重组人干扰素α1b滴眼液对体外培养翼状胬肉成纤维细胞增殖的影响

目的：观察重组人干扰素α1b滴眼液对体外培养翼状胬肉（初发、复发）成纤维细胞增殖的影响，寻找辅助治疗翼状胬肉和预防翼状胬肉复发的药物。方法：将初发、复发翼状胬肉成纤维细胞行原代和传代培养；用MTT比色法测定重组人干扰素α1b滴眼液对体外培养初发、复发翼状胬肉成纤维细胞增殖的作用；采用免疫组化法检测重组人干扰素α1b滴眼液对体外培养初、复发翼状胬肉成纤维细胞的增殖细胞核抗原（PCNA）表达的影响。结果：重组人干扰素α1b滴眼液与对照组相比，对初、复翼状胬肉成纤维细胞的增殖影响具有统计上的差异，对细胞的增殖具有抑制作用，同时重组人干扰素α1b滴眼液对初、复发翼状胬肉成纤维细胞PCNA的表达具有抑制作用。结论；重组人干扰素α1b滴眼液作为一种成品滴眼液对初、复发翼状胬肉成纤维细胞的增殖具有明显的抑制作用，可望用于临床上对该疾病治疗。     

汉防己甲素抑制翼状胬肉成纤维细胞增殖的研究

目的:观察汉防己甲素对体外培养的翼状胬肉成纤维细胞增殖抑制作用并探讨其机制,寻找治疗翼状胬肉和预防其复发的有效药物.方法:(1)倒置相差显微镜下观察不同浓度的Tet作用下,体外培养的翼状胬肉成纤维细胞形态的变化,并与丝裂霉素(Mitomycin,MMC)进行比较.(2)MTT比色法测定不同浓度的Tet作用48h对体外培养的翼状胬肉成纤维细胞增殖的抑制作用,并与MMC进行比较.(3)流式细胞仪检测不同浓度的Tet作用48h,体外培养的翼状胬肉成纤维细胞细胞周期的变化.结果:(1) Tet作用下,细胞胞体收缩,变圆,间隙增宽,药物浓度高时,细胞碎裂,浮起.0.1,0.2g/L MMC作用下大量细胞碎裂,溶解.(2)不同浓度的Tet作用48h对体外培养的翼状胬肉成纤维细胞的增殖均有明显的抑制作用(P＜0.01);0.1g/L与0.2g/L MMC、4×10-5 mol/L Tet与0.2g/L MMC对翼状胬肉成纤维细胞活性的影响无显著性差异(P＞0.05).Tet的IC50接近10-5mol/L(为0.848×10-5mol/L).(3)Tet作用下,翼状胬肉成纤维细胞周期中S期细胞增多,浓度越高,作用越明显.结论:汉防己甲素对翼状胬肉成纤维细胞的增殖具有明显的抑制作用,呈剂量依赖性,细胞分裂被阻止在S期(DNA合成期).可望用于对翼状胬肉的治疗.     

维生素E琥珀酸酯抑制人翼状胬肉成纤维细胞生长作用的研究

目的: 探讨维生素 E 琥珀酸酯(VES) 对体外培养翼状胬肉成纤维细胞增殖的影响, 寻找辅助治疗翼状胬肉和预防翼状胬肉复发的新方法。方法: 翼状胬肉成纤维细胞原代、传代培养,观察 VES 对细胞生长曲线的影响,四甲基偶氮唑盐(MTT) 法检测不同质量浓度 VES 对细胞增殖的影响。结果: 与对照组相比,VES 使细胞生长曲线下移,用10, 20mg/L VES 处理细胞 2, 4, 7d 后,细胞生长抑制率分别为 33.2%和 46.7%、67.9%和 76.8%、81.7%和 89.3%。MTT 法显示 VES 对细胞增殖抑制作用在一定范围内呈剂量 - 效应依赖性。结论: VES 可有效抑制翼状胬肉成纤维细胞的增殖活性。     

