基因表达。结果:荷叶碱有效降低了体重、总胆固醇(TC)、高/低密度脂蛋白胆固醇(HDL-C、LDL-C)及血清炎症(P0.05),且高剂量组尤为明显(P0.05),但对高TG血症改善不大(P0.05)。Real-Time PCR结果显示,AS组小鼠主动脉壁硬化段组织的炎性因子(IL-1β、TNF-α、MCP-1、NF-κB)表达均显著上调(P0.05),荷叶碱干预后明显回落(P0.05),且与剂量相关,但MCP-1mRNA除外(P0.05)。MMP-2,9mRNA亦呈相同变化趋势,而TIMP-2在荷叶碱干预后显著上调(P0.05),且在大剂量组表达尤为明显(P0.05)。结论:荷叶碱能够降低血脂异常及血清炎症,并减少血管壁炎症,这一作用可能与调控NF-κB有关;同时荷叶碱可能通过调控MMP-2、9及TIMP-2进一步影响动脉粥样硬化的发生发展。     

脱氢表雄酮对氧化应激诱导的血管平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白-1 mRNA表达的影响

目的观察脱氢表雄酮(DHEA)对氧化应激诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1) mRNA达的影响。方法贴块法培养雄性Wistar大鼠胸主动脉VSMC,实验分A组(对照组)、B组(50μmol/L H_2O_2处理6h)、C组(50μmol/L H_2O_2+1nmol/L DHEA处理6h)和D组(50μmol/L H_2O_2+10nmol/L DHEA处理6h)。逆转录聚合酶链式反应检测MCP-1的mRNA表达;比色法检测细胞丙二醛(MDA)含量。结果B组VSMC的MCP-1 mRNA表达及细胞MDA的含量显著高于A组;与B组比较,C组和D组VSMC的MCP-1 mRNA表达及细胞MDA含量显著降低,其中D组降低更为明显。结论DHEA能显著抑制H_2O_2引起VSMC的MCP-1 mRNA表达的上调,从而减轻氧化应激对VSMC的损伤,这部分是通过DHEA的直接抗氧化作用达到的。     

白黎芦醇对AS模型大鼠主动脉bcl-2及caspase-3表达影响的研究

目的 观察白黎芦醇对动脉粥样硬化(AS)模型大鼠主动脉壁平滑肌细胞bcl-2和caspase-3 mRNA表达的影响.方法 雄性SD大鼠复制食饵性AS早期模型,用药组灌胃白藜芦醇70 mg/(kg·d)共4 w.造模给药用逆转录聚合酶链反应,观察对照组、模型组和用药组主动脉壁平滑肌细胞bcl-2和caspase-3 mRNA的表达.结果 白藜芦醇组通过影响AS早期主动脉壁平滑肌细胞bcl-2和caspase-3表达,阻止AS的进程.结论 白藜芦醇对大鼠动脉粥样硬化具有保护作用,并能提高AS斑块稳定性.     

蒲黄提取物对氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞的保护作用

目的 研究蒲黄提取物对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用.方法　体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),采用MTT法测定不同浓度蒲黄提取物对HUVEC的影响.以蒲黄提取物(100,50,10 mg/L)预处理细胞24 h,再加入100 mg/L ox-LDL造成细胞损伤,取培养细胞上清液测定乳酸脱氢酶(LDH)活性,HUVEC用于测定细胞细胞间黏附因子(ICAM-1)、单核细胞趋化蛋白(MCP-1)mRNA的表达.结果 各剂量蒲黄提取物有显著的促进血管内皮细胞增殖的作用.与正常对照组比较,HUVEC经ox-LDL作用后,细胞活性显著下降,LDH的释放量和ICAM-1、MCP-1 mRNA的表达显著升高;100、50、10 mg/L 蒲黄提取物可显著降低LDH活性,下调ICAM-1、MCP-1 mRNA的表达.结论 蒲黄提取物具有促进脐静脉内皮细胞增殖的作用,并可抑制Ox-LDL诱导的HUVECs ICAM-1、MCP-1 mRNA表达的上调和LDH的释放,从而起到保护血管内皮细胞的作用.     

