中国Leber遗传性视神经病变14484位点突变的家系分析

目的:了解我国Leber遗传性视神经病变(Leber’shereditaryopticneuropathy,LHON)线粒体DNA(mtDNA)14484位点突变患者的发病率和临床特征。方法:对来自117个家系的119例临床确诊或疑诊LHON的患者进行mtDNA检测。对3例证实为14484位点突变的家系做深入调查并收集相关病史及临床资料,抽取15例家属的血样进行mtDNA检测。结果:存在线粒体DNA突变的62例(62/119,52.1%)中,14484位点突变仅3例(4.8%)。该3例3个家系56例中,28例有眼部症状,外显率50%。发病经过和临床表现类似11778位点突变的LHON,但其中视力恢复者17例(60.7%)。15例家属的血样检测再次证实为14484位点突变。结论:我国LHON患者中14484位点突变者少见,其临床表现与11778位点突变者相似,惟视力恢复率高。     

中国人Leber遗传性视神经病变线粒体DNA突变的主要类型和临床特征

目的 探讨国人Leber遗传性视神经病变（LHON）患者线粒体DNA(mtDNA)突变的主要类型和临床特征。 方法 对来自117个家系的119例双眼视神经疾病患者分2组进行基因检测，A组37例为临床确诊LHON患者，B组82例属可疑LHON患者。2组均采用单链构像多态分析，采用突变特异性引物多聚酶链反应确定11778位点, 采用序列分析法确定3 460及14484位点。对检测结果为11778位点突变的LHON患者，收集其病史和临床资料。 结果 A组中11778位点突变和14484位点突变者分别为33例（89.2%）和3例（8.1%），B组中仅有26例（31.7%）11778位点突变者。2组均未检测到3460位点突变者；所有11778位点突变者均有特征性临床表现：中心视力急性或缓慢下降，不伴眼球疼痛，多在10～25岁发病，视野检查 结果显示中心或旁中心暗点等，视力恢复率为8.6%～11.6%。 结论 我国LHON患者中11778位点突变率高，临床特征与白种人11778位点突变LHON患者相似。 （中华眼底病杂志，2004，20：78-80）     

Leber遗传性视神经病变11696位点突变的家系分析

目的了解我国Leber遗传性视神经病变（Leber’s Hereditary Optic Neuropathy，LHON）线粒体DNA（mtDNA）11696位点突变病人的临床特征。方法对来自51个家系的54例临床确诊或疑诊LHON的病人进行mtDNA检测，进行全基因排序分析。结果对3例证实为11696位点突变的家系做深入调查并收集相关病史及临床资料。3位先证者均是家系中唯一发病者，发病经过和临床表现类似11778位点突变的LHON。在随防中，有一例先证者视力恢复至1．0，其余2例视力无变化。结论LHON病人中11696位点突变者少见，其临床表现与11778位点突变者相似，预后差异大。     

Leber氏病的线粒体研究

目的了解Leber氏遗传性视神经病变(Leber's hereditary optic neuropathy,LHON)相关的线粒体DNA原发性突变基因检测结果,探讨该项检查的临床意义.方法采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR),检测先证者及其母系血缘亲属外周血DNA中提取的线粒体DNA的3 460位点,11778位点.结果本组临床确诊患者的DNA均表现为11 778位点突变,未发现3 460位点突变.结论Leber病发病机制为mtDNA点突变,线粒体DNA的检测分析为确立LHON提供了诊断依据,尤其对无家族史或原因不明的双侧性视神经炎的患者更具有诊断价值.并为其它神经性遗传病的研究提供了技术支撑.     

