激活素A、Bax和XIAP在特发性胎儿生长受限患者的表达及意义

目的:探讨特发性胎儿生长受限(IFGR)患者母血和脐血激活素A(ActivinA)及胎盘组织中B细胞淋巴瘤因子相关x蛋白(Bax)和X-连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)的表达及意义。方法:选取剖宫产分娩的IFGR孕妇30例作为实验组,同期因社会因素剖宫产分娩的正常足月孕妇30例作为对照组。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定两组母血、脐血ActivinA水平;免疫组化法检测两组胎盘组织中Bax与XIAP的表达。结果:实验组母血、脐血ActivinA水平(102.659±16.467,57.752±13.498)ng/ml均明显高于对照组(75.927±10.519,29.870±5.992)ng/ml(P<0.05)。Bax、XIAP在胎盘合体滋养细胞中的表达,实验组Bax平均灰度值(146.513±10.611)明显高于对照组(113.672±9.631),差异有统计学意义(P<0.05);实验组XIAP平均灰度值(114.562±5.167)明显低于对照组(144.430±7.311),差异有统计学意义(P<0.05)。实验组母血、脐血中ActivinA水平与胎盘组织中Bax表达均呈正相关(P<0.05),与胎盘组织中XIAP表达均呈负相关(P<0.05);实验组胎盘组织中Bax表达与XIAP表达呈负相关(P<0.05)。结论:母血、脐血中ActivinA升高及胎盘组织中Bax表达增加、XIAP表达降低可能是IFGR发病的重要环节之一。在IFGR中ActivinA可能通过上调Bax的表达、下调XIAP的表达,促进胎盘滋养细胞过度凋亡,影响胎盘的发育和功能,进而影响胎儿生长发育。     

胎盘组织中人类主要组织相容性抗原G mRNA的表达变化与特发性胎儿生长受限发病的关系

目的探讨人类主要组织相容性抗原G(HLA G) mRNA在特发性胎儿生长受限(IFGR)产妇胎盘组织中的表达及其与IFGR发病的关系。方法采用原位杂交法,检测20例IFGR产妇(IFGR组)及28例正常产妇(对照组)胎盘组织中HLA GmRNA的表达水平和表达部位,并对两组产妇的胎盘组织进行病理学观察。结果( 1 )IFGR组产妇胎盘出现病理改变的发生率为75%(15 /20), 主要为慢性绒毛膜炎、胎盘梗死及绒毛发育迟缓;明显高于对照组的18% (5 /28),两组比较,差异有统计学意义(P=0 001)。(2)IFGR组产妇胎盘HLA GmRNA的阳性表达率为45% ( 9 /20),明显低于对照组的79% ( 22 /28 )。两组比较,差异有统计学意义(P= 0 017 )。( 3 )HLA GmRNA的阳性表达部位主要位于胎盘绒毛外细胞滋养细胞及合体滋养细胞的细胞质内,呈紫蓝色的颗粒状沉淀,轮廓清晰。(4)HLA GmRNA表达阴性者,出现胎盘病理改变的例数较HLA GmRNA表达阳性者明显增多(r=-0 638,P=0 008 )。结论IFGR产妇胎盘组织中HLA GmRNA表达水平明显下降,HLA GmRNA的异常表达可能参与了IFGR的发病过程。     

脂肪和胎盘组织肿瘤坏死因子-α表达与妊娠期糖尿病胰岛素抵抗的相关性研究

目的探讨脂肪和胎盘组织中肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)表达与妊娠期糖尿病(gestationaldiabetesmellitus,GDM)及胰岛素抵抗之间的关系。方法采用免疫组化法和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量法检测了50例非GDM孕妇(对照组)及48例GDM孕妇(30例BMI<30kg/m2为Ⅰ组,18例BMI≥30kg/m2为Ⅱ组)脂肪及胎盘组织中TNF-α蛋白和TNF-αmRNA的表达。采用放射免疫法测定各组血清TNF-α水平,并测定空腹血糖、胰岛素水平,计算胰岛素敏感指数(HOMA-ISI)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果(1)Ⅰ、Ⅱ组脂肪组织TNF-αmRNA表达水平分别为0.99±0.23、1.29±0.27,均显著高于对照组(0.86±0.13)(P<0·05,0.01),并且Ⅱ组高于Ⅰ组(P<0.01);Ⅰ、Ⅱ组脂肪组织TNF-α蛋白表达水平分别为163·032±16·240、179.331±23.039,均显著高于对照组(152.175±22.218)(P<0.05,0.01),Ⅱ组高于Ⅰ组(P<0·01)。(2)各组胎盘TNF-αmRNA及TNF-α蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。(3)脂肪组织TNF-αmRNA表达水平与血清TNF-α水平、HOMA-ISI及HOMA-IR均有明显相关性(P<0·05)。结论脂肪组织TNF-α过度表达可能是GDM患者胰岛素抵抗的重要原因。胎盘TNF-α的表达与GDM及其胰岛素抵抗的关系不明显。     

