羊膜移植对兔角膜碱烧伤早期MMP-2和TIMP-2表达的影响

目的研究羊膜移植在兔角膜碱烧伤早期治疗中的作用机制。方法对60只新西兰白兔随机分为碱烧伤组、羊膜移植组及正常对照组,实验组建立角膜碱烧伤模型,羊膜移植组于烧伤后30min实施羊膜移植手术。术后14、30、60d,观察分析角膜病理组织学改变;并应用计算机图像分析系统对角膜组织中基质金属蛋白酶-2（Matrix metalloproteinase-2,MMP-2）和基质金属蛋白酶组织抑制剂-2（Tissue inhibitors of metalloproteinase-2,TIMP-2）的表达进行半定量测定。结果羊膜移植组角膜浸润及角膜基质坏死溃疡程度均较同期碱烧伤组为轻,角膜MMP-2的表达显著降低（P〈0.05）,而TIMP-2表达显著升高（P〉0.05）。结论羊膜移植可提高角膜TIMP-2表达的水平并抑制MMP-2的活性,从而在角膜碱烧伤的早期治疗中起到抑制角膜炎症和溃疡的作用。     

基质金属蛋白酶及其抑制剂在眼表疾病发病机制研究中的进展

基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)是一组降解细胞外基质的内源性蛋白酶系,其与基质金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMPs)组成MMPs/TIMPs系统,降解和重塑细胞外基质.MMPs/TIMPs系统表达水平的失衡与眼病的发生发展密切关联,尤其是在各类眼表疾病中.目前认为结膜成纤维细胞中MMP-1、MMP-3及MMP-9过度表达是引起MMPs与TIMPs之间失去平衡的关键因素.MMPs与TIMPs之间失去平衡,使胶原纤维融解,弹力纤维变性减少,导致球结膜基质和Tenon囊的过度降解,引起眼表泪液异常的病理循环.眼表泪液的异常破坏了眼表环境的稳定性,参与多个眼表疾病如干眼、结膜松弛症、翼状胬肉、角膜炎等的病理变化.     

基质金属蛋白酶在视网膜前膜的表达和意义

目的 研究增生性玻璃体视网膜病变（PVR）视网膜前膜中基质金属蛋白酶（MMPs)的表达。探讨MMPs在PVR病理过程中的作用。方法 经扁平部玻璃体切割术（PPV）和膜剥离术取得PVRC3-D3级视网膜前膜21例，免疫组织化学法分析MMP-2和MMP-9在PVR视网膜前膜的表达，同时进行视网膜色素上皮细胞（RPE）和巨噬细胞染色。结果 21例PVR视网膜前膜MMP-2阳性染色15例，MMP-9阳性8例，RPE细胞表达18例，巨噬细胞表达9例。结论 PVR视网膜前膜有MMP-2和MMP-9表达，可能主要由RPE细胞和巨噬细胞分泌，对PVR的发生和发展起重要作用。     

增生性玻璃体视网膜病变增生膜中基质金属蛋白酶及其抑制剂的表达

目的研究增生性玻璃体视网膜病变（proliferative vitreoretinopathy，PVR）增生膜中基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMP）及其抑制剂（tissue inhibitors of matrix metalloproteinases，TIMP）的表达。方法采用免疫组织化学技术的SP法，检测PVR增生膜和正常尸眼神经视网膜标本中MMP-2、MMP-9和TIMP-1的表达，光镜观察染色结果。结果41例PVR增生膜标本HE染色切片光镜下可见视网膜色素上皮（retinal pigment epithelial，RPE）细胞、神经胶质细胞、成纤维细胞、巨噬细胞等细胞成分，它们被大量细胞外基质所包绕。视网膜前膜中以RPE细胞为主要增生细胞，视网膜下膜中以神经胶质细胞为主要增生细胞。免疫组织化学染色结果显示：（1）25例PVR增生膜标本表达MMP-2，11例PVR增生膜标本表达MMP-9，14例PVR增生膜标本表达TIMP-1；（2）22例视网膜前膜标本表达MMP-2，3例视网膜下膜标本表达MMP-2，差异有显著性（P〈0．05）；（3）正常尸眼神经视网膜标本中未检测到MMP-2、MMP-9及TIMP-1的表达。结论细胞外基质与PVR增生膜的形成关系密切，MMP-2、MMP-9及TIMP-1在PVR形成过程中发挥重要作用，通过合理地调控MMP和TIMP的平衡，为预防和治疗PVR提供可能性理论依据。     