T14502C突变位点在Leber遗传性视神经病变发生发展中的作用

目的分析T14502C突变位点在Leber遗传性视神经病变(Lebers hereditary optic neuropathy,LHON)发生发展中的作用。方法对15例家系成员进行视力、眼压、裂隙灯、眼底、色觉及眼底荧光素血管造影等眼科检查;对以上成员进行高盐法线粒体DNA提取,针对目前公认的3个原发性突变位点G11778A、T14484C、G3460A进行PCR,扩增产物纯化后进行双向测序。结果 15例家系成员中,10例同时携带有G11778A和T14502C两个突变位点,其中的3例为LHON患者。平均发病年龄13岁,均为男性且均无视力恢复。结论与单独携带G11778A位点的中国家系相比,同时携带G11778A和T14502C位点可能导致家系成员LHON发病年龄偏低以及更加不良的视力预后。     

Leber遗传性视神经病变患者G11778A位点突变与临床预后的关系

背景 Leber遗传性视神经病变是一种典型的母系遗传性疾病,已经发现线粒体的多个突变可以导致该病的发生. 目的 报道2个携带线粒体G11778A位点突变的Leber遗传性视神经病变(LHON)家系及其临床预后. 方法 对在郑州大学第一附属医院眼科收集到的2个LHON家系40人进行家系分析和基因检测.2个家系成员中包括母系成员28人,其中LHON病患者10例,作为研究组,母系男性成员的后代及配偶2例作为对照组.抽取受试者外周血2 ml,常规酚-氯仿-异戊醇法抽提外周血基因组DNA,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增目的基因,对受试者基因进行测序,对3个常见突变位点G3460A、G11778A、T14484C进行检测和筛查. 结果 本研究中的2个家系所有母系成员(包括患者)均携带G11778A位点突变,家系内对照者未携带该突变位点.所有的家系成员未携带G3460A和T14484C位点的原发突变.这2个家系中的LHON患者视力均等于或低于0.1,未见有视力自行恢复者. 结论 本研究2个家系患者均携带G11778A点突变,视力预后较差.     

Leber遗传性视神经萎缩基因突变比率实验研究

目的 探讨LHON线粒体基因突变比率对疾病发生发展的影响.方法 利用线粒体荧光比值与量化相关性建立线性关系,对6个G11778A突变位点的Leber病家系44例成员进行外周血突变与野生线粒体荧光比值的测定.并分析患者视力损害程度与线粒体突变比率之间的相关性.结果 母系成员中纯突变型外显率远高于杂合子型,外周血中突变型线粒体含量越高患者发病几率越大,患者视力损害程度与线粒体突变比率无相关性.结论 外周血线粒体突变比率检测对Leber家系外显率的推测有重要意义.     

遗传性Leber视神经病变家系致病基因突变分析

目的 探讨遗传性Leber视神经病变(LHON)家系的致病基因突变位点.方法 家系调查研究.对LHON家系成员进行临床检查,抽取部分家系成员外周血提取基因组DNA,应用聚合酶链反应(PCR)和DNA序列测定法,检测家系成员线粒体DNA上的突变位点.结果 该家系3代14例成员中共有7例患者,其中男性2例,女性5例,家系图分析符合母系遗传特征.对其中4例患者及3例未发病家系成员进行线粒体DNA突变检测,显示4例患者及2例未发病家系成员携带G11778A位点突变.结论 线粒体DNA的G11778A突变位点是导致该家系患者发病的致病基因.对尚未发病的基因突变携带者进行早期干预治疗,有可能延缓或阻止疾病的发生与发展.     

全血样等位基因特异性聚合酶链反应法筛查Leber遗传性视神经病变线粒体DNA G11778A位点突变

目的建立全血样等位基因特异性聚合酶链反应(PCR)法快速筛查Leber遗传性视神经病变(LHON)患者线粒体DNA G11778A位点突变。方法采用直接以全血样为模板的等位基因特异性PCR法检测14例阳性对照和10例阴性对照血样。同时对22例血样进行双盲检测。 结果24份对照血样检测结果表明该方法的准确率为100%,而且以全血样为模板的PCR特异性优于以纯化DNA为模板的。双盲检测22例血样发现7例阳性结果和15例阴性结果,与预期结果相一致。结论该方法简便、快速、准确、经济,非常适合临床基因诊断线粒体DNA G11778A位点突变的LHON患者,具有重要的临床推广应用价值。     