水通道蛋白3、9在特发性羊水过多产妇胎盘和胎膜中的表达变化及意义

目的 探讨水通道蛋白(AQP)3、9在特发性羊水过多产妇胎盘和胎膜中的表达、分布及其在特发性羊水过多发病巾的作用.方法 2006年6月至2008年3月,选择在温州医学院附属第二医院产科住院并分娩的21例特发性羊水过多的足月产妇为研究组,同期分娩的30例羊水量正常的足月产妇为对照组.采用实时荧光定量PCR技术,检测两组产妇胎盘、胎膜中AQP3、9 mRNA的表达及分布,采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白.过氧化物酶(SP)连接法枪测两组产妇胎盘、胎膜中AQP3、9蛋白的表达及分布.结果 (1)两组产妇羊膜、绒毛膜、胎盘中均可检测到AQP3、9 mRNA的表达.AQP3、9主要表达于羊膜上皮细胞、绒毛膜滋养细胞、胎盘滋养细胞.(2)研究组羊膜上皮细胞AQP3、9 mRNA的表达分别为对照组的5.00倍和3.25倍,而研究组绒毛膜滋养细胞AQP3、9 mRNA的表达分别为对照组的2.03倍和2.08倍,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.01);但是研究组胎盘滋养细胞AQP3、9 mRNA的表达均明显低于对照组,差异也有统计学意义(P<0.01).(3)AQP3、9蛋白在研究组羊膜上皮细胞的表达强度为7.5±2.0、11.1±1.8,对照组为5.3 ±1.6、5.6±2.3,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);AQP3、9蛋白在研究组绒毛膜滋养细胞的表达强度为7.5±2.0、10.0±1.6,对照组为5.4±2.2、5.6±2.1,分别比较,差异也有统计学意义(P<0.05),但是AQP3、9蛋白在胎盘滋养细胞的表达强度(3.5±1.4、4.0 ±2.5)较对照组(5.6±1.3、7.1±2.9)明显下调(P<0.05).结论 AQP3、9在特发性羊水过多产妇胎盘和胎膜中的表达变化可能为羊水增加后的代偿性反应,其调节机制尚待进一步研究.     

原发性羊水过多产妇胎膜和胎盘组织中水通道蛋白8的表达

目的 探讨水通道蛋白8(AQP8)在原发性羊水过多产妇胎膜和胎盘组织中的表达.方法 收集2005年10月-2007年5月重庆医科大学附属第一医院和重庆市妇幼保健院行足月剖宫产分娩(孕37～40周)的原发性羊水过多产妇12例为羊水过多组,同期因社会因素行剖宫产分娩的正常产妇12例为对照组.采用RT-PCR技术检测两组产妇胎膜和胎盘组织中的AQP8 mRNA表达水平;采用免疫组化技术检测两组产妇胎膜和胎盘组织中的AQP8蛋白表达水平.结果 (1)羊水过多组羊膜、绒毛膜和胎盘组织中的AQP8 mRNA表达水平分别为0.78±0.13、0.58±0.10、0.86±0.15,对照组分别为0.39±0.07、0.45±0.09、0.34±0.09,羊水过多组各组织中AQPS mRNA表达水平均高于对照组,两组分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).(2)羊水过多组羊膜、绒毛膜和胎盘组织中的AQP8蛋白表达水平分别为0.195±0.024、0.170±0.028、0.193±0.024,对照组分别为0.151±0.018、0.156±0.024、0.152±0.023,其中羊水过多组羊膜、胎盘组织中AQP8蛋白表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而羊水过多组绒毛膜组织中AQP8蛋白表达水平虽高于对照组,但两组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 原发性羊水过多产妇羊膜和胎盘组织中AQP8mRNA及蛋白的表达水平均显著高于正常产妇,提示AQP8在产妇羊水量的调节中发挥重要作用.     