锗132对体外培养翼状胬肉成纤维细胞的增殖抑制作用观察

观察锗１３２对体外培养翼状胬肉成纤维细胞的抗增殖作用,寻找辅助治疗翼状胬肉和预防翼状胬肉复发的新方法。方法将翼状胬肉成纤维细胞行体外原代和传代培养;观察不同浓度锗１３２及丝裂霉素Ｃ对成纤维细胞生长曲线的影响及培养的翼状胬肉成纤维细胞增殖抑制作用和毒性作用;采用免疫组织化学方法检测增殖细胞核抗原（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇ ｃｅｌｌ ｎｕｃｌｅａｒ ａｎｔｉｇｅｎ,ＰＣＮＡ）的表达,结果锗１３２可抑     

转化生长因子-β与翼状胬肉

转化生长因子-β(transforminggrowthfactor-beta,TGF-β)具有多种生物学作用,翼状胬肉中也有其异常表达。TGF-β在翼状胬肉发病中的作用主要表现为:①能促进翼状胬肉上皮细胞,成纤维细胞的增殖和新生血管形成。②能促进多种细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)的合成。③对翼状胬肉中的炎症和免疫反应也有介导作用。     

层黏连蛋白对人翼状胬肉成纤维细胞生长的抑制作用

目的:探讨层黏连蛋白对体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞增殖的影响.方法:体外培养的第3代翼状胬肉成纤维细胞,接种于层黏连蛋白包被培养皿(Ln组)和空白培养皿(对照组)中,倒置显微镜观察细胞生长状态,MTT法检测细胞增殖状态,作出生长曲线;免疫荧光法检测α-SMA在细胞内的表达;RT-PCR法检测TGF-β1和cytokeratin mRNA的表达水平.结果:Ln组成纤维细胞数量少于对照组;3～7 d,Ln组A570明显低于对照组(0.20 vs 0.28,0.22 vs 0.30,0.28 vs0.34,0.31 vs0.36,0.33 vs 0.36,P＜0.05);α-SMA在对照组细胞内表达良好,在Ln组的表达受到抑制;与对照组相比,Ln组TGF-β1 mRNA的表达下降,cytokeratin mRNA表达增加.结论:层黏连蛋白能抑制翼状胬肉中成纤维细胞的增殖.     

小檗碱调节翼状胬肉成纤维细胞增殖能力的机制研究

目的:探讨小檗碱对体外培养翼状胬肉成纤维细胞增殖能力的影响及可能的作用机制。方法:通过对手术获取的翼状胬肉组织进行培养,获取翼状胬肉成纤维细胞。采用不同终浓度(0、20、40、80μmol/L)小檗碱对细胞进行诱导,检测小檗碱诱导后翼状胬肉成纤维细胞凋亡水平、线粒体膜电位和凋亡相关因子mRNA与蛋白表达水平变化。结果:小檗碱能够以剂量依赖的方式提高体外培养翼状胬肉成纤维细胞线粒体去极化水平、细胞凋亡比率、促凋亡基因Bax和Bad mRNA与蛋白的表达水平,降低Bcl-2 mRNA和蛋白的表达水平。结论:小檗碱可能通过提高体外培养翼状胬肉细胞线粒体去极化水平诱导胬肉细胞发生凋亡。     

γ-干扰素对肿瘤坏死因子α促进牛晶状体上皮细胞增殖的抑制作用

目的　观察γ-干扰素 (γ- interferon,γ- IFN )对肿瘤坏死因子α(tum or necrosisfactorα,TNF-α)所引起体外培养的牛晶状体上皮细胞增殖的抑制作用。方法　牛晶状体上皮细胞原代与传代培养。第 3代培养细胞中添加 TNF-α,浓度为 10 - 2 ～ 10 4μg· L- 1 ,通过甲基噻唑基四唑 (methyl thiazolyl tetrazolium ,MTT)测定法 ,观察 TNF-α对牛晶状体上皮细胞的影响 ,进一步测定γ- IFN对 TNF-α增殖影响的抑制作用。结果　 TNF-α在体外有促进牛晶状体上皮细胞增殖作用并与 TNF-α有关 ,10～ 10× 10 3μg· L- 1 OD值明显升高 ,并以 10 3μg· L- 1 最为明显 ,而γ- IFN可以抑制这一作用。结论　 TNF-α是促进晶状体上皮细胞增殖、参与后囊形成混浊的一个重要的细胞因子。γ- IFN可抑制 TNF-α促牛晶状体上皮细胞增殖作用 ,因而能抑制后发性白内障的形成     