中国邢台地区Leber遗传性视神经病变分子流行病学调查研究

目的：：初步估测 Leber 遗传性视神经病变( Leber’s hereditary optic neuropathy,LHON)在中国邢台地区的发病率及分子流行病学特点。方法：对2001-12/2014-12就诊于河北省眼科医院(原邢台市眼科医院)的可疑 LHON 患者进行 mtDNA ( mitochondrial DNA)检测,筛选出中国华北南部邢台籍的LHON患者,对这些LHON家系进行详细的随访、家系调查、视力、眼底、色觉、视野等相关临床检查,确诊出这些家系的患病人群,以2010年国家第六次人口普查时邢台地区常住人口为基数,对入组的LHON家系进行统计学分析,粗略地估算出邢台地区Leber遗传性视神经病变的发病率与分子遗传学特点。结果：2001-12/2014-12期间调查了33个LHON家系的4代母系成员463例,确诊中国华北南部邢台籍Leber遗传性视神经病变患者72例,男65例,女7例。其中T3866 C 位点突变1例, G11778 A 位点突变60例, T14484C位点突变8例,G11696A+G11778A位点同时突变2例,G3460A突变1例。以2010年国家第六次人口普查时邢台地区0~64岁常住人口数6592466作为基数,计算出中国邢台地区Leber遗传性视神经病变患病率为1.092/10万(95%CI：0.964/10万~1.22/10万),其中以G11778A位点突变最为常见,G11778A位点的发病率为0.91/10万(95%CI：0.79/10万~1.03/10万)。结论：Leber遗传性视神经病变在中国邢台地区的发病率较高,其患病率的下限约为1.092/10万,其中ND4为突变热点区域,以G11778 A位点突变最为常见,男性患者较女性患者明显多。     

Macular nerve fibers temporal to fovea may have a greater potential to recover function in patients with Leber's hereditary optic neuropathy

PURPOSE: It is known that even after visual loss, younger patients with Leber's hereditary optic neuropathy (LHON) can recover vision. The purpose of this study was to determine the mean age at onset for LHON patients with and without visual recovery who carried the 11778 mutation, and to determine the pattern of central vision recovery. METHODS: Thirty-five LHON patients with the 11778 mutation of mitochondrial DNA who had visited the Keio University Hospital between 1980 and 1999 and were followed for 2 to 20 years, were the subjects of this retrospective study. The patients who had recovered vision were tested by Goldmann perimetry, Humphrey perimetry, and landmark-driven fundus microperimetry with a scanning laser ophthalmoscope (SLO). The fixation status was assessed by SLO microperimetry. RESULTS: Nine of the 35 patients (14 of 70 eyes) demonstrated a recovery of visual acuity to better than 0.3 in at least one eye. The mean age of disease onset was 15.9 +/- 4.6 years in patients with visual recovery and 25.5 +/- 8.9 years in patients without visual recovery. This difference in the mean age at onset was significant (P =.0001; Welch t-test). These 9 patients (14 eyes) showed fenestrated central scotomas in testing by Humphrey 10-2 threshold and SLO microperimetry. The nasal side of the central visual fields had a higher sensitivity than the temporal side in 7 of the 9 patients in Humphrey 10-2 threshold testing. Areas insensitive to 0 dB were detected on the nasal side of the central retina in these patients by SLO microperimetry, and fixation stability was related to the degree of clinical visual acuity. CONCLUSION: The LHON patients with the 11778 mutation and a younger age of onset were more likely to show visual recovery. The findings made by perimetry suggest that the nerve fiber bundles in the nasal field (retina temporal to the fovea) may have a greater potential to recover function in LHON patients.     