let-7b及肿瘤坏死因子α在重度子痫前期胎盘组织中的表达及意义

目的探讨let-7b和肿瘤坏死因子α(TNF-α)在重度子痫前期(SPE)患者胎盘组织的表达情况及临床意义。方法选取2017年8月至2018年10月于中国医科大学附属第一医院剖宫产术分娩的产妇50例,SPE产妇(SPE组)30例,健康孕产妇(NC组)20例,均为单胎妊娠。QRT-PCR及Western-blot检测两组胎盘组织中let-7b、TNF-αmRNA及其蛋白的表达水平,统计分析两者相关性及临床意义。结果 let-7b在SPE组的相对表达明显低于对照组(0.07±0.01 vs. 0.23±0.03,P0.05);TNF-αmRNA在SPE组的表达明显高于对照组(0.47±0.05 vs.0.19±0.02,P0.05);TNF-α蛋白在SPE组表达显著增高(1.01±0.11 vs. 0.55±0.04,P0.05);let-7b和TNF-α显著负相关(r=-0.41,P0.05);SPE组与对照组孕产妇的血压及新生儿出生体重相比差异显著[收缩压(163.80±4.67)mmHg vs.(124.90±2.16)]mmHg,舒张压(108.30±3.06)mmHg vs.(76.62±2.63)mmHg,新生儿出生体重(2505.00±162.60)g vs.(3593.00±154.50)g,P0.05];SPE组胎盘组织TNF-α的表达与收缩压及舒张压显著正相关(r=0.92和0.90,P0.05)。结论 let-7b可能通过负向调控TNF-α的表达,参与了SPE的发生和发展。     

子痫前期孕产妇胎盘组织中过氧化氢对人类白细胞相关抗原G表达的影响

目的 探讨子痫前期孕产妇胎盘组织中氧化应激产物过氧化氢(H2O2)对胎盘滋养细胞中的人类白细胞相关抗原G(HLA-G)表达的影响.方法 选择2008年10月-2009年10月南京医科大学第一附属医院住院的产妇40例,其中子痫前期组20例,健康妊娠组20例.采用比色法检测两组产妇胎盘组织中H2O2水平;采用蛋白印迹法检测两组产妇胎盘组织中HLA-G蛋白的表达水平;并对胎盘组织中H2O2水平与HLA-G蛋白表达水平进行相关性分析.人绒毛膜癌细胞株JEG-3细胞培养24 h后贴壁完全,分为两组,干预组加入浓度为175 μmol/L的H2O2,对照组不加H2O2,两组细胞培养24及48 h后,采用蛋白印迹法和细胞免疫荧光法检测JEG-3细胞中HLA-G蛋白表达水平和强度的变化.结果 (1)子痫前期组产妇胎盘组织中H2O2水平为(105±13)nmol·mg-1·prot-1,健康妊娠组产妇胎盘组织中H2O2水平为(62±18)nmol·mg-1·prot-1,子痫前期组较健康妊娠组明显升高,且差异有统计学意义(P<0.05).(2)子痫前期组产妇胎盘组织中HLA-G蛋白表达水平为0.20±0.08,健康妊娠组为1.67±0.65,子痫前期组比健康妊娠组下降了88%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05).(3)两组产妇胎盘组织中H2O2水平与HLA-G蛋白表达水平呈显著负相关(r=-0.895,P=0.000).(4)H2O2干预JEG-3细胞24 h后,JEG-3细胞中HLA-G蛋白表达水平为1.95±0.25,干预48 h后为0.65±0.08;与未干预细胞中的3.21±0.33比较,分别下降了39%和80%,干预24、48 h分别与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);干预48 h与干预24 h比较,HLA-G蛋白表达水平下降了67%,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05).H2O2干预JEG-3细胞48 h后荧光显微镜下显示,干预组细胞中HLA-G表达强度明显弱于对照组.结论 子痫前期产妇胎盘滋养细胞中的高水平H2O2能下调胎盘滋养细胞中HLA-G蛋白的表达,从而参与子痫前期的发病.     

早产孕妇外周血、脐血及胎膜组织中S100钙结合蛋白A12表达及其与亚临床绒毛膜羊膜炎的关系

目的探讨S100钙结合蛋白A12(S100A12)在早产孕妇外周血、脐血及胎膜组织中的表达及其与亚临床绒毛膜羊膜炎(subclinical chorioamnionitis,HCA)的关系。方法选择早产临产孕妇46例,根据产后胎膜病理结果是否合并亚临床绒毛膜羊膜炎,分为感染组(n=21)与未感染组(n=25)。采用ELISA法检测两组孕妇外周血、脐血中S100A12水平;逆转录RT-PCR法检测胎膜组织中S100A12 m RNA表达水平。结果感染组孕妇外周血、脐血、胎膜组织中S100A12水平[(173.30±18.92)、(105.71±8.72)、(1.38±0.37)]与未感染组[(138.26±11.02)、(88.26±7.00)、(1.07±0.15)]比较,差异有统计学意义(P0.05);感染组孕妇外周血中S100A12水平与脐血及胎膜组织中S100A12水平均呈正相关(r=0.861,0.883;P0.05);感染组新生儿感染发病率(86%,18/21)高于未感染组(56%,14/25)(P0.05)。结论孕妇外周血、脐血、胎膜组织中S100A12表达水平升高,可能与合并亚临床绒毛膜羊膜炎及新生儿感染有关。     