人视网膜下膜中ICAM-1及MMP-2的免疫组织化学研究

目的观察增生性玻璃体视网膜病变的视网膜下膜中粘附分子（intercellular adhesion molecules-1，ICAM-1）及基质金属蛋白酶（matrix metculoproteinase-2，MMP-2）的表达。方法用免疫组织化学法对15例复杂视网膜脱离行玻璃体切割术时剥离的视网膜下膜进行观察。结果ICAM-1和MMP-2分别在10例和8例视网膜下膜中表达，二者同时在7例视网膜下膜中表达。结论视网膜下膜中有ICAM-1和MMP-2的表达，提示二者在增生性玻璃体视网膜病变的发生发展中有一定作用。     

基质金属蛋白酶及其抑制剂与后发性白内障发生的关系

基质金属蛋白酶(MMPs)是一类依赖金属锌离子存在而获得催化活性的锌金属蛋白酶超家族,由正常组织细胞或肿瘤细胞合成、分泌,其作用较为广泛,在创伤愈合和肿瘤发生中起降解细胞外基质的作用.正常机体存在内源性的基质金属蛋白酶抑制剂(TIMPs),可以调节MMPs的活性.根据来源不同,MMPs抑制剂分为:TIMPs、天然MMPs抑制剂和人工合成的MMPs抑制剂.MMPs与TIMPs的表达失衡参与了肿瘤、类风湿性关节炎、后发性白内障(PCO)等病理过程,已有研究证实PCO患者MMP-2和MMP-9表达增加.现将MMPs及其抑制剂的分类、功能特点进行归纳总结,并对其与PCO发生的关系进行综述.     

基质金属蛋白酶及其抑制剂与角膜

基质金属蛋白酶（ＭＭＰｓ）是降解细胞外基质成分的主要酶簇，其活性及过度表达与多种角膜疾病有关。本文综述了ＭＭＰｓ的分类、特性、各种角膜疾病中的表达，以及表达与活性调节机制，并总结了各种抑制剂在体内及体外对ＭＭＰｓ的抑制效果。     

MMP/TIMP系统与玻璃体视网膜疾病的研究进展

基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）和基质金属蛋白酶组织抑制剂（tissue inhibitor of metalloproteinabe，TIMP）组成MMP／TIMP系统，是降解和重塑细胞外基质最重要的酶系统，在玻璃体液化及后脱离、增生性玻璃体视网膜病变、增生性糖尿病视网膜病变、老年性黄宽变性的发生发展中起重要作用。近年来，MMP／TIMP系统和玻璃体视网膜疾病关系的研究取得了较大进展，以MMP／TIMP系统为靶向的干预疗法受到重视。[眼科新进展2007；27（2）：155-158]     

IL-1α对体外培养的牛小梁网细胞MMPs及TIMPs表达的影响

目的 观察白细胞介素-1α（IL-1α）对体外培养的牛小梁网细胞分泌基质金属蛋白酶（MMPs）和基质金属蛋白酶组织抑制剂（TIMPs）的影响，探讨IL-1α降低眼压的机制。方法 采用酶谱分析法和反向酶谱分析法检测牛小梁网细胞MMP和TIMPs的分泌，并观察IL-1α对MMP和TIMPs分泌的调节作用。结果 体外培养的牛小梁细胞分泌MMP-2、MMP-3、MMP-9和TIMP-1；IL-1α对MMP-2、MMP-3、MMP-9的分泌有促进作用，且呈时间和浓度依赖性，其中以IL-1α对MMP-3的分泌促进作用最强；IL-1α对TIMP-1的分泌也有微小的增加作用。结论 IL-1α能够显著促进牛小梁网细胞分泌MMPs，打破了MMP／TIMPs的平衡，可能进一步促进小粱网细胞外基质（ECM）的分解，增强房水流动性。     