氯沙坦对家兔早期动脉粥样硬化血管MCP-1表达及胆固醇含量的影响

目的 :氯沙坦对加速性家兔早期动脉粥样硬化 （AS）血管增生及 MCP- 1蛋白表达的影响。方法 :采用组织学、免疫组织化学和生物化学方法评价加速性家兔 AS早期血管组织学、增殖细胞核抗原 （PCNA）及单核白细胞趋化蛋白 - 1（MCP- 1）蛋白表达和组织胆固醇含量的改变。结果 :AS组血管内膜与中膜厚度比值、主动脉组织胆固醇含量、内膜 PCNA阳性细胞数及 MCP- 1蛋白表达平均光密度积分值均显著增加 ,氯沙坦干预组内膜与中膜厚度比值较 AS组显著下降 ,PCNA阳性细胞数明显减少 ,血管壁 MCP- 1蛋白表达水平明显下降 （均 P<0 .0 1）。氯沙坦干预组主动脉组织胆固醇含量明显低于 AS组 [1.47± 0 .0 3mg/ g（wet）与 1.35± 0 .0 2 mg/ g（wet） ,P<0 .0 5 ]。结论 :氯沙坦干预可抑制 MCP- 1蛋白表达 ,减轻加速性 AS病变血管内膜增生 ,减少胆固醇在血管壁沉积 ,从而可能在防治AS过程中起重要作用。     

氯沙坦对急性期2肾1夹高血压大鼠主动脉单核细胞趋化因子-1表达的影响

目的:探讨急性期2肾1夹(2K1C)高血压主动脉单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的表达以及氯沙坦 (losartan)干预对其影响。方法:采用银夹法复制2K1C高血压模型,用放免法测定血浆和主动脉壁血管紧张素ⅡAngⅡ)浓度,用原位杂交和RT-PCR方法检测2K1C高血压大鼠在血压升高不同时间以及氯沙坦干预28 d后主动脉MCP-1 mRNA的表达。结果:正常血压大鼠主动脉无MCF-1的表达;在2K1C大鼠高血压形成1周,主动脉MCP-1即有表达,并随时间延长,其表达持续增加;氯沙坦干预28 d后,2K1C高血压大鼠主动脉MCP-1的表达明显减少,差异有统计学意义;2K1C高血压大鼠血浆和主动脉壁AngⅡ浓度增加,但只有主动脉壁局部的 AngⅡ浓度同MCP-1表达的吸收度值呈正相关。结论:急性期2K1C高血压大鼠主动脉即有MCP-1的表达并随时间延长而增加,氯沙坦干预可明显减少其表达。     

Ox-LDL对血管内皮细胞中ABCA1及单核细胞趋化因子的影响

目的研究在致动脉粥样硬化（AS）因子氧化型低密度脂蛋白（Ox-LDL）刺激下,人血管内皮细胞ECV304中腺苷三磷酸结合盒转运体A1（ABCA1）基因对炎性因子单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）的调节作用,从而阐明ABCA1基因在AS发生中的作用机制。方法培养人血管内皮细胞ECV304,加入Ox-LDL（30 ng/ml）刺激3、6、12、24 h,以荧光定量RT-PCR检测ABCA1、MCP-1 mRNA表达量,Western蛋白印迹法和ELISA法检测ABCA1、MCP-1及IL-1β蛋白表达量;ABCA1的反义寡核苷酸（100 nmol/L）转染人血管内皮细胞,给予上述的Ox-LDL,同样方法测定上述指标的改变。结果人血管内皮细胞ECV304在给予Ox-LDL刺激后,ABCA1、MCP-1的mRNA和蛋白质水平及IL-1β蛋白质水平均增高;给予反义寡核苷酸转染3、6 h后,ABCA1、MCP-1 mRNA的表达降低,12、24h后ABCA1、MCP-1及IL-1β蛋白质的表达水平降低。结论在Ox-LDL作用下,血管内皮细胞中的ABCA1可能通过增加IL-1β的表达,促进MCP-1释放,从而在AS的早期发生中发挥作用。     

丹参对实验性动脉粥样硬化形成的预防

目的:探讨丹参抑制动脉粥样硬化(AS)作用中的可能的分子机制。方法:随机将21只家兔均分为 对照组、AS组和丹参干预组,采用高脂饲料建立AS模型,9周后行血脂测定、主动脉粥样斑块面积计算,并以逆 转录 聚合酶链式反应(RT PCR)分别进行三组的单核细胞趋化蛋白 1(MCP 1)mRNA表达水平测定,以及用免 疫组织化学方法对比各组MCP 1蛋白表达。结果:对照组和丹参组中血脂水平和主动脉粥样斑块面积低于AS 组(P<0.01);主动脉血管内皮细胞以及平滑肌细胞内MCP 1mRNA水平及蛋白表达水平在对照组和丹参组中 明显低于AS组(P<0.01)。结论:丹参能降低MCP 1表达水平,这可能是其抑制AS形成的分子学机制之一。     