人类白细胞抗原G的表达与子痫前期发病的关系

目的 通过检测子痫前期孕妇相关组织中人类白细胞抗原G (HLA-G)的表达,探讨其与子痫前期发病的关系.方法 选择2009年3月至12月在陕西省妇幼保健院产科住院分娩的子痫前期孕妇30例,根据病情分为轻度子痫前期组8例,重度子痫前期组22例.选择同期健康孕妇30例为对照组.3组孕妇均以剖宫产方式分娩.采用ELISA法检测孕妇外周血、脐血及羊水中的可溶性HLA-G(sHLA-G)水平;采用蛋白印迹法检测胎盘、胎膜及脐带组织中HLA-G蛋白的表达.结果 (1)各组孕妇外周血、脐血、羊水中sHLA-G水平:轻、重度子痫前期组孕妇外周血sHLA-G水平分别为(50±14)、(30±6) μg/L,新生儿脐血中sHLA-G水平分别为(34±10)、( 26±8)μg/L,均明显低于对照组的(100±16)、(70±9) μg/L,分别与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01);重度子痫前期组与轻度子痫前期组比较,差异也有统计学意义(P＜0.01).重度子痫前期组新生儿脐血中sHLA-G水平虽低于轻度子痫前期组,但差异无统计学意义(P＞0.05).轻、重度子痫前期组孕妇羊水中sHLA-G水平分别为(26±7)、( 25±5) μg/L,均低于对照组的(27±6)μg/L,但分别与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);轻度子痫前期组与重度子痫前期组比较,差异也无统计学意义(P＞0.05).(2)各组孕妇胎盘、胎膜及脐带组织中的HLA-G蛋白表达:对照组胎盘组织中HLA-G蛋白表达水平为1.59±0.36,胎膜组织中表达水平为0.42±0.09,胎盘组织中的HLA-G蛋白表达水平明显高于胎膜组织,两者比较,差异有统计学意义(P＜0.05);对照组脐带组织中HLA-G蛋白表达水平为0.24±0.17,分别与胎盘及胎膜组织中的HLA-G蛋白表达水平比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).轻度子痫前期组胎盘组织中HLA-G蛋白表达水平为0.78±0.21,重度子痫前期组为0.29±0.17,分别与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).轻、重度子痫前期组孕妇胎膜及脐带组织中均未检测出HLA-G蛋白的表达.结论 与健康孕妇相比,HLA-G在子痫前期孕妇外周血、脐血及胎盘组织中呈明显低表达,HLA-G表达水平的异常可能与子痫前期的发病有关.     

孕妇血清及胎盘组织中晚期糖基化终末产物及其受体的表达水平变化与子痫前期发病的相关性

目的探讨孕妇血清及胎盘组织中晚期糖基化终末产物（AGE）及晚期糖基化终末产物受体（RAGE）的表达水平变化与子痫前期发病的相关性。方法选择2013年12月至2014年6月在青岛大学附属医院产科住院的重度子痫前期孕妇32例为重度子痫前期组,选取同期晚期妊娠健康孕妇30例为健康对照组,两组孕妇均为剖宫产术分娩。采用ELISA法检测孕妇血清中AGE、可溶性晚期糖基化终末产物受体（sRAGE）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）及胎盘组织中AGE、TNF-α的水平;免疫组化SP法检测胎盘组织中AGE、RAGE蛋白的表达定位;实时荧光定量PCR技术检测胎盘组织中RAGE和TNF-αmRNA的表达水平;蛋白印迹法（western blot）检测胎盘组织中AGE、RAGE及TNF-α蛋白的表达水平。结果（1）重度子痫前期组孕妇血清中AGE、sRAGE及TNF-α水平分别为（538±75）、（367±86）及（322±40）ng/L,均显著高于健康对照组的（454±50）、（286±35）及（270±35）ng/L,两组分别比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。重度子痫前期组孕妇血清AGE水平与TNF-α水平呈显著正相关（r=0.588,P<0.05）,sRAGE水平与TNF-α水平无相关性（r=-0.041,P>0.05）。（2）重度子痫前期组胎盘组织中AGE及TNF-α水平分别为（500±82）及（334±57）ng/L,明显高于健康对照组的（431±74）及（263±46）ng/L,两组分别比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。重度子痫前期组孕妇胎盘组织中AGE水平与TNF-α水平呈显著正相关（r=0.406,P<0.05）。（3）重度子痫前期组及健康对照组胎盘组织中AGE及RAGE蛋白均主要定位表达于胎盘合体滋养细胞、巨噬细胞及血管内皮细胞,AGE主要定位于细胞质内,RAGE主要定位于细胞膜和细胞质内。（4）重度子痫前期组胎盘组织中RAGE及TNF-αmRNA的表达水平分别为12.6±4.6及10.4±2.4,均高于健康对照组的0.9±0.4及3.5±0.9,两组分别比较,差异均有统计学意义（P<0.01）。（5）重度子痫前期组胎盘组织中AGE、RAGE及TNF-α蛋白的表达水平分别为0.68±0.06、0.82±0.08及0.76±0.08,均显著高于健康对照组的0.46±0.05、0.42±0.09及0.52±0.07,分别比较,差异均有统计学意义（P<0.01）。结论重度子痫前期孕妇血清及胎盘组织中AGE及RAGE表达水平明显高于健康孕妇,同时伴有胎盘组织炎性因子TNF-α水平的明显升高,提示AGE及RAGE可能通过诱发孕妇全身和胎盘局部炎性反应参与子痫前期的发病过程。     