β-catenin在翼状胬肉成纤维细胞中的表达

目的:β-catenin在正常的细胞粘附和wnt信号通路中发挥重要功能,本文探讨其在翼状胬肉组织及成纤维细胞中的表达及TGF-β1对其的影响。方法:通过组织块培养获取正常球结膜和翼状胬肉成纤维细胞并传至第4代,用10μg/LTGF-β1作用于细胞。抗β-catenin抗体对体内取出组织和培养的细胞行免疫组化染色;免疫印迹法检测培养成纤维细胞中β-catenin的表达情况。结果:免疫组化显示翼状胬肉成纤维细胞中β-catenin阳性着色强于正常结膜成纤维细胞。β-catenin在胬肉组织中较多,且多分布于上皮下纤维血管组织,上皮染色较少。体外培养见翼状胬肉成纤维细胞的生长较正常结膜成纤维细胞快、增殖能力强。免疫印迹法显示在翼状胬肉成纤维细胞蛋白中β-catenin的特异性阳性条带灰度值高于正常球结膜成纤维细胞蛋白。TGF-β1能促进翼状胬肉成纤维细胞中的β-catenin蛋白表达。结论:β-catenin在翼状胬肉组织及其成纤维细胞中的表达增高,提示β-catenin与翼状胬肉的发病有关。     

正常球结膜与翼状胬肉成纤维细胞生长增殖状况的对比观察

目的对比观察相同的培养条件下翼状胬肉与正常结膜成纤维细胞的生长增殖状况,对两种成纤维细胞的生长增殖特性作出评价。方法用10%胎生牛血清的RPMI1640培养液,在相同的培养条件下分别培养正常球结膜与初发翼状胬肉组织成纤维细胞;倒置相差显微镜下观察培养的两种成纤维细胞的特点及生长增殖状况。对传第3代的两种成纤维细胞,分别于接种后2、5、8d行噻唑蓝[3-（4,5-dimethyl -2thiazol）-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromid,MTT]比色试验,检测细胞增殖活力（细胞数）。结果翼状胬肉成纤维细胞较正常结膜成纤维细胞生长快,增殖旺盛;MTT检测结果显示：5d翼状胬肉成纤维细胞的细胞总数多于正常结膜成纤维细胞（P〈0.05）,8d更明显（P〈0.01）。结论体外翼状胬肉成纤维细胞的生长、增殖特性明显强于正常结膜成纤维细胞。提示治疗翼状胬肉药物的筛选和疗效评价的实验研究应直接应用翼状胬肉成纤维细胞为研究对象,才能作出较为符合客观实际的评价。     

色素上皮源性因子在眼科研究中的进展

色素上皮源性因子（PEDF）最初是在胎儿视网膜色素上皮（RPE）细胞条件培养基中发现的一种神经营养因子。PEDF属于丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族，是具有神经保护与抑制新生血管的神经营养因子，也是维持角膜、玻璃体无血管状态的主要细胞因子。PEDF的改变与多种眼病相关，尤其是视网膜脉络膜血管性、退行性疾病，也是治疗这类疾病的靶点之一。就PEDF的结构、功能以及在眼科方面的研究作一综述。     