Leber遗传性视神经病变一家系的线粒体分子遗传学研究

背景Leber遗传性视神经病变（LHON）是由线粒体DNA（mtDNA）遗传的可致盲眼病,了解DNA突变位点对该疾病发生的影响具有重要意义。目的分析一个Leber遗传性视神经病变家系mtDNA突变与疾病发生之间的关系。方法收集江西省鹰潭市一个LHON家系中72名母系成员进行系谱分析和突变基因筛选,对其中的11例患者、13例突变基因携带者和49名正常者进行常规眼科检查,按照视力损害的程度分级,视力〉0．3者为正常,0．1～0．3者为轻度损害,〈0．05～0．1者为中度损害,〈0．02～0．05者为重度损害,〈0．01者为极重度损害,分析该家系的临床特征。收集受检者周围静脉血2—4ml进行单个核细胞分离,用改进高盐法提取mtDNA,进行PCR扩增,对突变基因位点进行DNA测序。结果突变基因的PCR扩增产物DNA测序结果显示72名受检的家系成员中,有24例同时具有G11778A和T14502C两个突变位点,包括11例LHON患者,其余13名为突变基因携带者,但至今尚未发病,故该家系的LHON外显率不足50％,而其他家系成员未检测到G11778A和T14502C突变位点。11例患者的发病年龄为8～50岁,平均为24．36岁,显著低于13例基因携带者年龄5～72岁,平均40．38岁,差异有统计学意义（t=2．102,P=0．049）。结论该家系成员的线粒体DNAC11778A和T14502C突变是LHON发病的主要原因,原发性mtDNA突变为LHON发病所必需,但其并非充分条件,一个有效的“二次打击”过程同样具有重要的作用。     

Visual recovery in patients with Leber's hereditary optic neuropathy and the 11778 mutation.

Five patients with Leber's hereditary optic neuropathy (LHON) and the 11778 mitochondrial mutation spontaneously recovered 20/40 or better visual acuity in at least one eye after months to years of legal blindness. The patients ranged in age from 9 to 45 years, and the duration of visual loss before recovery ranged from several months to 5.9 years. These patients constitute only about 4% of the 136 affected LHON patients we have studied who also had the 11778 mutation in their mitochondrial DNA. Thus, even though the visual prognosis for most patients with LHON and the 11778 mutation is poor, a few individuals do recover near-normal vision in at least one eye even years after the initial visual loss.     

Leber遗传性视神经病变的临床特征及线粒体突变位点分析

背景 Leber遗传性视神经病变(LHON)是一种线粒体脱氧核糖核酸(mtDNA)变异而导致的母系遗传疾病,其常见的突变位点有m.3460 G＞A,m.11778 G＞A和m.14484 T＞C,其他突变类型较为少见,而了解患者的mtDNA突变位点对于患者的治疗有重要的临床意义. 目的 结合LHON患者的发病特点检测和分析其线粒体突变位点.方法 纳入2010-2014年在北京大学人民医院确诊的无亲缘关系的12例LHON患者,对患者的双眼进行视力、视野、眼前节、视觉诱发电位、眼底等眼科检查.采集患者肘静脉血4 ml,采用PCR法对患者的mtDNA进行扩增并测序,对患者携带的3个常见突变位点和其他突变位点进行分析.结果 12例患者中男11例,女1例;双眼视力同时下降者7例,左眼先发病者3例,右眼先发病者1例.患者左右眼间视力损害程度比较无明显差异.患者近视力为看不到J7者18眼,近视力为J7者3眼,近视力为J6者2眼,近视力为J2者1眼.患者远视力为手动/眼前者1眼,光感者1眼,0.01 ～0.1者18眼,0.12～ 0.3者2眼.患者鼻侧视野严重缺损者7眼,颞侧视野严重缺损者3眼,中央视野严重缺损者8眼.12例患者的mtDNA测序发现,m.3460 G＞A突变者3例,m.11778 G＞A突变者5例,m.14484 T＞C突变者2例,2例患者无上述3个常见位点突变,分别为MT-ND1和MT-ND4L基因的序列突变,其突变位点分别为m.3497 C＞T和m.10663 T＞C. 结论 LHON患者中以男性多见,患者双眼间视力下降的程度不同,多数患眼近视力损害更为严重.视野损害以中心区较为多见.本研究中发现了中国人群中LHON患者的少见线粒体基因m.3497C＞T和m.10663 T＞C位点突变.     