特发性胎儿生长受限胎盘组织学与体视学分析

目的:评估特发性胎儿生长受限(IFGR)胎盘大体、组织学及终末绒毛体视学特征。方法:对2013年1月至2014年12月在上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院足月分娩的IFGR40例(IFGR组)及正常妊娠30例(对照组)行回顾性研究,比较二组胎盘组织学及体视学参数差异。结果:与对照组比较,IFGR组大体检查胎盘最长径×最短径减小(分别为17.21 cm×19.00 cm、14.25 cm×16.10 cm)、胎盘质量明显降低(分别为595.68±22.70 g、422.00±18.42 g)(P0.001),胎盘质量及径线与胎儿体质量间均存在线性相关(r=0.574,r=0.603,P0.001);但两组胎盘系数无明显差异(P0.05)。组织学评估发现IFGR组胎盘中绒毛周围大量纤维蛋白沉积、慢性绒毛膜羊膜炎、绒毛发育迟缓、合体结节增多的发生率显著增高(P0.05)。体视学测量发现IFGR组胎盘终末绒毛在每个镜下参考面积中的总个数明显多于正常对照组,终末绒毛平均面积及血管形成系数明显减低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:IFGR时胎盘形态学和体视学特征均有改变,IFGR胎盘存在绒毛发育和胎儿-胎盘血管生成异常。     

子痫前期患者胎盘组织中TNF-α和MSTN的表达差异及临床分析

目的探讨轻、重度子痫前期患者和正常产妇胎盘组织中TNF-α和MSTN的表达差异与子痫前期发病程度的关系。方法选择足月健康产妇40例为正常妊娠组、确诊轻度子痫前期产妇40例作为实验A组、重度子痫前期产妇40例为实验B组。免疫组化SP法检测TNF-α和MSTN在胎盘组织中的定位,反转录-半定量PCR(RT-PCR)及蛋白印迹法(Western blot)检测胎盘组织中TNF-α和MSTN mRNA和蛋白的表达差异。结果各组胎盘组织中均有TNF-α和MSTN表达,位置基本相同。TNF-α和MSTN mRNA和蛋白的表达水平在A组和B组明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.01)。B组显著高于A组,差异有统计学意义(P0.01)。结论子痫前期患者胎盘组织中TNF-α和MSTN的分子生物学的变化,可能是子痫前期病情加重的机制之一。     

核因子κB p65表达变化与早产合并亚临床绒毛膜羊膜炎的关系

目的 探讨核因子κB p65(NF-κB p65)表达变化与早产合并亚临床绒毛膜羊膜炎的关系.方法 选择2005年10月-2006年10月在湖南省人民医院、中南大学湘雅三医院、长沙市妇幼保健院产科住院产妇111例,分为早产临产组36例,足月妊娠自然临产组37例,足月妊娠剖宫产组38例.3组产妇分娩后行胎膜组织病理检查,比较3组产妇的亚临床绒毛膜羊膜炎发生率,根据病理检查结果分为亚临床绒毛膜羊膜炎组(亚临床感染组)及非感染组.应用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法和RT-PCR技术检测亚临床感染组及非感染组产妇外周静脉血白细胞中及胎膜组织中NF-κB p65蛋白及mRNA表达;并行胎膜组织中NF-κB p65蛋白及mRNA表达水平与外周血白细胞中NF-κB p65蛋白及mRNA表达水平的相关性分析.结果 (1)亚临床绒毛膜羊膜炎发生率:早产临产组为67%(24/36),自然临产组为19%(7/37),剖宫产组为8%(3/38),早产临产组产妇亚临床绒毛膜羊膜炎发生率明显高于自然临产组及剖宫产组,两者比较,差异有统计学意义(P＜0.01);111例产妇中发生亚临床绒毛膜羊膜炎34例,为亚临床感染组,77例无感染产妇为非感染组.(2)NF-κB p65蛋白及mRNA在亚临床感染组产妇胎膜组织中的表达水平分别为8.0及47.5±17.2;在非感染组产妇胎膜组织中分别为4.0及31.3±13.6,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).(3)NF-κB p65蛋白及mRNA在亚临床感染组产妇外周血白细胞中的表达水平分别为8.0及42.6;在非感染组产妇外周血白细胞中分别为4.0及23.6,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).(4)胎膜组织中NF-κB p65蛋白及mRNA表达水平与外周血白细胞中NF-κB p65蛋白及mRNA表达水平呈正相关关系(r分别为0.581及0.571,P均＜0.01).结论 早产合并亚临床绒毛膜羊膜炎患者外周血白细胞及胎膜组织中NF-κB p65表达水平升高,其外周血白细胞中NF-κB p65表达水平变化与胎膜组织中的NF-κB p65表达水平变化有相关性,检测孕产妇外周血白细胞中NF-κB p65水平变化可作为预测早产合并亚临床绒毛膜羊膜炎的一个指标.NF-κB p65在早产患者的亚临床绒毛膜羊膜炎发病机制中有重要作用.     