MMP-2、MMP-9的表达与脉络膜黑色素瘤微血管密度及肿瘤转移的关系

目的 探讨恶性脉络膜黑色素瘤细胞中基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2,MMP-2） 和基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）的表达特征及其与血管生成的关系及预后意义.方法 采用免疫组织化学SP法检测56例（56眼）脉络膜黑色素瘤细胞中MMP-2、MMP-9的表达特征,以CD34标记检测微血管密度（microvessel density,MVD）并分析其与肿瘤血管生成及肿瘤转移的关系.结果 56例患者中MMP-2和MMP-9的表达阳性率较高,分别为91.07%和96.42%,两者的表达强度呈正相关关系（r=0.45,P=0.001）;有转移病例出现MMP-2、 MMP-9高表达的比例明显高于无转移病例（P=0.004,P=0.006）;MMP-2 、MMP-9高表达者的MVD明显大于其低表达者（P=0.025,P=0.021）.结论 MMP-2和MMP-9的过度表达可能与脉络膜黑色素瘤血管生成及肿瘤转移有关.     

Expression of MMP-2 and MMP-9 in retinoblastoma and their significance

AIM: To investigate the expression of matrix metallopr- oteinase-2 (MMP-2) and matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) in retinoblastoma (Rb), and their relationships with tumor development stage. METHODS: Immunohistochemical technique was used to detect the expression of MMP-2 and MMP-9 in 41 cases of paraffin embedded Rb samples. Quantitative analysis of the expression of MMP-2 and MMP-9 was assessed by HMIAS-2000 Color Pathologic Analysis System. The differences of the expression of MMP-2 and MMP-9 in each clinical and pathological stage were analyzed statistically. RESULTS: In all the 41 Rb specimens, MMP-2 and MMP-9 expression was found in tumor cells. The expression of MMP-2 and MMP-9 was significantly higher in tumors with optic nerve invasion than in tumors without optic nerve invasion (P <0.05); the expression of MMP-2 and MMP-9 was significantly higher in tumors of extra-ocular stage than in tumors of glaucomatous stage or intra-ocular stage(P<0.05). CONCLUSION: MMP-2 and MMP-9 exist in retinoblastoma cells. The level of MMP-2 and MMP-9 is related to optic nerve invasion and clinical stage of Rb, which suggests the expression of MMP-2 and MMP-9 could be connected to the invasion and development of tumor cells. Further research is needed for deeper understanding of the biological behavior and better evaluation of the prognosis of Rb.     

MMP-2和MMP-14在视网膜母细胞瘤中的表达及意义

目的:探讨视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,Rb)中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和MMP-14的表达及其与临床病程的关系。方法:应用免疫组织化学SP法检测50例Rb组织中MMP-2和MMP-14的表达;用HMIAS-2000型全自动医学彩色图像分析系统测量其平均光密度值。统计学方法比较不同临床和病理阶段Rb表达MMP-2和MMP-14的差异。结果:患者50例Rb组织切片中MMP-2阳性表达38例,占76%;MMP-14的阳性表达41例,占82%;有视神经浸润的肿瘤MMP-2和MMP-14表达水平明显高于无视神经浸润的肿瘤(P<0.01),处于眼外期的肿瘤MMP-2和MMP-14的表达水平明显高于眼内期和青光眼期的肿瘤(P<0.01);Rb中MMP-2和MMP-14的阳性表达水平呈密切相关(P<0.01)。结论:MMP-2和MMP-14的表达水平与视神经浸润和临床分期存在密切的关系,提示其表达水平与该肿瘤的浸润与发展有关。     

塞来昔布与羊膜匀浆提取液对兔角膜热烧伤后角膜新生血管面积及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响