色素上皮细胞衍生因子:一种高效的新生血管抑制因子

色素上皮细胞衍生因子 (pigm ent epithelium- derived factor,PEDF)是最先在视网膜色素上皮细胞培养液中发现的细胞因子 ,属于丝氨酸蛋白酶抑制剂基因家族 ,但不具备抗蛋白酶活性。 PEDF有营养神经效果 ,保护神经元免受快速神经毒性侵害 (如谷氨酸毒性 )作用及“胶质细胞静息”特性。PEDF还能抑制血管内皮细胞移行 ,促进血管内皮细胞凋亡 ,正常角膜、玻璃体中PEDF含量较高 ,在低氧环境中降低。PEDF具有抗新生血管诱导因子的作用 ,目前 PEDF被视为最有效的细胞内新生血管抑制因子之一。可能对治疗神经元损伤和抑制血管生成特别有效。     

糖尿病视网膜病变FGF、EGF、TNF水平及其临床意义

用放射免疫法对20例糖尿病视网膜病变(DR)患者、20例糖尿病眼底正常者(DM)和20名健康者(C组)进行了成纤维细胞生长因子(FGF)、上皮细胞生长因子(EGF)、肿瘤坏死因子(TNF)的测定。结果表明：DM组和DR组的FGF、EGF和TNF均高于C组(P<0.05～0.01)；单纯型DR与DM组的FGF、EGF和TNF差异无显著性；增殖型DR的FGF、EGF和TNF显著高于单纯型组，FGF、EGF和TNF有随着DR的进展而逐渐升高的趋势。提示DR的发生、发展与FGF、EGF和TNF升高有关。 (中华眼底病杂志，1995，11：232-234）     

生长因子与角膜内皮细胞

角膜内皮细胞是维持角膜透明的关键细胞成分,角膜内皮细胞密度降低和形态异常可导致内皮细胞功能失代偿而降低视力。在伤口愈合过程中,生长因子可增加角膜内皮细胞密度槿刺激内皮细胞再生,促进伤口愈合。肽类生长因子影响着多种细胞生理过程,包括细胞增殖,分化,移行和存活。     

圆锥角膜组织中EGF和bFGF变化免疫组织化学的研究

目的 观察正常人及圆锥角膜中表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)的表达，探讨EGF和hFGF在圆锥角膜中的变化。方法 采用免疫组织化学SABC法检测角膜组织中EGF、bFGF的表达，结果 在圆锥角膜上皮层、Bowman层和内皮层有EGF表达，EGF比正常角膜的表达强；在圆锥角膜的上皮层、实质层和内皮层可见bFGF的阳性表达，圆锥角膜的基质瘢痕区bFGF有较强的阳性表达。结论 圆锥角膜组织中EGF水平增高，促进上皮细胞和基质细胞的DNA合成，从而使组织愈合。bFGF表达增强可以促进角膜上皮、基质细胞和内皮细胞的增殖。     

水蛭素对血小板源性生长因子及受体的影响

目的 通过观察水蛭素对血小板源性生长因子(PDGF)及受体(PDGF-R)的影响,深入探讨水蛭素防治增生性玻璃体视网膜病变(PVR)形成的机制。方法 利用穿孔性眼外伤的动物模型,分别给予10U/ml和20U/ml的水蛭素于玻璃体腔内,用酶联免疫法(ELISA)测定玻璃体中PDGF的含量,用免疫组织化学法观察玻璃体腔内细胞增殖相关抗原(Ki-67)、白介素1β转换酶(interlukin 1-β converting enzyme,ICE)和PDGFR的表达。结果 造模后3d和28dPDGF的检测结果显示生理盐水对照组(434.88±56,75,457.17±74.39)与剂量Ⅰ组之间(285.95±54.04,322.50±106.93)差异有显著性(P<0.01);PDGF-R的检测结果显示生理盐水对照组(147.82±14.95,141.05±19.03)与剂量Ⅰ组(87.27±20.80,2.57±16.75)和剂量Ⅱ组(97.67±11.37,68.26±5.6)之间差异有显著性(P<0.01);ICE的检测结果显示生理盐水对照组(38.51±3.04,39.74±3.78)与剂量Ⅰ组(57.01±10.02,57.61±9.04)和剂量Ⅱ组(56.22±4.95,57.45±8.25)之间差异有显著性(P<0.01)。Ki-67检测结果显示造模后28d生理盐水对照组(127.83±128.72)与剂量Ⅰ组(51.67±18.61)和剂量Ⅱ组(51.50±31.55)之间差异有显著性(P<0.01和P<0.05)。结论 水蛭素通过抑制PDGF的分泌和PDGF-R的激活而抑制玻璃体腔内细胞的     