血管内皮细胞中三磷酸腺苷-结合盒转运子A1对炎性细胞因子表达的影响

目的研究在公认的ATP-结合盒转运子A1(ABCA1)诱导因素8-溴-环磷酸腺苷(8-Br-cAMP)刺激下,人血管内皮细胞ECV304中ABCA1基因对炎性细胞因子细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、单核细胞化学趋向蛋白-1(MCP-1)及白介素-1β(IL-1β)的调节作用。以阐明ABCA1基因在动脉粥样硬化(AS)发生中的作用机制。方法培养人血管内皮细胞株ECV304,加入8-Br-cAMP(0.5 mmol/L)刺激3、6、12及24 h,以荧光定量逆转录聚合酶链式反应检测ABCA1、ICAM-1及MCP-1 mRNA表达量,Western blot蛋白印迹法和酶联免疫吸附测定法检测ABCA1I、CAM-1、MCP-1及IL-1β蛋白质表达量;ABCA1的反义寡核苷酸(100 nmol/L)转染人血管内皮细胞,给予上述的8-Br-cAMP,同样的方法测定上述指标的改变。结果人血管内皮细胞ECV304在给予8-Br-cAMP刺激6、12 h后,ABCA1I、CAM-1、MCP-1的mR-NA和蛋白质水平及IL-1β蛋白质水平均增高;给予反义寡核苷酸转染后,8-Br-cAMP刺激后36、h ABCA1I、CAM-1、MCP-1mRNA的表达降低,122、4 h ABCA1I、CAM-1、MCP-1及IL-1β蛋白质的表达水平降低。结论在8-Br-cAMP作用下,血管内皮细胞中ABCA1可增加炎性因子的表达,从而在AS早期的发生中发挥作用。     

醛固酮对大鼠肾小球系膜细胞单核细胞趋化蛋白1表达和合成的影响

目的 探讨醛固酮对大鼠肾小球系膜细胞表达和合成单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的影响. 方法 采用高糖(17.5mmol/L,Con组)、高糖+不同浓度醛固酮、高糖+螺内酯+醛固酮培养大鼠系膜细胞.24h后检测各组MCP-1 mRNA表达和MCP-1蛋白的浓度. 结果 与Con组比较,10-5、10-7和10-9mol/L醛固酮组系膜细胞上清中MCP-1水平明显增高.RT-PCR结果显示醛固酮可显著上调MCP-1 mRNA的表达(P<0.01),而螺内酯可部分抑制醛固酮诱导的MCP-1高表达. 结论 醛固酮可上调大鼠肾小球系膜细胞MCP-1 mRNA的表达和蛋白质合成.     

表没食子儿茶素没食子酸酯对高尿酸血症大鼠血管内皮炎症因子的作用

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对高尿酸血症大鼠血管内皮炎症因子的作用。方法将36只雄性SD大鼠分为正常对照组、模型对照组、EGCG低剂量组、EGCG中剂量组、EGCG高剂量组、别嘌呤醇组,5周后,运用RT-PCR检测大鼠主动脉MCP-1、TNF-α、ICAM-1、ET-1及e NOS表达量,以及大鼠血清尿酸、肌酐、尿素氮和黄嘌呤氧化酶(XO)水平。结果模型对照组大鼠的血尿酸和XO水平显著高于正常对照组(P0.01),EGCG各浓度组及别嘌呤醇组大鼠的血尿酸和XO水平与模型对照组相比较则有不同程度下降(P0.01)。模型对照组大鼠主动脉MCP-1、TNF-α、ICAM-1的mRNA表达量较正常对照组显著升高(P0.01),EGCG各浓度组和别嘌呤组大鼠主动脉TNF-α、ICAM-1的mRNA表达量与模型对照组相比显著下降(P0.01),EGCG高剂量组和别嘌呤组MCP-1 mRNA表达量与模型对照组相比显著下降(P0.05)。EGCG中剂量组和别嘌呤组ET-1 mRNA表达量与模型对照组相比显著下降(P0.05)。结论 EGCG干预可以降低高尿酸血症大鼠的血尿酸水平,同时减少血管内皮炎症因子的表达。