目的 比较塞来昔布与羊膜匀浆提取液对兔角膜热烧伤后角膜新生血管(comeal neovascularization,CNV)面积及基质金属蛋白酶-2(matrix metallo-proteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达的影响,为临床上塞来昔布治疗CNV提供理论依据.方法 建立36只兔角膜热烧伤动物模型,随机分为3组:阴性对照组、羊膜匀浆提取液组、塞来昔布组,每组12只,8只用于观察,4只用于取材.各组兔均于造模后第1天开始球结膜下注射,至造模后第14天;阴性对照组注入90g· L-1生理盐水0.1 mL,羊膜匀浆提取液组注入羊膜匀浆提取液0.1 mL,塞来昔布组注入8 mg·mL-塞来昔布溶液0.1 mL.对比热烧伤后4d、7d、14 d在裂隙灯显微镜下所观察到的各组角膜的组织形态及新生血管的生长状况,并测算CNV面积;各组均于热烧伤后第7天随机取4只兔完整角膜,行免疫组织化学染色并用计算机图像分析系统检测MMP-2、MMP-9的表达.结果 角膜热烧伤后第4天,阴性对照组、羊膜匀浆提取液组、塞来昔布组都可见不同程度的角膜水肿,角膜缘血管充血扩张,新生的小血管芽呈毛刷状,垂直角膜缘切线向内生长.热烧伤后4d、7d、14 d,CNV面积阴性对照组为(11.32±1.11)mm2、(38.49±4.64)mm2、(43.30±4.39) mm2;羊膜匀浆提取液组为(9.69±1.30) mm2、(31.15±4.85) mm2、(37.19±5.27) mm2;塞来昔布组为(8.47±1.20) mm2、(30.31±4.93) mm2、(36.69±3.54)mm2.热烧伤后4d、7d、14 d,阴性对照组的CNV面积均明显大于羊膜匀浆提取液组和塞来昔布组,差异均有统计学意义(均为P＜0.05);羊膜匀浆提取液组的CNV面积与塞来昔布组相比,差异均无统计学意义(均为P＞0.05).热烧伤后第7天MMP-2和MMP-9表达阴性对照组大于羊膜匀浆提取液组和塞来昔布组,差异均有统计学意义(均为P ＜0.05);羊膜匀浆提取液组与塞来昔布组相比,差异均无统计学意义(均为P ＞0.05).结论 塞来昔布与羊膜匀浆提取液均能有效抑制角膜热烧伤后新生血管的生长,可能与其抑制MMP-2、MMP-9在热烧伤后角膜中的表达有关.     

热烧伤后的人角膜组织中基质金属蛋白酶-2、-9表达的研究

目的:研究热烧伤后人角膜组织中的基质金属蛋白酶-2、-9(MMP-2、MMP-9)的表达与分布,探讨其含量的变化与角膜病变的相关性。方法:收集铁水烫伤后行角膜移植患者病变角膜19例,正常角膜组织10例。应用免疫组化染色方法检测MMP-2、MMP-9在角膜各层次中的分布与表达,应用图像分析系统进行半定量分析。结果:MMP-2、MMP-9在正常角膜组织中均未见阳性表达,平均灰度值分别为117.8188±3.7967,119.1902±0.9679。热烧伤后角膜组织中,MMP-2的阳性表达主要分布于角膜基质层,平均灰度值为94.4197±5.8327;MMP-9的阳性表达主要分布于角膜上皮层和基底膜附近,平均灰度值为115.0188±0.7149。将正常角膜组织中和病变角膜组织中两种酶的平均灰度值分别进行统计学分析,P值均<0.05。随着病程的发展,在病变角膜组织中MMP-2的阳性表达先呈现逐渐增高趋势14d后逐渐下降,角膜基质层溶解达高峰时阳性表达的量最高;MMP-9在患病初期角膜基底膜病变明显时表达较高,后期逐渐下降。结论:MMP-2、MMP-9对热烧伤后的人角膜组织病变的发展起重要的作用。MMP-2主要参与角膜基质层的损害,MMP-9主要参与角膜上皮层和基底膜的损害。     