Mitochondrial DNA mutation in Leber's hereditary optic neuropathy.

Leber's hereditary optic neuropathy (LHON) causes acute or subacute central visual loss in healthy young males. Recently, it has been thought to be caused by a single nucleotide change in the ND4 gene in the mitochondrial genome. Mitochondrial DNA (mtDNA) of leukocytes and hair follicle cells from five patients in four families with LHON and nine relatives were analyzed by Sfa NI and Mae III enzyme digestion and DNA sequencing. Loss of Sfa NI site was found in all patients and maternal lineages but not in nonmaternal lineages and normal controls. Mae III digested all the mtDNAs that lost the Sfa NI site. The restriction fragment pattern of polymerase chain reaction (PCR) products exhibited mtDNA heteroplasmy in the hair follicle cells but not in blood cells of the proband in one family. Direct sequencing of PCR-amplified mtDNA fragments encompassing the ND4 gene of the patients disclosed a transition from guanine to adenine at nucleotide position 11778. These results confirm previous reports that a G to A point mutation is associated with LHON and that tissue variability and heteroplasmy of mtDNA exist in some, but not all, LHON patients.     

Increase of mitochondrial DNA in blood cells of patients with Leber's hereditary optic neuropathy with 11778 mutation

AIMS: To investigate the change of mitochondrial DNA (mtDNA) content in Leber's hereditary optic neuropathy (LHON) with 11778 mutation. METHODS: Mitochondrial DNA content in 27 LHON patients with 11778 mutation, 26 asymptomatic maternal relatives, and 23 normal controls was measured using a competitive polymerase chain reaction (PCR) method. RESULTS: The mean relative content of mtDNA (with respect to the beta actin gene) in LHON patients, asymptomatic maternal relatives, and normal controls was 245.5 (162.3), 238.2 (118.4), and 156.5 (61.6), respectively. There was a statistically significant difference between patients and controls and between relatives and controls. However, no statistically significant difference between patients and unaffected relatives was found. There was no statistically significant difference in the relative content of mtDNA between all males and females carrying 11778 mtDNA mutation CONCLUSION: The results suggest that the increase in mtDNA content in LHON patients with 11778 mtDNA mutation may be due to a compensatory effect for respiratory chain defects of mitochondria. However, the increase of mtDNA content is the result rather than the cause of defective mtDNA. It still cannot explain the pathogenesis of LHON.     

Leber''''s遗传性视神经病变分子致病机制研究

Leber’s遗传性视神经病变（Leber＇s hereditary optic neurology，LHON）是一种较常见的引起视神经萎缩的遗传性疾病。该病主要引起双侧中心视力丧失，造成永久性的严重视觉障碍，常常发生在一些即将或已工作或上学的年轻人身上，以及在对该病患者家系中其他成员进行遗传病检查时发现。在一些LHON家系中，视觉障碍的患者呈现母系遗传方式，这表明线粒体DNA（mitochondrial DNA，mtDNA）是该病的分子遗传基础。至今为止，在世界各地不同家系报道中已经发现大约有35个与LHON相关的突变位点，其中ND1 G3460A、ND4 G11T78A、ND6 T14484C为三个公认的原发突变位点，均参与呼吸链复合体I的亚基编码。在不同种族发病统计中，其中大约50％的LHON由三个原发致病突变中的一个所致，尤为G11778A突变为主。引人注意的是，IMON家系携带相同突变的母系成员表现出不同的外显率、表现度（如发病严重程度、发病年龄、视力丧失进展程度）。不完全和不同的外显率以及轻度的生化影响说明mtDNA突变本身不足以产生临床表型，其他因素（如环境、核修饰基因、线粒体单体型等）可能影响LHON的外显率和表型表达。