人白细胞抗原G1及G5在重度子痫前期患者胎盘组织中的表达

目的 探讨重度子痫前期(sPE)患者胎盘组织中人白细胞抗原(HLA)G1及G5表达的变化.方法 选取早发型及晚发型sPE患者各10例、早产及正常足月妊娠产妇各10例,通过蛋白印迹法及免疫组化方法检测胎盘组织中HLA-G1及G5蛋白的表达.结果 与早产产妇相比,HLA-G1蛋白在早发型sPE患者的胎盘组织中表达量明显减少,分别为2.9±1.1、2.4±0.6,两者比较,差异有统计学意义(P＜0.05);与正常足月妊娠产妇相比,晚发型sPE患者的胎盘组织中HLA-G1蛋白的表 达量明显减少,分别为4.2±2.4、3.5±2.1,两者比较,差异有统计学意义(P＜0.05).与正常足月妊娠产妇相比,HLA-G5蛋白在晚发型sPE患者的胎盘组织中表达量增加,分别为1.1±0.9、1.8±1.1,两者比较,差异有统计学意义(P＜0.05);与早产产妇相比,HLA-G5蛋白在早发型sPE患者胎盘组织中的表达量无明显变化(分别为1.4±0.7、1.6±0.9,P＞0.05).HLA-G1蛋白在早产产妇胎盘组织中的表达量较正常足月妊娠者减少(P＜0.05);HLA-G5蛋白在早产及正常足月妊娠产妇胎盘组织中的表达量无明显差异(P＞0.05).HLA-G1及G5蛋白主要在胎盘的绒毛外细胞滋养细胞中有表达,在血管周围及胚外中胚层中也有高表达.结论(1)HLA-G1在早发型及晚发型sPE患者胎盘组织中的表达均减少.(2)HLA-G5在早发型及晚发型sPE患者胎盘组织中的表达均增加,这一增加趋势在晚发型sPE患者中更为明显.(3)在妊娠晚期,HLA-G1在早产产妇胎盘组织中的表达较少.(4)胎盘组织中能够检测到HLA-G1及G5的表达,其主要位于胎盘的绒毛外细胞滋养细胞中.     

早期自然流产患者TNF-α及TGF-β1的异常表达

目的:探讨自然流产患者外周血单个核细胞和胎盘组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以及转化生长因子-β(TGF-β1)的异常表达。方法:采用RT-PCR技术,检测30例早期自然流产患者(自1然流产组)、25例正常妊娠妇女(正常妊娠组)、25例正常未妊娠妇女(未孕对照组)外周血单个核细胞内TNF-αmRNA和TGF-β1mRNA表达水平;采用免疫组织化学技术检测绒毛和蜕膜组织内TNF-α及TGF-β1表达强度。结果:三组研究对象外周血单个核细胞表达TNF-αmRNA相对含量分别为21.1±9.4%、68.6±14.1%、97.0±11.6%,组间比较有显著性差异(P<0.05);TGF-β1mRNA相对含量分别为21.5±9.4%、95.7±12.9%、87.0±13.8%,组间比较也均有显著性差异(P<0.05)。自然流产组细胞滋养层细胞及合体滋养层细胞表达TNF-a均显著强于人工流产组(P<0.01);自然流产组合体滋养层细胞表达TGF-β1显著低于人工流产组(P<0.01)。结论:①早期自然流产患者外周血单个核细胞TNF-αmRNA表达水平显著下降,而细胞滋养层细胞及合体滋养层细胞表达TNF-α均显著强于人工流产组,提示TNF-α可能在母胎界面局部发挥作用并导致流产。②正常早期妊娠妇女外周血单个核细胞TGF-β1mRNA表达水平较正常未妊娠妇女显著升高,提示TGF-β1对妊娠维护起重要作用。早期自然流产患者外周血单个?     