翼状胬肉基质金属蛋白酶表达的意义

目的:研究基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP)在翼状胬肉中的表达。方法:采用免疫组织化学法,检测翼状胬肉与正常结膜组织中MMP-2,MMP-7和MMP-9的表达,比较两者表达的差异。结果:MMP-2,MMP-7和MMP-9在翼状胬肉各层组织中均有不同程度的表达,MMP-2和MMP-7在血管内皮层及鳞状上皮层中表达强阳性,MMP-9在血管内皮层中表达阳性。MMP-2,MMP-7和MMP-9在正常结膜组织中表达阴性或弱阳性。翼状胬肉组织中MMP-2,MMP-7和MMP-9的表达强于正常结膜组织,差异有显著性(P<0.01)。结论:MMP高表达可能与翼状胬肉的发生及复发有关。     

TGF-beta1 stimulates production of gelatinase (MMP-9), collagenases (MMP-1, -13) and stromelysins (MMP-3, -10, -11) by human corneal epithelial cells

Matrix metalloproteinases (MMPs) have been implicated in the pathogenesis of ocular surface diseases. This study investigated the regulated expression of gelatinases (MMP-2 and -9), collagenases (MMP-1 and -13) and stromelysins (MMP-3, -10, and -11) by TGF-beta1 in cultured human corneal epithelial cells. Primary human corneal epithelial cell cultures were grown to confluence and treated with different concentrations (0.1, 1.0, 10 ng ml(-1)) of TGF-beta1 in serum-free medium for 6-24 hr. Total RNA was isolated from cultured cells with or without TGF-beta1 treatment for 6 hr and subjected to semi-quantitative RT-PCR and Northern hybridization. Conditioned media were collected from cultures with or without TGF-beta1 treatment for 24 hr to evaluate the MMP production by ELISA and activity assays. Semi-quantitative RT-PCR revealed that the expressions of MMP-9, -1, -13, -3, -10 and -11 mRNA were up-regulated by TGF-beta1 in a concentration-dependent fashion, while MMP-2 and MMP-14 production did not change. Northern hybridization confirmed these findings. Gelatin zymography, MMP ELISA and activity assays showed concentration-dependent stimulated production and activity of MMP-9, -1, -13, -3 and -10 protein in the conditioned media of cultures treated for 24 hr with TGF-beta1. In conclusion, our results demonstrate that TGF-beta1 stimulates the expression and production of gelatinase (MMP-9), collagenases (MMP-1, -13) and stromelysins (MMP-3, -10, -11) in human corneal epithelial cells. These findings suggest that TGF-beta1 may play a role in the pathogenesis of MMP mediated ocular surface diseases, such as sterile corneal ulceration.     

促红细胞生成素对光损伤后视网膜色素上皮层基质金属蛋白酶表达的影响

背景 近年来,随着眼科光学诊疗器械和显微手术应用的增多,各种器械的光源所导致的视网膜损伤等问题倍受关注,研究视网膜光损伤可为临床治疗相关疾病提供参考. 目的 研究小鼠光损伤后视网膜色素上皮(RPE)层基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9表达的变化,探讨促红细胞生成素(EPO)对小鼠视网膜光损伤的治疗作用及其相关机制.方法 将52只SPF级BALB/c小鼠采用抽签法随机分为正常对照组4只、单纯光照组24只和EPO预处理组24只,后两组小鼠在自制光照箱内用6000 lx弥散白光照射4h以建立光损伤动物模型.单纯光照组接受6000 lx白光照射4h,EPO预处理组小鼠腹腔注射rhEPO 5000 U/kg(商品单位)后,接受6000 lx白光照射4h.光照后6、12、36、72、96 h和7d采用免疫组织化学法检测各组小鼠RPE中MMP-2和MMP-9的表达.结果 单纯光照组小鼠视网膜组织病理学改变出现早且明显,光照后RPE细胞出现不同程度的水肿和结构紊乱,且随着光照后时间的延长,形态异常的细胞数增加,但EPO预处理组在光照后7d未发现类似改变.免疫组织化学法检测显示,正常BALB/c小鼠RPE层MMP-2低表达,单纯光照36 h后,RPE层可观察到大量MMP-2阳性表达细胞,但同一时间点EPO预处理组阳性表达量(A值)明显下降.3个组和不同时间点MMP-2的表达量差异均有统计学意义(F分组=3.68,P=0.04;F时间=9.13,P=0.00).MMP-9免疫组织化学法检测显示,正常RPE层中未见MMP-9的阳性表达,单纯光照6h后,MMP-9开始表达,12h时达高峰并维持高表达状态,96 h后表达量开始下降;EPO预处理组MMP-9表达趋势同单纯光照组,但各时间点MMP-9的表达量均较单纯光照组减少.3个组和不同时间点MMP-9的表达差异均有统计学意义(F分组=3.61,P=0.04;F时间=16.91,P=0.00). 结论 MMP-2、MMP-9在视网膜光损伤过程中发挥着重要作用,推测EPO可能通过抑制MMP-2、MMP-9的表达发挥对视网膜的保护作用.     