糖尿病视网膜病变的炎症机制

糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是50岁以上人群主要致盲眼病之一.研究表明,DR的发生与非酶糖基化作用、蛋白激酶C激活、免疫/炎症、多元醇旁路、生长因子、氧化应激、RAS系统及血流动力学改变等假说有关,但其确切机制尚未完全阐明.近年来,炎症机制在DR发生发展中的作用一直受到国内外学者的关注,而肿瘤坏死因子α (TNFα)、黏附分子及血管内皮生长因子(VEGF)、色素上皮衍生因子(PEDF)在糖尿病视网膜病变发病机制中的作用更是研究的热点.本文就炎症因子及炎症相关因子在DR发病机制中作用的研究现状进行综述.     

PDGF抗体和VEGF抗体预防增生性玻璃体视网膜病变

目的评价血小板源性生长因子（PDGF）抗体和血管内皮生长因子（VEGF）抗体对实验性增生性玻璃体视网膜病变（PVR）的预防作用。方法将兔制成PVR模型，将一定浓度的PDGF抗体、VEGF抗体及BSS液分别在当时及第7d注入兔眼的玻璃体腔，每日观察兔眼情况，处死兔子做眼病理切片及免疫组织化学染色。结果间接检眼镜观察可见对照组与实验组均出现视网膜脱离。玻璃体腔内注药后第21d、28dPVR分级实验组与对照组差异有统计学意义（P〈0．05），在制作动物模型时直接注入和第7d时注入差异无统计学意义（P〉0．05）。病理检查所见与间接检眼镜所见相符。免疫组织化学染色计算阳性细胞百分率，亦得出相同结果。结论玻璃体腔内注入PDGF抗体、VEGF抗体均可预防PVR的进展，注药时间对于PVR的发展无明显影响。     

VEGF和PEDF在增殖性糖尿病视网膜病变中的研究进展

增殖性糖尿病视网膜病变( proliferative diabetic retinopathy,PDR)是一种以眼内新生血管形成为特征的糖尿病并发症。眼内新生血管的形成是当今世界主要致盲原因之一。血管内皮生长因子( vascular endothelial growth factor,VEGF)与色素上皮衍生因子( pigment epithelium-derived factor,PEDF)作为眼内新生血管形成最主要的细胞因子,近年来成为研究热点。本文就VEGF和PEDF在PDR中的研究进展进行综述。     

胎盘生长因子在早产儿视网膜病变纤维血管膜中的表达

目的　研究胎盘生长因子（ｐｌａｃｅｎｔａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＰＬＧＦ）在早产儿视网膜病变（ｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙｏｆｐｒｅｍａｔｕｒｉｔｙ,ＲＯＰ）纤维血管膜的血管内皮细胞、周细胞、巨噬细胞和胶质细胞中的表达和分布。方法　玻璃体切割术中取ＲＯＰ患者视网膜表面纤维血管膜保存备用,冰冻切片,ＨＥ染色、免疫组织化学染色和免疫荧光染色观察ＰＬＧＦ在纤维血管膜上的表达和分布。结果　ＨＥ染色及免疫组织化学染色结果显示ＰＬＧＦ在纤维血管膜中可见阳性表达。免疫荧光双标记法实验结果显示纤维血管膜的ＰＬＧＦ可能由血管内皮细胞、周细胞、巨噬细胞和胶质细胞表达。结论　ＰＬＧＦ可能参与了ＲＯＰ的发病过程,ＰＬＧＦ在ＲＯＰ发病中的作用及其分子机制需要进一步研究。