核因子κB顺式诱骗寡脱氧核苷酸对子痫前期患者脐血清培养的脐动脉平滑肌细胞功能的影响

目的 探讨核因子κB顺式诱骗寡脱氧核苷酸(ODN)对子痫前期患者脐血清诱导人脐动脉平滑肌细胞(HUASMC)前胶原Ⅰ、Ⅲ及肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响.方法 将原代培养的HUASMC分4组:A组(加入正常新生儿脐血清培养)、B组(加入子痫前期患者的新生儿脐血清培养)、C组(加入子痫前期患者的新生儿脐血清及核因子κB顺式诱骗ODN培养)和D组(加入子痫前期患者的新生儿脐血清及无序ODN培养).通过四甲基偶氮唑蓝比色法及流式细胞仪检测各组HUASMC的增殖活力[以吸光度(A)表示]和凋亡率;应用RT-PCR检测各组HUASMC的前胶原Ⅰ、ⅢmRNA的表达,蛋白印迹法检测TNF-α蛋白的表达[均以A值表示].结果 (1)增殖活力:A组为0.11±0.02,B组为0.19±0.02,C组为0.14±0.02,D组为0.18±0.03;B、C、D组增殖活力显著高于A组(P＜0.05),B、D组显著高于C组(P＜0.05).(2)凋亡率:A组为(14.3±1.2)%,B组为(7.8±1.3)%,C组为(10.1±1.2)%,D组为(8.1±1.3)%;B、C、D组凋亡率显著低于A组(P＜0.05),B组与C组比较,差异也有统计学意义(P＜0.05).(3)前胶原Ⅰ mRNA:A组为0.16±0.02,B组为0.31±0.04,C组为0.23±0.04,D组为0.30±0.03,B、C、D组前胶原Ⅰ mRNA表达水平显著高于A组(P＜0.05),B组与C组比较,差异也有统计学意义(P＜0.05).(4)前胶原ⅢmRNA:4组前胶原ⅢmRNA表达水平相互比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).(5)TNF-α蛋白:A组为0.15±0.03,B组为0.74±0.11,C组为0.36±0.09,D组为0.79±0.12,B、C、D组TNF-α蛋白表达显著高于A组(P＜0.05);B、D组又显著高于C组(P＜0.05),但B组与D组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 核因子κB顺式诱骗ODN能降调子痫前期患者脐血清促HUASMC增殖、胶原合成及炎性因子合成的作用.核因子κB在子痫前期患者胎盘血管病变过程中可能起重要作用.     

TNF-α在妊娠高血压疾病中的作用机制

目的探讨肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)在妊娠高血压疾病(hypertensive disorder complicating pregnancy,HDCP)发病中的作用机理。方法采用放免法检测60例HDCP患者(研究组)血清TNF-α,并与同期正常晚期妊娠孕妇20例(对照组)对照。并用免疫组化法观察两组胎盘组织中的TNF-α和肿瘤坏死因子-α受体1(tumor necrosis factor receptor 1,TNFR1)的表达。结果(1)血清TNF-α浓度对照组为(0.79±0.14)μg/L,妊娠期高血压组为(0.90±0.14)μg/L,轻度子前期(mild preeclampis,MPE)组为(1.13±0.15)μg/L,重度子前期(severe preeclampsia,SPE)组为(1.32±0.31)μg/L,对照组与MPE及SPE、研究组组内比较均有统计学意义(P<0.01)。(2)胎盘组织中TNF-α的阳性表达率对照组为(41.5±11.37)%,妊娠期高血压组为(63.5±12.68)%,MPE组为(72.5±11.64)%,SPE组为(79.0±8.52)%,对照组与研究组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。妊娠期高血压的阳性表达率均低于MPE及SPE(P<0.05,P<0.01);(3)胎盘组织TNFR1的阳性表达率对照组为(43.5±9.33)%,妊娠期高血压组为(63.5±12.68)%,MPE组为(71.5±11.82)%,SPE组为(78.5±9.88)%,对照组与研究组之间、研究组组内比较均差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论HDCP患者血清中的TNF-α水平、胎盘TNF-α和TNFR1的阳性率随病情的加重而升高,TNF-α与HDCP有密切的关系,可能为HD-CP的发病原因之一。     