牛磺酸对大鼠视神经损伤后MMP-2和MMP-9表达的促进作用

目的观察视神经损伤后基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP)-2和MMP-9的表达及牛磺酸对其表达的影响,探讨牛磺酸在视神经再生修复方面的作用。方法 84只大鼠随机分为4组,正常组(12只)不作处理,对照组、预治疗组、治疗组(每组24只)建立大鼠视神经不完全损伤模型,预治疗组于造模前3d、治疗组于造模后1h开始每天1次给予体积分数5%牛磺酸腹腔注射,对照组造模后1h每天1次给予等量蒸馏水腹腔注射。各组分别于伤后3d、7d、14d、28d取视神经采用免疫组织化学法检测MMP-9平均光密度值,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测MMP-2mRNA。结果对照组、预治疗组、治疗组视神经损伤后MMP-9和MMP-2mRNA的表达较正常组均增高,预治疗组及治疗组与对照组相比,各时间点MMP-9和MMP-2mRNA的阳性表达均明显升高(均为P<0.05)。在视神经损伤后3d时预治疗组MMP-9光密度值为39.53±4.05、MMP-2mRNA灰度值为1.746±0.268,其阳性表达与治疗组的MMP-9光密度值32.96±3.62、MMP-2mRNA灰度值1.303±0.289相比均明显增高(均为P<0.05),其后两组相近,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论视神经损伤后MMP-2和MMP-9的表达增强,牛磺酸治疗可以提高视神经组织中MMP-2、MMP-9的表达,对视神经损伤后的再生修复有一定的促进作用。     

GM6001对碱烧伤角膜组织中基质金属蛋白酶表达及活性的影响

目的 检测正常和碱烧伤后不同时间角膜组织中明胶酶(MMP-2，MMP-9)和胶原酶(MMP-1)的表达，探讨在角膜融解发生中的作用．方法 兔角膜碱烧伤20眼，分为对照组和GM600l治疗组，于伤后12、24、48、72h，1、2周和1个月取材，酶谱法检测角膜组织中明胶酶MMP-2、MMP-9的表达，Western blot检测胶原酶MMP-1的表达。结果 在正常兔角膜中，仅检测到微弱的明胶酶原MMP-2，碱烧伤后1周后开始明显升高，至烧伤后1个月维持较高水平，并在2周时出现MMP-2活性酶的表达，并持续至烧伤后1个月。明胶酶MMP-9在正常角膜组织中检测不到，但烧伤后24h开始表达，于烧伤后1周达到最高，然后逐渐下降，至伤后1个月已检测不到。胶原酶MMP-1在正常组织中检测为阴性，从伤后24h开始升高，1个月内无下降。GM6001治疗组角膜组织MMP-2、MMP-9及MMP-1的表达均明显低于对照组。结论 基质金属蛋白酶参与碱烧伤角膜组织的融解，GM6001可抑制MMPs的活性，进而抑制角膜融解的发生。