脂联素和内脂素与胎儿生长发育的关系

目的 探讨脂肪因子--脂联素和内脂素与胎儿生长发育的关系.方法 收集2007年6月至12月北京军区总医院妇产科住院分娩的产妇42例,其中分娩胎儿生长受限(FGR)儿14例(FGR组),分娩巨大儿14例(巨大儿组),分娩出生体重正常新生儿14例(对照组).采用酶联免疫吸附试验(ELISA,双抗体夹心法)检测3组产妇血和新生儿脐血中的脂联素和内脂素的水平,并分析新生儿脐血中脂联素和内脂素水平与产妇血中水平的相关性.结果 (1)FGR组产妇血中内脂素水平为(41.4±5.5)μ/L,明显高于对照组的(34.7±4.9)μ/L和巨大儿组的(37.3±4.4)μ/L,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05);巨大儿组产妇血中脂联索水平为(4.1±1.3)mg/L,显著低于对照组的(6.6±1.5)mg/L和FGR组的(6.4±1.3)mg/L,分别比较,差异均有统计学意义(P均<0.01).(2)FGR组新生儿脐血中内脂素水平为(58.1±7.6)μ/L,明显高于对照组的(42.6±7.8)μ/L和巨大儿组的(48.5±9.1)μ/L,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05);巨大儿组新生儿脐血中脂联素水平为(6.5±1.3)mg/L,低于对照组的(7.7±1.5)mg/L和FGR组的(7.7±1.0)mg/L,分别比较,差异均有统计学意义(P均<0.05).(3)脐血中内脂素水平高于产妇血中的水平,两者呈显著正相关关系(r=0.720,P<0.01);脐血中脂联素水平略高于产妇血中的水平,两者无明显相关性(r=0.301,P>0.05).结论 内脂索水平的升高可能与FGR的发生有关,脂联素水平的降低可能与巨大儿的发生有关.     

脂联素和胰岛素与胎儿生长的关系

目的:探讨脂联素,胰岛素与胎儿生长发育的关系。方法:选取21例分娩生长受限胎儿(FGR组)、21例分娩巨大儿(巨大儿组)及21例分娩正常儿(对照组)的产妇,抽取3组产妇分娩后肘静脉血及其新生儿脐静脉血.分离血清。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法和放射免疫法测定3组产妇血清及新生儿脐静脉血清中脂联素和胰岛素的水平。结果:FGR组产妇血清脂联素水平明显低于对照组及巨大儿组(P<0.01);FGR组新生儿脐血清脂联素水平明显低于对照组及巨大儿组(P<0.05);3组产妇血清中脂联素水平均明显低于新生儿脐血清中脂联素水平(P<0.01)。FGR组胎盘重量明显低于对照组及巨大儿组(P<0.01);3组产妇血清及新生儿脐血血清中胰岛素水平差异无显著性(P>0.05)。3组产妇血清脂联素水平与胰岛素水平无相关(P>0.05);3组新生儿脐血清脂联素水平与胰岛素水平呈明显负相关性(P<0.05);3组产妇血清脂联素水平与新生儿脂联素水平无相关(P>0.05);3组产妇血清胰岛素水平和新生儿脐血胰岛素水平无相关性(P>0.05)。3组新生儿脐血清脂联素水平与新生儿出生体重、胎盘重量、新生儿头围、身长、体重/身长比呈明显正相关关系(P<0.05);3组新生儿脐血清胰岛素水平、产妇血清脂联素水平、产妇血清胰岛素水平与新生儿出生体重、胎盘重量、头围、身长、体重/身长比均无相关性。结论:脐血中的脂联素、胰岛素在胎儿宫内生长和发育过程中可能起重要的调节作用,可作为评价胎儿生长发育及体内脂肪储备状态的临床指标之一。胎儿自身分泌的脂联素与胎儿生长关系密切。     

趋化因子LKN-1及其受体CCR1和CCR3在妊娠期高血压疾病中的表达

目的:通过测定妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中趋化因子白细胞诱素-1(leukotactin-1,LKN-1)及其受体CCR1和CCR3的表达,以探讨其在妊娠期高血压疾病发病中的作用.方法:收集32例妊娠期高血压疾病患者(研究组)和32例正常足月妊娠孕妇(正常对照组)的胎盘组织;采用Western蛋白印记法进行检测LKN-1及其受体CCR1和CCR3在胎盘组织中的表达;并结合免疫组化法对LKN-1、CCR1和CCR3在胎盘中的表达进行定位.结果:①Western蛋白印记法:在研究组和正常对照组胎盘组织中LKN-1表达均为阴性;研究组胎盘组织中无论是CCR1还是CCR3的水平均明显低于正常对照组(CCR1:0.66±0.06 vs 0.88±0.03,P<0.01:CCR3:0.17±0.01 vs 0.27 ±0.01,P<0.01);②免疫组化法:两组孕妇胎盘组织中LKN-1表达均为阴性;两组孕妇胎盘血管内皮细胞和基质细胞内均有CCR1阳性表达,绒毛滋养细胞中CCR1弱阳性表达;两组孕妇胎盘血管内皮细胞和绒毛滋养细胞内均有CCR3阳性表达.结论:LKN-1在妊娠期高血压疾病患者和正常足月妊娠的胎盘组织中均无阳性表达;但其受体CCR1与CCR3蛋白在研究组胎盘组织中表达下调,可能与人妊娠期高血压疾病的发生、发展有关.